Efecto de la actividad de agua y

presión osmótica y barofílica

Dr. Oscar R. Rodas Suárez

Efecto de la presión hidrostática en la distribución de
los microorganismos.
Efecto de presión hidrostática
Aumento de la viscosidad del citoplasma.

Disminución de la capacidad de enzimas de unirse a sus

respectivos sustratos.

Interferencia en procesos de transporte a nivel de membrana.

Interferencia en la biosíntesis de proteínas.

Interferencia en la división celular

Clasificación de los microorganismos en
relación a la presión hidrostática.
Bacterias barotolerantes.

Crecen a la presión atmosférica, pero soportan

hasta unas 500 atmósferas. Su hábitat son las
aguas oceánicas, entre los 2000 y 4000 metros de
profundidad.
Bacterias barofílicas

Crecen óptimamente a más de 400 atmósferas. Podemos

distinguir entre las barofílicas moderadas (facultativas) y
barofílicas extremas (obligadas).
Barofílicas moderadas

Aquellas bacterias que pueden crecer a presión atmosférica,

aunque su óptimo está a unas 400 atmósferas. Habitan
profundidades entre los 5000 y 7000 metros.
Barofílicas extremas

Presentan óptimos de crecimiento a muy altas presiones (por

encima de 600-700 atmósferas) y son incapaces de crecer a
presión atmosférica. Se han llegado a aislar a más de 10,000
metros de profundidad.
◦ Criofílicas (2-3°C)
 Actividad de agua (aw) y ósmosis

La cantidad de agua disponible por los microorganismos se

puede reducir mediante interacciones con moléculas de
soluto (efecto osmótico) o por adsorción a las superficies de
sólidos (efecto matricial).

El grado de disponibilidad del agua, se le denomina actividad

de agua (aw)
Límites inferiores de aw para el crecimiento
microbiano
Presión osmótica, a aquella que seria necesaria para detener el
flujo de agua a través de la membrana semipermeable. Al
considerar como semipermeable a la membrana plasmática, las
células de los organismos pluricelulares deben permanecer en
equilibrio osmótico con los líquidos tisulares que los bañan.
 Efectos de la presión osmótica
En medios hipotónicos:

◦ Aumento de la concentración de un oligosacárido derivado de la

membrana (MDO).

En medios hipertónicos:

◦ Bombeo de iones al interior.

◦ Síntesis de una molécula orgánica osmóticamente activa (solutos

compatibles).

◦ Bombeo de substancias osmoprotectoras.

 Efecto de la presión osmótica
P
a Citoplasma Soluto Membrana citoplásmica
r
e
d
c
e
l
u
l Agua
a
r
Solución isotónica Solución hipotónica Solución hipertónica
 Tipos de microorganismos
Osmosensibles
Son microorganismos
Halodúricos capaces de soportar
altas concentraciones
Osmodúricos Sacarodúricos de sal o de azúcar pero
no crecen.

Son microorganismos
Osmotolerantes capaces de soportar
altas concentraciones
de sal o de azúcar y
logran crecer un poco.

Osmofílicos Halofílicos
Sacarofílicos
 Sacarolíticos

Sacarofílicos
Osmofílicos
Halofílicos

Xerofílicos
 Alimentos que pueden ser alterados por
Microorganismos osmofílicos

Aderezos
Nueces
Jarabes
Granos
Chocolates
Harinas
Dulces
Mieles
Mermeladas

Jugo de frutas
concentradas
Carne y pescado
salados parcialmente
desecados
 Sacarofílicos
•Leuconostoc
•Saccharomyces
•Torula
•Zygosaccharomyces
Cuadro 1. Ejemplos de alimentos involucrados
y microorganismos que los alteran
Alimento Microorganismo
Mieles Saccharomyces nusbaumeri
Jarabe Saccharomyces mellis
Torula lactis var. condensi
Leche condensada Zygosaccharomyces rouxii
Aislamiento en el laboratorio

Agar de malta y extracto de

levadura
Con 40% de sacarosa

Agar de papa y dextrosa

40 % de sacarosa

Sabouraud dextrosa
modificado
40% de sacarosa

Agar MRS /APN

40% sacarosa
 Río Tinto

RT:
Diatomeas,
hongos

RT: Algas verdes

(Euglena sp)
 Solutos Compatibles
La acumulación de solutos puede ser:
Bombeando iones inorgánicos del
exterior
Sintetizando o concentrando del
exterior solutos orgánicos
TIPOS DE SOLUTOS COMPATIBLES
A)Tipo aminoácidos o derivados
Prolina (G(+), ej, Staphylococcus
aureus);
Glicinbetaina (bacterias halófilas)
Ectoina (Ectothiorhodospira)
Glutamato
B) Tipo carbohidratos
Sacarosa, Trealosa, Glucosa, Fructosa
(Cianobacterias de aguas continentales,
fotosintéticas anoxigénicas)
C) Tipo alcohol
Glicerol, Manitol, Sorbitol, Ribitol
(Cianobacterias y algas marinas,
Dunaliella, levaduras osmofílicas,
hongos xerófilos)
D) Otros
Dimetilsulfoniopropionato
(Algas marinas)
E) KCl
Arqueobacterias halófilas extremas
 Medios Salinos

Tipos de Hábitats

Medio Marino

Lagos salinos

Marismas

Salinas naturales y artificiales

Alimentos en salazón
 Medios Salinos
Características del Hábitat

Luminosidad muy alta

Concentración elevada de sales

Baja concentración de oxígeno

Alta concentración de nutrientes inorgánicos

Generalmente, alta concentración de nutrientes

orgánicos

Temperatura variable
Medios Salinos
Efecto de la concentración de sodio en el
crecimiento de los microorganismos.
 Halofílicos Moderados

Requieren concentraciones de 3.5% de NaCl,

concentraciones mayores o menores inhiben su
desarrollo.

La función del Na+ es:

◦ Mantener los sistemas de la membrana citoplásmica y transporte.

◦ Estabilizar la pared celular.

◦ Cofactor
Pozos evaporados con alta
concentración salina.

Bacterias halofílicas
 Ambientes Salinos Naturales

IÓN Gran Lago Mar Muerto. MAR (g/L)

Salado (g/L) (g/L)

Na+ 105 39 10.6

K+ 6.7 7.3 0.38

Mg2+ 11 41 1.27

Ca2+ 0.3 17 0.4

Cl- 181 212 18.9

La concentración de los iones depende del hábitat y del clima

Gran Lago Salado (UTHA)

P
o
z
o
s
e
v
a
p
o
r
a
d
o
s
Las Halobacterias contienen glicoproteínas en su P.C., Enlaces éter en sus lípidos,
y RNA polimerasas. Son insensibles a la mayoría de los antibióticos y todas son
gram negativas, con fisión binaria y sin esporas. La mayoría son inmóviles y
algunas poseen flagelos lofotricos. Sus plásmidos son de los más grandes que hay y
se desconoce la función de la gran cantidad del DNA que poseen.

Halobacterium de color rojo,

nadando entre cristales de NaCl. Los
de color verde son cianobacterias
halofílicas: Dunaliella salina y
Dangeardinella saltitrix
Halobacterium sp. H. salinarum
 Halofílicos Extremos

Familia Halobacteriaceae

Usan como sustrato compatible al K+

La función del K+ es:

◦ Mantener la estabilidad y función de los ribososmas y enzimas.

◦ Sistemas de transporte.
 Adaptaciones a la Salinidad
Acúmulo/formación de solutos compatibles

-Eubacterias y eucariotas: sustancias orgánicas neutras

Arqueas: sales de Na+ y K+

-Sistemas de transporte de membrana dependientes de Na+ en bacterias marinas

-Compensación de cargas en arqueas

-Las enzimas requieren cationes (Na+, K+) para su función catalítica

Enzimas y proteínas estructurales con exceso de aa ácidos (COO-, polianiones que

neutralizan restos de K+)
 Adaptaciones a la Salinidad

-Modificación estructural de la estructura terciaria

-Compartimentalización de algunas enzimas

- En arqueas, paredes típicas , con lípidos isoprenoides con unión éter, cargados negativamente
y estabilizándose con cationes

-Adaptación a la alta irradiancia (presencia de bacteriorruberinas, carotenoide C-50)

- Algunas halobacterias (arqueas) pueden fotofosforilar (vía bacteriorrodopsina) en condiciones

anaerobias o microaerófilas
 Fisiología

La pared celular está estabilizada por sodio, este mantiene la integridad de la

membrana por su alto contenido de aminoácidos ácidos que confieren carga
negativa a la proteína. Sin sodio las cargas se repelen dando lugar a lisis.

Las proteínas son “ácidas” y requieren de potasio para su actividad, además

contienen pocos aminácidos hidrofóbicos, lo que representa un fénomeno
evolutivo de la alta especialización del citoplasma y la gran cantidad de iones.

Los ribosomas también requieren de K+ para su estabilidad a diferencia de los

ribosomas de las no halófilas.

EN SÍNTESIS, LOS COMPONENTES CELULARES DEL EXTERIOR

NECESITAN MUCHO Na+ Y LOS DEL INTERIOR MUCHO K+. Son únicas.
Ión Concentración Concentración
en medio (M) celular (M)
Na+ 3.3 0.8
K+ 0.05 5.3
Mg++ 0.13 0.12
Cl- 3.3 3.3
Halobacterium cutirubrum
Algunas Halobacterias tienen
bombas para el anión cloro
del exterior al interior de la
célula donde los residuos de
arginina intervienen. Los
halófilos concentran altas
cantidades de soluto para
mantener un equilibrio
osmótico con el medio
externo.
 Bacteriorrodopsina
ØAlgunas halófilos extremos constan de un sistema fotosintético utilizando
bacteriorrodopsina.

ØEste pigmento se incrusta en la membrana para formar placas cristalinas. Al

ser activada por la luz, esta actúa como una bomba de protones.

ØLa proteína pasa de una conformación cis a una trans durante el fotociclo, los
protones generan un gradiente electroquímico que se usa para la síntesis del
ATP por un mecanismo quimiosmótico.

ØLa membrana contiene 25% lípidos y 75% bacteriorrodopsina a bajas

concentraciones de O2.
Cuadro 2. Clasificación de los Microorganismos
de Acuerdo a la Concentración de Sal

Ligeramente Moderadamente Extremadamente

0.5-3 % 3-15% 15-30%

HALOFÍLICOS
 Ligeramente Halofílicos

•Vibrio, •Pseudomonas
•Salmonella •Streptococcus
•Micrococcus •Aeromonas
•Flavobacterium •Plesiomonas
•Clostridium •Serratia
•Bacillus •Escherichia
 Cuadro 3 . Ejemplos de Alimentos y Microorganismos
Ligeramente Halofílicos
Alimento Generos Especies
Vibrio V. cholerae
Productos de la Aeromonas hydrophila
pesca
Pseudomonas P. aeruginosa

Carne Acinetobacter

Salmuera Achromobacter
Moderadamente Halofílicos

Bacillus, B. cereus
Clostridium C. perfringens
Micrococcus M. halodenitrificans
Vibrio V. parahaemolyticus
Staphylococcus S. aureus
 Extremadamente Halofílicos

Halococcus
Halobacterium
Alimentos

Cecina, tocino,
Verduras en salmuera,
Bacalao
 Demostración en el Laboratorio

Ligeramente Diluyente, caldo de enriquecimiento, agares

con concentraciones de sal de 3 %

Moderadamente

Concentración de sal a 5%

Extremadamente

En ambiente húmedo
con 15% de sal
 Xerofílicos
Debaromyces hansenii
Hansenula anomala
Candida pseudotropicalis
Zygosaccharomyces rouxii
Mohos Xerofílicos

Aspergillus
Eurotium
Chrysosporidium
Polipacelium
 Cuadro 4. Hongos Xerofílicos con Capacidad para
Alterar Algunos Alimentos

Hongo Aw Máxima Temperatura °C

Eurotium chevalieri 0.71 33
Chrysosporidium xerophilum 0.71 25
Eurotium amstelodami 0.70 25
Aspergillus conicus 0.70 22
Polipacelium pisce 0.70 25
Chrysosporidium fastidium 0.69 25
Eurotium echinolatum 0.62 25
Zygosaccharomyces rouxii 0.62 30
Xeromyces bisporus 0.61 25
 Deterioro de alimentos con
Aw menor de 0.85

Nueces Mermeladas
Granos Aderezos
Harinas Jarabes
Mieles