Instituto Politécnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas

Sistemas de control de calidad

Profesores: Carreño Duran Luis R.

Hernández Olicón Aura Patricia
Jiménez Gutiérrez Elizabeth G.
Pérez Cervantes Hilda

Alumno: Cerón Gámez Antonio

Practica: Determinación del volumen mínimo de

lectura. Observación del “efecto menisco” y evaluación
del efecto de arrastre y acarreo
Grupo: 5QM2

Sección 3

Fecha de entrega: 22 de Marzo 2019

Introducción:

En fotómetros que utilizan celdas, el adicionar un volumen menor al adecuado

ocasiona lecturas erróneas y como resultado se obtienen resultados incorrectos.
En las determinaciones fotométricas es importante que el volumen de la muestra
que se deposita en la celda de lectura sea el suficiente para asegurar que el haz de
luz incida en la solución en la zona donde no interfiera el menisco, ya que cuando
se coloca un volumen de muestra insuficiente, el haz de luz incide directamente en
el menisco provocando que la luz se difracte, lo que se conoce como efecto menisco
Otro factor que afecta, es la interferencia entre 2 mediciones. Cuando se utiliza una
celda con una sustancia y se utiliza la celda para otra medición sin que se haya
lavado, se ocasionan interferencias lo que provoca que haya resultados errorenos,
esto es conocido como efecto acarreo. El efecto acarreo es muy evidente en
equipos automatizados, aunque también puede manifestarse en equipos
semiautomatizados si no te tienen los cuidados necesarios.
Objetivos:

 Determinar el volumen mínimo que un fotómetro puede utilizar, para obtener

lecturas confiables
 Evaluar la magnitud del efecto con que el menisco afecta las mediciones,
cuando se utilizan volúmenes inferiores al mínimo
 Determinar si un sistema analítico o equipo presenta o no el efecto acarreo,
a partir del empleo de soluciones coloridas de 2 diferentes concentraciones,
mediante un procedimiento sencillo.

Fundamento:
Los equipos espectrofotométricos utilizan celdas de diferente volumen por lo que es
necesario investigar en cada equipo el volumen mínimo necesario para poder
realizar determinaciones analíticas sin que se afecte la lectura de absorbancia o
transmitancia por la difracción del haz de luz en el efecto menisco
El manejo de volúmenes inferiores al volumen mínimo requerido ocasiona lecturas
erróneas y como consecuencia resultados incorrectos. Cuando se coloca una
cantidad insuficiente de solución en la celda! el rayo de luz atraviesa por el menisco
de la misma y por efecto de difracción se obtienen lecturas elevadas.
Método:

Resultados
Bitácora de resultados Fecha: 08/03/2019
Determinación del volumen mínimo, evaluación y observación del efecto acarreo
Resultados y observaciones:

Efecto menisco

Tabla 1 Determinación de efecto menisco

Espectro utilizado: DLAB SD-V100

Reactivo utilizado: K2Cr2O7 Tipo de celda: Celda de vol. semi-reducido
Longitud de onda utilizado: 500 nm
Volumen seleccionado: Vol. de 50 en 50
Absorbancia a la que se leyó el menisco: 500 nm
Volumen al que se observa el menisco: 400 µL
Volumen mínimo: 650 µL
Volumen necesario para obtener lecturas adecuadas: 750 µL
% de error: 18.03 %

Efecto acarreo

Tabla 2 Soluciones sin intercalar

Solución A Absorbancia Solución B Absorbancia

1 0.307 1 1.579
2 0.307 2 1.583
3 0.307 3 1.582
4 0.307 4 1.583
5 0.307 5 1.583
Media 0.307 Media 1.582
DS 0 DS 0.00173
%CV 0 %CV 0.109

Reactivo utilizado: K2Cr2O7

Longitud de onda utilizado: 500 nm
Concentración de la solución A: 100 mL H2O(Des) + 1 mL K2Cr2O7 al 8%
Concentración de la solución B: 100 mL H2O(Des) + 4 mL K2Cr2O7 al 8%

Formula del coeficiente de variación:

Cálculos:

Tabla 3 Soluciones intercaladas

Solución A Absorbancia Solución B Absorbancia

1 0.295 1 0.512
2 0.323 2 0.657
3 0.311 3 0.663
4 0.318 4 0.647
5 0.315 5 0.639
Media 0.3124 Media 0.6236
DS 0.106 DS 0.063
%CV 3.39 %CV 10.1

Tabla 4 Coeficientes de variación obtenidos:

Sol Sin/Int Sol. Int

Sol. A Sol. B Sol. A Sol. B
Media 0.307 1.582 0.3124 0.6236
%CV 0 0.109 3.39 10.1
%V - -- 1.75 -60.58
 Tabla 5 Resultados grupales

Efecto Menisco A Sin/Int B Sin/Int A Int B Int

Analista Tipo A del A cte % de Vol. Vol. X % CV X %CV X %CV %V X %CV %V

de menisc E Meni Minim
celda o sco o µL
µL
Cris/Luisa Vol. 0.27 0.243 10.00 1400 1500 0.3244 0.168 1.685 0 0.36 8.05 10.97 1.6618 1.86 -1.37
Com
Dany/Alex Vol. 0.333 0.242 21.53 1400 1500 0.3396 0.492 1.5684 0.339 0.4052 11.895 19.31 1.4812 0.82 -5.55
Com 4
Toño/Carlo Vol. 0.286 0.244 18.03 400 650 0.307 0 1.582 0.109 0.3124 0.109 1.75 0.6236 10.1 -60.58
s Semi
Gabriel/Al Vol. N/A 0.238 N/A N/A 1500 0.318 0.71 1.429 0.34 0.3886 12.44 16.52 1.368 1.5 -3.41
ex Com
Diana/Shar Vol. 0.667 0.217 207.37 350 450 0.308 0.53 1.384 2.45 0.338 10.35 9.74 1.307 3.21 -5.56
on Semi
Andrea/Me Vol. 0.512 0.236 116.94 300 400 0.3076 1.43 1.462 0.9103 0.398 11.3 29.38 1.376 1.01 -5.88
rari Semi 7
Yolanda/Ab Vol. 0.263 0.232 0.00 800 1100 0.29 0.39 1.391 0.18 0.321 6.85 75 1.381 0.55
ril Com
*No aplica: N/A
Discusión
De acuerdo con los resultados, se utilizó una celda de volumen semi-reducido a la
cual se le pudo determinar el volumen mínimo que fue de 750 µL, este dato es de
vital importancia, debido a que si se añade volúmenes menores a este puede
producirse que una lectura diferente al valor real. En la parte experimental se
determinó a que volumen se dio el efecto menisco en este tipo de celda (recordar
que hay celdas de vol. completo, reducido y semi-reducido) que fue a un volumen
de 400 µL, esto es debido a que la luz que es proyectada de la fuente de luz del
equipo incide con el menisco de la muestra en cuestión provocando que la luz se
difracte, dando lecturas mayores a las reales. Esto puede ser comprobado en la
sección de resultados, en la tabla 1 se observan los diferentes volúmenes que se
trabajaron y su absorbancia respectivamente, en donde se puede ver la mayor
absorbancia que corresponde al efecto menisco, posteriormente el valor disminuye
hasta mantenerse constante (se considera un volumen adecuado donde la lectura
al añadir K2Cr2O7 se mantenga constante) que en este caso fue con una
absorbancia de 0.244. En el caso de la tabla 5 se pueden visualizar los resultados
grupales, en la cual se observa que el volumen es diferente de acuerdo al tipo de
celda que se ocupe, además de que el efecto menisco no se observó en una celda
de vol. completo, esto puede deberse al ancho de la misma, que provoca que el
menisco se casi indetectable.
Posteriormente se realizó el efecto acarreo, en el caso de nuestros resultados no
salieron concordes a con respecto al de la tabla 5 que fue la grupal, esto pudo ser
debido a que en el momento de pasar de las soluciones sin intercalar al pasar a las
soluciones intercaladas, cuando se lavó el material, este no se secó bien,
provocando que se viera un efecto de dilución sobre las lecturas obtenidas en las
intercaladas, otro factor pudo haber sido el carro del espectrofotómetro, ya que pudo
haber sido movido, lo que ocasiono que la luz incidida en la muestra no fuera la
correcta. En este caso nos basaremos en los resultados de la tabla 5 en la cual se
ve dicho efecto, al pasar de las soluciones A sin intercalar (tabla 2) a la solución A
intercalada (tabla 3) las concentraciones difieren, esto debido a que en las
intercaladas se lleva parte de la solución anterior, en este caso de las soluciones A,
el efecto de pasar de una solución menos concentrada a una más concentrada
provoco que la muestra aumentara su concentración con respecto a la original, en
el caso de las soluciones B, es el caso contrario, las soluciones sin intercalar son
nuestra referencia, en este caso al pasar de una solución mas concentrada a una
menos concentrada disminuye la concentración con respecto a la original
Conclusiones
 El volumen minimo para la celda de vol. semi- reducido es de 750 µL
 El volumen del menisco se presenta en 400 µL
 El volumen para celdas de vol. completo es de 1500 µL
 El no limpiar correctamente las celdas provoca que se dé el efecto acarreo
Pregunta extra
Qué tipo de celdas son ocupadas para la determinación de glucosa oxidasa de
Randox:

El inserto indica que para que se efectué el método se necesita un volumen de 1 µL

de muestra/patrón y 1000 µL para el reactivo y el blanco, en este caso se utilizarían
celdas de volumen semi-reducido ya que el volumen final es de 1001 µL aprox. ya
que si se usaran celdas de vol. completo, no alcanzaría a leerse la muestra, ya que
como recordaremos estas tienen lecturas a partir de volúmenes de 1500 µL.
Volumen mínimo que miden los siguientes equipos
SpinLab: 220 µL
MicroLab: 32 µL
Selectra XL: 200 µL
Referencias
 Archivo PDF, Randox: insertos de laboratorio, disponible en:
http://sistemainterno.com/web/wp-
content/themes/aaaclientesflash/gaamsa2011/pdf/MANUAL_QC_2013.pdf
 DIAGKIT, Selectra XL, Analizador de química sanguínea disponible en:
http://www.diagkit.com/portfolio/selectra-xl/
Archivo PDF, Spinlab Analizador automatizado para química clínica, Disponible
en: http://www.spinreact.com.mx/public/_pdf/SPINLAB180.pdf