GUÍA DE LABORATORIO

Los grupos de laboratorio realizarán presentación ORAL de los siguientes temas.

1. Descripción de la estructura tridimensional del ADN, mostrando las diferencias entre la
estructura primaria-secundaria-terciaria y cuaternaria, especificando los siguientes niveles de
empaquetamiento del ADN: Nucleosoma - Collar de perlas - Fibra cromatínica - Bucles radiales
– Solenoides-Cromosoma.

EL ADN

El ADN es el Ácido DesoxirriboNucleico. Es el tipo de molécula más compleja que se conoce.

Su secuencia de nucleótidos contiene la información necesaria para poder controlar el
metabolismo un ser vivo. El ADN es el lugar donde reside la información genética de un ser
vivo.
El estudio de su estructura se puede hacer a varios niveles, apareciendo estructuras, primaria,
secundaria, terciaria, cuaternaria y niveles de empaquetamiento superiores.
Estructura primaria

El ADN está compuesto por una secuencia de nucleótidos formados por desoxirribosa. Las bases
nitrogenadas que se hallan formando los nucleótidos de ADN son Adenina, Guanina, Citosina y
Timina. No aparece Uracilo. Los nucleótidos se unen entre sí mediante el grupo fosfato del
segundo nucleótido, que sirve de puente de unión entre el carbono 5' del primer nucleótido y el
carbono 3' de siguiente nucleótido.
Como el primer nucleótido tiene libre el carbono 5' y el siguiente nucleótido tiene libre el
carbono 3', se dice que la secuencia de nucleótidos se ordena desde 5' a 3' (5' → 3').

Estructura secundaria

La estructura secundaria del ADN fue propuesta por James Watson y Francis Crick, y la
llamaron el modelo de doble hélice de ADN.
Este modelo está formado por dos hebras de nucleótidos. Estas dos hebras se sitúan de forma
antiparalela, es decir, una orientada en sentido 5' → 3' y la otra de 3' → 5'. Las dos están
paralelas, formando puentes de Hidrógeno entre las bases nitrogenadas enfrentadas.
Cuando en una hebra encontramos Adenina, en la otra hebra hallamos Timina. Cuando en una
hebra encontramos Guanina, en la otra hallamos Citosina. Estas bases enfrentadas son las que
constituyen los puentes de Hidrógeno. Adenina forma dos puentes de Hidrógeno con Timina.
Guanina forma tres puentes de Hidrógeno con la Citosina.
Las dos hebras están enrolladas en torno a un eje imaginario, que gira en contra del sentido de las
agujas de un reloj. Las vueltas de estas hélices se estabilizan mediante puentes de Hidrógeno.
Esta estructura permite que las hebras que se formen por duplicación de ADN sean copia
complementaria de cada una de las hebras existentes.
Estructura terciaria

El ADN es una molécula muy larga en algunas especies y, sin embargo, en las células eucariotas
se encuentra alojado dentro del minúsculo núcleo. Cuando el ADN se une a proteínas básicas, la
estructura se compacta mucho.
Las proteínas básicas son Histonas o Protaminas.
La unión con Histonas genera la estructura denominada nucleosoma. Cada nucleosoma está
compuesto por una estructura voluminosa, denominada core, seguida por un eslabón o "Linker".
El core está compuesto por un octámero de proteínas, Histonas, denominadas H2A, H2B, H3 y
H4. Cada tipo de histona se presenta en número par. Esta estructura está rodeada por un tramo de
ADN que da una vuelta y 3/4 en torno al octámero. El Linker está formado por un tramo de ADN
que une un nucleosoma con otro y una histona H1.
El conjunto de la estructura se denomina fibra de cromatina de 100Å. Tiene un aspecto repetitivo
en forma de collar de perlas, donde las perlas serían los nucleosomas, unidos por los linker.
El ADN debe encontrarse más compacto en el núcleo de los espermatozoides. En este caso, el
ADN se une a proteínas de carácter más básico, denominadas Protaminas. El ADN se enrolla
sobre estas proteínas, formando una estructura muy compacta, denominada estructura cristalina
del ADN.

Estructura cuaternaria
La cromatina en el núcleo tiene un grosor de 300Å. La fibra de cromatina de 100Å se empaqueta
formando una fibra de cromatina de 300Å. El enrollamiento que sufre el conjunto de
nucleosomas recibe el nombre de solenoide.
Los solenoides se enrollan formando la cromatina del núcleo interfásico de la célula eucariota.
Cuando la célula entra en división, el ADN se compacta más, formando los cromosomas.
2. Clasificación externa e interna de los cromosomas.

Los cromosomas son estructuras que se encuentran en el centro (núcleo) de las células que transportan
fragmentos largos de ADN. El ADN es el material que contiene los genes y es el pilar fundamental
del cuerpo humano. Los cromosomas también contienen proteínas que ayudan al ADN a existir en la
forma apropiada, llamadas histonas.

Estructura interna cromosomatica

Los cromosomas contienen el ácido nucleico ADN (ácido desoxirribonucleico), el cual está
formado por la unión de pequeñas moléculas que se llaman NUCLEÓTIDOS; en el ADN sólo
existen cuatro tipos de nucleótidos distintos, diferenciándose solamente en uno de sus
componentes, las llamadas
 BASES NITROGENADAS:

Nucleótidos con ADENINA = A

Nucleótidos con GUANINA = G
Nucleótidos con CITOSINA = C
Nucleótidos con TIMINA = T

Estructura externa cromosomatica

Los cromosomas son estructuras complejas, ubicadas en el núcleo de las células eucariotas y que
constituyen el cromosoma de las células eucariotas, que están compuestas por cromatina. La
cromatina es el conjunto de ADN (35%), histonas (35%), otras proteínas no histónicas (20%) y ARN
(10%). En los humanos, cada célula contiene 46 cromosomas dispuestos en 23 pares; las únicas
excepciones son las células sexuales (espermatozoide y óvulo) que contienen 23 cromosomas, pero
que al fecundarse crean una célula con una dotación completa de cromosomas, es decir, 46.

Las unidades básicas de la cromatina son los nucleosomas. Éstos se encuentran formados por
aproximadamente 146 pares de bases (el número depende del organismo) enrollados alrededor de un
octámero de histonas core, y una histona externa llamada H1. Las histonas core que constituyen el
octámero se denominan H3, H4, H2A y H2B. Entre cada una de las asociaciones de ADN e histonas
existe un ADN libre llamado ADN linker, que garantiza flexibilidad a la fibra de cromatina. Este tipo
de organización, permite un primer paso de compactación del material genético, y da lugar a una
estructura parecida a un "collar de perlas".
Partes de un cromosoma común:

 Cromátida: es una de las unidades longitudinales que forma el cromosoma, y que está unida a
su cromátida hermana por el centrómero. Las cromátidas hermanas son idénticas en
morfología e información ya que provienen de una molécula de ADN que se duplicó.

 Centrómero: es la región estrecha de un cromosoma, que divide a cada cromátida en dos

brazos (corto y largo). El centrómero, junto a una estructura proteica denominada cinetocoro,
es el responsable de llevar a cabo y controlar los movimientos cromosómicos durante las fases
de la mitosis y la meiosis. Se lo denomina también constricción primaria ó centromérica.

 Brazo corto: el brazo corto resulta de la división, por el centrómero, de la cromátida. Se lo

denomina brazo q y por convención, en los diagramas, se lo coloca en la parte superior.

 Brazo largo: el brazo largo también resulta de la división, por el centrómero, de la cromátida.
Se lo denomina brazo p y por convención, en los diagramas, se lo coloca en la parte inferior.

 Telómero: corresponde a la porción terminal de los cromosomas, que si bien

morfológicamente no se distingue, cumpliría con la función específica de impedir que los
extremos cromosómicos se fusionen.

 Constricción secundaria: es la región del cromosoma, ubicada en los extremos de los brazos,
que en algunos cromosomas corresponde a la región organizadora del nucleolo, donde se
sitúan los genes que se transcriben como ARN.

 Satélite: es el segmento esférico del cromosoma, separado del resto por la constricción
secundaria.
 Los cromosomas se clasifican según la longitud relativa de sus brazos, es decir, según la posición del
centrómero, en:

 METACÉNTRICOS: cuando los dos brazos son aproximadamente iguales y el

centrómero está en el centro.

 SUBMETACÉNTRICOS: el centrómero está ligeramente desplazado hacia un lado

dando dos brazos algo desiguales

 TELOCÉNTRICOS: cuando el centrómero está más cerca de un extremo, dando dos

brazos muy desiguales.

 ACROCÉNTRICOS: el centrómero está en un extremo, por lo que en realidad sólo

existe un brazo.

3. Características del ADN presente en mitocondrias, plastos y células procariotas. (DIBUJOS)

 Características del ADN mitocondrial: El ADN mitocondrial (ADNmt) se encuentra fuera de

los cromosomas de una célula, en la mitocondria. El ADNmt solo se hereda de la madre. De
manera que todos los hijos de una mujer tienen el mismo ADNmt. Los hijos de las hijas de esta
mujer tienen también el mismo ADNmt y así sucesivamente. El ADNmt se hereda únicamente
de madre a hijos. Con el análisis del ADN mitocondrial (ADNmt) podrá conocer la historia
personal de su familia por parte materna.

 Características del ADN plastos: Los plastos de las plantas se presentan como orgánulos
relativamente grandes, de forma elipsoidal, y generalmente numerosos. En un milímetro
cuadrado de sección de una hoja, pueden existir más de 500.000 cloroplastos. En protistas son
a menudo estructuras singulares, que se extienden más o menos extensamente por el
citoplasma. Se encuentran limitados del resto del citoplasma por dos membranas
 estructuralmente distintas. A menudo están coloreados por pigmentos de carácter liposoluble.
Al igual que las mitocondrias, poseen ADN circular y desnudo.

Cloroplastos (generalmente en las células de plantas y algas). Realizan la fotosíntesis. Los

cloroplastos son los orgánulos celulares que en los organismos eucariontes fotosintetizadores
se ocupan de la fotosíntesis. Están limitados por una envoltura formada por dos membranas
concéntricas y contienen vesículas, los tilacoides, donde se encuentran organizados los
pigmentos y demás moléculas que convierten la energía lumínica en energía química.

Cromoplastos (sólo en las células de plantas y algas). Sintetizan y almacenan pigmentos. Su

presencia en las plantas determina el color rojo, anaranjado o amarillo de algunas frutas,
hortalizas y flores. El color de los cromoplastos se debe a la presencia de ciertos pigmentos;
como los carotenos, de color rojo y las xantofilas, de color amarillo. Por ejemplo, el tomate y
las zanahorias contienen muchos pigmentos carotinoides.

Leucoplastos: Estos plastos son blancos y se localizan en las células vegetales de órganos no
expuestos a la luz, tales como raíces, tubérculos, semillas y órganos que almacenan almidón.

 Características del ADN en células procariotas: Una célula procariota o procarionte es un

organismo unicelular sin núcleo, es decir, cuyo material genético se encuentra disperso en el
citoplasma, reunido en una zona denominada nucleoide. Por el contrario, las células que sí
tienen un núcleo diferenciado del citoplasma, se llaman eucariotas, es decir, aquellas cuyo
ADN se encuentra dentro de un compartimento separado del resto de la célula.
4. Estructura tridimensional del ARN.

ESTRUCTURA ARN

El ARN, o ácido ribonucleico, es un ácido nucleico formado por la polimerización de nucleótidos,

cuya pentosa es la ribosa (ribonucleótidos) y en los que las bases nitrogenadas pueden ser adenina,
guanina, citosina y uracilo (no aparece la timina).

5. Función y tipos de ARN.

La unión de ribonucleótidos se establece mediante enlaces fosfodiéster entre el grupo –OH del
carbono 5′ de un nucleótido y el –OH del carbono 3′ del nucleótido siguiente (enlace 5’→3′).
Según la función biológica que desempeñan podemos distinguir los siguientes tipos de ARN: ARN
mensajero, ARN de transferencia y ARN ribosómico, fundamentalmente.

ARN MENSAJERO

El ARN mensajero (ARNm) presenta una estructura lineal de una sola hebra, que puede formar
horquillas en determinados tramos cuyas bases son complementarias.
Su función es trasladar la información genética del ADN a los ribosomas, para la síntesis de proteínas.
Cada molécula de ARNm es complementaria a un fragmento o gen de ADN, que sirve de molde para
su síntesis durante la transcripción:
  ARNm monocistrónico: el ARNm contiene la información necesaria para la síntesis de una
proteína (eucariotas).

 ARNm policistrónico: el ARNm contiene información para la síntesis de varias proteínas

(procariotas).

Cada triplete de bases del ARNm se denomina codón y a cada uno le corresponde un aminoácido en
la síntesis de proteínas.

ARN DE TRANSFERENCIA

El ARN de transferencia (ARNt) es el encargado de transportar los aminoácidos en el citoplasma para

la síntesis de proteínas. Está formado por 70-90 nucleótidos, algunos de los cuales presentan bases
poco frecuentes (distintas de A, C, G o U) y presenta fragmentos con estructura de doble hélice y
otros en los que se forman bucles:

 Extremo 5′, con un triplete de bases nitrogenadas en el que existe una guanina y un ácido
fosfórico libre.

 Extremo 3′, formado por el triplete de bases CCA desapareadas por donde se une el
aminoácido.

 El brazo T, que lleva timina, a través del cual se une al ribosoma.

 El brazo D, mediante el cual se une a la enzima aminoacil-ARNt-sintetasa que cataliza su

unión con el aminoácido.

 El brazo A, que posee un triplete de bases denominado anticodón, que es complementario al

correspondiente codón del ARNm.
A cada codón del ARNm le corresponde el ARNt que posea el anticodón complementario, el cual
transporta un determinado aminoácido. Es por eso que cada gen codifica específicamente la síntesis
de una proteína, pues proporciona la información necesaria para unir sus aminoácidos en la secuencia
adecuada en el proceso de traducción.

ARN RIBOSÓMICO

El ARN ribosómico (ARNr) es el más abundante (en torno al 80 % del ARN celular). Sus moléculas
son largas y monocatenarias, aunque presenta fragmentos con estructura de doble cadena. Tiene función
estructural ya que se encuentra asociado a proteínas formando los ribosomas, orgánulos encargados de
la síntesis de proteínas.

OTROS TIPOS DE ARN

El ARN nucleolar se origina en el núcleo a partir de diferentes segmentos de ADN denominados

organizadores nucleolares. Se encuentra unido a diferentes proteínas formando el nucléolo y tras un
proceso de maduración origina los ARNr.

También existen otros ARN con función catalítica, formando estructuras complejas tridimensionales
que actúan como enzimas (ribozimas). Algunos son autocatalíticos, es decir, son capaces de escindirse
en varios fragmentos por sí mismos, sin ayuda de ninguna enzima.