Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Determinación de aminoácidos terminales con grupo alfa amino libre. Método SECCIÓN II
de Sanger
bovina.
Análisis técnica Comparación entre reacción de
Se realiza el marcaje del aminoácido Sanger y Edman
terminal con DNFB observando un Reacción Sanger Reacción Edman
color amarillo. Se acidifica
No permite el análisis Permite el análisis
cuidadosamente con HCl 6 N. Se sucesivo (no puede sucesivo(puede repetirse)
repetirse)
extrae la solución acidificada con éter
sin peróxido (conservado en FeSO4) Empleo de ácido fuerte Se emplea un ácido débil
HCl TFA (Ácido
se añaden volúmenes pequeños y se trifluoroacético)
realiza la extracción con pipetas hasta
Aplicar Temperatura y
que el éter es incoloro, Presión
Tabla de resultados Se emplea el compuesto Se emplea
Rf = Movimiento de banda soluto / FDNB Fenilisotiocianato
Conclusión:
Consideramos los resultados
obtenidos de Rf similares entre
nuestra muestra y la valina por lo que
podemos decir que son iguales, de
acuerdo a la investigación realizada
los resultados fueron los esperados.
El método de sanger es un método
básico pero práctico para la
determinación de aminoácido de
cadena terminal N, ya que como
sabemos existen métodos mucho más
convenientes para realizar este tipo de
determinaciones, sin embargo no le
quita importancia y el mérito a
Frederick Sanger quien fue el que lo
desarrolló y a partir de su trabajo,
permitió mejorar nuestro
entendimiento de las proteínas como
estudiantes de la carrera de ingeniería
bioquímica.
Bibliografía:
Reginald H.G, Charles M.G
Biochemistry 2nd Edition Saunders
College 1999 USA .pp.132-134