CUESTIONARIO N°8

1. ¿Por qué se usa la razón (ratio para estimar la pureza del ADN?

La relación A260/280 es muy estable y se considera que un ADN de pureza

óptima tiene un valor entre 1.8-2.0. Un ADN de pureza aceptable debe tener al
menos una relación A260/280 > 1.6. Un valor A260/280 < 1.6 indica una
posible contaminación por compuestos aromáticos como fenoles y proteínas.
Un radio A260/280 > 2.1 podría deberse a la presencia de ARN en la muestra.

Las proteínas tienen un máximo de absorción a A280 (principalmente por

residuos de triptófano) las lecturas a esta longitud pueden mostrar si existe
algún contaminante proteico.1

2. ¿Porque se utiliza la proteinaza k?

La proteinasa k, que es un serina proteasa de amplio espectro, se utiliza en

muchos protocolos de extracción de ADN para digerir proteínas contaminantes.
El sitio de escisión predominante es el enlace peptídico adyacente al grupo
carboxilo de los aminoácidos alifáticos y aromáticos con grupos alfa amino
bloqueados. Se utiliza comúnmente por su amplía especificidad.

Además, puede haber nucleasas (enzimas que degradan los ácidos nucleicos)
presentes. La adición de proteinasa K degrada estas nucleasas. Además, la
proteinasa K es estable en un amplio rango de pH y es adecuada para su uso
en la extracción de ADN.2

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

1. Banco de ADN Carlos III. Programa de control de calidad de muestras.

España: Universidad de salamanca. 2015.
2. Wilson, K. (2001). Preparation of genomic DNA from bacteria. Current
protocols in molecular biology, 56
(1), 2-4.