MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA

INFORME DE PRACTICA Nª 02 – MICROBIOLOGIA

TINCION GRAM

1. FUNDAMENTOS:

El universo que descubrió Leeuwenhoek estuvo conformado por

bacterias y protozoarios de diversas características. Es por ello que hoy en
día sabemos que hay millones de microorganismos que se encuentran en
todos los lugares de nuestro planeta, en al agua dulce y salada, por tanto,
viven en el aire, agua y tierra, se les halla también en los alimentos, en el
exterior y el interior de los seres vivos. También causan enfermedades y otros
que son beneficiosos para nosotros.

Por eso es de vital importancia conocer sobre estos microorganismos.

Especialmente hablaremos sobre bacterias, tipos, características y
diferencias entre gramnegativas y positivas. Las bacterias pertenecen al filum
de las Shizomycophyta, se les llama también microbios o gérmenes. Son de
pequeño tamaño. Casi siempre son unicelulares. Están recubiertas por una
pared celular de naturaleza quitinosa en su superficie externa. Poseen
prolongaciones filamentosas que les permiten desplazarse otras tienen
flagelos.

La pared celular que rodea a las bacterias es compleja y existen dos formas
básicas: pared celular grampositiva con una gruesa capa de péptidoglucano
y una pared gramnegativa con una delgada capa de péptidoglucano, así
como una membrana externa.

2. OBJETIVOS:

 Comprender la base teórica y química de los procedimientos de tinción

diferencial.
 Comprender la base química de la tinción de Gram.
 Comprender el procedimiento para diferenciar entre dos grupos
principales de bacterias: Gram positivas y Gram negativas.

3. REACTIVOS

 AZUL VIOLETA (cristal violeta – violeta de genciana)

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 LUGOL

 ALCOHOL CETONA

 SAFRANINA O FUCSINA

4. MATERIALES

 PORTA OBJETOS

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 ASA DE SEMBRA

 MICROSCOPIO

 REACTIVOS

 ACEITE DE INMERSION

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5. PROCEDIMIENTO

 Homogenizar nuestra muestra en el porta objetos con la ayuda del

cloruro de sodio o agua destilada.

 Dejar secar a temperatura ambiente o en un acelerador.

 Agregar azul violeta y esperar aproximadamente 3 a 5 minutos hasta

cubrir el área de la muestra.

 Enjuagar con agua, no directamente sobre la muestra.

 Agregar lugol y esperar aproximadamente 3 a 5 minutos hasta cubrir

el área de la muestra.

 Enjuagar con agua, no directamente sobre la muestra.

 Agregar el alcohol y esperar aproximadamente 3 a 5 minutos hasta

cubrir el área de la muestra.

 Enjuagar con agua, no directamente sobre la muestra.

 Agregar la coloración safranina y esperar aproximadamente 30

segundos hasta cubrir el área de la muestra.

 Enjuagar con agua, no directamente sobre la muestra.

 Dejar secar a temperatura ambiente o en un acelerador.

 Llevar al microscopio

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6. DATOS OBTENIDOS EN EL MICROSCOPIO (RESULTADOS)

7. INTERPRETACION:

 Por lo que podemos que podemos observar en una primera impresión son:
o Basilos gram negativos
Para poder definir en específico que tipo de bacteria puede ser, tenemos que
saber el origen de con se tomó la muestra (de que parte del cuerpo), según
el cuadro clínico del paciente.
POSIBLE AFECCIONES
o Infecciones de las vías urinarias
o meningitis neonatal
o Sepsis
o Diarrea del viajero.
o Fiebre tifoidea
o Enterocolitis
o Septicemia con abscesos
o Meningitis
o Otitis media
o Sinusitis

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o Bronconeumonía
o Artritis séptica
o Celulitis

POSIBLE CUADRO CLINICO

o Infección
o Inflamación
o Proceso febril

El tipo de bacterias antes mencionadas se pueden tratar de forma general

con QUINOLONAS
o ácido nalidíxico
o ciprofloxacino
o ofloxacino
o moxifloxacino
o levofloxacino

8. CONCLUSIONES

 Que la técnica de coloración Gram nos permite identificar con presión si es

negativo o positivo.
 Nos ayuda a identificar si son cocos, bacilos, etc.
 Nos puede dar una idea del posible responsable de la infección.

9. BIBLIOGRAFIA

 PRESCOTT MICROBIOLOGÍA QUINTA EDICIÓN PÁG. 70

 http://docencia.izt.uam.mx/gra/bioquimica1pdfs/1-
1_celulas_procariontes.pdf
 Beishir, L. “Microbiology in practice. A self-instructional laboratory course”.5ª
Ed. Harper Collins Pub. Inc., 1991.
 Case, C.L. y T.R. Johnson. “Laboratory experiments in Microbiology”. The
Benjamin/Cummings Publishing Company, Inc. 1984.
 Claus, GW. “Understanding microbes: A laboratory textbook for
microbiology”. 1ª Ed. W.H. Freeman and Co. New York, 1989.
 Collins, C.H. y P.M. Lyne. “Microbiological methods”. Butterworth & Co. (Pub)
Ltd., 1985.