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Objetivo : Separar adecuadamente los componentes de una mezcla de compuestos poco polares
por medio de cromatografía en capa fina en columna y en cuantificación por espectrofotometría
Materiales y métodos
Introducción
Se empleó una columna cromatografíca en donde se le adiciono una suspensión entre la fase
estacionaria (silicagel) y la fase móvil (acetato de etilo: etano7:3) sin dejar secar la columna, se dejó
hasta que la mezcla llego al borde de la fase estacionaria, siguiente a esto se le agrego 1mL de la
mezcla (n- nitroalinina, Rojo Congo) dejándola caer por las paredes, se mantuvo en hidratación
constantemente con la fase móvil buscando obtener una buena elución. La sustancia fue recogida
en un vaso de precipitado, se le midieron los componentes de pureza y absorbancia en el
espectrofotómetro.
Para la cuantificación del colorante se midió el patrón de m- nitroalinina de 200 ppm , con esta
medida se realizaron diluciones seriadas agregando 5 mL de 200ppm con una pipeta aforada
vertiéndolas en en un tubo de ensayo ,siguiente a eso se le agrego 5 mL del solvente (acetato de
etilo 7:3 )obteniendo diluciones de concentraciones a 100ppm, 50ppmy 25 ppm .Se midió la
absorbancia de la fracción obtenida en la columna cromatografía
Resultados .
I) Separacion por CC
Volumen fracción obtenida _______
Color de la fracciónamarilla
Concentración
Absorbancia
II)
Concentracion Absorbancia
0.00mg/L
(ppm)
25 mg /L
(ppm)
50 mg/L
(ppm)
100 mg/L (ppm)
200 mg / L
(ppm)
Fracción
Volumen de la Fraccion
Concentración de la fracción :_______
Conclusión
Concentracion Absorbancia
25 0.163
50 0.291
100 0.492
200 0.926