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La transgenèse végétale
Patrice Crété
Laboratoire de Génétique et de Biophysique des plantes
UMR6191,Faculté des Sciences de Luminy
crete@luminy.univ-mrs.fr
la transgenèse végétale 1
Biotechnologie
* Produire de la biomasse
La culture in vitro
Totipotence: aptitude de la cellule végétale à exprimer la totalité des potentialités du génome pour
donner un organisme entier
Cette totipotentialité cellulaire s'accompagne d'une possibilité de multiplication indéfinie que l'on
peut observer dans les zones de croissance de la plante : les méristèmes, cellules restant dans un
état de dédifférenciation permanent.
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- une organogenèse
Les AUXINES
dérive d’un acide aminé: le tryptophane, exp: l’acide indole acétique
tryptophane AIA
(photosensible)
Le transport de l'auxine s'effectue de façon polarisée, de l'apex vers la base dans la tige.
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LES CYTOKININES
Synthèse dans les racines puis migrent dans la plante via la sève brute
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Indole Butyric
Acid (IBA)
La transgenèse végétale
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Les plasmides Ti
Les gènes nécessaires au transfert du T-DNA sont portés par la zone vir
(virulence) des plasmides Ti
Plasmide Ti à octopine
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Blessure
autophosphorylation
coupures
Vir Vir
D2
Ici coupure simple brin d’où
D2
intermédiaire ADN-T
simple brin, on peut avoir
des coupures double brin et
un intermédiaire ADN-T
Vir
D2
double brin, dépend des
souches
Vir
D2
VIR D2
Vir
D2
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Modèle de synthèse de l’ADN-T
3’
= délétion de l’ADN
génomique
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ion
at
rm
n sfo
tra
Cellules
Disques foliaires
ou OGM ou PGM
Applications fondamentales
BLANC
BLEU
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- Détails de la construction
- Observations
Promoteur A
Promoteur B
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Émission à 509 nm
Marquage des noyaux avec une fusion NLS-GFP
dans une plante transgénique
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Gène X
Transgenèse,
insertion au hasard du T-DNA
AATCGTAGTACTAGAT CTGCAGACTTGAGTACAAGGGTGATGATGCGGACATTCTATCTGCTTA……...
BD Gène X
ADN génomique
Salk_074723
Dr. Jonas Salk, developer of the polio vaccine, established the Salk Institute for Biological Studies more than 40 years ago.
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CLON SALK_074723.37.35.x[seq] [About & Citation] [analysis] [Order from ABRC] [Order from NASC]
TYPE SALK T-DNA
CHRO chr1
EVAL 1e-41
COOR C/4101-4298
HITS At1g01010[Seq] [Transcriptome] [RiceGE] [GO] [NCBI] [NCBI Map] [TAIR] [MIPS] [MPSS] [AMPDB] [KEGG]
TYPE Gene
TITL no apical meristem (NAM) family protein similar to NAC domain protein NAM GB: AAD17313 GI:4325282 from [Arabidopsis
thaliana]; go_function: transcription factor activity [goid 0003700]; go_process: development [goid 0007275]
LOCN Intron
COOR W/3760-3913,3996-4276,4486-4605,4706-5095,5174-5326,5439-5630
>SALK_074723.37.35.x ATATATATGAATAGAAGAAAACCTGATGTTCTGGTAAGAGGTCGTAGTGGAACTCGTGGATAAC
CCAATCAGATTTGGTTTTGTCAGGGTATCTTCCATCGAGGAACACCAAAACCCTTTTATGACCA
ATCTTACCACGAAAGCCCTCACTACAAAATCCCCACTGGTCCTTGACCTCAACAGATTCTCCGG TAAGCT
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The Arabidopsis Information Resource (TAIR)
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1 acaaatttct acagaggatg atattcaatc cacggttcac ccaaaccgat tttataaaat
61 ttattattaa atctttttta attgttaaat tggtttaaat ctgaactctg tttacttaca
121 ttgattaaaa ttctaaacca tcataagtaa aaaataatat gattaagact aataaatctt
181 aatagttaat actactcggt ttactacatg aaatttcata ccatcaattg ttttaataat
241 ctttaaaatt gttaggaccg gtaaaaccat accaattaaa ccggagatcc atattaattt
301 aattaagaaa ataaaaataa aaggaataaa ttgtcttatt taaacgctga cttcactgtc
361 ttcctccctc caaattatta gatataccaa accagagaaa acaaatacat aatcggagaa
421 atacagatta cagagagcga gagagatcga cggcgaagct ctttacccgg aaaccattga
481 aatcggacgg tttagtgaaa ATGGAGGATC AAGTTGGGTT TGGGTTCCGT CCGAACGACG
541 AGGAGCTCGT TGGTCACTAT CTCCGTAACA AAATCGAAGG AAACACTAGC CGCGACGTTG
601 AAGTAGCCAT CAGCGAGGTC AACATCTGTA GCTACGATCC TTGGAACTTG CGCTgtaagt
661 tccgaatttt ctgaatttca tttgcaagta atcgatttag gtttttgatt ttagggtttt
721 tttttgtttt gaacagTCCA GTCAAAGTAC AAATCGAGAG ATGCTATGTG GTACTTCTTC
781 TCTCGTAGAG AAAACAACAA AGGGAATCGA CAGAGCAGGA CAACGGTTTC TGGTAAATGG
841 AAGCTTACCG GAGAATCTGT TGAGGTCAAG GACCAGTGGG GATTTTGTAG TGAGGGCTTT
901 CGTGGTAAGA TTGGTCATAA AAGGGTTTTG GTGTTCCTCG ATGGAAGATA CCCTGACAAA
961 ACCAAATCTG ATTGGGTTAT CCACGAGTTC CACTACGACC TCTTACCAGA ACATCAGgtt
1021 ttcttctatt c atatatata tatatatata tatgtggata tatatatatg tggtttctgc
T1 T2 T3
Homozygotes Homozygotes
Agriculture
Agroalimentaire
Industries
Environnement
Santé-pharmacie
Agriculture
Résistance aux herbicides, aux insectes et contre certains virus et bactéries
Résistance à la pyrale
Moins d’insecticides chimiques, maïs, tomate, pomme de terre, coton, laitue, peuplier,
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Agriculture
Résistance aux stress (chaleur, froid, sécheresse et salinité)
Agroalimentaire
Introduction de caractères pour obtenir des avantages nutritionnels, gustatifs
Maïs Résistance aux insectes, Tolérance aux herbicides (Afrique du Sud, Argentine,
Canada, Etats-Unis d'Amérique, Union européenne, Argentine, Canada, Etats-
Unis d'Amérique, Union européenne)
Pomme de Terre
Résistance aux insectes / tolérance aux herbicides (Canada, Etats-Unis)
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Industries
Industries
Biocarburants
Huile de Colza
De nouvelles variétés de colza ont été obtenues par transgenèse pour diminuer la
viscosité et augmenter l'indice d'octane du diester.
Santé-pharmacie
Ces modifications possibles chez les plantes, difficiles voir impossible chez les
bactéries ou levures
Plantes non porteuses des agents pathogènes couramment associés aux infections
humaines (virus, bactéries)
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Leur contenu cellulaire, hormis la protéine recombinante, connu de l’homme par son
utilisation dans l’alimentation, en cosmétique et en pharmacie.
Santé-pharmacie
Santé-pharmacie
Exemples de molécules obtenues
Production de vaccins
Santé-pharmacie
Exemples de molécules obtenues
Production de vaccins
La prochaine pandémie (épidémie planétaire) pourrait être d’origine aviaire
(si virus de la grippe aviaire H5N1 muté très contagieux pour l’homme)
Vaccin basé sur l’inoculation du virus de la grippe humaine dans des œufs
fertilisés ou embryonnés, puis purification du virus et inactivation
Production de ("VLP") Virus-Like Particle dans des plants de tabac pour faire un
vaccin contre le virus H5N1