UNIVERSIDAD CIENTÍFICA DEL SUR

FACULTAD DE CIENCIAS VETERINARIAS Y BIOLÓGICAS

CARRERA DE BIOLOGÍA MARINA

TEMA: Preparaciones Permanentes como Referentes Taxonómicos de

Muestras Microscópicas

AUTORES:
Aguirre Saldaña, Sandy

Altamirano Cobeñas, Micaela

Condor Chuquivilca, Nilton

Flores Egusquiza, Gabriel

Garcia Alvarado, Kamila

PROFESORA:

Santome Sanchez, Selma

LIMA - PERÚ

2018
I. INTRODUCCIÓN:

El éxito en el estudio de la Biología depende de varios factores tales como la observación,

instrumentos y técnicas; para lo cual es necesario apoyar las explicaciones teóricas con
prácticas de laboratorio; en donde cada persona puede realizar sus propias observaciones e
investigaciones. Los seres vivos presentan variedad en tamaño, forma, estructura, función,
etc. con relación al tamaño éste varía, el ojo humano logra identificar objetos hasta 20
micras, por lo que se hace necesario recurrir a instrumentos ópticos que faciliten la
observación de objetos de menor diámetro; este instrumento es el Microscopio, que
consiste en juegos de lentes que agrandan la imagen.

Para observar los objetivos a través del microscopio es necesario colocar los objetos sobre
una laminilla de vidrio (portaobjetos) y generalmente se coloca otra laminilla más delgada
(cubreobjetos); en esta forma se obtiene la preparación microscópica, la que puede durar
poco tiempo o puede ser guardada lo que nos da la clasificación de preparaciones
microscópicas TEMPORALES y/o PERMANENTES.

Un detalle que se toma en cuenta es que lo observado a través del Microscopio, debe ser
esquematizado y descrito en lo que forma el Reporte de Laboratorio. En esta práctica se
darán los lineamientos generales para el la fijación de muestras , hacer preparaciones
microscópicas y efectuar el reporte de Laboratorio.

OBJETIVO

● Capacidad de preparar referentes taxonómicos de algas microscópicas.

MATERIALES

• Microscopio óptico
• Cocinilla eléctrica
• Lámina portaobjetos
• Lámina cubreobjeto
• Beaker (500 ml)
• Gotero
• Bagueta
REACTIVOS QUÍMICOS

• 20 g de colapez
• 120 ml de agua destilada
• 140 ml de glicerina
• 1 g de cristales de fenol

METODOLOGÍA

La metodología se realizó con la preparación de la cera sintética, es decir con el material de

la gelatina sin saborizante (agar). Por otra parte para la preparación de la sustancia se
utilizó un patrón, en este caso el agar presentó una proporción de 1, el agua destilada una
proporción de 6 y la glicerina de 7, esto nos dice la cantidad que se requiere, por ejemplo se
emplea 10 g de agar, 60 ml de agua destilada y 70 de glicerina, en total nos da 140 ml de
gelatina glicerada para la fijación.

PROCEDIMIENTO:

A) Preparación de medios de montaje

1. Medios de montaje
Se emplean los medios de montaje para hacer preparados microscópicos permanentes
(bálsamo de Canadá) o semipermanentes (miel karo, gelatina glicerada) para su posterior
observación.
2. Preparación de gelatina glicerada
En un vaso de precipitado de 500 ml colocar 120 ml de agua destilada y agregar
cuidadosamente 20 g de colapez. Esperar hasta que este se hidrate totalmente. Colocar el
vaso de precipitado en baño maría para licuar la solución. Agregar 140ml de glicerina y 1 g
de fenol moviendo muy lentamente para prevenir la formación de burbujas. Inmediatamente
después proceder a repartir la gelatina glicerada en frascos viales de 10ml de capacidad.
Rotular y conservarla en refrigeración.
B) Preparaciones permanentes como referentes taxonómicos.
1. Obtención, fijación y concentración de la muestra.
Recolectar una muestra de agua en un frasco plástico. Agregar formol al 7%. Esperar 24
horas, decantar la mayor parte del líquido sin agitar el contenido y colocar la muestra en
envase pequeño, hermético.
2. Manejo de la muestra: Con un gotero tomar una muestra del frasco preparado. Agregar
sobre un portaobjeto limpio una gota de la muestra, extenderla con un alfiler. Colocarlo en
un lugar ventilado y dejar evaporar el agua.

3. Montaje de la muestra: Colocar la gelatina glicerada en baño maría, cuando esta se haya
licuado introducir la bagueta en el vial y sacarla sin remover para evitar la formación de
burbujas. Dejar caer una gota sobre la muestra, colocar un cubreobjeto sobre el preparado
de manera suave.

4. Limpieza y sellado: Con ayuda de una gilette se debe retirar el exceso de gelatina
glicerada, limpiar el portaobjeto con el uso de algodón y alcohol.

5. Etiquetado de láminas: Finalmente, se debe esperar que seque y luego sellar los bordes
del cubreobjeto usando esmalte de uñas.

RESULTADOS:

Descripción basada en fijación correcta del ejemplar

Para una lámina permanente se debe tomar en cuenta los siguientes aspectos : el
cubreobjeto debe ser estar colocado encima de la gelatina glicerinada y la muestra
seca,seguidamente se procede a sellar los bordes del cubreobjeto con esmalte
transparente, para que este no se mueva el cubreobjeto cuando se observe en un
microscopio.
Para la visualización de la muestra fijada se acude a un microscopio, así pues se corrobora
si esta correcta, es decir, que no contenga burbujas en la muestra , si se visualiza realmente
la muestra y no puntos negros.

Al ver la muestra y corroborar su estado se procede a etiquetarla con los siguientes datos :
De tal modo nuestra lámina permanente nos queda con la muestra al centro, sellada con
esmalte y al costado derecho con su etiqueta respectiva.Esta puede ponerse en una
colección donde los datos de muestreo coincidan o se puede tomar como objeto de estudio
por la representación de especies fijadas.

Composición de las muestra fijada

La comunidad del fitoplancton observados en nuestra muestra están compuestos por la

Orden Biddulphiales, Orden Bacillariales y algunos dinoflagelados tecados.

ORDEN BIDDULPHIALES

La variedad de diatomeas centrales fueron halladas en las muestras de agua marina ,

reconocidas en esta orden por sus ornamentaciones de simetría radial .

Coscinodiscus sp.

Skeletonema sp.

ORDEN BACILLARIALES

Valvas en forma delgadas , presentando simetría bilateral .

Pleurosigma sp.

ORDEN PERIDINIALES

Formando parte de los dinoflagelados tecados ,no tiene estructura bivalvas porque sus
regiones son :epiteca,hipoteca,cíngulo y surco.Encontrada en abundancia en la muestra en
especial el siguiente género.
Protoperidinium sp.

ORDEN GONYAULACALES

Espinas muy características de ellos , con su forma variable forma parte de la muestra
marina.

Ceratium sp.

RECOMENDACIONES

- Antes de poner la muestra en el portaobjetos asegurarse de que este es limpio y sin

ninguna huella.
- Al momento de secar en la cocinilla la muestra que está colocada en el portaobjetos
tener sumo cuidado, ya que se puede llegar a deteriorar.
- Se debe de hechar 2 a 3 gotas de gelatina glicerinada en el porta objeto ,
dependiendo del tamaño de muestra y del cubreobjeto.
- Cuando se ponga el cubreobjeto encima de la gelatina glicerinada, debe de ser
suavemente y percatarse de que cubra todo el cubreobjetos.
- Antes de colocar el cubreobjeto asegurarse de que esté limpio y que este sea un
tamaño pequeño.
- Cuando se haya secado toda la muestra, retirar los sobrantes con ayuda de una hoja
de afeitar.
- Sellar los bordes del cubreobjeto con esmalte transparente de uñas.
- No utilizar concentraciones o cantidades inadecuadas de fijador.

CONCLUSIÓN

En el presente trabajo se pudo concluir que la fijación es un método empleado para la

conservación de la composición química y morfológica del espécimen. Existen métodos
adecuados de fijación en relación al organismo, ya que varían la cantidad y el tipo de
sustancias químicas para su uso. Por otra parte la metodología empleada para fitoplancton
es exclusivo, como se puede apreciar en la parte de procedimiento. Para su desarrollo se
realizó series con la aportación del agar (gelatina) como uso de cera, y por ende las
muestras ya fijadas requieren ser identificadas, ya que les permite ser identificadas por
códigos según sus características.
BIBLIOGRAFÍA

- Tomasi H. . (2008). Fijación de Muestras Biológicas. septiembre 15, 2018, de

BLOGGER Sitio web: ​http://educacionhistotecnologiafijacion.blogspot.com/
- N. Arraiza, P.M. Viguria J. Navarro & A. Ainciburu. (2008) (2008). Estudio "IN VIVO".
En Manual de Microscopia (pp. 17-18). s/l: AUXILAB, S.L. Material para Laboratorio.