PONTIFICIA UNIVERSIDAD CATÓLICA DEL ECUADOR

FACULTAD DE MEDICINA
CARRERA: BIOQUIMICA CLINICA
Asignatura: Hematología Reporte #: 2
Nombre de la práctica: Anemia Ferropénica Fecha de entrega: 05/10/2018
Estudiante: Nicole Núñez

OBJETIVOS. –

 Capacitar al estudiante en el diagnóstico de anemia ferropénica.

 Reconocer los parámetros hematológicos que se encuentran fuera del rango en caso
de anemia ferropénica.
 Indicar los valores de referencia de hemoglobina y hematocrito.
 Enumerar las pruebas de laboratorio para confirmar anemia ferropénica.

RESUMEN. –

La anemia ferropénica es una patología que en los últimos años ha sido un problema a nivel
mundial y cada vez afecta a más personas. Anemia está definida como la deficiencia de hierro
en la sangre y se presenta por varios factores como la deficiencia de Fe en la dieta diaria, a causa
de hemorragias y por falta de absorción de hierro en el duodeno. En la práctica de laboratorio
se capacitó al estudiante para que pueda identificar los índices hematológicos que indiquen el
padecimiento de anemia, el principal signo de padecer de anemia es la baja de hemoglobina que
se manifiesta en la primera prueba de laboratorio que se debe hacer. Los estudiantes
desarrollaron dos técnicas de identificación de anemia ferropénica, la primera hemosiderina en
médula y la segunda hierro sérico.

RESULTADOS. –

COLORACIÓN PARA HIERRO- TINCIÓN DE PERLS HEMOSIDERINA

Hemosiderina. – “Forma altamente insoluble de almacenamiento de hierro. Ocurre cuando la

cantidad total de hierro del organismo supera la que puede contener el fondo común de
depósito de apoferritina. Se almacena la hemosiderina en células, en las que puede detectarse
con métodos de tinción para el hierro”. (Paredes, 2015)

1. Para la técnica se prepara una solución de ferrocianuro de potasio disuelto en agua.

Ilustración 1Ferrocianuro de potasio. (Núñez,2018)

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2. Colocar Ácido Clorhídrico a la solución anterior hasta formar turbidez.

3. Filtrar la solución preparada.

Ilustración 2. Solución preparada. (Núñez,2018)

4. Colocar la solución en las placas de médula por veinte minutos.

Ilustración 3. Coloración de placas. (Núñez,2018)

5. Lavar con agua destilada.

6. Eliminar exceso de colorante.
7. Cubrir con hematoxilina de Mayer las placas y esperar por diez minutos.

Ilustración 4 Hematoxilina de Mayer. (Núñez,2018)

8. Lavar con agua destilada.

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9. Limpiar con esponja excesos.

10. Observar al microscopio en 100x

Glóbulo
rojo

LEUCOCITO
Hierro
S

Ilustración 5. Observación de Hierro. (Núñez,2018)

La tinción de Perls es una de las técnicas más antiguas. Es un método que se utiliza para
observar las reservas de hierro en la médula ósea, las cuales se encuentran como
hemosiderina, es importante para el diagnóstico de una variedad de patologías
hematológicas. (Milstein, 2016)

La técnica que se utilizó se basa en la liberación de hierro depositado por acción del ácido
clorhídrico el cual reaccionó con ferrocianuro potásico para formar ferrocianuro férrico, por
lo tanto, la prueba pone en evidencia la presencia de complejos insolubles de Fe por la
precipitación de azul de Prusia. El método que se utilizó por ende permite una
semicuantificación de los depósitos de hierro.

Coloración de células sanguíneas. –

Célula Color
Leucocitos Lila- morado
Glóbulos rojos Amarillos
Hierro Verde brilloso

Resultado de observación de hierro en médula. – El paciente, no presenta cantidades

significativas de reservas de hierro.

PRUEBA PARA HIERRO SÉRICO

La técnica que se utilizó para hierro sérico fue fotométrica colorimétrica para el hierro con factor
aclarante de lípidos, el método se basa en la reacción de cromazurol B (CAB) y
cetiltrimetilbromuro de amonio (CTMA) para formar un complejo ternario coloreado con una
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máxima absorbancia de 623 nm. El color que se produce es directamente proporcional al hierro
presente en la muestra del paciente.

Para la técnica se utilizó plasma, reactivo RGT, agua destilada y el estándar.

50 ul 50 ul
50 ul
pcte+ ST
H2O+
1000 +1000
1000
RGT RGT
RGT

1. En el primer tubo de ensayo se coloca 50 micro litros de agua destilada con 1000 micro
litros de reactivo RGT.
2. En el segundo tubo de ensayo se coloca 50 micro litros de suero del paciente con 1000
micro litros de reactivo RGT.
3. En el tercer tubo de ensayo se coloca 50 micro litros del estándar con 1000 micro litros
de de reactivo RGT.
4. Se deja incubar a temperatura ambiente por quince minutos.
5. Se pasa por el espectrofotómetro en el siguiente orden:
-Blanca
- Estándar
-Paciente

NOTA: El resultado no será el idóneo por la longitud de onda que tiene el equipo de laboratorio
ya que la casa comercial del reactivo requiere una onda superior a la que se trabajó.

Los valores que marco el espectrofotómetro fueron los siguientes:

Blanco 0.144
Estándar 1.028
Paciente 1.119

Cálculos. –

Cálculo con factor:

Longitud de onda Hierro (ug/dl) Hierro (umol/l)

Hg 623 nm 830 x ΔA muestra 149 x ΔA muestra

 Se trabajó con micro litros sobre decilitros por lo tanto se utiliza la segunda fórmula
propuesta:

830 x ΔA muestra

830*1.119=741.73 ug/dl
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Cálculo con estándar:

Como se utilizó una longitud de onda diferente, se empleó el estándar y se realiza el siguiente
cálculo:

ΔA muestra
C= 100 x (ug/dl).
ΔA sto
ΔA muestra
C=17.9 x (ug/dl).
ΔA sto
 Como se trabajó con micro litros sobre decilitros se emplea la primera fórmula
propuesta:

ΔA muestra
C= 100 x (ug/dl).
ΔA sto
1.119
C= 100 x (ug/dl)=108.85 (ug/dl).
1.028
Los valores de referencia son los siguientes:

Hombre 59-148 ug/dl

Mujer 37-145 ug/dl

Resultado. – El paciente de sexo desconocido presenta un valor de 108.85 ug/dl lo que indica
que se encuentra dentro del rango de referencia.

DISCUSIÓN DE RESULTADOS. –

CONCLUSIONES. –

1. La primera prueba de diagnóstico de laboratorio que se debe hacer para determinar

anemia es un hemograma y el parámetro que indica que el paciente padece de anemia
es el valor disminuido de hemoglobina.
2. La anemia ferropénica es de clase arregenerativa que quiere decir que los reticulocitos
se encontraran normales o ligeramente bajos.
3. En anemia ferropénica se van a observar parámetros fuera del rango, como por ejemplo
la ferritina se encontrará baja, el hierro sérico bajo, la capacidad de fijación del hierro
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alto, el índice de saturación alto, los transportes de hierro altos y el protoporfirinogeno

alto.
4. Para el análisis de hierro medular se buscaron precipitados azul turquesa que es la
coloración adquirida por la presencia de ferrocianuro férrico en los puntos en donde se
ha liberado iones férricos.
5. La técnica de Perls para observar hemosiderina sirvió para evaluar las reservas de hierro
y su presencia en macrófagos y el hierro presente en los eritroblastos.
6. La prueba de hierro sérico es otra prueba de laboratorio de gran importancia clínica para
verificar que el paciente se encuentra con anemia ferropénica ya que el
espectrofotómetro mide la absorbancia del color producido en este caso del hierro,
entonces se da a concluir que si la intensidad de color producida es menor a los valores
de referencia el paciente estará con una concentración de hierro disminuida.

RECOMENDACIONES. –

1. Se debe tomar en cuenta el inserto del reactivo a utilizar ya que si no se leen las
indicaciones y todos los parámetros que pone la casa comercial se obtendrán resultados
erróneos y provocara que se dé un resultado equivocado.
2. Se recomienda realizar todas las pruebas básicas antes de realizar pruebas más
complejas para la detección de anemia ferropénica.

CUESTIONARIO. –

Investigue estudio de anemia ferropénica en el país. Debe incluir el artículo y el resumen de una
página.

http://repositorio.utn.edu.ec/bitstream/123456789/4859/2/06%20NUT%20137%20ARTICULO
%20PERIODISTICO.pdf

Resumen
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BIBLIOGRAFÍA. –
Aixalá, M. (2015). Anemias Ferropénicas . Obtenido de Sociedad Argentica de Hematología :
http://sah.org.ar/docs/1-78-SAH_GUIA2012_Anemia.pdf

Alonso, A. (2002). Iron Deficiency anemia . Obtenido de http://www.elsevier.es/es-revista-

gaceta-medica-bilbao-316-pdf-S0304485802743941

Bilbao, G. (2002). Anemias Ferropenicas . Obtenido de

http://www.imbiomed.com/1/1/articulos.php?method=showDetail&id_articulo=3651
8&id_seccion=2218&id_ejemplar=3772&id_revista=136

Milstein, C. (28 de 04 de 2016). Tinción de hierro medular . Obtenido de Laboratorio en

Hematología:
http://www.sah.org.ar/revista/numeros/14%20vol%2020%20N2%20%202016.pdf

Paredes, A. (2015). Clínica Universidad de Navarra. Obtenido de

https://www.cun.es/diccionario-medico/terminos/hemosiderina

Paredes, E. (12 de 2014). Obtenido de

http://repositorio.utn.edu.ec/bitstream/123456789/4859/2/06%20NUT%20137%20A
RTICULO%20PERIODISTICO.pdf

Prieta, R. (2002). Anemias ferropénicas . Obtenido de Elsevier :

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S030448580274393X