CROMATOGRAFIA POR TROCA IÔNICA

Prof. MSc. Eduardo Sobieski Neto

E-mail: sobieskineto@gmail.com
Mecanismo de Separação
Matriz Trocadora
1. Apresentam ligações covalentes ligados aos grupos trocadores
iônicos;

2. Mais usadas: resinas orgânicas altamente polimerizadas.

Trocadores Iônicos
- 1935 Adams e Holmes - Condensação de fenóis com formaldeído.
Em 1942: Desenvolvimento de resinas com base no estireno cruzado com divinilbenzeno.
 Seletividade
I- A seletividade da resina aumenta com o aumento das ligações cruzadas
da matriz;

II-Íons com carga elevada são ligados mais fortemente ao trocador do que
os íons com menor carga, em uma mesma concentração;

III- Íons com a mesma carga, porém de tamanhos diferentes em solução

apresentam grau de afinidade diferentes. *Relacionado com o poder de
polarização do íon e grau de hidratação
rente
De maneira geral o trocador iônico
“prefere”:

- Íons que apresentam maior carga;

- Íons com tamanho pequeno;

- Íons altamente polarizáveis;

- Íons com fraca interação com a fase móvel.

 Aplicações
- Aplicações analíticas e preparativas diversas;

- Extração, concentração e análises de metais;

- Eliminação de interferentes;
 - Análises de substâncias que podem apresentar
cargas (ex: aminoácidos, polieletrólitos etc);

- Aplicações industriais (desionização da água).

Cromatografia por exclusão
Sinônimos:
- Filtração em Gel;
- Permeação em Gel;
- Cromatografia em Peneira Molecular.
Princípio
- Distribuição (seletiva e dinâmica) do soluto entre
duas fases;
- A estrutura estacionária apresenta poros de
tamanho controlado.
Vantagens
- Simplicidade da técnica;
- Coluna não sofre desativação;
- Baixa possibilidade de reações durante a
separação.
 Desvantagens
- Separa poucas substâncias de cada vez;
- Substâncias com a mesma massa molecular
(comumente não são separadas);
- Condições brandas de pH e temperatura.
 Características específicas
- Gel (recheio da coluna) constituído de moléculas, não
carregadas, que apresentam ligações cruzadas;
- O Gel simplesmente fornece os poros;
- Gel constituído de partículas pequenas apresenta melhor
resolução. Partículas maiores podem resultar em espalhamento
da banda;
- Gel deve apresentar rigidez mecânica para não ser deformado.
Na forma de pérolas facilita o fluxo e uniformidade.
Aplicações
- Desmineralização. Determinação da Massa
Molecular;
- Remoção de substâncias (radioativas);
- Proteínas (muito utilizada) e Polímeros naturais;
- Exploração de compostos desconhecidos (ex.
compostos naturais).
Cromatografia por Bioafinidade
Mecanismo: Interações funcionais reversíveis.
Etapas – Imunoglobina e Proteína A.
a- Amostra aplicada com tampão que favorece a ligação;
b-Composto de interesse fica retido e os outros eluem da coluna;
c-Elue-se passando de pH 1 para 2,6 e a IgG foi eluída em sua forma pura em 1,,3 min.