EXPERIMENTO 2. REACCIÓN DE BIURET.

 Preparar una serie de 5 tubos de ensayo, etiquetar y numerar del 1 al 5,

añadir 1 mL de las siguientes soluciones:

 Añadir 2 mL de solución de NaOH (Hidróxido de Sodio) al 10% en cada tubo

¡PRECAUCIÓN!
 Agregar de 5 gotas de solución de CuSO4(Sulfato de Cobre II) al 1% en cada
tubo.
 Agitar los tubos y observar la reacción que se produce en cada caso. La
aparición de una coloración violeta o rosa en no más de 20 minutos debe
considerarse como prueba positiva.
 Registrar sus resultados en la tabla que se encuentra al final de esta práctica.
Evidencias de aprendizaje

1) Se puede considerar la reacción de Biuret como característica para todas

las proteínas? ¿Por qué?
Si, por que esta reacción se encarga de revelar los enlaces peptídicos
encargados de dar el primer sostén a las proteínas, así que, a menos que
sean de un solo aminoacido todas las proteínas tienen enlaces peptídicos
que revelar.
Se basa en la formación de un complejo coloreado entre el Cu2+ y los
grupos NH de los enlaces peptídicos en medio básico. 1Cu2+ se
acompleja con 4 NH. La intensidad de coloración es directamente
proporcional a la cantidad de proteínas (enlaces peptídicos) y la reacción
es bastante específica, de manera que pocas sustancias interfieren. La
sensibilidad del método es muy baja y sólo se recomienda para la
cuantificación de proteínas en preparados muy concentrados
2) Escribir la reacción.

3) Ilustrar sus resultados

 EXPERIMENTO 7b. PRECIPITACIÓN DE PROTEÍNAS EN ORINA
 Preparar 2 tubos de ensayo, etiquetar y marcar un tubo como orina normal y
el otro como orina de paciente nefrótico, agregar 3 mL de la orina
correspondiente a cada tubo.
 Añadir2 mL de la mezcla HNO3-CH3OH (Ácido Nítrico-Metanol) resbalando
lentamente por la pared a cada tubo, para estratificar.
 Observar y registrar sus resultados.

Evidencias de aprendizaje
1) Explicar el fenómeno observado.
Al añadir HNO3-metanol a la orina patológica se observo un anillo de
precipitado proteico en la interfase de la orina, esto nos indica un
resultado positivo
2) Ilustrar y describir lo que sucede en la interfase.
El agua se caracteriza por su alta constante dieléctrica, lo cual significa
que los iones en solución acuosa presentan interacciones más débiles
que con otros medios. La adición de un solvente orgánico (etanol o
acetona) produce agregados de moléculas proteicas que tienden a
precipitar, esto se debe a que el solvente presenta una constante
dieléctrica menor que la del agua, lo cual produce un incremento en las
fuerzas de atracción entre cargas opuestas y una disminución en el grado
de ionización de los radicales de las proteínas, y en consecuencia una
disminución en la solubilidad de ésta.

En esta imagen podemos

observar en el tubo
marcado con OP (orina
patológica) el anillo de
héller que se marca
perfectamente hasta
arriba de la muestra.