Guia Lab Oratorio Quimica Plan Comun

GUÍAS DE LABORATORIO DE
QUÍMICA BIOLÓGICA
PARA CARRERAS DEL ÁREA DE LA SALUD
Autoras: Paola Campodónico, PhD.

Paulette Conget, PhD.
2008
Guía de Laboratorio de Química Biológica
_________________________________________________________________________
CONTENIDOS
o Seguridad en el Laboratorio ……………………………………… 2
o Material de Laboratorio …………………………………………… 16
o Laboratorio Nº 1: Soluciones …………………………………….. 29
o Laboratorio Nº 2: pH y Soluciones Buffer ………………………. 44
o Laboratorio Nº 3: Síntesis de Aspirina………………………….. 61
1
______________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
SEGURIDAD EN EL LABORATORIO
A. Información
El elevado número de accidentes laborales producidos en laboratorios es debido,

en gran medida, al incumplimiento de las más elementales normas de seguridad.
Es primordial, entonces, adquirir unos hábitos de trabajo en los que prime la
seguridad, tanto personal como colectiva.
Para ello es necesario, que tengas en cuenta lo siguiente:
1. Localiza los dispositivos de seguridad más próximos.
Estos dispositivos son elementos tales como extintores, lavaojos, ducha de

seguridad, salidas de emergencia, etc. Infórmate sobre su funcionamiento.
2. Lee las etiquetas de seguridad.
Las botellas de reactivos contienen pictogramas y frases que informan sobre su

peligrosidad, uso correcto y las medidas a tomar en caso de ingestión, inhalación,
etc. Algunos aparatos pueden contener información del mismo tipo. Lee siempre
detenidamente esta información y no olvides tener en cuenta las especificaciones
que se señalan en ella.
3. Infórmate sobre las medidas básicas de seguridad.
El trabajo en el laboratorio exige conocer una serie de medidas básicas de

seguridad que son las que intenta recoger esta guía.
2
______________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
4. Presta atención a las medidas específicas de seguridad.
Las operaciones que se realizan en algunas prácticas requieren información

específica de seguridad. Estas instrucciones son dadas por el profesor y/o
recogidas en la guía de laboratorio y debes de prestarles una especial atención.
5. En caso de duda, consulta al profesor.
Cualquier duda que tengas, consúltala con tu profesor. Recuerda que no está
permitido realizar ninguna experiencia no autorizada por tu profesor.
B. Protección
1. Cuida tus ojos.
Los ojos son particularmente susceptibles de daño permanente por productos

corrosivos así como por salpicaduras de partículas.
Es obligatorio usar gafas de seguridad siempre que se esté en un laboratorio

donde los ojos puedan ser dañados. No lleves lentes de contacto en el laboratorio,
ya que en caso de accidente, las salpicaduras de productos químicos o sus
vapores pueden pasar detrás de las lentes y provocar lesiones en los ojos.
2. Cómo ir vestido en el laboratorio.
El uso del delantal es obligatorio en el laboratorio, ya que por mucho cuidado que
se tenga al trabajar, las salpicaduras de productos químicos son inevitables. El
delantal será preferentemente de algodón, ya que, en caso de accidente, otros
tejidos pueden adherirse a la piel, aumentando el daño. No es aconsejable llevar
minifalda o pantalones cortos, ni tampoco medias, ya que las fibras sintéticas en
contacto con determinados productos químicos se adhieren a la piel. Se
recomienda llevar zapatos cerrados y no sandalias. Los cabellos largos suponen
un riesgo que puede evitarse fácilmente recogiéndolos con una cola.
3
______________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
3. Usa guantes.
Es recomendable usar guantes, sobre todo cuando se utilizan sustancias

corrosivas o tóxicas. En ocasiones, pueden ser recomendables los guantes de un
sólo uso.
C. Trabajar con seguridad en el laboratorio
1. Normas higiénicas.
• No comas ni bebas en el laboratorio, ya que es posible que los alimentos o

bebidas se hayan contaminado.
• Lávate siempre las manos después de hacer un experimento y antes de

salir del laboratorio.
• Por razones higiénicas y de seguridad, está prohibido fumar en el

laboratorio.
• No inhales, pruebes o huelas productos químicos si no estás debidamente

informado. Nunca acerques la nariz para inhalar directamente de un tubo de
ensayo.
2. Trabaja con orden y limpieza.
• Recuerda que el orden es fundamental para evitar accidentes.
• Mantén el área de trabajo ordenada, sin libros, abrigos, bolsas, exceso de

frascos de productos químicos y cosas innecesarias o inútiles.
• Mantén las mesas y vitrinas extractoras siempre limpias.
• Se tienen que limpiar inmediatamente todos los productos químicos

derramados.
• Limpia siempre perfectamente el material y aparatos después de su uso.
4
______________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
3. Actúa responsablemente.
• Trabaja sin prisas, pensando en cada momento lo que estás haciendo, y

con el material y reactivos ordenados.
• No se deben realizar bromas, correr, jugar, empujar, etc. en el laboratorio.

Un comportamiento irresponsable puede ser motivo de expulsión inmediata
del laboratorio y de sanción académica.
4. Atención a lo desconocido.
Está terminantemente prohibido hacer experimentos no autorizados por el

profesor. No utilices ni limpies ningún frasco de reactivos que haya perdido su
etiqueta. Entrégalo inmediatamente a tu profesor. No substituyas nunca, sin
autorización previa del profesor, un producto químico por otro en un experimento.
No utilices nunca un equipo o aparato sin conocer perfectamente su
funcionamiento. En caso de duda, pregunta siempre al profesor.
D. Precauciones específicas en un laboratorio químico.
1. Manipulación del vidrio.
Muchos de los accidentes de laboratorio se producen por cortes y quemaduras

con vidrio, que se pueden prevenir siguiendo unas reglas simples:
• Nunca fuerces un tubo de vidrio, ya que, en caso de ruptura, los cortes

pueden ser graves. Para insertar tubos de vidrio en tapones humedece el
tubo y el agujero con agua o silicona y protégete las manos con trapos.
• El vidrio caliente debe de dejarse apartado encima de una plancha o similar

hasta que se enfríe. Desafortunadamente, el vidrio caliente no se distingue
del frío; si tienes duda, usa unas pinzas o tenazas.
• No uses nunca equipo de vidrio que esté agrietado o roto. Deposita el

material de vidrio roto en un contenedor para vidrio, no en una papelera.
5
______________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
2. Manipulación de productos químicos.
• Los productos químicos pueden ser peligrosos por sus propiedades tóxicas,
corrosivas, inflamables o explosivas.
• Muchos reactivos, particularmente los disolventes orgánicos, arden en

presencia de una llama. Otros pueden descomponer explosivamente con el
calor. Si usas un mechero Bünsen, u otra fuente intensa de calor, aleja del
mechero los botes de reactivos químicos. No calientes nunca líquidos
inflamables con un mechero. Cierra la llave del mechero y la de paso de
gas cuando no lo uses.
• No inhales los vapores de productos químicos. Trabaja en una vitrina

extractora siempre que uses sustancias volátiles. Si aún así se produjera
una concentración excesiva de vapores en el laboratorio, abre
inmediatamente las ventanas. Si en alguna ocasión tienes que oler una
sustancia, la forma apropiada de hacerlo es dirigir un poco del vapor hacia
la nariz. No acerques la nariz para inhalar directamente del tubo de ensayo.
• Está terminantemente prohibido pipetear reactivos directamente con la

boca. Usa siempre un dispositivo especial para pipetear líquidos.
• Un posible peligro de envenenamiento, frecuentemente olvidado, es a

través de la piel. Evita el contacto de productos químicos con la piel,
especialmente de los que sean tóxicos o corrosivos, usando guantes de un
sólo uso. Lávate las manos a menudo.
• Como norma general, lee siempre detenidamente la etiqueta de seguridad

de los reactivos que vayas a usar.
3. Transporte de reactivos.
No transportes innecesariamente los reactivos de un sitio a otro del laboratorio.

Las botellas se transportan siempre cogiéndolas por el fondo, nunca del tapón.
6
______________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
4. Calentamiento de líquidos.
No calientes nunca un recipiente totalmente cerrado. Dirige siempre la boca del

recipiente en dirección contraria a ti mismo y a las demás personas cercanas.
5. Riesgo eléctrico.
Para evitar descargas eléctricas accidentales, siga exactamente las instrucciones

de funcionamiento y manipulación de los equipos.
No enchufe nunca un equipo sin toma de tierra o con los cables o conexiones en
mal estado. Al manipular en el interior de un aparato, compruebe siempre que se
encuentra desconectado de la fuente de alimentación.
E. Eliminación de residuos.
Las medidas de seguridad no terminan al finalizar el experimento. La eliminación

inadecuada o la ausencia de identificación son causa frecuente de contaminación
ambiental y de accidentes. El depósito indiscriminado de residuos peligrosos,
cristal roto, etc. en la papelera provoca frecuentes accidentes entre el personal de
limpieza.
Vidrio roto. El material de cristal roto se tirará en los recipientes destinados

especialmente a este fin. Los papeles y otros desperdicios se tirarán en la
papelera.
Residuos químicos. Los productos químicos tóxicos se tirarán en contenedores

especiales para este fin. No tires directamente al fregadero productos que
reaccionen con el agua (sodio, hidruros, amiduros, halogenuros de ácido), o que
sean inflamables (disolventes), o que huelan mal (derivados de azufre), o que
sean lacrimógenos (halogenuros de bencilo, halocetonas), o productos que sean
difícilmente biodegradables (polihalogenados: cloroformo). Las sustancias líquidas
7
______________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
o las disoluciones que puedan verterse al fregadero, se diluirán previamente,

sobretodo si se trata de ácidos y de bases. No tires al fregadero productos o
residuos sólidos que puedan atascarlas. En estos casos deposita los residuos en
recipientes adecuados. Se ha determinado que varios reactivos químicos que se
utilizan habitualmente en el laboratorio (benceno, cloroformo, tetracloruro de
carbono,...) producen cáncer en animales cuando se administra en grandes dosis.
En los pocos casos en los que se usan los reactivos que se sospecha que puedan
ser cancerígenos, extremar las precauciones y seguir estrictamente las notas que
al respecto incluye el guión o del profesor.
F. Qué hay que hacer en caso de accidente: primeros auxilios
En caso de accidente, avisa inmediatamente al profesor.
1. Fuego en el laboratorio.
Evacuar el laboratorio, por pequeño que sea el fuego, por la salida principal o por
la salida de emergencia si no es posible por la principal. Avisar a todos los
compañeros de trabajo sin que se extienda el pánico y conservando siempre la
calma.
Fuegos pequeños: Si el fuego es pequeño y localizado, apagarlo utilizando un

extintor adecuado, arena, o cubriendo el fuego con un recipiente de tamaño
adecuado que lo ahogue. Retirar los productos químicos inflamables que estén
cerca del fuego. No utilizar nunca agua para extinguir un fuego provocado por la
inflamación de un disolvente.
Fuegos grandes: Aislar el fuego. Utilizar los extintores adecuados. Si el fuego no

se puede controlar rápidamente, accionar la alarma de fuego, avisar al servicio de
extinción de incendios y evacuar el edificio.
8
______________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
2. Fuego en el cuerpo.
Si se te incendia la ropa, grita inmediatamente para pedir ayuda. Estírate en el

suelo y rueda sobre ti mismo para apagar las llamas.
No corras ni intentes llegar a la ducha de seguridad si no está muy cerca de ti. Es

tu responsabilidad ayudar a alguien que se esté quemando. Cúbrele con una
manta antifuego, condúcele hasta la ducha de seguridad, si está cerca, o hazle
rodar por el suelo. No utilices nunca un extintor sobre una persona. Una vez
apagado el fuego, mantén a la persona tendida, procurando que no coja frío,
nunca intentaremos despegar trozos de ropa adheridos a la piel abrasada. Si el
accidentado no ha perdido el conocimiento, es muy conveniente darle a beber un
vaso de agua con un poco de bicarbonato sódico y una pizca de sal; esta medida
intenta compensar la pérdida de líquidos a través de la quemadura. y
proporciónale asistencia médica.
3. Quemaduras.
Las pequeñas quemaduras de primer grado, producidas por material caliente,

baños, placas o planchas calefactoras, etc., se trataran lavando la zona afectada
con chorro de agua fría o incluso en un cubo con agua y hielo durante 10-15
minutos. Se puede aplicar compresa y crema para aliviar el ardor y la tirantez de la
piel.
Las quemaduras más graves requieren atención médica inmediata. No utilices

pomada grasa y espesa en las quemaduras graves. Nos limitaremos a colocar una
gasa gruesa por encima, que le aísle del aire.
4. Cortes.
Los cortes producidos por la rotura de material de cristal son un riesgo común en
el laboratorio. Estos cortes se tienen que lavar bien, con abundante agua
corriente, durante 10 minutos como mínimo. Observar y eliminar la existencia de
fragmentos de cristal, en este caso se retira con gasa y pinzas. Si son pequeños y
dejan de sangrar en poco tiempo, lávalos con agua y jabón y tápalos con una
9
______________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
venda o apósito adecuados. Si son grandes y no paran de sangrar, colocar una

apósito en la herida, aplicando una presión firme, enviando lo más urgente posible
a una asistencia médica inmediata.
5. Derrame de productos químicos sobre la piel.
Los productos químicos que se hayan vertido sobre la piel han de ser lavados
inmediatamente con agua corriente abundante, como mínimo durante 15 minutos.
Las duchas de seguridad instaladas en los laboratorios serán utilizadas en
aquellos casos en que la zona afectada del cuerpo sea grande y no sea suficiente
el lavado en un fregadero. Es necesario sacar toda la ropa contaminada a la
persona afectada lo antes posible mientras esté bajo la ducha. Recuerda que la
rapidez en el lavado es muy importante para reducir la gravedad y la extensión de
la herida. Proporciona asistencia médica a la persona afectada.
6. Actuación en caso de producirse corrosiones en la piel.
Por ácidos. Corta lo más rápidamente posible la ropa. Lava con agua corriente
abundante la zona afectada. Neutraliza la acidez con bicarbonato de sodio durante
15-20 minutos. Saca el exceso de pasta formada, seca y cubre la parte afectada
con linimento óleo-calcareo o parecido.
Por álcalis. Lava la zona afectada con agua corriente abundante y aclárala con
una disolución saturada de ácido bórico o con una disolución de ácido acético al
1%. Seca y cubre la zona afectada con una pomada de ácido tánico.
7. Actuación en caso de producirse corrosiones en los ojos.
En este caso el tiempo es esencial (menos de 10 segundos). Cuanto antes se lave

el ojo, menos grave será el daño producido. Lava los dos ojos con agua corriente
abundante durante 15 minutos como mínimo en una ducha de ojos, y, si no hay,
con un frasco para lavar los ojos. Es necesario mantener los ojos abiertos con la
ayuda de los dedos para facilitar el lavado debajo de los párpados. No frotar nunca
los ojos. Es necesario recibir asistencia médica, por leve e insignificante que
parezca la lesión.
10
______________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
8. Actuación en caso de ingestión de productos químicos.
Ante un posible envenenamiento de cualquier tipo, comunicarlo inmediatamente al

profesor. Antes de cualquier actuación concreta pide asistencia médica. Si el
paciente está inconsciente, ponlo en posición inclinada, con la cabeza de lado, y
échale la lengua hacia fuera. Si está consciente, mantenlo apoyado. Tápalo con
una manta para que no tenga frío.
Prepárate para practicarle la respiración boca a boca. No dar bebidas alcohólicas

precipitadamente sin conocer la identidad del producto ingerido. El alcohol en la
mayoría de los casos aumenta la absorción de los productos tóxicos. No
provoques el vómito si el producto ingerido es corrosivo.
Cualquiera que sea el producto ingerido, daremos a beber un litro de agua para
que así la concentración del tóxico sea menor. Provocar el vómito para expulsar el
tóxico dándole a beber un vaso de agua tibia con bicarbonato o sal. A excepción
de cuando el tóxico sea de tipo de ácidos fuertes, de álcalis fuertes o de derivados
del petróleo, la acción corrosiva sobre el esófago hace que las lesiones que
provocan se produzcan durante el vómito.
Dar el antídoto. Suministrar otra sustancia que hace desaparece su acción nociva,
entonces podemos suministrar cualquiera de los llamados antídotos universales.
El más práctico es el de administrar claras de huevo en un litro de agua, creando
una película protectora de la mucosa gástrica. Una vez tomadas estas medidas, el
intoxicado permanecerá echado y bien abrigado ,tratamiento anti-shock.
9. Actuación en caso de inhalación de productos químicos.
Conduce inmediatamente la persona afectada a un sitio con aire fresco. Requiere

asistencia médica lo antes posible. Al primer síntoma de dificultad respiratoria,
inicia la respiración artificial boca a boca. El oxígeno se ha de administrar
únicamente por personal entrenado. Continúa la respiración artificial hasta que el
medico lo aconseje.
11
______________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
Trata de identificar el vapor tóxico. Si se trata de un gas, utiliza el tipo adecuado

de máscara para gases durante el tiempo que dure el rescate del accidentado. Si
la máscara disponible no es la adecuada, será necesario aguantarse la respiración
el máximo posible mientras se esté en contacto con los vapores tóxicos.
Resumen de las Vías de Entrada al Organismo

La inhalación de gases, vapores o aerosoles.
Absorción por la piel debido al contacto con el agente tóxico.
Ingesta accidental, por ejemplo uso de pipetas sin propipetas.
INGESTIÓN INHALACIÓN ENDOVENOSA INTRAPERITONEAL
SUBCUTÁNEA
TRACTO
PULMÓN INTRAMUSCULAR
GASTROINTESTINAL
DÉRMICA
Vena
porta
HÍGADO
Sangre y Linfa
LíQUIDO
GRASA
EXTRACELULAR
BILIS
ÓRGANOS
RIÑÓN PULMÓN
SECRETORES ÓRGANOS
VEJIGA
ALVÉOLO
URINARIA
TEJIDO HUESO
AIRE
HECES ORINA SECRECIONES
ESPIRADO
Vías de absorción, distribución y eliminación de agentes tóxicos

en el organismo humano (ROZMAN y KLAASSEN, 1996)
12
______________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
TRABAJO EN EL LABORATORIO
Metodología de Trabajo
1. La asistencia a las prácticas es obligatoria.
2. El ingreso de cada alumno al laboratorio supone un dominio total del tema a
desarrollar en la práctica. Para lograr este objetivo, cada alumno dispondrá de
una guía de laboratorio.
3. Se realizará un control al comienzo de cada laboratorio que evaluará los
contenidos de dichas guías.
4. El trabajo se organiza en grupos de dos o tres personas según lo indique el
profesor.
5. Cada alumno debe registrar el desarrollo de la práctica en un cuaderno
individual, tan pronto como realice cada actividad.
6. Cada grupo de trabajo deberá entregar un informe de práctica a los 7 días de
haberla realizado.
MÉTODO CIENTÍFICO
El Método Científico es un procedimiento riguroso y sistemático orientado a
extraer información verdadera de algún estudio:
Hechos Observaciones Pregunta Hipótesis
Experimentos Recolección de
datos
Conocimientos
acumulados Conclusión Análisis
TEORÍA
13
______________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
MATERIAL DE LABORATORIO
Material de Vidrio
Durante el trabajo de laboratorio, en muchas oportunidades es necesario medir
con exactitud volúmenes de líquidos para la correcta ejecución del paso
experimental. Para ello, existen diversos tipos de materiales volumétricos. Por lo
tanto, es necesario conocerlos y tener claro cual utilizar en cada ocasión.
Cabe señalar que la precisión de la medida con estos materiales puede verse
alterada. Considerando que la mayoría de los materiales volumétricos que se usan
en el laboratorio están hechos en vidrio, y este material puede dilatarse o
contraerse según la temperatura a la que esta expuesto, se ha establecido un
estándar convencional de 20ºC para material de laboratorio destinado a medir
volúmenes.
La graduación de los utensilios considera un aforo para entregar volúmenes

determinados.
Para trabajar en el laboratorio es esencial tener un conocimiento básico del

material de vidrio que se requiere y de su adecuado uso.
Vaso Precipitado: Se utiliza para contener un

volumen de un líquido, disolver sustancias, evaporar
líquidos por calentamiento y para realizar
reacciones. Poseen graduaciones que indican su
capacidad máxima y van comúnmente desde 25 mL
hasta 2L.
14
______________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
Matraz Erlenmeyer: Se utiliza para contener un volumen

de un de liquido. Es especialmente útil cuando se requiere
tener un volumen de líquido en constante agitación. Por su
forma, el líquido no salpica fuera del matraz. Los más
comunes poseen una capacidad de volúmenes que
fluctúan desde 25 mL hasta 1 L.
Probeta: Recipiente cilíndrico con escala graduada y

provisto de una base. Se utiliza para medir volúmenes
conocidos de un líquido y permite trasvasijarlo a otro
recipiente por vaciado. Los más comunes poseen
graduaciones que indican su capacidad máxima, con
volúmenes de 5, 10, 25, 50, 100, 250 y hasta 2000 mL de
capacidad. Se usa cuando no es necesaria una gran
precisión en la medida del volumen. Debido a que su
diámetro interior es amplio, las probetas sirven sólo para
mediciones aproximadas de volúmenes.
Matraz Aforado: Material calibrado para preparar

soluciones a volumen y concentración específico. Estos
matraces deben permanecer tapados, para evitar la
evaporación del disolvente de la disolución y no se deben
calentar, pues pierden su calibración. Hay matraces
aforados con capacidad para contener con exactitud 25,
50, 100, 250, 300, 1000 y 2000 ml de líquido o solución
17
______________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
Pipeta Graduada: Se utiliza para medir fracciones de un

volumen conocido de líquido con una precisión aceptable,
permite transferir el líquido de un recipiente a otro. Tiene una
escala graduada que permite medir volúmenes intermedios a
su máxima capacidad. Existen pipetas de 1, 2, 5 y 10 mL,
generalmente graduadas en décimas y centésimas del
volumen que contienen.
Pipeta Aforada o Volumétrica: Existen pipetas de 1, 2, 5, 10,

25 y 50mL de capacidad. Al igual que las pipetas graduadas
se utiliza para medir y transferir volúmenes fijos y exactos, no
25
mL
se pueden medir volúmenes intermedios al indicado en la
pipeta. Para utilizarla correctamente se debe llenar hasta la
línea superior llamada aforo y vaciarla completamente. La
cantidad de volumen medido en estas condiciones se llama
alícuota. Se reconocen por presentar su parte central más
dilatada.
Uso de las pipetas

Las pipetas, así como todo material de vidrio destinado a la medición de volumen,
deben ser previamente ambientadas con el líquido a medir. Esto consiste en
hacer escurrir una pequeña porción del líquido por las paredes internas del
instrumento, para luego desecharlo. Este proceso tiene como fin evitar toda
alteración de la sustancia a medir, ya sea en su composición o concentración.
La pipeta se llena por succión utilizando una pera de goma llamada propipeta o
bien por acción capilar.
18
______________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
La propipeta tiene 3 válvulas:

A
Válvula A: expulsión del aire
Válvula S: aspiración del líquido
S
E Válvula E: vaciado del líquido
Si la pipeta se ha llenado por capilaridad, se debe vaciar el líquido por acción de la

gravedad, regulando la velocidad y cantidad de volumen vaciado haciendo presión
con el dedo índice sobre el extremo superior de la misma. En ambos casos, el
líquido vertido se deja escurrir sobre las paredes del recipiente que lo recibe.
Debido al fenómeno de capilaridad, en la punta de la pipeta permanece un

pequeño volumen de líquido. Este volumen ya ha sido considerado al calibrar la
pipeta, por lo tanto, no debe ser forzado a salir soplando o sacudiendo la pipeta.
19
______________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
Bureta: Tubo graduado provisto de una llave que

permite controlar el flujo con que el líquido se
evacua. Sirve para medir volúmenes conocidos y
exactos. Otorga mediciones con precisión del orden
de la centésima de mL (± 0,01 mL).
La bureta está calibrada para verter una cantidad
dada de líquido, aumentando la numeración desde la
boca de la bureta hacia el extremo donde se
encuentra la llave. Esta última puede ser de vidrio o
de teflón.
La bureta se utiliza en forma vertical sostenida por un
soporte universal mediante una pinza llamada porta
bureta.
Uso de la bureta
Antes de realizar cada medición, se debe tener la precaución de eliminar
totalmente las burbujas de aire que puedan quedar ocluidas entre la llave y el
extremo de la bureta. Para ello es aconsejable abrir la llave un instante con
cuidado y verter, en un vaso precipitado de desechos, una pequeña porción de
líquido hasta lograr expulsar el aire contenido. Además, el vaciado de la bureta
debe ser lento, para que el líquido tenga el tiempo necesario para escurrir y la
lectura sea correcta.
Medida y Lectura Correcta de Volúmenes con Probetas, Pipetas, Buretas y

Matraces Aforados
Todos los líquidos (a excepción del mercurio) mojan las paredes de los recipientes
que los contienen, y como consecuencia de ello, su superficie no es plana y
forman una curva a la que se le llama menisco.
20
______________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
Menisco convexo: mercurio
Menisco cóncavo: otros líquidos

otros
mercurio
líquidos
Para hacer una correcta lectura, se debe tomar la probeta, tubo graduado o
matraz aforado, etc. con la mano y subirla hasta que el nivel del líquido (menisco)
quede a la altura de nuestros ojos, de tal forma que la medida se tome en la
tangente del menisco.
Una causa de error en la medida de volúmenes, es debida a que no se sitúa la

altura del nivel del líquido a la altura de los ojos. Este error recibe el nombre de
error de paralelaje o paralaje.
La otra causa de error se debe a que aunque se sitúe el nivel del líquido a la altura
de nuestros ojos, no hacemos la lectura en la tangente del menisco. Este error se
llama error de nivel.
21
______________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
MATERIAL AUXILIAR
Material Metálico
Soporte universal
Pinza con nuez
Pinza doble
Pizeta: Es un frasco de polietileno que suministra

pequeñas cantidades de líquidos, que ayudan a
Pizeta
arrastrar sólidos desde las paredes de un contenedor, o

bien, para lavar precipitados, entre otras.
Las micropipetas están diseñadas para medir pequeños

volúmenes de líquido con una alta precisión. Sus partes
son:
A: caperuza para accionar el expulsor de las puntas

B: mando de ajuste del volumen a medir
C: mando de pipeteado
D: parte de sujeción
E: vástago de pipeta
F: cono de acoplamiento (puntas de pipeta)
22
______________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
Manejo de la Micropipeta
1. Se debe ajustar el volumen que se desea medir

haciendo girar el mando de ajuste de pipeteado
hasta el volumen deseado.
2. Se debe colocar la punta a la micropipeta en el

cono de acoplamiento.
3. Con el dedo pulgar se acciona el mando de
pipeteado, se mantiene apretado, se sumerge en
el líquido y se suelta para poder succionar el
liquido.
4. Para trasvasijar el volumen se acciona el mando
de pipeteado, una sola vez, para expulsar el
liquido.
MEDICIÓN DE VOLÚMENES
La unidad básica de volumen según el Sistema Internacional (SI) es el m3. Dada la
pequeña envergadura de las operaciones que se realizan en el laboratorio, los
volúmenes se miden, generalmente en mL. Otra unidad de volumen común, pero
que no pertenece al SI es el litro (L). Otras unidades de volumen son: decilitro
(dL), microlitro (μL), picolitro (pL).
La interconversión de unidades es la siguiente:

1L = 1000 mL
1 mL = 1 cm3
1dL = 10 mL
1μL = 1x10-6 mL
23
______________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
BALANZA DE LABORATORIO
La unidad internacionalmente reconocida como patrón de peso es el kilogramo
(Kg). Sin embargo, en el laboratorio la unidad de peso más usada es el gramo (g),
así como el miligramo (mg) y el microgramo (μg) que son submúltiplos del gramo.
Balanza de precisión
Se caracteriza por un sistema oscilante de una barra o cruz apoyada sobre una
columna. Actualmente a este tipo de balanza se le ha adicionado un sistema
electrónico que registra la pesada. La capacidad de carga de las balanzas de
precisión es generalmente hasta 500g y más comúnmente hasta 200g, con una
exactitud de pesada al centésimo de gramo.
Balanza analítica
Es un instrumento de alta precisión empleada en la pesada de reactivos del orden
de los miligramos. Las balanzas analíticas pueden presentar un variado tipo de
diseños y aspectos exteriores, todas ellas se construyen basadas en los mismos
principios. La base es de gran solidez y confiere estabilidad al instrumento
evitando al máximo la posibilidad de vibraciones. La columna es un tubo por el
cual se conduce el mando de arresto o bloqueo del sistema oscilante. La cruz esta
hecha de una aleación especial de aluminio u otro metal estable que no permita
deformaciones por el peso variable que debe soportar.
______________________________________________________________________
24
_________________________________________________________________________
APLICACIÓN DE CALOR
Mechero Bunsen: La aplicación de calor sobre

muestras se usa con el fin de acelerar reacciones
químicas, esterilizar, secar, calcinar, etc. Para ello se
emplean materiales resistentes al calor tales como
tubos de ensayo, matraces erlenmeyer, crisoles, vasos
de precipitado, etc. La principal fuente de calor
utilizada en el laboratorio es el mechero Bunsen.
DENSIDAD
La densidad de un cuerpo es la masa que tiene la unidad de volumen de ese
cuerpo, a una temperatura determinada.
masa m
densidad = o bien, d = (Ec. 2.1)
volumen V
La unidad del sistema internacional, SI para la densidad es kilogramo por metro

cúbico (kg/m3). Esta unidad es demasiado grande para la mayoría de las
aplicaciones, por eso es frecuente expresar la densidad en unidades de g/cm3,
g/mL o kg/L.
Interconversión de unidades: 1000 kg/m3 = 1 g/mL = 1 g/cm3
______________________________________________________________________
25
_________________________________________________________________________
Los densímetros o areómetros consisten en cilindros de

vidrio hueco que, en su parte inferior contienen un lastre
(municiones, perdigones, o mercurio) y en su parte superior
están unidos a un tubo que contiene una escala graduada.
La densidad varía con la temperatura, es por lo que una vez
que se haya medido la densidad, hemos de medir también la
temperatura a la que se ha realizado la medición y luego ver
en las tablas la corrección.
Procedimiento para Medir Densidad de un Líquido con Densímetros

En una probeta limpia y ambientada, se elige un densímetro y se introduce con
cuidado en la probeta. Si se observa que al soltarlo se va hacia el fondo, se debe
sacar y elegir otro densímetro que mida densidades mayores. Este procedimiento
se debe repetir hasta dar con el densímetro adecuado, es decir, aquel que flote.
Una vez elegido el densímetro apropiado, se deja sobre la superficie del líquido
dando una rotación con los dedos de forma que caiga girando. De esta forma,
cuando el densímetro deja de girar, se puede medir en su escala sin que se quede
adherido a la pared de la probeta.
NOTACIÓN CIENTÍFICA
______________________________________________________________________
26
_________________________________________________________________________
NOTACIÓN CIENTÍFICA
En el trabajo científico es muy común encontrarse con números muy grandes o
demasiado pequeños, por lo que, para trabajar con este tipo de cantidades, se
utiliza la notación científica, según la cual todos los números se pueden expresar
como:
Ν = 10n (Ec. 2.2)
Donde N es un número entre 1 y 10 y n es un exponente entero, que puede ser

positivo o negativo.
Ejemplos:
Número Notación científica
600.000 6 x 105
156.231 1,56 x 102
0,0000879 8,79 x 10-5
PRECISIÓN Y EXACTITUD
Cuando se analizan mediciones, es conveniente tener muy clara la diferencia
existente entre dos términos muy usados en este ámbito: precisión y exactitud.
La exactitud indica cuan cerca está una medición del valor real de una cantidad
medida. Por lo tanto, dice relación con el error de una medición.
La precisión indica cuanto concuerdan dos o más mediciones experimentales

realizadas en condiciones idénticas. Por lo tanto, dice relación con la incerteza, la
precisión, o la desviación de los datos obtenidos.
Reproducibilidad: Es otro término para describir exactitud. Es una forma de

determinar que un procedimiento dado, al repetirlo, permite obtener resultados
iguales o muy cercanos ente si.
______________________________________________________________________
27
_________________________________________________________________________
En el esquema siguiente se representan distintas situaciones (descendentes) las

cuales permiten esclarecer la diferencia entre exactitud y precisión.
• Buena precisión, exactitud y reproducibilidad (instrumento adecuado y buena

técnica).
• Buena precisión, buena reproducibilidad, pero poca exactitud (error sistemático).
• Poca precisión, mala reproducibilidad, pero buena exactitud (errores que se
compensan).
• Poca precisión, mala reproducibilidad y poca exactitud (instrumento no
adecuado y mala técnica).
Valor real
______________________________________________________________________
28
_________________________________________________________________________
LABORATORIO Nº 1
SOLUCIONES
INTRODUCCIÓN
Una Mezcla, es una combinación de dos o más sustancias en la cual éstas
mantienen su identidad. Se pueden separar sus componentes puros por medios
físicos sin cambiar su identidad.
Tipos de Mezclas:
• Mezcla Homogénea: La composición de la mezcla es la misma en toda la
solución y son indistinguibles sus componentes.
• Mezcla Heterogénea: Los componentes individuales permanecen
físicamente separados y se pueden ver como tales.
Proceso de Disolución:
• La solución se define como una mezcla homogénea de sustancias puras en
la cual no hay precipitación.
• Las soluciones verdaderas constan de un disolvente y uno o más solutos,
cuyas proporciones varían de una a otra solución.
• El disolvente es el medio en el cual los solutos se disuelven. Las unidades
fundamentales de los solutos son los iones o moléculas.
Miscibilidad
La miscibilidad es la capacidad de un líquido para disolverse en otro.
• Las tres atracciones que están involucradas en la miscibilidad son:
soluto – soluto ; disolvente – disolvente ; soluto – disolvente.
______________________________________________________________________
29
_________________________________________________________________________
Hidrofobicidad
El soluto no tiene afinidad con el agua como disolvente, pero sí por solventes
apolares.
Hidrofilicidad
El soluto tiene afinidad con el agua como disolvente y no por los disolventes
apolares.
Tipos de Disolución Homogénea (Disolución de Líquidos en Líquidos)

• Todos los líquidos polares son solubles en la mayoría de los disolventes
polares.
• Los líquidos apolares que no reaccionan con el disolvente generalmente no
son muy solubles en líquidos polares, ya que las fuerzas de interacción son
desiguales. Sin embargo, los líquidos no polares suelen ser bastantes
solubles en otros líquidos no polares.
Tipos de Disoluciones Heterogéneas

• Dispersión coloidal: Consiste en partículas finamente divididas
suspendidas en un medio continuo. Las partículas constituyen la fase
dispersa o coloide y el medio es el dispersante.
• Emulsión: Coloide constituido por dos fases, una de estas fases es acuosa
y la otra es un aceite. Por ejemplo, mayonesa y mantequilla.
• Suspensión: Coloide constituido por dos fases, una de estas fases puede
ser líquida y la otra sólida. Por ejemplo, arena en agua.
______________________________________________________________________
30
_________________________________________________________________________
Tipos de Dispersiones Coloidales
Coloide
Medio Gas Liquido Sólido
Gas --- Niebla Humo
Liquido Espuma Emulsión Suspensión
Sólido Espuma Sólida --- Suspensión
Unidades de Concentración
• Gramos por Litro (g/L): Gramos de soluto por litro de disolución.

g gramos de soluto
= (Ec. 3.1)
L litros de solución
• Miligramos por Decilitro (mg/dL): Miligramos de soluto por decilitro de

disolución.
mg miligramos de soluto
= (Ec. 3.2)
dL decilitros de solución
• Porcentaje peso/peso (%p/p): Gramos de soluto en 100 gramos de

disolución
gramos de soluto
%p/ p = x 100 (Ec. 3.3)
gramos de disolución
______________________________________________________________________
31
_________________________________________________________________________
• Porcentaje peso/volumen (%p/v): Gramos de soluto en 100 mL de

disolución
gramos de soluto
%p/v = x 100 (Ec. 3.4)
mililitros de disolución
• Porcentaje volumen/volumen (%v/v): Mililitros (mL) de soluto en 100 mL de

disolución
mililitros de soluto
%v / v = x 100 (Ec. 3.5)
mililitros de disolución
• Molaridad (M): Moles de soluto en 1000mL o 1 Litro de disolución.

moles de soluto
M = (Ec. 3.6)
Litro de disolución
• molalidad (m): Moles de soluto en 1000 g de disolvente.

moles de soluto
m= (Ec. 3.7)
Kilo de solvente
• Normalidad (N): Número de equivalentes de soluto en 1000 mL de disolución.

número de equivalentes de soluto
N= (Ec. 3.8)
Litro de disolución
• Fracción Molar ( λ A ): Número de moles del soluto A en moles totales.

λt = λA + λB + λC + ...... (Ec. 3.9)
número de moles del soluto A

λA = (Ec. 3.10)
moles totales
______________________________________________________________________
32
_________________________________________________________________________
Preparación de Soluciones Diluidas a partir de Soluciones Concentradas
Es posible preparar soluciones a partir de una solución de mayor concentración,

utilizando la siguiente ecuación.
C1 x V1 = C2 x V (Ec. 3.11)
2
C1: Concentración de la solución más concentrada.
V1: Volumen de la solución más concentrada.
C2: Concentración de la solución más diluida.
V2: Volumen de la solución más diluida.
Parámetros relacionados con la absorción de luz
En la figura se ha esquematizado lo que ocurre cuando un haz de luz atraviesa

una muestra (celda). Para medir la cantidad de luz absorbida, lo que se hace es
comparar la intensidad del haz que incide sobre la muestra (I0), con la intensidad
del haz que emerge después de atravesarla (I). Existe una relación directa entre
la luz absorbida y la transmitida, de hecho, muchos instrumentos tienen ambas
escalas en su registro.
______________________________________________________________________
33
_________________________________________________________________________
El parámetro denominado transmitancia, T, se define como la razón entre la

intensidad de luz que emerge y la que incide en la muestra,
I
T= (Ec. 3.12)
I0
Por lo tanto, la transmitancia es una fracción menor o igual a uno y también se
puede expresar como porcentaje, con lo cual, el %T varía entre 0 y 100:
%T = T x 100 (Ec. 3.13)
Sin embargo, la transmitancia no varía linealmente con la concentración, sino a

través de una función logarítmica:
⎛ I⎞
− log⎜⎜ ⎟⎟ = - log T = k x C (Ec. 3.14)
⎝ I0 ⎠
Donde:
C: es la concentración de la especie que absorbe
k: es la constante de proporcionalidad.
Por lo tanto, es más útil trabajar con absorbancia, A, para resolver el problema de
la linealidad con la concentración:
A = - log T (Ec. 3.15)
A = 2 - log %T (Ec. 3.16)
A=k xC (Ec. 3.17)
______________________________________________________________________
34
_________________________________________________________________________
Factores que afectan la absorbancia

Los factores que afectan la absorbancia son:
• Concentración, C: La relación entre absorbancia y concentración es lineal.
La concentración se expresa en concentración Molar.
• Camino óptico, b: El camino óptico, es decir, la distancia que debe
recorrer el haz que atraviesa la muestra, el cual está dado por el ancho de
la celda. La absorbancia varía linealmente con este parámetro que se
simboliza también por "l". Se expresa en cm.
• Coeficiente de extinción molar, ξ: Es una constante cuyo valor indica la

probabilidad de una transición electrónica. Esta constante es, por lo tanto,
inherente a cada especie, debido a que la absorción dependerá de la
facilidad con que se efectúen las transiciones electrónicas y vibracionales
posibles en una determinada molécula, a una longitud de onda
determinada, en un disolvente determinado.
Estos factores se conjugan estableciendo la Ley de Lambert-Beer:
A=ξ x b x C (Ec. 3.18)
Así, la constante de proporcionalidad k de la ec. 3.17 involucra a ξ (coeficiente de

extinción molar) y b (camino óptico). Para las especies que cumplan esta ley (Ec.
3.18), es posible graficar la absorbancia versus disoluciones de distintas
concentraciones medidas a una misma λfija (longitud de onda) y usando la misma
celda (es decir, manteniendo ξ y b constantes), debe obtenerse una recta que
nace en el origen y su pendiente sea ξ x b.
______________________________________________________________________
35
_________________________________________________________________________
Determinación de concentración a través de la curva de calibración
En numerosas disciplinas (Química, Medicina, Biología, Agronomía, etc.), se

requiere determinar concentraciones en muestras que contienen especies
capaces de absorber luz y cuyas concentraciones son desconocidas. Basándose
en la ley de Lambert-Beer, es posible determinar sus concentraciones a través del
uso de una curva de calibración.
Por lo tanto, una curva de calibración grafica las absorbancia en función de la
concentraciones, de una serie de soluciones patrón (diferentes concentraciones
conocidas) a las cuales se les ha determinado su absorbancia a λfija, Se grafica
Absorbancia (A) versus Concentración (C), trazando la mejor recta, que nace
desde el origen (0,0).
Se sabe que, el camino óptico (b) es 1. Por lo tanto, el coeficiente de extinción

molar (ξ) de la especie a analizar se obtiene fácilmente, a partir de la pendiente
del grafico de la curva de calibración. Mediante interpolación en el gráfico, se
puede determinar la concentración de una muestra cualquiera, midiendo su
absorbancia en condiciones idénticas a las consideradas para las soluciones
patrón.
La curva de calibración, es el método más apropiado de análisis, ya que está

basado en relaciones lineales entre la propiedad medida y la variable a
determinar.
La recta debe pasar por cero, es decir, la absorbancia de una disolución cuya
concentración en la especie analizada es cero, debe ser cero. En este aspecto se
______________________________________________________________________
36
_________________________________________________________________________
basa la calibración del instrumento: se ajusta el cero con una disolución que
contiene todos los componentes de la muestra, excepto el que se desea
determinar: disolución blanco. Es decir, al medir las absorbancia de las soluciones
patrón y de la muestra de concentración desconocida, a cada una de estas
absorbancia (AE) debe restarse la absorbancia de la solución blanco (AB), el
resultado de esta resta corresponde a la absorbancia real de la muestra (AR).
AR = AE - AB (Ec. 3.19)
OBJETIVOS
a) Reconocer mezclas homogéneas y heterogéneas
b) Manejar los conceptos de hidrofilicidad e hidrofobicidad
c) Realizar cálculos relacionados con la preparación de soluciones.
d) Preparar soluciones acuosas por disolución de un soluto en un solvente dado.
e) Preparar soluciones acuosas por dilución seriada de soluciones de mayor
concentración.
f) Determinar densidad de una solución y los factores que la afectan.
______________________________________________________________________
37
_________________________________________________________________________
DESARROLLO EXPERIMENTAL
ACTIVIDAD I: MEZCLAS
Materiales y Reactivos
1. 6 tubos de ensayo con tapa
2. 3 pipetas graduadas de 5 ó 10 mL rotuladas
3. Propipeta (3)
4. Espátula (2)
5. Gradilla
6. Papel parafilm
7. Cinta para marcar
8. Jeringa de 5 mL. (Maalox)
9. Etanol (CH3CH2OH)
10. Tetracloruro de carbono (CCl4)
11. Agua destilada
12. Antiácido líquido (Maalox)
______________________________________________________________________
38
_________________________________________________________________________
Procedimiento Experimental
Reconocimiento de Mezclas Homogéneas y Heterogéneas.

a) Rotule 3 tubos de ensayo (1, 2 y 3)
b) En cada tubo agregue:
Tubo 1 1,5 mL de CCl4 + 1,5 mL de agua destilada
Tubo 2 1,5 mL de etanol + 1,5 mL de agua destilada
Tubo 3 3 mL de antiácido (Maalox)
c) Observe las mezclas 1 a 3 sin agitar. Registre sus observaciones.

d) Agite cada una de las mezclas y registre sus observaciones.
Concepto de Hidrofobicidad e Hidrofilicidad.

a) Rotule 3 tubos de ensayo (A, B y C)
b) En cada uno agregue 1,0 mL de agua y 1,0 mL de CCl4
c) En cada tubo agregue:
Colorante Oil Red Colorante Azul de Toluidina
Tubo A Cristales -
Tubo B - Cristales
Tubo C Cristales Cristales
d) Agite cada uno de los tubos

e) Observe como se distribuyen los colorantes
f) Registre sus observaciones
______________________________________________________________________
39
_________________________________________________________________________
ACTIVIDAD II: SOLUCIONES
1. Vaso precipitado de 100 mL
2. Bagueta
3. Matraces aforados de 100mL, 50 y 250 mL.
4. Espátula
5. Pizeta de 250 mL
6. Pipeta volumétrica de 25 mL
7. Propipeta
8. Micropipeta 1000 mL
9. Probeta de 250 mL
10. Densímetro rango 1,0 – 1,1
11. Densímetro rango 1,5 – 1,6
12. Sulfato de cobre pentahidratado CuSO4 x 5H2O
13. Acetona
14. Agua destilada
15. Solución de NaCl 7M
16. Cinta para marcar
17. Frascos plásticos para almacenar
______________________________________________________________________
40
_________________________________________________________________________
Preparación de una Solución por Pesada
Preparación de 100mL de una solución acuosa de CuSO4 (sulfato de cobre)

90 g/L a partir de CuSO4 x 5H2O (solución stock)
1. Calcular la masa de CuSO4 x 5H2O necesaria para preparar 100 mL de una

solución 90 g/L en dicha sal.
2. Pesar la cantidad calculada en el punto anterior de CuSO4 x 5H2O en un vaso
precipitado.
3. En el mismo vaso de precipitado, disolver la sal (CuSO4 x 5H2O) con el mínimo
de agua destilada (aproximadamente 5 a 10 mL), agite con su bagueta hasta
disolución de la sal.
4. Trasvasijar la solución a un matraz aforado de 100 mL.
5. Repetir los puntos 3 y 4 hasta disolución total de la sal, preocupándose de no
sobrepasar los 100 mL de volumen con agua destilada.
6. Agregar aproximadamente 5 mL de agua destilada al vaso precipitado y
trasvasije este volumen al matraz aforado, con el fin de rescatar todo el residuo
del vaso.
7. Completar el volumen (100 mL) de su matraz hasta la marca del aforo
agregando agua destilada con una pizeta.
8. Tapar el matraz y agitar la solución para su completa homogenización.
9. Trasvasijar la solución preparada a un frasco plástico con tapa de 100 mL.
10. Rotular con el nombre del compuesto y concentración de la solución
preparada.
Recuerde que en su matraz no deben quedar residuos sólidos y al momento de

aforar su solución no debe sobrepasar la línea del aforo.
______________________________________________________________________
41
_________________________________________________________________________
Preparación de Soluciones por Dilución Seriada
Preparación de 50 mL de una solución de CuSO4 4,5% p/v por dilución de

una solución más concentrada (solución stock)
1. Calcular el volumen de la solución de CuSO4 90 g/L necesario para preparar

50 mL de una solución 4,5% p/v en CuSO4.
2. Tomar el volumen calculado con una pipeta volumétrica y trasvasijarlo a un
matraz aforado de 50 mL.
3. Completar el volumen del matraz de aforo agregando agua destilada con una
pizeta hasta la marca del aforo que indica 50 mL.
4. Tapar el matraz de aforo y agitar la solución para su completa homogenización.
5. Trasvasijar la solución a un frasco plástico con tapa.
6. Rotular el frasco con el nombre del compuesto y concentración de la solución
preparada.
Preparación de 50 mL de una solución de CuSO4 2,25% p/v por dilución de

una solución más concentrada (solución madre)
1. Calcular el volumen de la solución de CuSO4 4,5%p/v necesario para preparar

50 mL de una solución 2,25% p/v en CuSO4.
2. Tomar el volumen calculado con una pipeta volumétrica y trasvasijarlo a un
matraz de aforo de 50 mL.
3. Completar el volumen agregando agua destilada con una pizeta hasta la
marca del aforo que indica 50 mL.
4. Tapar el matraz de aforo y agitar la solución para su completa
homogenización.
5. Trasvasijar la solución a un frasco plástico con tapa.
6. Rotular con el nombre del compuesto y concentración de la solución
preparada.
______________________________________________________________________
42
_________________________________________________________________________
Determinación de Concentración a través de medidas de Absorbancia
Medición de la Absorbancia de Soluciones
1. Agregue una muestra de 150 μL de cada una de las soluciones preparadas en

una micro placa. Cada solución debe ser tomada con puntas diferentes y
deben ser depositadas en celdas diferentes, evitando cualquier posibilidad de
contaminación.
2. En otra celda de la micro placa agregue 150 μL de solución blanco (agua
destilada).
3. Haciendo uso del espectrofotómetro, mida el valor de absorbancia a 595 nm
para cada solución y su solución blanco.
4. Registre los valores de absorbancia obtenidos.
Preparación de una Solución por dilución y Determinación de Densidad
Preparación de 250 mL de una solución de NaCl 0,7 M por dilución de una

solución más concentrada (solución stock)
1. A partir de una solución stock de NaCl (3,5 M), calcule el volumen que se
necesita para preparar 250 mL de NaCl 0,7 M.
2. Tomar el volumen calculado de la solución stock de NaCl con una pipeta
volumétrica y trasvasijar a un matraz de aforo de 250 mL.
3. Completar el volumen agregando agua destilada con una pizeta hasta 250 mL.
4. Tapar y agitar la solución para su completa homogenización.
5. Trasvasije su solución a una probeta de 250 mL.
6. Tome la temperatura de la solución preparada.
7. Haciendo uso de un densímetro, mida la densidad de su solución.
______________________________________________________________________
43
_________________________________________________________________________
LABORATORIO Nº 2
pH y SOLUCIONES BUFFER
INTRODUCCIÓN
Equilibrio Químico
Muchas reacciones químicas son reversibles, es decir, la reacción se puede
producir en ambos sentidos, por lo que la reacción inversa (productos a
reactantes) “compite” con la reacción directa (reactantes a productos). Así,
después de un tiempo, las dos reacciones se producen a la misma velocidad y se
establece un equilibrio:
aA + bB ' cC + dD
Para esta reacción general se puede escribir la siguiente constante de equilibrio:
K eq =
[C ] [D ]
c d
[A]a [B ]b
Es decir, la constante de equilibrio es el cuociente entre las concentraciones de

productos y reactantes, elevadas a sus coeficientes estequiométricos, en las
condiciones de equilibrio. Las concentraciones deben expresarse como
concentraciones molares.
Ácido Fuerte
Es aquella especie cuya ionización es completa y por lo tanto no existe en la
solución formación de equilibrio y disocia totalmente liberando iones hidrógeno
[H+]. Por lo tanto es un electrolito fuerte, y se representa de la siguiente forma:
HA → H+ + A-
______________________________________________________________________
44
_________________________________________________________________________
Ácido Débil
Es aquella especie cuya ionización es parcial, y los iones pueden regenerar al
ácido, estableciendo su equilibrio en solución. Este ácido se disocia parcialmente
liberando iones hidrógeno [H+]. Por lo tanto es un electrolito débil y se representa:
HA ' H+ + A-
La constante de disociación ácida, se expresa como:
Ka =
[H ][A ]
+ −
[HA]
Cuanto más grande sea el valor de Ka más disociado se encuentra el ácido,

inversamente, cuanto menor sea su valor, menos disociado se encuentra el ácido.
Base Fuerte
Es aquella especie cuya ionización es completa y por lo tanto no existe en la
solución formación de equilibrio y se disocia totalmente liberando iones hidroxilo
[OH-]. Por lo tanto es un electrolito fuerte:
BOH → B+ + OH-
Base Débil
Es aquella especie cuya ionización es parcial, y los iones pueden regenerar la
base al establecer el equilibrio. Se disocia parcialmente liberando iones hidroxilo
[OH-]. Por lo tanto es un electrolito débil.
BOH ' B+ + OH-
La constante de disociación básica, se expresa como:
Kb =
[B ][OH ]
+ −
[BOH ]
______________________________________________________________________
45
_________________________________________________________________________
Cuanto más grande sea el valor de Kb más disociada se encuentra la base,

inversamente, cuanto menor sea su valor, menos disociado se encuentra la base.
Auto ionización del Agua

La ionización del agua es la transferencia de un protón de una molécula de agua a
otra molécula de agua, originando un ión hidrónio (H3O+) y un ión hidroxilo.
H2O + H2O ' H3O+ + OH-
Esta reacción ocurre en agua pura, pero en poca extensión aunque medible. La
constante de equilibrio debe expresarse en concentraciones molares y como la
concentración del agua prácticamente no cambia en estas condiciones, se define
el producto iónico del agua como:
[ ][ ]
K w = H + OH − = 1.0 x 10-14 (25º C) (Ec. 4.1)
En agua, los únicos iones positivos que existen son los protones y los únicos iones
negativos los hidroxilos, y como el agua es eléctricamente neutra, se cumple:
[H ] = [OH ] = 1.0 x 10
+ − -7
(Ec. 4.2)
Al disolver en agua una sustancia de características ácidas o básicas, ésta al

reaccionar con el agua origina una solución en la cual hay un predominio de H+ o
de OH-. Como debe mantenerse el producto iónico del agua, una solución es:
Ácida: [H+] > [OH-] [H+] > 1,0 x 10-7 M

Neutra: [H+] = [OH-] [H+] = 1,0 x 10-7 M
Básica: [H+] < [OH-] [H+] < 1,0 x 10-7 M
______________________________________________________________________
46
_________________________________________________________________________
Debido a que las soluciones con las que se trabaja comúnmente son diluidas, su
concentración de ión hidrógeno a menudo es bastante pequeña y se expresa en
forma de potencias negativas de 10, parámetro denominado “p”
p = − log [C(M )] (Ec. 4.3)
[ ]
pH = − log H + (Ec. 4.4)
pOH = − log [OH ] −

(Ec. 4.5)
De acuerdo a la definición de pH una solución es:
Ácida: pH < 7,0

Neutra: pH = 7,0
Básica: pH > 7,0
Como además en la solución debe cumplirse:

[ ][
K w = H + OH − ]
Aplicando log negativo
[ ]
− log K w = − log H + − log OH − [ ]
pK w = pH + pOH
14 = pH + pOH (Ec. 4.6)
______________________________________________________________________
47
_________________________________________________________________________
Análisis Volumétrico
Es una técnica cuantitativa, en la cual la medición de volúmenes es la operación
fundamental. A partir del volumen medido, es posible determinar la concentración
de una especie que reacciona cuantitativamente con otra, cuya composición se
conoce. La operación que se realiza se denomina volumetría, titulación,
valoración, titración o normalización.
Se basa en la estequiometría de una reacción química. Así, en volumetría, según

el tipo de reacción en que se base el análisis, se habla de titulación ácido-base;
titulación redox, titulación complexométrica o titulación de precipitación.
La operación de titulación se realiza utilizando una bureta, previamente

ambientada, que se llena con solución titulante (solución cuya concentración se
conoce exactamente). En un matraz erlenmeyer, se pone una alícuota (porción de
volumen) de titulado (muestra) y unas gotas de indicador. El titulante se añade
desde la bureta, mientras se agita circularmente el matraz erlenmeyer para
homogenizar hasta viraje de color del indicador.
Las alícuotas cuando son líquidas se miden con pipetas aforadas (volumétricas),
ya que estos son los instrumentos que permiten medir de la manera más exacta y
precisa las cantidades de volumen que se utilizan.
______________________________________________________________________
48
_________________________________________________________________________
A medida que se agrega disolución desde la bureta, el titulante va reaccionando

con el titulado que se encuentra en el erlenmeyer, hasta que se igualan los
equivalentes. En ese instante, se dice que se ha alcanzado el punto de
equivalencia de la titulación. Cuando las disoluciones son incoloras, o cuando en
el punto de equivalencia no se produce algún cambio físico apreciable, se recurre
al uso de indicadores.
Indicadores
Son especies que sufren un cambio visible (como por ejemplo, color) en las
cercanías del punto de equivalencia, lo cual permite advertir ese momento y
detener la adición de titulante (Punto Final), para medir el volumen consumido en
la reacción.
En la medida que el Punto Final (cambio de color) sea más cercano al Punto de
Equivalencia (“igualación” de equivalentes), menor será el error de titulación. De
todos modos, es muy difícil que estos puntos coincidan, por lo que para cada tipo
de titulación se debe buscar el indicador más adecuado, con el fin de minimizar
este error.
Volumetría o Neutralización Ácido-Base

Corresponde a la reacción química entre un ácido y una base, dando como únicos
productos sal y agua.
Por ejemplo, en la neutralización de un ácido fuerte (HCl) con una base fuerte
(NaOH), se tiene:
HCl + NaOH ' H2O + NaCl

H+ + Cl- + Na+ + OH- ' H2O + NaCl
Esta reacción es 1:1, es decir, un mol de ácido reacciona con un mol de base para
formar el producto, lo cual significa que en el punto de equivalencia los moles de
OH- que reaccionan, son iguales a los moles de H+:
______________________________________________________________________
49
_________________________________________________________________________
Moles de ácido = Moles de base (Ec. 4.7)
En términos generales:
Moles de titulante = Moles de titulado
Los moles que reaccionan se encuentran en un determinado volumen de una

disolución, por lo que:
Vtitulante x Ctitulante = Vtitulado x Ctitulado (Ec. 4.8)
De este modo, conociendo el volumen de titulante y de titulado empleados para

que se cumpla esta condición (titulación hasta el punto de equivalencia o final), y
conociendo la concentración de la disolución patrón, la única incógnita es la
concentración de la disolución analizada.
Cuando la reacción de titulación no es 1:1, el cálculo es algo menos sencillo. Es

imprescindible conocer la reacción de titulación, para considerar la estequiometría
en el momento de realizar los cálculos, es decir, multiplicar los moles que
reaccionan en cada caso, por el factor que corresponda.
Debido a ello, en el cálculo volumétrico es mucho más útil trabajar con

equivalentes y por tanto, con Pesos Equivalentes y Normalidad, ya que éstas
tienen involucrado el factor correspondiente.
Por lo tanto,
Equivalentes de Ácido = Equivalentes de Base
En términos generales:
Equivalentes de Titulante = Equivalentes de Titulado
______________________________________________________________________
50
_________________________________________________________________________
Los equivalentes que reaccionan se encuentran en un determinado volumen de

una disolución, por lo que:
Vtitulante x Ntitulante = Vtitulado x Ntitulado
El análisis de neutralización ácido-base da origen a cuatro situaciones posibles:

a) Combinación de un ácido fuerte con una base fuerte
b) Combinación de un ácido fuerte con una base débil
c) Combinación de un ácido débil con una base fuerte
d) Combinación de un ácido débil con una base débil
Antiácidos y pH en el Estómago
Un adulto promedio produce diariamente 2 a 3 litros de jugo gástrico. El jugo
gástrico es un fluido digestivo delgado y ácido, secretado por las glándulas de la
membrana mucosa que envuelve el estómago. Entre otras sustancias, contiene
ácido clorhídrico. El pH del jugo gástrico es de aproximadamente 1,5, que
corresponde a una concentración de ácido clorhídrico de 0,03M.
La envoltura interior del estómago está formado por células apriétales que forman
uniones compactas. El interior de las células está protegido de los alrededores por
las membranas celulares. Estas membranas permiten el paso de agua y
moléculas neutras, pero comúnmente impiden el movimiento de iones tales como
H+, Na+, K+, y Cl-. Los iones H+ provienen del ácido carbónico (H2CO3) que se
forma como resultado de la hidratación del CO2, un producto final del
metabolismo:
CO2(g) + H2O(l) ' H2CO3(ac)
H2CO3 (ac) ' H+(ac) + HCO3-(ac)
Estas reacciones ocurren en el plasma sanguíneo que irriga las células de la

mucosa. Por un proceso conocido como transporte activo los iones H+ se mueven
______________________________________________________________________
51
_________________________________________________________________________
a través de la membrana hacia el interior del estómago. Para mantener el balance

eléctrico, una cantidad igual de iones Cl- también se mueve desde el plasma hacia
el estómago. Una vez en el estómago, muchos de estos iones no pueden regresar
por difusión al plasma sanguíneo por las membranas celulares.
El propósito de un medio tan ácido dentro del estómago es digerir el alimento y

activar enzimas digestivas. El comer estimula la secreción de los iones H+. Una
pequeña fracción de estos iones se reabsorbe por la mucosa. Si el contenido de
ácido es demasiado grande, la fluencia constante de los iones H+ a través de la
membrana de regreso al plasma sanguíneo puede causar contracción muscular,
dolor, hinchazón, inflamación y sangrado.
Una forma de reducir temporalmente la concentración del ión H+ en el estómago

es tomar un antiácido. La función principal de los antiácidos es neutralizar el
exceso de HCl en el jugo gástrico. Si tomamos algunos de los antiácidos
comerciales más comunes, las reacciones por medio de las cuales neutralizan al
ácido estomacal son las siguientes:
NaHCO3 (ac) + HCl (ac) NaCl (ac) + H2O(l) + CO2 (g)

CaCO3 (s) + 2 HCl (ac) CaCl2 (ac) + H2O(l) + CO2 (g)
MgCO3 (s) + 2 HCl (ac) MgCl2 (ac) + H2O(l) + CO2 (g)
Mg(OH)2 (s) + 2 HCl (ac) MgCl2 (ac) + 2 H2O(l)
Al(OH)2NaCO3 (ac) + 4HCl (ac) AlCl3 (ac) + NaCl + 3H2O (l) + CO2 (g)
Capacidad Neutralizadora de un Antiácido Comercial

La capacidad de neutralización ácida de una tableta de antiácido comercial es la
cantidad de ácido clorhídrico que esta puede neutralizar. Esta capacidad puede
determinarse por una técnica llamada “retrovaloración”. Esta técnica consiste en
disolver una cantidad conocida del antiácido en un exceso de ácido clorhídrico
(HCl), y este exceso de ácido, es retrovalorado con una solución de NaOH de
concentración exactamente conocida. Cuando se llega al punto final o punto de
______________________________________________________________________
52
_________________________________________________________________________
equivalencia de la neutralización, se verifica que el número de moles de ácido que

fueron adicionados a la muestra de antiácido es igual al número de moles de base
presentes, ósea el número de moles de NaOH agregado más el número de moles
de antiácido. De tal manera que el número de moles de HCl que fueron
neutralizados por el antiácido se calculan como:
Moles de ácido neutralizados por el antiácido es igual a, el número de moles de

HCl adicionados, menos el número de moles de NaOH requeridos para la
retrovaloración.
mmoles de ácido neutralizados = (MHCl x VHCl) – (MNaOH x VNaOH) (Ec. 4.10)
M = concentración en unidades de molaridad (M)

V = volumen de las soluciones expresada en litros
Soluciones Buffer
Una solución buffer es una solución constituida de un ácido y su sal (formada por
la base conjugada del ácido) o de una base y su sal (formada por el ácido
conjugado de la base), tienen la particularidad de resistir los cambios de pH al
añadir pequeñas cantidades de ácidos o de base.
Si consideramos una solución de buffer fosfato HPO42-/H2PO4-, se establece el

equilibrio:
H2PO4- ' H+ + HPO42-
Se cumple
Ka = [H+][HPO42-]
[H2PO4-]
Que es lo mismo que
[H+] = Ka [H2PO4-]
[HPO42-]
______________________________________________________________________
53
_________________________________________________________________________
Aplicando logaritmo a ambos lados de la ecuación
log[H+] = logKa + log[H2PO4-]

[HPO42-]
Multiplicando todo por –1 se tiene

-log [H+] = -logKa - log[H2PO4-]
[HPO42-]
que se puede rescribir como

-log[H+] = -logKa + log [HPO42-]
[H2PO4-]
o bien
-log [H+] = -logKa + log [sal]
[ácido]
y si se sustituye pH =- log [H+] y pKa = -log Ka, se tiene la ecuación de

Henderson-Hasselbalch:
pH = pK a + log
[sal] (Ec. 4.11)
[ácido]
______________________________________________________________________
54
_________________________________________________________________________
Zona de Amortiguamiento de un Buffer

El pKa para este buffer es 7,2.
Se determina como zona de

amortiguamiento del buffer
como el rango en que el pH
de la solución toma valores
entre:
(pKa – 1) y (pKa + 1).
Capacidad Tamponante o Amortiguadora de un Buffer

La capacidad reguladora de un buffer permite conocer la efectividad de su acción
amortiguadora, es decir, la capacidad de mantener su pH constante con la adición
de pequeñas cantidades de ácidos y bases. En 1922, se definió la capacidad
tamponante de un buffer como la cantidad de moles de ácido o base que debe
agregarse al buffer para producir un cambio de una unidad en el pH.
ΔA(moles)
CT =
ΔpH
La capacidad tamponante se puede
deducir a partir de una “curva de
titulación”.
La capacidad tamponante es
máxima en el punto cuando la
concentraciones de [sal] se hace
igual a la concentración de [ácido],
es decir cuando el pH del buffer es
igual a su pKa.
______________________________________________________________________
55
_________________________________________________________________________
OBJETIVOS
a) Titular un antiácido por retrovaloración.
b) Determinar y comparar la capacidad neutralizadora de un antiácido comercial.
c) Preparar soluciones buffer a pH determinados.
d) Determinar la capacidad tamponante de soluciones buffer.
ACTIVIDAD 1
TITULACIÓN DE UN ANTIÁCIDO COMERCIAL. DETERMINACIÓN DE LA
CAPACIDAD NEUTRALIZADORA DE ANTIÁCIDOS COMERCIALES.
1. Antiácidos de marcas comerciales
2. Bagueta
3. Erlenmeyer de 250 mL
4. Pizeta
6. Propipeta
7. Vidrio de reloj
8. Bureta de 25 mL
9. Soporte universal
10. Porta bureta
11. Placa calentadora
12. Jeringa Plástica de 5 mL.
13. HCl 0,1 M (concentración exacta)
14. NaOH 0,1 M (concentración exacta)
15. Agua destilada
16. Solución de indicador fenolftaleína
17. Ftalato ácido de potasio 0,1 M
______________________________________________________________________
56
_________________________________________________________________________
Antiácido Sólido
1. Coloque la tableta triturada en un erlenmeyer de 250 mL previamente pesado.
2. Pese el erlenmeyer con la tableta ya triturada.
3. Calcule la masa de la tableta triturada.
4. Con una pipeta volumétrica agregar sobre el antiácido 25 mL de una solución
de HCl 0,1 M.
5. Lavar las paredes del erlenmeyer con agua destilada.
6. Homogenizar la solución hasta obtener su completa disolución. Si es necesario
caliente la solución tapada con un vidrio de reloj en una placa calentadora para
obtener una solución completamente homogénea y enfríe la solución hasta
alcanzar aproximadamente la temperatura ambiente.
7. Agregue 3 gotas del indicador ácido-base fenolftaleína a la solución una vez
fría.
8. Homogenice la solución.
9. Llene una bureta con una solución de NaOH 0,1 M (verifique la concentración
de su base con su profesor).
10. Gotear a flujo lento el NaOH 0,1 M mientras rota el erlenmeyer entorno a un eje
imaginario hasta observar la aparición de un color rosa pálido en la solución
que indica el punto final de la titulación.
11. Registre la cantidad de mL de NaOH 0,1 M agregado.
12. Repita todo el procedimiento anterior teniendo la precaución de agregar el
NaOH 0,1 M gota a gota cuando esté próximo al volumen agregado en la
primera titulación.
13. Registre los volúmenes de NaOH de cada valoración y saque un promedio de
estos. La diferencia entre estos no debe ser superior a 1 mL.
______________________________________________________________________
57
_________________________________________________________________________
Antiácido Líquido
1. Tome una alícuota de 5 mL con una jeringa.
2. Transfiera el volumen a un erlenmeyer de 250 mL.
3. Agregar sobre el antiácido 25 mL de una solución de HCl 0,1 M.
4. Lavar las paredes del erlenmeyer con agua destilada.
5. Homogenizar la solución hasta obtener su completa disolución. Si es necesario
caliente la solución tapada con un vidrio de reloj en una placa calentadora para
obtener una solución completamente homogénea y enfríe la solución hasta
alcanzar aproximadamente la temperatura ambiente.
6. Agregue 3 gotas del indicador ácido-base fenolftaleína a la solución fría.
7. Homogenice la solución.
8. Llene una bureta con una solución de NaOH 0,1 M. (verifique la concentración
de su base con su profesor).
9. Gotear a flujo lento el NaOH 0,1 M mientras rota el erlenmeyer entorno a un eje
imaginario hasta observar la aparición de un color rosado en la solución que
indica el punto final de la titulación.
10. Registre la cantidad de mL de NaOH 0,1 M agregado.
11. Repita todo el procedimiento anterior teniendo la precaución de agregar el
NaOH 0,1 M gota a gota cuando esté próximo al volumen agregado en la
primera titulación.
12. Registre los volúmenes de NaOH de cada valoración y saque un promedio de
estos. La diferencia entre estos no debe ser superior a 1 mL.
Cada grupo debe disponer de los volúmenes de NaOH gastados para el

antiácido sólido y para el antiácido líquido.
______________________________________________________________________
58
_________________________________________________________________________
ACTIVIDAD 2. CAPACIDAD TAMPONANTE DE SOLUCIONES BUFFERS
3. Matraz aforado de 100 mL
4. Matraz aforado de 50 mL
5. Pipeta graduada de 10 mL
6. Propipeta
8. Bureta de 25 mL
9. Soporte universal
10. Porta bureta
11. pH-metro
12. Fosfato dibásico de sodio (Na2HPO4) 0,4 M y 1M
13. Fosfato monobásico de sodio (NaH2PO4) 0.4M y 1M
14. NaOH 0,5 M
______________________________________________________________________
59
_________________________________________________________________________
Preparación de Soluciones Buffer a pH Determinados

1. A partir de las soluciones de fosfato dibásico de sodio (Na2HPO4) 1M y fosfato
monobásico de sodio (NaH2PO4) 1M, calcule los volúmenes de necesarios de
estas soluciones para preparar 100 mL de un Buffer HPO42-/H2PO4- de
concentración 0,2 M, a pH = pKa = 7,2.
2. Una vez preparado su buffer (1) prepare mediante dilución 50 mL de una

nueva solución buffer Buffer HPO42-/H2PO4- de concentración 0,1 M a pH =
pKa = 7,2.
3. Trasvasije sus dos soluciones buffer a vasos de precipitado con la rotulación

correspondiente (nombre, concentración y pH del buffer) y utilizando un pH-
metro mida el pH de cada solución buffer.
Determinación de la Capacidad Tamponante de un Buffer a través de la

Curva de Titulación.
1. Tome una alícuota de 25 mL de NaH2PO4 0,4M y trasvasíjela a un vaso
precipitado de 250 mL.
2. Llene una bureta con NaOH 0,5 M. (verifique la concentración de su base con
su profesor).
3. Registre el pH de su buffer cada 0,5 mL de NaOH 0,5 M agregados a su
alícuota de 25 mL de NaH2PO4 0,4M.
4. Detenga el proceso cuando el pH alcance un valor aproximadamente de 10,5.
5. Grafique en papel milimetrado los valores obtenidos.
______________________________________________________________________
60
_________________________________________________________________________
LABORATORIO Nº 3
SÍNTESIS DE ÁCIDO ACETILSALICÍLICO
INTRODUCCIÓN
La historia del ácido acetilsalicílico comienza el 2 de junio de 1763 cuando Edwars
Stone describe que el extracto de corteza de sauce es capaz de reducir los
síntomas febriles de la malaria. Un siglo después, un médico escocés descubrió
que estos extractos también aliviaban los síntomas del reumatismo agudo. Este
extracto reunía, las propiedades de analgésico antipirético e antiinflamatorio. Al
poco tiempo se logró aislar e identificar como principio activo de la corteza de
sauce el ácido salicílico. Dicha sustancia pudo entonces sintetizarse químicamente
en grandes cantidades para su uso en medicina. Pronto resultó evidente que el
uso del ácido salicílico como fármaco se veía limitado por sus propiedades ácidas,
ya que producía irritación de las mucosas de la boca, del esófago y del estómago.
La solución llegó en 1893 cuando el químico alemán Félix Hoffmann de la casa
Bayer, fue el primero en conseguir sintetizar ácido acetilsalicílico en forma estable,
quien diseñó una síntesis sencilla del ácido acetilsalicílico, el cual presentaba las
mismas propiedades farmacológicas que el ácido salicílico, pero no tenía ya ese
gusto desagradable y no irritaba excesivamente la mucosa gástrica. La casa Bayer
llamó ASPIRINA al nuevo producto.
El ácido acetilsalicílico es un ácido débil con un pKa de 3,5. Se absorbe en la

sangre a través de las células que cubren el estómago y el intestino delgado. Se
puede preparar por reacción del ácido salicílico con anhídrido acético, en medio
ácido sulfúrico. El ácido acetilsalicílico obtenido (PM: 180,2 g/mol) es un sólido
muy poco soluble en agua. Por ello, se puede separar de la mezcla de reacción
por cristalización y posterior filtración. El ácido sulfúrico se emplea como
catalizador de la reacción (modifica la velocidad de la reacción química sin sufrir
cambios químicos permanentes). La ecuación que describe la síntesis es la
siguiente:
______________________________________________________________________
61
_________________________________________________________________________
O OH O OH
O O O
OH O CH3
+ H3C O CH3
O + H3C OH
ácido salicílico anhídrido acético ácido acetilsalicílico ácido acético
El mecanismo por el cual transcurre esta reacción es el siguiente:

O O O O
+
H
Ar
Ar OH
+ H3C O CH3 O
+
CH3
+ H3C O-
O O
Ar
O CH3
+ H3C OH
Es una reacción de esterificación del ácido salicílico catalizada por el ácido

sulfúrico. El ácido salicílico ataca al anhídrido acético (anhídrido etanoico) a través
de una reacción de sustitución nucleofilica, liberando al etanoato como grupo
abandonante de la reacción. En una rápida y posterior etapa se libera el hidrógeno
del ácido acetil salicílico el cual es captado por el etanoato dando paso al ácido
acetil salicílico y al ácido etanoico como productos de la reacción.
Los cristales del ácido acetilsalicílico son alargados de color blanquecino, que
funden a 132 ºC y son insolubles en agua. Es estable en aire seco, pero con la
humedad se descompone lentamente en ácido salicílico y ácido acético.
______________________________________________________________________
62
_________________________________________________________________________
Recristalización
Los productos sólidos que se obtienen en una reacción química están impuros,
debido a que contienen pequeñas cantidades (impurezas) de reactantes o de sub-
productos de la misma reacción, por lo que se debe proceder a purificarlos.
El método más común de purificación de compuestos que son sólidos a

temperatura ambiente, es la recristalización desde un disolvente apropiado.
Esta técnica es útil para purificar o separar un sólido de sus impurezas,

suponiendo que éstas se encuentran en cantidades relativamente pequeñas,
generalmente inferiores al 10%. La recristalización se basa en la diferencia de
solubilidad de los distintos compuestos en un disolvente, o en una mezcla de
éstos. Se entiende por solubilidad la máxima cantidad de soluto que se puede
disolver en 100 partes de disolvente, a una temperatura determinada.
De tal manera que obtenido los cristales impuros del producto desde su reacción
química de síntesis, se solubilizan en caliente con un solvente adecuado, que en
el caso del ácido acetilsalicílico es el etanol.
Si las impurezas son más solubles en el disolvente que el compuesto que se

desea purificar, se procede a enfriar la solución, de tal manera que se produce la
cristalización del sólido purificado, y las impurezas quedan solubilizadas en el
solvente.
Una vez que se ha completado la recristalización, se separan los cristales puros

del solvente, comúnmente llamado “aguas madres”, por filtración en frío a presión
reducida. Se debe realizar un lavado adecuado de los cristales y los cristales así
purificados se dejan secar.
______________________________________________________________________
63
_________________________________________________________________________
Filtración a Presión Reducida

Se utiliza un embudo Büchner con kitazato, que se conecta a una trompa de agua,
que permite succionar el líquido. El lavado se realiza normalmente con el mismo
disolvente que se utilizó para recristalizar. En todo caso, se lava varias veces con
pequeñas porciones del disolvente frío, para evitar pérdida de producto por
solubilidad.
Cromatografía de Capa Fina, TLC

La cromatografía de capa fina (TLC) es una importante técnica para la
identificación y separación de mezclas de compuestos orgánicos. Es útil en:
a) Identificación de componentes de una mezclas (usando estándar apropiados)
b) Seguimiento del curso de una reacción
c) Análisis de fracciones colectadas durante una purificación
d) Análisis de la pureza de un compuesto
En una cromatografía de capa fina (TLC), los componentes de una mezcla de

compuestos orgánicos se particionan entre un adsorbente también llamada fase
estacionaria que usualmente es de sílica gel y un solvente también llamado fase
móvil que es una mezcla de solventes, el cual fluye a través del adsorbente en
forma ascendente por capilaridad.
______________________________________________________________________
64
_________________________________________________________________________
En una TLC, un plástico, vidrio o una hoja de aluminio

es usada como soporte para una fina capa de
adsorbente, que por lo general es sílica gel.
Una pequeña cantidad de una solución que contiene la

sustancia en estudio (en el ejemplo se indican las
sustancia A, B, U, C y D), las cuales son aplicadas en
forma de pequeñas gotas con un tubo capilar,
esperando que se seque una gota antes de aplicar la
siguiente, a una distancia de aproximadamente a 1 cm
A B U C D del borde inferior de la placa de TLC, como se indica en
el dibujo. Se debe dibujar la línea base además de
identificar las muestras que estén estudio en la placa,
usando para ello un lápiz grafito.
La TLC es desarrollada en una cámara la cual contiene el solvente que es la fase

móvil, (que puede ser un vaso precipitado) que en muchas ocasiones es una
mezcla de solventes. Un trozo de papel filtro dentro de la cámara sirve para
saturarla con la fase móvil. Y el nivel del solvente debe estar bajo la línea que
contiene las muestras, como se indica en la figura.
La fase móvil sube por la placa TLC por acción capilar, de tal manera que los
componentes se disuelven en el solvente y se mueven hacia la parte superior de
la placa.
______________________________________________________________________
65
_________________________________________________________________________
filter paper
A B U C D
Los componentes individuales se mueven a diferente velocidad, dependiendo de

las fuerzas intermoleculares entre los componentes y la fase estacionaria de sílica
gel y las fuerzas entre los componentes y la fase móvil del solvente.
Dependiendo de los grupos funcionales que posee una molécula, será su

interacción con estas fases, de forma única y diferente de otras moléculas. Por lo
tanto si una mezcla de moléculas son aplicadas en una lámina de cromatografía
de placa fina (TLC) y un solvente es aplicado para que fluya a través de la sílica
gel habrán moléculas que interactúen mejor con la fase móvil que con la fase
estacionaria y se moverán rápidamente hasta el fin de la placa de TLC y se
separarán de las otras moléculas.
Si la identidad de las moléculas a ser separadas es conocida, la composición de la

fase móvil puede ser tal que se maximice la diferencia de interacción de las
moléculas con la fase móvil y de este modo aumentar la separación de las
moléculas sobre la placa de TLC.
______________________________________________________________________
66
_________________________________________________________________________
x x x x x
A B U C D
Todo esto ocurre porque la fase estacionaria es muy polar, ya que tiene un grupo
SiO2 hidratado. Que es capaz de entablar enlaces dipolo-dipolo fuertes y también
es capaz de formar puentes de hidrógeno con las moléculas a separar. Entre más
polares son las moléculas analizadas, mayor fuerza es la que se establecerá con
la fase estacionaria, y por lo tanto ese tipo de moléculas se moverá muy
lentamente hacia arriba en la placa TLC. Por el contrario, la fase móvil es
relativamente apolar y es capaz de interactuar fuertemente con moléculas a través
de el establecimiento de fuerzas de London. Entre más apolares son las moléculas
analizadas, menor fuerza tendrán con la fase estacionaria y más fuertemente
interactuarán con la fase móvil, por lo tanto se moverán más rápidamente hacia la
parte más alta de la placa de TLC.
Cuando el solvente llega a 1 cm de la parte superior de la placa de TLC, esta es

removida de la cámara de desarrollo, se debe marcar con un lápiz grafito el lugar
donde llegó la línea del frente del solvente, para luego evaporarlo completamente.
Las manchas son visualizadas usando el reactivo cloruro férrico FeCl3 0.02M en
forma de spray sobre la placa. El Fe3+ reacciona con la presencia de los grupos
funcionales del ácido acetilsalicílico formando un compuesto coloreado. Entre mas
______________________________________________________________________
67
_________________________________________________________________________
alta sea la concentración de ácido acetilsalicílico presente, mas intenso es el color

del compuesto formado con el Fe3+.
El centro de las manchas son ubicadas y marcadas con un lápiz grafito y se

calcula la distancia entre este punto y la línea base.
2.0 cm
Rf (A) = = 0.40
5.0 cm
Solvent Front
Rf (B) = 3.0 cm = 0.60

5.0 cm
Distance solvent
migrated = 5.0 cm
4.0 cm
Distance B
migrated = 3.0 cm Rf (C) = 0.8 cm = 0.16
5.0 cm
Distance A
migrated = 2.0 cm 3.0 cm Rf (D) = 4.0 cm = 0.80
5.0 cm
Distance C
migrated = 0.8 cm
0.8 cm Rf (U1) = 3.0 cm = 0.60
Origin
x x x x x 5.0 cm
A B U C D
0.8 cm
Rf (U2) = = 0.16
5.0 cm
Rf: Los valores de Rf se definen como la distancia entre el centro de la mancha

que se movió dividido por la distancia que el frente del solvente alcanzó. Ambas
distancias medidas desde el origen. Los valores de los Rf pueden ser usados
como dato adicional para la identificación de sustancias por comparación con
muestras estándar.
El valor de Rf no es una constante física y sólo puede ser comparada entre

manchas de una misma placa, que fue desarrollada en un mismo momento. Dos
sustancias que tienen el mismo valor de Rf son moléculas idénticas, mientras que
valores de Rf diferentes indica que las moléculas no son idénticas.
______________________________________________________________________
68
_________________________________________________________________________
OBJETIVOS
1. Sintetizar el ácido acetilsalicílico a partir de ácido salicílico y anhídrido acético.
2. Purificar un producto sólido por recristalización.
3. Analizar el producto obtenido de la síntesis a través de TLC, para su
identificación y determinación cualitativa de su grado de pureza.
ACTIVIDAD 1. SÍNTESIS DE ÁCIDO ACETILSALICÍLICO
1. Erlenmeyer de 250 mL
2. Kitazato
3. Embudo Büchner
4. Papel filtro
5. Placa TLC
6. Capilares
7. Pizeta
8. Bagueta
9. Espátula
10. Propipeta
12. Pipeta graduada de 10 mL
13. 3 Tubos de ensayo
14. Vidrio de reloj
15. Ácido salicílico
16. Anhídrido acético
17. Etanol
18. Ácido sulfúrico concentrado H2SO4
______________________________________________________________________
69
_________________________________________________________________________
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Síntesis de Ácido Acetilsalicílico

1. Pesar 5.0 g de ácido salicílico en un matraz erlenmeyer de 250 mL limpio y
seco.
2. Con precaución, añadir 10 mL de anhídrido acético (atención: el anhídrido
acético es irritante, evite contacto con la piel y vapores en sus ojos)
3. Luego agregue 10 gotas de ácido sulfúrico concentrado (atención: el ácido
sulfúrico es corrosivo, solicite al profesor que lo asesore).
4. Agitar suavemente el matraz erlenmeyer describiendo círculos durante unos
minutos. Si el ácido salicílico no se disuelve, calentar la mezcla durante
algunos minutos en un baño de agua caliente en una placa calentadora, con
agitación ocasional. La reacción es exotérmica y continúa manteniendo la
temperatura de la disolución por encima de 70ºC durante varios minutos.
5. Quitar el matraz del baño, con precaución. En presencia del profesor, agregar
25 mL de agua destilada helada.
6. Colocar el matraz en un baño de hielo hasta que la cristalización del ácido
acetilsalicílico parezca completa.
7. Separar los cristales del líquido por filtración a presión reducida utilizando un
kitazato con embudo Büchner. Solicite indicaciones al profesor para este
procedimiento.
8. Separe y guarde en un tubo de ensayo, una punta de espátula de los cristales
impuros, para luego analizarlos por cromatografía TLC.
______________________________________________________________________
70
_________________________________________________________________________
Recristalización
1. Colocar los cristales de ácido acetilsalicílico en un vaso precipitado de 100 mL.
2. Disolverlos con 10 mL de alcohol etílico. Si es necesario, colocar en un baño
de agua caliente, para ayudar a la disolución.
3. Adicionar 50 mL de agua destilada caliente a la solución alcohólica.
4. Colocar el vaso en baño de hielo y cubrir con un trozo de parafilm hasta que la
cristalización parezca completa.
5. Separar los cristales por filtración a presión reducida y lavarlos con pequeñas
porciones de agua destilada helada.
6. Secar los cristales entre dos trozos de papel de filtro, moviéndolos con una
espátula para facilitar el secado de los mismos.
ACTIVIDAD 2. ANÁLISIS TLC
1. Placa de sílica gel para TLC
2. Capilares
3. Cloruro férrico 0,02 M
5. Solución de eluyente para TLC
6. Parel filtro
7. Tubos de ensayos
8. Pipeta de 10 mL
9. Etanol
10. Propipeta
______________________________________________________________________
71
_________________________________________________________________________
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Cromatografía de Capa Fina

1. Usando tubos de ensayos, ponga en cada uno algunos cristales de las
muestras:
Tubo A : una punta de espátula de ácido acetilsalicílico (aspirina comercial)
Tubo B : una punta de espátula de los cristales de ácido acetilsalicílico
sintetizado impuro
Tubo C : una punta de espátula de los cristales de ácido acetilsalicílico
sintetizado puro.
2. Diluya las muestras con 2 a 3 mL de etanol y homogenícelas.
3. Con un lápiz grafito dibuje una línea a 1 cm del borde inferior de la placa
cromatográfica. (Línea base)
4. Luego dibuje otra línea paralela a la anterior a 5 cm de altura.
5. Aplique una o dos gotas de cada muestra solubilizada sobre la línea como se
indica en el esquema descrito en la introducción, esperando que sequen
totalmente.
6. En un vaso precipitado de 100 mL agregue 5 mL aproximadamente de la
mezcla de solvente de la fase móvil que indique el profesor.
7. A continuación sumerja la placa de TLC en la mezcla de solvente en la fase
móvil y tape con vidrio de reloj la parte superior del vaso precipitado.
8. Una vez que el frente del solvente llegue al punto final saque la placa del
solvente y marque la línea donde llegó el frente del solvente con un lápiz
grafito.
9. Deje secar la placa TLC.
10. A continuación prosiga a revelar su Placa TLC aplicando con un spray la
solución de FeCl3 0,02M.
11. Deje secar completamente la placa y prosiga con el análisis de los Rf para
cada compuesto analizado.
12. Guarde sus placas para su posterior análisis.
______________________________________________________________________
72

Guia Lab Oratorio Quimica Plan Comun

Încărcat de

Informații document

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Guia Lab Oratorio Quimica Plan Comun

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

GUÍAS DE LABORATORIO DE

PARA CARRERAS DEL ÁREA DE LA SALUD

Autoras: Paola Campodónico, PhD.

o Seguridad en el Laboratorio ……………………………………… 2

o Material de Laboratorio …………………………………………… 16

o Laboratorio Nº 1: Soluciones …………………………………….. 29

o Laboratorio Nº 2: pH y Soluciones Buffer ………………………. 44

o Laboratorio Nº 3: Síntesis de Aspirina………………………….. 61

El elevado número de accidentes laborales producidos en laboratorios es debido,

Para ello es necesario, que tengas en cuenta lo siguiente:

1. Localiza los dispositivos de seguridad más próximos.

Estos dispositivos son elementos tales como extintores, lavaojos, ducha de

2. Lee las etiquetas de seguridad.

Las botellas de reactivos contienen pictogramas y frases que informan sobre su

3. Infórmate sobre las medidas básicas de seguridad.

El trabajo en el laboratorio exige conocer una serie de medidas básicas de

4. Presta atención a las medidas específicas de seguridad.

Las operaciones que se realizan en algunas prácticas requieren información

5. En caso de duda, consulta al profesor.

1. Cuida tus ojos.

Los ojos son particularmente susceptibles de daño permanente por productos

Es obligatorio usar gafas de seguridad siempre que se esté en un laboratorio

2. Cómo ir vestido en el laboratorio.

Es recomendable usar guantes, sobre todo cuando se utilizan sustancias

C. Trabajar con seguridad en el laboratorio

• No comas ni bebas en el laboratorio, ya que es posible que los alimentos o

• Lávate siempre las manos después de hacer un experimento y antes de

• Por razones higiénicas y de seguridad, está prohibido fumar en el

• No inhales, pruebes o huelas productos químicos si no estás debidamente

2. Trabaja con orden y limpieza.

• Recuerda que el orden es fundamental para evitar accidentes.

• Mantén el área de trabajo ordenada, sin libros, abrigos, bolsas, exceso de

• Mantén las mesas y vitrinas extractoras siempre limpias.

• Se tienen que limpiar inmediatamente todos los productos químicos

• Limpia siempre perfectamente el material y aparatos después de su uso.

• Trabaja sin prisas, pensando en cada momento lo que estás haciendo, y

• No se deben realizar bromas, correr, jugar, empujar, etc. en el laboratorio.

Está terminantemente prohibido hacer experimentos no autorizados por el

D. Precauciones específicas en un laboratorio químico.

1. Manipulación del vidrio.

Muchos de los accidentes de laboratorio se producen por cortes y quemaduras

• Nunca fuerces un tubo de vidrio, ya que, en caso de ruptura, los cortes

• El vidrio caliente debe de dejarse apartado encima de una plancha o similar

• No uses nunca equipo de vidrio que esté agrietado o roto. Deposita el

2. Manipulación de productos químicos.

• Muchos reactivos, particularmente los disolventes orgánicos, arden en

• No inhales los vapores de productos químicos. Trabaja en una vitrina

• Está terminantemente prohibido pipetear reactivos directamente con la

• Un posible peligro de envenenamiento, frecuentemente olvidado, es a

• Como norma general, lee siempre detenidamente la etiqueta de seguridad

No transportes innecesariamente los reactivos de un sitio a otro del laboratorio.

No calientes nunca un recipiente totalmente cerrado. Dirige siempre la boca del

Para evitar descargas eléctricas accidentales, siga exactamente las instrucciones

Las medidas de seguridad no terminan al finalizar el experimento. La eliminación

Vidrio roto. El material de cristal roto se tirará en los recipientes destinados

Residuos químicos. Los productos químicos tóxicos se tirarán en contenedores

o las disoluciones que puedan verterse al fregadero, se diluirán previamente,

F. Qué hay que hacer en caso de accidente: primeros auxilios

En caso de accidente, avisa inmediatamente al profesor.

Fuegos pequeños: Si el fuego es pequeño y localizado, apagarlo utilizando un

Fuegos grandes: Aislar el fuego. Utilizar los extintores adecuados. Si el fuego no

Si se te incendia la ropa, grita inmediatamente para pedir ayuda. Estírate en el

No corras ni intentes llegar a la ducha de seguridad si no está muy cerca de ti. Es

Las pequeñas quemaduras de primer grado, producidas por material caliente,