Artigo

CIANOBACTÉRIAS E SUAS TOXINAS

Resumo Talita Gomes Carneiro e

Flávio Leite
As cianobactérias são microrganismos presentes em ambientes aquáticos e vêm sendo cada T&E Analítica – Centro
vez mais pesquisadas devido a sua capacidade de produção de toxinas, em alguns casos, Analítico e Científico Ltda.
altamente prejudiciais à saúde humana e animal. Essas toxinas, denominadas cianotoxinas,
são responsáveis por alterações organolépticas das águas e têm sido causadoras de graves Correspondência:
R. Lauro Vannucci, 1.260
intoxicações pela ingestão e contato com corpos d’água contaminados. Conhecer essas
Jardim Santa Cândida
cianotoxinas envolve a disponibilidade de técnicas analíticas sofisticadas, além de métodos CEP: 13087-548. Campinas.SP
definidos e validados. Fone: (19) 3756-6600
Fax: (19) 3296-0128
Palavras-chave: cianobactérias, cianotoxinas, métodos analíticos E-mail:
teanalitica@teanalitica.com.br;
talita@teanalitica.com.br;
flavio@teanalitica.com.br
Summary
Cyanobacteria are microorganisms that live in aquatic environments and have been widely
studied because of their capability to produce toxins, that are, in some cases, hazardous
to human and animal health. These toxins, called cyanotoxins, are responsible for sensory
alterations in water and have been the cause of serious intoxications by ingestion and con-
tact with contaminated waters. Knowledge of cyanobacterial toxins require availability of
sophisticated analytical techniques, and so harmonized and validated methods.

Keywords: cyanobacteria, cyanotoxins, analytical methods

Introdução
Cianobactérias e suas toxinas
As cianobactérias, também conhecidas como cianofíceas
ou algas azuis, são microrganismos procarióticos (não pos-
suem qualquer tipo de membrana para compartimentalização
de DNA e outras organelas), autotróficos (produzem seu
próprio alimento por meio de fotossíntese) e são capazes
de se desenvolver em mananciais superficiais, especialmente
aqueles com elevados níveis de nutrientes.
O aumento das atividades urbanas e industriais, assim como
a descarga de seus efluentes acarretam o acúmulo de nutrientes
ricos em fósforo e nitrogênio nos corpos d’água. Ao fenômeno
causado pelo excesso desses compostos nutrientes dá-se o nome
eutrofização, que aliado à elevação da temperatura, tem como
uma das consequências, a rápida proliferação de cianobactérias
no ambiente aquático, conhecida como “floração” ou “bloom”.
As cianobactérias têm sido estudadas no ramo alimentício,
farmacêutico e agrícola pelo seu alto valor nutritivo, possível
potencial farmacológico e pela influência que exercem sobre
a fertilidade de solos e águas. Entretanto, algumas espécies
de cianobactérias têm a capacidade de produzir metabólitos
secundários que dão gosto e odor desagradáveis à água, além
de poderosas toxinas. Daí seu principal interesse e estudos
sobre os impactos no meio ambiente e na saúde. No Brasil,
entre os gêneros potencialmente nocivos, destacam-se Mi-
crocystis, Anabaena, Cylindrospermopsis, Oscillatoria, Planktothrix
e Aphanocapsa (Calijuri, 2006).
Denominadas cianotoxinas, essas substâncias causam gra-
ves injúrias a animais terrestres, aquáticos e humanos, através
da ingestão ou contato com a água contaminada. As principais
e mais perigosas toxinas produzidas por esses gêneros de
cianobactérias são Microcistinas, Nodularinas, Anatoxinas,
Cilindrospermopsinas e Saxitoxinas. As cianotoxinas são clas-
sificadas como hepatotóxicas, neurotóxicas, dermatotóxicas
ou promotoras da inibição da síntese de proteínas, de acordo
com seu mecanismo de ação.

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 Segundo suas estruturas químicas, as toxinas de cianobac-
térias são classificadas como alcalóides, peptídeos cíclicos ou
lipopolissacarídeos, como mostra a Figura 1.
A cilindrospermopsina (Figura 1) é um alcalóide guanidí-
nico cíclico hepatotóxico, de peso molecular (PM) 415. Em
sua forma pura, afeta principalmente o fígado, além de induzir
sintomas patológicos nos rins e coração. Essa toxina apresen-
ta DL50 de 2,1 mg.kg-1 em 24 horas e 0,2 mg.kg-1 em 5-6 dias,
segundo bioensaios realizados em ratos (Ohtani et al., 1992).
Também conhecidas como PSP’s (Paralytic Shellfish Poisons), as
saxitoxinas (Figura 2) são um grupo de alcalóides carbamatos
neurotóxicos, produzidas por cianobactérias de águas mari-
nhas ou doces. Intoxicações por essas substâncias, de acordo
com bioensaios em ratos, causaram uma morte rápida (2-30
minutos) por parada respiratória, devido ao bloqueio dos ca-
nais de sódio. Saxitoxina e seus análogos, como mostrado
acima, apresentam diferentes estruturas químicas e, conse-
quentemente, diferentes toxicidades (Calijuri, 2006).
Anatoxina e suas variantes (Figura 3) são alcalóides neu-
rotóxicos de baixo peso molecular e alta toxicidade. Estudos
em ratos demonstraram valores de DL50 entre 200 e 250
µg.kg-1 para anatoxina-a e homoanatoxina-a. Para anatoxina-
a(s), a DL50 foi de 20 µg.kg-1 de peso corpóreo. (Carmichael
et al., 1990)
As microcistinas (Figura 4), hepatotoxinas mais comumen-
te encontradas em blooms de água doce, são peptídeos cíclicos
formados por sete aminoácidos (heptapeptídeos cíclicos) de
pesos moleculares (PM’s) entre 800 e 1100. Essas toxinas são

H H OH

- O
O3SO

N NH HN NH
Me +
H NH O
Figura 1. Alcalóide - Cilindrospermopsina

H2N O
STX R1 R2 R3
O H H +
N NH2
R1N STX H H H
NH GTX-II H H OSO3-
H2N N GTX-III H OSO3- H
OH
+ NeoSTX OH H H
OH GTX-I OH H OSO3-
GTX-IV OH OSO3- H
R2 R3
Figura 2. Alcalóides - Saxitoxinas

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caracterizadas de acordo com o arranjo dos aminoácidos na
molécula e podem levar à morte em algumas horas por hemor-
ragia no fígado. Cerca de 60 variações estruturais de microcis-
tinas já foram identificadas. As mais conhecidas são MC-RR;
MC-YR; MC-LR e MC-LA (Chorus e Bartram ed., 1998).
Nodularinas (Figura 5) são peptídeos cíclicos hepatotóxicos
formados por 5 aminoácidos (pentapeptídeos cíclicos). Assim
como as microcistinas, as nodularinas são solúveis em água e
apresentam alta estabilidade química, o que traz importantes im-
plicações sobre sua persistência no meio ambiente e exposição
a humanos nos corpos d’água. Poucas variações de nodularinas
foram identificadas e sua toxicidade, segundo experimentos em
animais, é dada por hemorragia e necrose de hepatócitos, além
de carcinogênese de fígado (Chorus e Bartram ed., 1998).

CH3
O O HN
CH3 CH2CH3 N
NH2+ NH2+ +
CH3
+H N N
2 O

CH3
P
-O O
O

anatoxin-a homoanatoxin-a anatoxin-a(S)

Figura 3. Alcalóides - Anatoxinas

Glu Mdha

H CO2H CH3 O
N
HN NH
O CH2 Ala
Adda CH3 H
O
H CH3
H OCH H H O
3

H NH HN
H CH3 CH3 H H H CH3 H
O N N X
Y
O H CO H O
2
β-Me-Asp

x y
MC-RR Arginin Arginin
MC-YR Tryptophan Arginin
MC-LR Leucin Arginin
MC-LA Leucin Alanin
Figura 4. Peptídeos Cíclicos - Microcistinas

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Lipopolissacarídeos (LPS) são componentes da parede
celular de toda bactéria gram-negativa, incluindo as ciano-
bactérias. Como o próprio nome indica, lipopolissacarídeos
são polímeros complexos compostos por açúcares e lipídeos,
normalmente ácidos graxos C14-C18. Diferentes gêneros de
cianobactérias apresentam diferentes composições de LPS.
Tais toxinas são classificadas como irritantes e pirogênicas
por causarem reações alérgicas a animais mamíferos e hu-
manos (Weckesser e Drews, 1979). Estudos comparativos
indicam que LPS produzidos por cianobactérias são menos
tóxicos a seres humanos que LPS produzidos por outras bac-
térias gram-negativas, como por exemplo, Salmonella sp. (Ke-
leti e Sykora, 1982).
Tem-se observado nos últimos 20 anos, grande aumento
de ocorrências de florações de algas tóxicas em reservató-
rios utilizados para abastecimento público. Um dos primeiros
e mais graves relatos de intoxicação humana por cianotoxinas
no Brasil foi em 1996, na cidade de Caruaru, Pernambuco,
onde 60 pacientes de hemodiálise morreram pela hepatotoxi-
na microcistina, encontrada na água utilizada no procedimen-
to (Jochimsen et al., 1998).
Em recente Conferência Internacional “7th International
Conference on Toxic Cyanobacteria” (7th ICTC), realizada no es-
tado do Rio de Janeiro e organizada pela pesquisadora Profa.
Dra. Sandra Azevedo, especialistas de diversos países discuti-
OH
H2N
Figura 5. Peptídeos Cíclicos - Nodularinas
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ram temas como métodos de detecção; Ecofisiologia e Ecolo-
gia; gerenciamento e tratamento de água; Biologia Molecular;
avaliação de risco; Toxicologia, além dos novos desafios rela-
cionados às cianobactérias tóxicas.
Avanços na Área Analítica das Cianotoxinas
Métodos para detecção, identificação e quantificação de
cianotoxinas podem variar de acordo com a sofisticação e o
tipo de informações que proporcionam. Em campo, testes rá-
pidos e de baixo custo podem ser empregados para avaliação
do grau de risco de uma floração e direcionar as medidas a
serem tomadas. Por outro lado, técnicas analíticas mais so-
fisticadas podem determinar com maior precisão a identidade
e quantidade das cianotoxinas. Os métodos analíticos hoje
disponíveis para essa finalidade se dividem em físico-químicos
(HPLC-UV; HPLC-PDA; eletroforese capilar; LC/MS); bioquí-
micos (ensaio de inibição de fosfatase; ensaio de inibição de
acetilcolinesterase; ELISA) ou biológicos (bioensaios; testes
de toxicidade).
Segundo Guia da Organização Mundial da Saúde “Toxic
Cyanobacteria in Water”, após clean-up das amostras, nodulari-
nas, microcistinas (Lawton et al., 1994) e cilindrospermopsina
(Hawkins et al., 1997) podem ser detectadas por sistemas de
HPLC acoplados a PDA ou espectroscopia de massas. Já para
N N
COOH O
O O
NH NH
O NH COOH
O
NH
NH
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 a quantificação de saxitoxinas é proposto método por HPLC
com detecção por fluorescência (Oshima, 1995).
No Brasil, a Resolução no 357/2005 do Conselho Nacional
de Meio Ambiente (CONAMA) dispõe sobre a classificação
dos corpos de água, além de estabelecer condições e padrões
de lançamentos de efluentes, incluindo limites de densidade
de cianobactérias. A Portaria no 518/2004 do Ministério da
Saúde, por sua vez, estabelece procedimentos e responsabi-
lidades relativos ao controle e vigilância da qualidade da água
para consumo humano e seu padrão de potabilidade, através
de parâmetros microbiológicos, físicos e químicos, além de
recomendar e estabelecer valores aceitáveis para cianobac-
térias e cianotoxinas (microcistinas, saxitoxinas e cilindros-
permopsinas).
No entanto, a quantificação dessas cianotoxinas tem sido
prejudicada pela baixa disponibilidade de materiais de refe-
rência (padrões analíticos). Iniciativas internacionais, através
de esforços colaborativos e com o objetivo de suprir essa
necessidade de mercado, têm buscado a preparação de ma-
teriais de referência certificados no Brasil e exterior. Estra-
tégias gerais para o desenvolvimento desses padrões ana-
líticos envolvem operações como: (a) extração de toxinas
a partir de culturas em larga-escala de cianobactérias ou a
partir de ocorrências naturais (florações ou blooms); (b) pu-
rificação por métodos preparativos de separação; (c) deter-
Referências
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monitoring and management. World Health Organization, 1999
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minação da pureza e estudos de estabilidade; (d) preparação
de soluções estoque concentradas, seguida de precisas di-
luições para a obtenção de soluções finais de concentrações
conhecidas; (e) fracionamento em ampolas e certificação do
produto através de métodos analíticos validados. (Quilliam
et al., 2007)
Conclusão
Os impactos ambientais e os problemas de saúde pública
causados por florações de cianobactérias têm se mostrado
cada vez mais freqüentes no Brasil e no mundo. Uma das
causas observadas é o lançamento não controlado de efluen-
tes, a partir do quê, se faz necessária a conscientização da
população e entidades comerciais, no sentido de controlar e
solucionar essa problemática.
Do ponto de vista analítico, observa-se um grande avanço
com relação às técnicas instrumentais, embora a indisponibi-
lidade de padrões e materiais certificados seja um obstáculo
para os cientistas.
Laboratórios privados e oficiais no Brasil se estruturam
dentro do alto custo e da complexidade analítica para ofere-
cer o controle da qualidade das águas para abastecimento pú-
blico, segundo parâmetros estabelecidos por órgãos oficiais.
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