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Jenny Andrea Ramirez

Producción de Pectinasas a partir Valentina Giraldo Grisales


de Aspergillus Niger. Yesica Andrea Gonzalez
Yudi Tatiana Yepes
Resumen
Metabolito de interés
Las pectinasas son un grupo de enzimas capaces de hidrolizar la pectina, se encuentran en
casi cualquier lugar de la naturaleza y son producidas por vegetales, frutas y
microorganismos. Son capaces de descomponer o separar los grupos pectinos, los cuales
les dan rigidez a la pared celular de las frutas. Se dividen en tres grupos.

- Las pectinesterasas
- Las hidrolasas o liasas
- Las protopectinas
Microorganismo productor

Nombre: Aspergillus niger


Clasificación:
Subdivisión: Deuteromycotina
Clase: Deuteromycete
Orden: Moniliales
Familia: Moniliacea
Género: Aspergillus
Especie: niger
Bioprospección y aislamiento

¿Donde buscarlo?
El Aspergillus Niger crece en cualquier tipo de sustrato especialmente en suelos y material de plantas
en descomposición, es un contaminante habitual de alimentos.

Aislamiento
Cultivo de tejidos: Se toma una pequeña parte del hongo, se
hace un protocolo de desinfección con abundante agua
destilada y agentes desinfectantes, y se coloca en la parte
central de la caja petri la cual contiene agar, generalmente
PDA. Posteriormente esto es llevado a incubación
aproximadamente durante 48 horas a una temperatura de 30°
C.
Condiciones de cultivo
Condiciones físicas
- Temperatura: Se encuentra entre los 12 y 57°C con un óptimo a las 30°C
- pH: Óptimo de 5 a 6
- Oxígeno: Como es un microorganismo aerobio requiere el 21% del oxígeno que contiene el aire
- Humedad relativa: Necesitan mucha humedad para su crecimiento de 80 a 90% de humedad
- Tiempo de luz : Lo común de la luz del día 12 horas
- Relación C/N: Por fórmula molecular del microorganismo CH1.8O0.5N0.2 La relación carbono,
nitrógeno es 1 y 0,2

Condiciones químicas
- Fuente de energía: Dextrosa
- Fuente de carbono: Papa deshidratada
- Fuente de nitrógeno: Sulfato de amonio
Metabolismo las pectinasas son un complejo sistema de enzimas
que incluyen hidrolasas, liasas y oxidasas que se
encargan de descomponer la pectina, por lo que la
vía metabólica asociada a la producción de estas
enzimas es la ruta de las pentosas-fosfato (PF)

Esquema red metabólica de A. niger. (Reyes-Ocampo y col, 2013)

La red metabólica publicada para A.


niger, está constituida por 1190
reacciones y 1045 metabolitos,
distribuidos en tres compartimentos:
extracelular, citoplasmático y
mitocondrial.
Vías de metabolismo de carbohidratos
Mejoramiento Genético
- A. niger CBS 513.88 fue la primera de las tres cepas de A. niger que se secuenciaron. La cepa es un progenitor
de las cepas industriales que producen glucoamilasa.
- La segunda secuencia del genoma de A. niger es de A. niger ATCC 9029, una cepa de laboratorio de uso
frecuente. Fue una secuencia de borrador fuertemente fragmentada (9510 contigs) sin anotaciones ni
predicciones de genes.
- Finalmente, ha completado y publicado la secuencia del genoma de A. niger ATCC 1015, un productor de
ácido cítrico originalmente descrito en 1917.

Otras genómicas realizadas en A. niger incluyen la


secuenciación de 12,820 etiquetas de secuencias, con la
predicción de 5108 genes. Este estudio de los genes
expresados ​proporciona un recurso valioso que tiene valor por
separado y junto con una secuencia genómica disponible.
Cinéticas microbianas
Crecimiento Consumo de sustrato Formación de producto
Metodología
Extracción de pectina
Resultados
Observación macroscópica Observación microscópica

Producción de pectinasas

Crecimiento quinto día Crecimiento octavo día


Biomasa

Tiempo (h) Biomasa Seca (gr)

0 0

14 0.08

19 0.14

24 0.25

38 0.59

43 0.59

48 0.79

62 1.17

67 1.4

72 2.35
Conclusiones
El hongo Aspergillus Niger tiene un crecimiento rápido, con gran cantidad
de biomasa y buena producción de metabolitos secundarios como es el caso
de las enzimas pectinasas, esto se hace notoria a la hora de observar el
crecimiento en medio con diferentes concentraciones de pectina.
Bibliografía
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Production, Characterization and Industrial Application of Microbial Pectinolytic Enzymes . agosto 2018, de benthamopen Sitio
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http://www.pv.fagro.edu.uy/fitopato/cursometodosfito/03-Medios_de_cultivos.pdf

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