Universitatea de Medicină și Farmacie “Gr. T.

Popa” din Iași

“Bazele moleculare ale terapiei

genice”

1
 Cuprins
INTRODUCERE.............................................................................................................3

1.Terapia genică..............................................................................................................4

1.2 Istoric...................................................................................................................4

2. Metode de introducere a structurilor terapeutice în organism....................................6

2.1Terapia genică ex-vivo...........................................................................................7

2.2 Terapia genică in-vivo..........................................................................................8

3. Terapia genică pozitivă.............................................................................................10

3.1 Corectarea ADN-ului cromozomial la nivelul genelor......................................10

4. Terapie genică negativă.............................................................................................11

4.1 Reglarea funcționării genei la nivelul ARN-ului...............................................11

5. Terapia genică în tratarea bolilor..............................................................................11

5.1 Bolile ereditare ..................................................................................................12

5.2 Bolile oncologice...............................................................................................13

6. Perspectiva terapiei genice .......................................................................................15

7. Concluzii...................................................................................................................16

8. Bibliografie...............................................................................................................17

INTRODUCERE
2
 Terapia genetică astăzi poate fi definită ca tratamentul bolilor prin introducerea de gene în
celulele pacienților, cu scopul de a regla modificările defectelor genice sau de a conferi celulelor noi
funcții.. Corecția unei boli specifice se realizează prin introducerea în genele normale exprimate în
celulele somatice defecte.
Fiecare an, tot mai multe articole despre cercetarea clinică medicală apar în reviste științifice,
în care, într-un fel sau altul, a fost utilizat un tratament bazat pe introducerea de diferite gene -
terapia genică. Această zonă a crescut de la ramuri atât de bine dezvoltate ale biologiei, precum
genetica moleculară și biotehnologia. Cel mai important rezultat al studiului ființelor umane a fost
dezvoltarea rapidă a unei noi direcții de medicină moleculară.
Astăzi, datorită apariției unor informații posibile despre caracteristicile structurii genomului
individual (pașaportul genetic), inclusiv despre genetica anumitor boli cauzate genetic. Terapia
genică se bazează pe realizările biologiei moleculare, ingineriei genelor și a noilor tehnologii
informaționale. Inițial, terapia pre-genică a fost utilizată pentru a trata tratamentul bolilor moștenite
prin corectarea genelor mutante la nivelul ADN-ului cromozomial. Datorită complexității
direcționării genomului, metodele cele mai răspândite au fost obținute prin introducerea în organism
a unei gene funcționale (terapeutice) funcționale pe deplin funcționale în compoziția ADN-ului
plasmidic. Conceptul de terapie genică a apărut odată cu înțelegerea mecanismelor de transformare a
celulelor cu virusuri asemănătoare tumorii. Virușii efectuează o degradare stabilă a materialului lor
genetic în gazda celulară și, prin urmare, s-a sugerat ca acestea să fie utilizate ca un mecanism de
livrare a informațiilor genetice dorite în celulă pentru a corecta defectele celulare și pentru a trata
gena.

Terapia genică

3
Terapia genetică este tratamentul bolilor ereditare, non-ereditare, multifactoriale, care se realizează
prin introducerea altor gene în celulele pacientului. Scopul terapiei este de a elimina defectele
genetice sau de a conferi celulelor noi funcții.

Istoric
Conceptul de terapie genică aparent a apărut imediat după descoperirea fenomenului de
transformare în bacterii și studiul mecanismelor de transformare a celulelor animale de către virușii
care formează tumori. Astfel de viruși pot efectua introducerea stabilă a materialului genetic în
genomul celulei gazdă, așa că sa propus utilizarea acestora ca vectori pentru a furniza informațiile
genetice dorite în genomul celular. S-a presupus că astfel de vectori pot, dacă este necesar, să
corecteze defectele genomului.
Corecția genetică a celulelor somatice a devenit o realitate după anii 1980, când s-au
dezvoltat metode de producere a unor gene izolate, s-au creat vectori de expresie eucariote și
transferuri genetice la șoareci și alte animale au devenit comune.
Din punct de vedere istoric, terapia genică sa concentrat asupra tratamentului bolilor genetice
ereditare, însă domeniul aplicării sale, cel puțin teoretic, sa extins. În prezent, terapia genică este
considerată o abordare potențial universală a tratamentului pentru o gamă largă de boli, de la
ereditare, genetice și până la infecții.
În 1972, Friedman și Roeblin au publicat un articol în Jurnalul de Știință intitulat “Terapia
genică pentru bolile genetice umane T. Rogers (1970) a propus înlocuirea ADN-ului defect în cazul
celor care suferă de defecte genetice.
În 1984, a fost dezvoltat un sistem de vectori retroviral care poate introduce în mod eficient
gene străine în cromozomii de mamifere.
Primul studiu clinic autorizat al terapiei genice din istoria Statelor Unite a fost efectuat la 14
septembrie 1990 la National Institutes of Health, sub conducerea lui William Anderson . Ashanti
Desilva, în vârstă de patru ani, a primit tratament pentru un defect genetic sever al unei
imunodeficiențe combinate complexă asociată cu lipsa unei enzime ADA. În sânul pacientului, gena
defectă a fost înlocuită cu o variantă funcțională. Aceasta a dus la o restaurare parțială a sistemului
imunitar al Ashantei. Aceasta a stimulat temporar producerea enzimei lipsă, dar nu a generat celule
noi cu o genă funcțională. Ashanti a continuat să primească injecții de celule T ajustate la fiecare
două luni și a avut ocazia de a duce o viață normală
În 1993 s-a efectuat un studiu privind terapia genetică a unui pacient care suferă de SCID.
După terapie, celulele albe au continuat să-și îndeplinească funcțiile timp de 4 ani. Apoi, a fost

4
necesar un tratament suplimentar. În anul 1999 fiecare al patrulea copil SCID este tratat cu terapia
genică
În 2003, o echipă a Universității din California a reușit să transfere gene la neuroni din creier
folosind lipozomi acoperiți cu polimer polietilenglicol. Înainte de aceasta, transferul genei în
neuronii cerebrali a fost imposibil datorită faptului că vectorii virali nu au reușit să depășească
bariera hemato-encefalică datorită mărimii lor mari .Pe baza unei noi tehnologii, sunt dezvoltate
metode de terapie genică a bolii Parkinson.
În martie 2006, o echipă internațională de oameni de știință a anunțat utilizarea cu succes a
terapiei genice pentru a trata doi pacienți adulți pentru o boală asociată cu celule mieloide
În mai 2007, s-a anunțat primul proces de terapie genică pentru tratamentul amaurozei
congenitale a lui Leber.
Un articol al lui Komaromi, publicat în aprilie 2010, a descris tehnologia terapiei genice
pentru tratamentul achromatopsiei la câini. Achromatopsia sau orbirea cu culoare plină este utilizată
ca model ideal pentru dezvoltarea metodelor de terapie genetică destinate fotoreceptorilor conici.
Funcția de conuri și viziunea zilei a fost restaurată timp de cel puțin 33 de luni la doi câini tineri cu
achromatopsie. Cu toate acestea, terapia a fost mai puțin eficientă pentru câinii mai în vârstă.
Oamenii de știință de la Centrul Național de Cercetare a Cancerului din Spania (condusă de
Centro Nacional de Investigaciones Oncologicas), sub conducerea directorului sau Maria Blasco au
arătat că durata de viață a șoarecilor poate fi crescută printr-o singură injecție a unui medicament
care afectează în mod direct genele adulte ale animalului. Ei au făcut acest lucru cu ajutorul terapiei
genice - o strategie care nu a fost niciodată folosită pentru a lupta împotriva îmbătrânirii. Utilizarea
acestei metode la șoareci este recunoscută că fiind sigură și eficientă. Șoarecii tratați la vârsta de un
an au trăit în medie cu 24% mai mult, iar la vârsta de doi ani au trăit cu 13% mai mult. În plus,
tratamentul a dus la o îmbunătățire semnificativă a sănătății animalelor, întârzierea dezvoltării bolilor
legate de vârstă - cum ar fi osteoporoză și rezistența la insulină - și îmbunătățirea indicatorilor de
îmbătrânire, cum ar fi coordonarea neuromusculară.
În 2013, doar cinci preparate genetice au fost aprobate pentru utilizare clinică în lume: trei
pentru tratamentul tumorilor maligne, al patrulea pentru tratamentul unei boli ereditare rare.
În noiembrie 2017, în California, prima procedură din lume pentru "editarea" genomului
uman adult a fost efectuată chiar în interiorul corpului uman . Pacientul a devenit un om cu
mucopolizaharidoză de tip II (sindromul Hunter).
Metode de introducere a structurilor terapeutice în organism

5
 Noi abordări pentru terapia genică a celulelor somatice pot fi împărțite în două mari categorii:
terapia genică ex vivo și in vivo. Se dezvoltă medicamente specifice pe bază de acid nucleic: enzime
ARN, oligonucleotide modificate genetic, mutații genetice corective in vivo etc. Dezvoltarea unor
astfel de instrumente puternice pentru modificarea genei au oferit posibilitatea de a omenirii în
viitorul apropiat, prin modificarea genetică a elimina cu succes cauzele bolilor ereditare.
În funcție de modul de administrare al ADN-ul exogen în terapia genică a genomului
pacientului poate fi efectuat fie în cultură celulară ex vivo, fie direct în organism in vivo.
Dezvoltarea unui program de terapie genică este precedată de o analiză aprofundată a
țesuturilor specifice, expresia identificării genei corespunzătoare, structura, funcția și distribuția
intracelulară a produsului proteic, precum și o analiză biochimică a procesului patologic. Toate
aceste date sunt luate în considerare la întocmirea protocolului medical relevant. Testarea procedurii
de corecție genetică a unei boli ereditare se efectuează pe culturi de celule primare. Pe aceste modele
de celule se evaluează eficacitatea sistemului de transfer selectat. Se observă interacțiunea ADN-ul
exogen cu genomul celulei, determină expresia structurii genetice introduse, se analizează
interacțiunea lor, și metode de corectare la nivel biochimic.
Prin urmare, o astfel de atenție în programe pe terapia genică se dau experimente in vivo pe
modele naturale sau artificiale derivate din bolile ereditare observate la animale. Corecția genetică
reușită a defectelor la aceste animale și absența efectelor secundare nedorite ale terapiei genice sunt
cele mai importante condiții prealabile pentru rezolvare studii clinice.
Astfel, schema standard de corecție genetică a unui defect ereditar include o serie de etape
succesive. Începe prin a crea structura genetică complet operată (exprimată) care conține
semnificația proteinei codificatoare. Următorul pas este identificarea unui vector care oferă
eficacitate și, dacă este posibil, direcționarea genei către celulele țintă, eficiența transfecției, gradul
de corectabilitate a defectelor biochimice primare în condițiile culturilor celulare in vitro și, cel mai
important, in vivo la animale - modelele biologice. Numai după aceste operațiuni se începe
programul de studiilor clinice.

Terapia genică ex-vivo

6
Terapia genică ex vivo implică corectarea genetică a celulelor defecte în afara corpului, urmată de
revenirea celulelor care funcționează în mod normal în organism.

Terapia genică ex vivo include următoarele etape:

 obținerea de celule defecte ale pacienților și cultivarea lor;

 transferarea genei dorite în celule izolate prin transfectarea construcției genei terapeutice;
 selectarea și extinderea celulelor corectate genetic;
 transplantul sau transfuzia acestor celule către pacient.

Utilizarea celulelor proprii ale pacientului asigură că, după revenire, răspunsul imun nu se va
dezvolta. Procedura de transfer al constructului genic trebuie să fie eficientă, iar gena normală
trebuie să fie menținută stabil și exprimată în mod continuu.

Terapia genică in-vivo

7
 Terapia genică in vivo se bazează pe introducerea directă a secvențelor de ADN clonate
(înmulțite) și într-o anumită măsură în anumite țesuturi ale pacientului. În mod special promițătoare
pentru tratamentul bolilor genetice in vivo este introducerea de gene folosind aerosoli sau vaccinuri
injectabile. Terapia cu gene de aerosoli este dezvoltată, de regulă, pentru tratamentul bolilor
pulmonare (fibroză chistică, cancer pulmonar).

In vivo vizează tratarea nu a genelor, ci a bolilor organismului care utilizează gene. Obiectivele
principale ale acestei metodologii sunt

 compensarea defectelor metabolice;

 crearea unui agent dăunător în interiorul celulei.

O problemă comună a oricărei variante este eliberarea unui acid nucleic sau a oligonucleotidului la
țintele sale și stabilitatea lor. Aceasta înseamnă livrarea materialului genetic la anumite țesuturi sau
organe prin vectori, penetrarea prin membrana plasmatică și expunerea la o țintă specifică din
interiorul celulei.

8
 Transportul genei este efectuat de un vector - o moleculă ADN utilizată ca un „vehicul”
pentru transferul artificial a informațiilor genetice într-o celulă. Există multe varietăți de vectori:
plasmidă, virală, precum cromozomi artificiali etc.
Este fundamental important ca vectorii (în special, plasmidul) să aibă următoarele proprietăți
caracteristice:
1. Originea replicării este secvența de nucleotide din care începe dublarea ADN-ului ,dacă ADN
vector nu se poate dubla (replicarea), atunci efectul terapeutic necesar nu va fi atins, deoarece va fi
pur și simplu scindat rapid de enzime intracelulare-nucleaze și, din cauza lipsei matricelor, se vor
forma mult mai puține molecule de proteine.
2. Formarea „capetelor lipicioase”, aceste site-uri sunt necesare pentru a coase ADN vector (care, de
fapt, este un „blanc”) cu genele terapeutice dorite într-o singură moleculă.
3. Dacă avem de-a face cu o cultură a celulelor bacteriene, atunci acest ADN trebuie să fie izolat.
4. Folosind plasmidele, bacteriile pot schimba informații genetice, de exemplu, rezistența la transfer
la anumite antibiotice însă nimeni nu poate împiedica cercetătorul să sintetizeze artificial o plasmidă
care să posede proprietățile necesare pentru aceasta, și să o introducă într-o celulă.

Terapia genică pozitivă

9
 Terapia genetică pozitivă vizează restabilirea funcției genetice, a expresiei care poate fi
insuficientă sau complet absentă. În majoritatea cazurilorcazuri, diverse metode de terapiei genetice
pozitive sunt destinate corectării genelor deteriorate

Corectarea ADN-ului cromozomial la nivelul genelor

Corectarea ADN-ului cromozomial la nivelul genelor implică restaurarea funcției unei gene
prin înlocuirea sau duplicarea ei. O astfel de abordare pot fi utilizate, de exemplu, în tratamentul
ereditar al bolilor recesive, atunci când celulele pierd funcționalitatea unei gene. Strategia ideală
implică "tăierea" unei gene bolnave sau a unei părți din ea și înlocuirea ei cu una viabilă. Acest lucru
se poate face prin direcționare. Direcționarea (de la eng. țintă) - încorporarea construcției de terapie
genică într-un anumit loc în genom, care permite genei sa ofere o cale cu adevarat naturală pentru
reglementare. Cu toate acestea, direcționarea diferitelor genele cu secvențe suplimentare sunt
complicate și imprevizibil,pot provoca transformarea celulelor maligne. Terapie genică implică
introducerea acidului nucleic în forma dozată, care în loc de distribuție aleatorie este încorporată în
ADN-ul celulelor, ceea ce duce la corectarea mutației ADN-ului cromozomial, transformând gena
inactivă în activă sau normalizând activitatea genei anormale în una funcțională. În ciuda beneficiilor
vizibile ale corecției genelor (eliminarea mutației) în comparație cu introducerea ADN-ului exogen,
care teoretic poate duce la efecte secundare nedorite, aplicarea tehnologiilor de corecție a genei poate
fi foarte dificilă în cazul bolilor cauzate de sute de mutații diferite. Prin urmare, acest tip de terapie
genică se limitează la tratamentul bolilor monogene.
Folosind terapia corectivă, se presupune că gena defectă va fi înlocuită cu o recombinare normală.
Până în prezent, această metodă se află în stadiul testelor de laborator, deoarece eficacitatea acesteia
este încă foarte scăzută, dar studii recente arată succese în tratamentul anumitor boli.

Terapie genică negativă

10
 Promotorul unei infecție sau cu transformarea tumorii, reprezintă funcția excesivă a unei gene
neobișnuite pentru o celulă normală. În astfel de cazuri, terapia gencică are drept scop suprimarea
genei hiperactive sau a funcției genei "bolnave" prin introducerea în celule a unor construcții
genetice care exprimă factori care într-un fel sau altul interacționează cu produsul expresiei sale
nedorite și neutralizează efectul său dăunător

Reglarea funcționării genei la nivelul ARN-ului

Terapia cu ARN antisens se realizează pentru obținerea efectul suprimării unei gene negative
prin plasarea în celulă a unui construct care va suprima gena la nivelul ARNm.
ARN-ul este exprimat în mod constant de către celulă în construcția genetică, anticorpul
ARN este introdus în celulă din exterior. Efectul terapeutic al oligonucleotidelor antisens sintetic
depinde de specificitatea hibridizării lor cu un situs vizat de ARNm accesibil, rezistență la acțiunea
nucleazelor celulare și prezența unui sistem de eliberare a celulelor.
O altă modalitate de a suprima expresia genelor la nivel de ARNm este utilizarea ribozomilor
- care dispun în ARN. Crearea unui ribozim "terapeutic" este un proces complex. Acest lucru se
datorează dificultății obțineți cantități mari de ARN sintetic și păstrarea în starea lor nativă în celula
țintă.

Terapia genică în tratarea bolilor

Conceptul de terapie genică constă în faptul că este cel mai radical mod de a trata diferitele
boli cauzate de schimbările în conținutul genetic al celulelor și ar trebui să fie oferit un tratament
care vizează direct corectarea sau eradicarea cauzei genetice a bolii însăși și nu consecințele ei.
Datorită faptului că terapia genică este o nouă direcție a geneticii medicale, iar bolile care încearcă să
fie tratate în acest fel sunt foarte diverse, au fost create multe abordări metodologice inițiale ale
acestei probleme. În prezent, cercetarea privind terapia genică are ca scop, în principal, corectarea
defectelor genetice ale celulelor somatice, mai degrabă decât celulele germinative, care este asociată
cu probleme pur tehnice, precum și din motive de securitate.

Bolile ereditare

11
 Terapia genică a fost inițial menită să introducă gene direct în celulele umane, concentrându-
se asupra bolilor cauzate de defecte ale genei unice, cum ar fi fibroza chistică, hemofilie, distrofie
musculară și anemia cu secera Tulburările monogene, un singur locus (gena) sunt defecte și
responsabile pentru boală, 100% ereditare. Exemple: anemie celuloză, fibroză chistică, hemofilie,
distrofie musculară Duchenne, boala Huntington, Parkinsons
Studiile de terapie genică umană sunt direcționate asupra bolilor ereditare, incluzând
deficiența de adenozin deaminază, hipercolesterolemia familială și fibroza chistică.
Terapia genică umană implică introducerea și exprimarea genelor recombinante în celule
somatice, nereproductive, cu intenția de a inversa sau de a preveni o anumită boală. Două metode de
introducere a genelor în celulele umane sunt utilizate în prezent în studiile clinice. Administrarea
genei ex vivo implică îndepărtarea celulelor țintă din corpul pacientului, introducerea genei
recombinante în celule și plasarea celulelor modificate înapoi în corpul pacientului. Administrarea
genei in vivo implică plasarea genei recombinante direct în corpul pacientului, care vizează țesutul
sau celulă de interes. Transferul genei recombinante în celulă și expresia ulterioară a produsului
transgenic sunt etapele care limitează viteză pentru terapia genică de succes. O varietate de metode,
inclusiv utilizarea de viruși modificați și vectori sintetici, sunt utilizați în prezent în studiile clinice.
De la aprobarea și inițierea primului studiu de terapie genică umană pentru a trata deficiență în 1989,
au existat mai mult de 170 de studii aprobat terapie genică în Statele Unite. Mai mult de 1500 de
pacienți au fost înrolați în studiile de terapie genetică umane la nivel mondial. Studiile clinice
preliminare au vizat boli cum ar fi deficiența hipercolesterolemia familială și fibroză chistică. Aceste
studii au utilizat modele și strategii variabile, ceea ce face dificilă interpretarea rezultatelor. Cu toate
acestea, datele inițiale sunt încurajatoare, iar procedurile au fost bine tolerate. Utilitatea clinică a
terapiei genice umane rămâne a fi definită; eforturile imediate se vor concentra pe îmbunătățirea
designului vectorului pentru a limita toxicitatea și pentru a spori eficiența transferului de gene.
Bolile ereditare sunt caracterizate prin diferite manifestări clinice, iar tratamentul lor este în
mare măsură simptomatic. Tulburările metabolice individuale se pot ameliora urmând diete speciale
menite să reducă substanțele toxice din organism, acumularea cărora se datorează mutațiilor în
anumite gene.
Multe boli sanguine sunt asociate cu mutații moștenite, astfel, înlocuirea unei singure
nucleotide conduce la apariția hemoglobinei S și la dezvoltarea anemiei cu celule secerătoare.
Introducerea celulelor stem din celulele genelor care restabilește funcția normală a celulelor ar trebui
să aibă un efect terapeutic - de exemplu, introducerea genei de adenozin deaminază poate asigura
dezvoltarea normală a limfocitelor T și B. Utilizarea pe scară largă a acestei metode este împiedicată

12
de mai multe dificultăți, dintre care una este exprimarea slabă și pe termen scurt a genelor introduse
în celulele sanguine.
.
Bolile oncologice
Cancerul este, de obicei, rezultatul schimbărilor de celule în mai multe etape. Această
dificultate asociată cu implicarea multor gene și a interacțiunilor dintre ele și a sistemului de
reglementare celulară. Există numeroase experimente care arată că compensarea pentru o singură
gena supresoare poate duce la suprimarea proprietăților tumorale ale celulelor. Racul este flagelul
societății moderne și nu este o coincidență faptul că problemele diagnosticării și tratării cancerului
sunt acordate o atenție sporită în toate țările dezvoltate.
Cunoașterea noastră modernă a mecanismelor genetice care conduc la apariția tumorilor
maligne ne permite să ne gândim la terapia orientată spre cancer orientată în mod specific către
celulele tumorale și destinată distrugerii acestora fără a afecta celulele și țesuturile sănătoase Terapia
genetică este o alternativă elegantă la chimioterapie, în general, fără efecte secundare.
Bolile de cancer creează metode eficiente pentru tratamentul lor - una dintre principalele probleme ale
societății moderne. Nu este o coincidență faptul că sarcinile de diagnosticare și vindecare o fac mai vizibilă în
toate țările dezvoltate.
Prin urmare, viteza de abordare a terapiei genice actuale a terapiei este destul de semnificativă. Este
legată de doi factori, dintre care unii sunt științifici, alții sociali și etici.
Posibilitatea terapiei genice în lupta cu cancerul a fost postulată cu câteva decenii în urmă,
după primele succese în tratamentul bolilor genetice și infecțioase. După entuziasmul de la începutul
anilor 1990, astăzi predomină abordare rațională bazată pe analiza rezultatelor. Instrumente ale
acestei abordări sunt vectori, promotori, gene terapeutice. O nouă strategie pentru tratamentul
molecular al tumorilor include:
a) înlocuirea defectelor tumori supresoare tumorale;
b) inactivarea celulelor oncogene;
c) introducerea genelor suicidare;
d) imunoterapie genetică;
e) terapie antiangiogenică;
e) viroterapie.
Potențialele strategii pentru combaterea cancerului cu metodele terapiei genetice de astăzi:
1. Creșterea imunogenității celulelor tumorale, de exemplu, prin introducerea genelor care
codifică un antigen străin pentru aceste celule

13
 2. Încurajarea celulelor sistemului imunitar să-și mărească activitatea antitumorală prin
introducerea genelor citokinice în celulele tumorale.
3. Introducerea genelor ucigașe în celulele tumorale, care sintetizează produsul, ducând la
moartea celulelor tumorale în anumite condiții.
4. Blocarea expresiei oncogene prin intermediul imunizării intracelulare, de exemplu, prin
introducerea în celule a structurilor care programează sinteza ARN antisens sau anticorpi la
oncoproteine.
5. Introducerea în celulele tumorale a genelor supresoare.
6. Protejarea celulelor stem din efectele toxice ale chimioterapiei prin introducerea în ele a
unor gene de rezistență la medicamente, de exemplu MDR-1,
7. Blocarea mecanismelor prin care celulele tumorale evită distrugerea de către sistemul
imunitar, de exemplu, prin introducerea genelor care codifică ARN antisens la IGF-1.
8. uciderea direcțională a celulelor tumorale prin introducerea genelor care codifică toxinele
sub controlul promotorilor exprimați în mod specific în celulele tumorale.
Ca și în alte cazuri, se dezvoltă două strategii: Terapia genetică ex vivo pentru cancer și
terapia genică in vivo pentru cancer.
Un număr mic de tentative de terapie genetică pentru tumorile maligne sunt asociate cu
introducerea genelor sau a factorului de necroză tumorală în celulele tumorale rezecate. Apoi, aceste
celule sunt injectate subcutanat în zona coapsei. După 3 săptămâni, se elimină ganglionul limfatic
regional (pentru locul de injectare al amestecului de celule tumorale transgenice). Limfocitele T
izolate din acest nod sunt cultivate. În plus, se înmulțesc limfocitele din tumoare (filtrarea tumorii).
Pacientului i se administrează o masă totală de limfocite, care asigură un răspuns imunitar la celulele
tumorale. Acesta este modul în care pacienții cu melanom malign, cancer renal și cancer avansat pe
diferite organe au fost tratați.

14
 Perspectiva terapiei genice
Majoritatea terapiilor genetice pentru bolile cum ar fi fibroza chistică și hemofilia au fost concepute
pentru a ușura, nu pentru a vindeca boala. Cu toate acestea, distribuirea copiilor funcționale ale
genelor oferă o metodă potențială de corectare a bolii la nivelul de bază.
Terapia genică are, de asemenea, potențialul de a oferi regimuri de tratament "prietenoase
pacienților" pentru o varietate de afecțiuni. Astăzi, mulți pacienți cu hemofilie și diabet trebuie să
urmeze injecții repetate pentru a-și gestiona boală, deoarece proteinele existente în fluxul sanguin
pentru o perioadă limitată pot fi degradate sau eliminate, deoarece ADN-ul este mai stabil și
funcționează în interiorul celulei, administrarea de gene poate duce la exprimarea pe termen lung a
proteinelor necesare.
Datorită acurateții sale, terapia genică are potențialul de a elimina celulele canceroase fără a
distruge țesuturile normale, sănătoase. Mai mult decât atât, terapiile genetice ale cancerului pot oferi
alternative atunci când o boală nu răspunde la alte tratamente mai vechi. Potențialul terapiei genice
este mare, dar, comparativ cu promisiunea, rezultatele până în prezent sunt încă destul de limitate.
Cu toate acestea, beneficiile terapiei genice se consideră a fi pe orizontul apropiat. Terapia genetică
este una dintre cele mai enigmatice domenii de cercetare medicală de astăzi.
Progresele remarcabile ale geneticii, inclusiv proiectul genomului uman, au deschis noi porți
pentru explorarea terapiei genice. Sunt necesare noi tehnologii pentru a accelera progresul terapiei
genice. Pe măsură ce aceste noi tehnologii, precum „cipul bionic” vor fi implementate, fără îndoială,
terapia genică va juca un rol din ce în ce mai important în medicină în deceniile viitoare.

15
 Concluzie
Terapia genică implică modificarea, înlocuirea, inactivarea sau introducerea genei într-un
corp al pacientului cu scopul de a trata, preveni sau vindeca durabil boala.
Terapia genică deschide perspective strălucitoare pentru recuperarea celulelor și țesuturilor
pierdute și a ingineriei genetice a organelor, ceea ce va spori, fără îndoială, arsenalul metodelor de
cercetare biomedicală și va crea noi oportunități pentru conservarea și prelungirea vieții umane. O
analiză a datelor ne permite să concluzionăm că, în ciuda eforturilor multor laboratoare din lume,
toate sistemele vectoriale deja cunoscute și testate in vivo și in vitro sunt departe de a fi perfecte.
Până în prezent, integrarea în genom a fost realizată numai prin utilizarea vectorilor retrovirus sau
adeno-asociați. Este posibil să se mărească eficiența integrării stabile prin îmbunătățirea structurilor
genice cum ar fi sistemele mediate de receptori sau prin crearea unor vectori episomali suficient de
stabili (adică structuri ADN capabile să rămână pentru mult timp în interiorul nucleului).
Recent, s-a acordat o atenție deosebită creării de vectori bazați pe cromozomi artificiali de
mamifere. Datorită prezenței elementelor structurale de bază ale cromozomilor obișnuiți, astfel de
mini-cromozomi sunt reținuți o lungă perioadă de timp în celule și sunt capabili să transporte genele
cu lungime întreagă (genomice) și elementele lor de reglare naturale necesare pentru funcționarea
corectă a genei în țesutul drept și la momentul potrivit.

16
 Bibliografie
1. Padureanu Silvica, “ Genetica generală” Ed. "Ion Ionescu de la Brad", Iași, 2004

2. Padureanu Silvica, “Elemente de genetică moleculară” Ed. "Ion Ionescu de la Brad", Iași, 2004

3. Verma I. “Gene therapy: Twenty-first century medicine”, 2005

4. Hodgson C.P. “The Vector Void in Gene Therapy” BioTechnology. 1995. Vol. 13

5. Smith K.T., Shepherd A.J., Boyd J.E., Lees J.M. “Gene Delivery Systems for Use in Gene
Therapy: An Overview of Quality Assurance and Safety Issues” Gene Therapy, 1996

6. Storici, Francesca “Methods in Molecular Biology, Vol. 1114 (Ed.), 2014

7. Paul Singleton ” Dictionary of DNA and Genome Technology” 3rd Edition, 2012

8. Connelly S, Kaleko M. “Gene therapy”,1997

9.“Gene Therapy - The Future Is Here”

https://www.medicinenet.com/gene_therapy_-_the_future_is_here/views.htm

10. “От генетики человека до генной терапии – эволюция понятий и терминов, знаний и
практик” Пискун Савицкая Е.А., Лилевская А.А., Климчук

11. Парахонский А.П. “ПРОБЛЕМЫ И ПЕРСПЕКТИВЫ ГЕННОЙ ТЕРАПИИ” Современные

наукоемкие технологии, 2011

17