UNIVERSIDAD CENTRAL

DEL ECUADOR

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA

CARRERA DE INGENIERÍA QUÍMICA

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

PRÁCTICA 3
MICROSCOPÍA

Integrantes:

Alvarado María Gabriela

Carrera Ingrid
Marcillo Bryan
Ramos Fernanda

Ayudante de Cátedra:
Vizuete Emerson

Fecha de Entrega: 17-05-2018

2018-2018
 UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE INGENIERÍA QUIMICA
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

RESUMEN

Conocimiento e identificación de las partes y funciones de un

microscopio, adquiriendo habilidad en el manejo y uso del mismo para
la observación y reconocimiento de células eucariotas y procariotas.
Para ello se procedió a la preparación de diferentes muestras con sus
respectivas especificaciones, dependiendo el caso se utilizó una
sustancia aceitosa o de tinción que permitió tener un mejor contraste en
la observación de las placas, reconociendo y diferenciando las células
procariotas y células eucariotas vegetales y animales, se obtuvo
imágenes microscópicas de células presentes en diferentes productos.
Se concluye que el uso de técnicas y métodos utilizados en la
preparación de las muestras nos permite apreciar estructuras biológicas
que son imprescindibles al ojo humano.

PALABRAS CLAVE:

MICROSCOPIA/ CÉLULAS_EUCARIOTAS/
CÉLULAS_PROCARIOTAS/ TINCIÓN
 UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE INGENIERÍA QUIMICA
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

PRÁCTICA 3
MICROSCOPÍA

1. OBJETIVOS
1.1. Conocer e identificar las partes de un microscopio compuesto y sus funciones.
1.2. Adquirir habilidades en la utilización eficiente del Microscopio.
1.3. Conocer el manejo y uso del microscopio
1.4. Observar y reconocer en el microscopio, células eucariotas y procariotas.

2. TEORÍA
2.1. Microscopio óptico
2.1.1. Definición
2.1.2. Partes
2.1.3. Poder de resolución
2.2. Célula
2.2.1. Clasificación de los microorganismos por morfología
2.2.2. Célula eucariota
2.2.2.1. ¿Qué son?
2.2.2.2. Características
2.2.2.3. Estructura
2.2.3. Célula procariota
2.2.3.1. ¿Qué son?
2.2.3.2. Características
2.2.3.3. Estructura

3. PARTE EXPERIMENTAL
3.1. Materiales y Equipos
3.1.1. 3 Cubre y porta objetos
3.1.2. Materiales de disección
3.1.3. Microscopio
3.1.4. Gotero Rg: [0-1]mL Ap: ±0.1mL
3.1.5. Piceta

3.2. Sustancias y reactivos

3.2.1. Azul de metileno C16H18ClN3S (l)
3.2.2. Alcohol CH3OH (l)
3.2.3. Yogurt
3.2.4. Cebolla
3.2.5. Corcho
3.2.6. Agua H2O (l)

3.3. Procedimiento
PARTE A
3.3.1. Comprobar que los lentes estén limpios, caso contrario usar papel óptico para
retirar la suciedad
 UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE INGENIERÍA QUIMICA
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

3.3.2. Verificar que se encuentre para observación el objetivo con el lente de menor
aumento.
3.3.3. Determinar las partes del microscopio
Enfoque
3.3.4. Colocar la muestra preparada de la parte B, en la platina y sujetarla con las pinzas.
3.3.5. Encender el microscopio y verificar que la fuente de luz funcione.
3.3.6. Enfocar siempre primero con el lente de menor aumento luego 10x, 40x y 100x
3.3.7. Acercar el lente objetivo a la muestra utilizando el tornillo macrométrico.
3.3.8. Observar por el ocular y mover el tornillo micrométrico para mayor nitidez
3.3.9. Anotar observaciones y graficar
3.3.10. Proceder a cambiar el lente y continuar con el literal 3.3.7. Además, realice el
mismo procedimiento para las muestras de la Parte C y D.

PARTE B. Células procariotas.

3.3.11. Lavar y desinfectar un portaobjetos
3.3.12. Con ayuda de un gotero, colocar una gota de yogurt y una gota de agua en el centro
del portaobjetos.
3.3.13. Con otro porta objetos realizar un frotis. (extender la muestra por toda el área).
3.3.14. Fijar la muestra con ayuda de la lámpara de alcohol.
3.3.15. Colocar unas gotas de alcohol (uniformemente) y dejar secar.
3.3.16. Colocar unas gotas de azul de metileno dejar durante 5 minutos y retirar el exceso
de colorante con ayuda de la piceta.
3.3.17. Colocar el cubre objetos sobre la muestra y proceder a realizar la observación,
considerando la parte de enfoque. (10x, 40x, 100x)

Nota: Tomar el porta y cubreobjetos por los extremos para evitar que se ensucie o
se pierda muestra.

PARTE C. Células eucariotas.

3.3.18. Lavar y desinfectar un portaobjetos
3.3.19. Con ayuda de un bisturí y pinzas, retirar una delgada capa (epidermis) de la cebolla
(paiteña) y colocarla en porta objetos con una gota de agua.
3.3.20. Con ayuda del gotero colocar una gota de azul de metileno esperar 5 minutos y
retirar el exceso del colorante.
3.3.21. Colocar el cubre objetos sobre la muestra y proceder a observar en el laboratorio.
(10x, 40x, 100x)
3.3.22. Repetir el procedimiento para una fina la mina de corcho.

PARTE D. Células eucariotas.

3.3.23. Proceder a coger una placa fija.
3.3.24. Colocar el cubre objetos sobre la muestra y proceder a observar en el laboratorio.
(10x, 40x, 100x)
3.3.25. Registrar las observaciones.
 UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE INGENIERÍA QUIMICA
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

4. DATOS
4.1 Datos Experimentales
Tabla 4.1.1. Observaciones.
Muestra Observación
Pequeñas hileras dentro de la
Yogurt 100x muestra, que eran los
estreptococos.
Se veía el pedazo de muestra
4x con unas pequeñas celdas,
alargadas poligonales.
Las celdas se veían más grandes,
Cebolla 10x y con una forma hexagonal, con
un núcleo pequeño en un lateral
Pequeños puntos dentro de las
40x celdas eran los núcleos.

Celdas muy pequeñas que

4x estaban unidas entre sí.

Se agrando el tamaño de celdas,

Corcho 10x y sus líneas de unión eran
curvas.
Solo se observó la línea curva de
40x la celda.

Se observaron coágulos de color

4x rojo y amarillos.

Placa fija Solo se observaron coágulos de

10x color rojo.
(Intestino)
Se observó toda la muestra de
40x color rojo.

A la letra e, se la observó como

Letra e 4x si estuviera frente a un espejo.

Fuente: Universidad Central del Ecuador-Centro de Biología-Laboratorio de Biología

5. DISCUSIÓN

El método utilizado para la identificación de células con su respectiva estructura fue el

adecuado, siendo este método el cualitativo. Ya que mediante este método se logró
diferenciar las células eucariotas tanto animales como vegetales y posteriormente de las
procariotas. Durante la práctica se presentaron errores aleatorios, siendo estos la mala
preparación de las muestras a determinar, que dificultaron la observación, en especial
cuando se utilizaba el lente objetivo 100X, ya que, para usar este lente, a la muestra debía
ser aplicada un aceite especial. Para una mejor obtención de datos, es recomendable
 UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE INGENIERÍA QUIMICA
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

trabajar primero con el lente objetivo de menor aumento, y posteriormente subir el

aumento hasta lograr distinguir sus estructuras.

6. CONCLUSIONES
6.1. Se conoció y se identificó las partes de un microscopio compuesto y sus funciones a
través de un sin número de partes mecánicas que conlleva el mismo, verificando así que
hay partes muy puntuales y necesarias conocer y saber manejarlas, para poder llevar a
cabo una buena observación a través del microscopio, así como es la iluminación, el
sistema óptico o la resolución entre los más importantes, los mismos que deben ser
manejados adecuadamente para la nitidez de la imagen o claridad de la misma.
6.2. Se adquirió habilidades en la utilización eficiente del microscopio, a través de la
observación de diferentes muestras con diferentes lentes ópticos, los mismos que
determinaron ciertas características específicas como color y formas para el
reconocimiento de las células tanto eucariotas como procariotas, las mismas que
dependieron del aumento y capacidad del microscopio para poder visualizarlas y
reconocerlas.
6.3. Se conoció el manejo y uso del microscopio, con el fin de adquirir experiencia para
así poder reconocer fácilmente células procariotas o eucariotas, así como también conocer
la capacidad máxima de aumento de un microscopio verificando de esta manera su poder
de resolución a través de la observación y reconocimiento inmediato de características
definidas que dependió de la capacidad del aumento del microscopio en cuanto se refiere
a la lejanía o cercanía de lo visible ante el ojo humano.
6.4. Se observó y se reconoció en el microscopio células eucariotas y procariotas, las
mismas que involucraron un sin número de peculiaridades para poder reconocerlas e
identificarlas la una con la otra, dentro de las cuales se encuentra la estructura así como
el tamaño de las partículas observadas, que dependieron únicamente del poder de
resolución del sistema óptico para poder ser observadas minuciosamente y muy de cerca.

7. RECOMENDACIONES
7.1. Al momento de preparar la muestra de la epidermis de la cebolla es necesario estirarla
evitando pliegues y teñirla con una cantidad apropiada evitando la acumulación del tinte,
esto con el fin de apreciar de mejor manera la estructura hexagonal de las células con sus
núcleos.
7.2. Si realizó el enfoque de manera correcta con el objetivo anterior, al colocar el
siguiente objetivo de mayor aumento la imagen solo se debe enfocar girando únicamente
el tornillo micrómetro, nunca se debe utilizar el tornillo macrométrico con los objetivos
de mayor aumento, pues al estar éste muy cerca de la placa, se corre el riesgo de partirla.
7.3. Para una mejor observación celular, es recomendable trabajar con muestras que
estén frescas, es decir que no tengan un lapso de tiempo en espera.
7.4. Limpiar adecuadamente cada uno de los lentes ópticos para futuras
experimentaciones sobre todo el lente de 10x ya que estar al contacto directo con la
muestra este puede contaminar el resto de nuestro y la observación no se podrá llevar a
cabo.
 UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE INGENIERÍA QUIMICA
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

8. CUESTIONARIO
8.1. ¿Qué tipo de microscopio utilizó y cuál es el valor del lente o lentes oculares?
En el laboratorio se utilizó un microscopio binocular óptico, estos están preparados para
observar imágenes bidimensionales, por lo tanto, es necesario preparar la muestra en un
portaobjetos y un cubreobjetos para poder observarla adecuadamente, y el valor de sus
lentes oculares es de 10X.

8.2. Reporte la Apertura numérica del objetivo (A.N), de cada lente objetivo y el aumento
total observado en cada muestra.
La apertura numérica es de 0,10, y sabemos que a mayor apertura numérica tenemos
mayor poder de resolución.

𝐿𝑒𝑛𝑡𝑒 𝑑𝑒 𝐴𝑢𝑚𝑒𝑛𝑡𝑜 = 𝐿𝑒𝑛𝑡𝑒 𝑂𝑐𝑢𝑙𝑎𝑟 ∗ 𝐿𝑒𝑛𝑡𝑒 𝑂𝑏𝑗𝑒𝑡𝑖𝑣𝑜 (1)

𝐿𝑒𝑛𝑡𝑒 𝑑𝑒 𝐴𝑢𝑚𝑒𝑛𝑡𝑜 4𝑋 = 10𝑋 ∗ 4𝑋

𝐿𝑒𝑛𝑡𝑒 𝑑𝑒 𝐴𝑢𝑚𝑒𝑛𝑡𝑜 4𝑋 = 40𝑋
Aumenta 40 veces respecto a la imagen real de la muestra.

𝐿𝑒𝑛𝑡𝑒 𝑑𝑒 𝐴𝑢𝑚𝑒𝑛𝑡𝑜 10𝑋 = 10𝑋 ∗ 10𝑋

𝐿𝑒𝑛𝑡𝑒 𝑑𝑒 𝐴𝑢𝑚𝑒𝑛𝑡𝑜 10𝑋 = 100𝑋
Aumenta 100 veces respecto a la imagen real de la muestra.

𝐿𝑒𝑛𝑡𝑒 𝑑𝑒 𝐴𝑢𝑚𝑒𝑛𝑡𝑜 40𝑋 = 10𝑋 ∗ 0𝑋

𝐿𝑒𝑛𝑡𝑒 𝑑𝑒 𝐴𝑢𝑚𝑒𝑛𝑡𝑜 40𝑋 = 400𝑋
Aumenta 400 veces respecto a la imagen real de la muestra.

8.3. ¿Si no puede observar el campo óptico a qué puede deberse?

Puede deberse a que el diafragma este cerrado y la luz no pase así que no se va a enfocar
el preparado, también puede ser que la muestra está mal preparada o que los lentes de
microscopio estén sucios.

8.4. Después del primer enfoque, ¿qué debe hacer para cambiar el objetivo y obtener una
observación precisa?
Primero procedemos a realizar el enfoque grueso, moviendo el tornillo macrométrico
lentamente vamos separando la placa del objetivo, se verá la muestra de forma más o
menos nítida; en este momento dejamos de mover el tornillo macrométrico y pasamos a
mover el tornillo micrométrico para ajustar de forma más precisa el enfoque (enfoque
fino).

8.5. ¿Por qué es conveniente iniciar la observación con el objetivo de menor poder?
Porque necesitamos ubicar de forma amplia lo que vamos a observar, es para ubicar la
muestra o enfocarla y una vez ubicado parte de la muestra que nos interesa vamos
aumentando los objetivos.
 UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE INGENIERÍA QUIMICA
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

9. ANEXOS
9.1. Gráfico o fotografía de microscopio utilizado (Ver Anexo 1)
9.2. Gráficos de muestras observadas (Ver Anexo 2)
9.3. Placas de las muestras realizadas (Ver Anexo 3)
 ANEXO 1
9.1. Gráfico o fotografía de microscopio utilizado
Figura 9.1-1
Microscopio

Oculares

Revólver Brazo

Objetivos
Platina
Pinzas
Tornillo
Macrométrico

Condensador
Tornillo
Micrométrico

Base

Fuente: Universidad Central del Ecuador-Centro de Biología-Laboratorio de Biología

Nombres Fecha
Universidad Central del Ecuador
DIB Gabriela Alvarado 08/05/2018 Facultad de Ingeniería Química
Carrera de Ingeniería Química
REV Emerson Vizuete 17/05/2018

TEMA Microscopía LAM 1

 ANEXO 2

9.2. Gráficos de muestras observadas

Figura 9.2-1 Figura 9.2-2 Figura 9.2-3
Yogurt (100X) Cebolla con Azul de Cebolla con Lugol(40X)
Metileno (40X)

Fuente: Universidad Central del Fuente: Universidad Central del Fuente: Universidad Central del
Ecuador-Centro de Biología-Laboratorio Ecuador-Centro de Biología-Laboratorio Ecuador-Centro de Biología-Laboratorio
de Biología de Biología de Biología

Figura 9.2-4 Figura 9.2-5 Figura 9.2-6

Corcho (40x) Placa Fija – Intestino Letra e (4x)
(4X)

Fuente: Universidad Central del Fuente: Universidad Central del Fuente: Universidad Central del
Ecuador-Centro de Biología-Laboratorio Ecuador-Centro de Biología-Laboratorio Ecuador-Centro de Biología-Laboratorio
de Biología de Biología de Biología

Nombres Fecha
Universidad Central del Ecuador
DIB Gabriela Alvarado 08/05/2018 Facultad de Ingeniería Química
Carrera de Ingeniería Química
REV Emerson Vizuete 17/05/2018

TEMA Microscopía LAM 2

 ANEXO 3
9.3. Placas de las muestras realizadas

Figura 9.1-3
Placas Realizadas

Fuente: Universidad Central del Ecuador-Centro de Biología-Laboratorio de Biología

1. Placa de yogurt
2. Placa de corcho Nombres Fecha
3. Placa de cebolla con Lugol Universidad Central del Ecuador
4. Placa de cebolla con azul DIB Gabriela Alvarado 08/05/2018 Facultad de Ingeniería Química
Carrera de Ingeniería Química
de metileno REV Emerson Vizuete 17/05/2018
5. Placa fija de intestino
6. Placa con la letra e TEMA Microscopía LAM 3