HEMOLEUCOGRAMA

DEFINITIE
Hemograma este un test screening de baza, fiind unul din cele mai frecvent cerute teste
de laborator, reprezentand adesea primul pas in stabilirea statusului hematologic si
diagnosticul diverselor afectiuni hematologice si nehematologice. Cuantificarea
parametrilor hematologici asociata uneori cu examinarea frotiului de sange aduce
informatii pretioase, orientand in continuare spre efectuarea altor teste specifice.

Hemoleucograma completa este un test care poate furniza diagnostice pentru

numeroase boli. Rezultatele pot sa reflecte probleme cu volumul sangelui (deshidratare)
sau pierderi de sange. Poate deasemenea sa indice disfunctionalitati in producerea,
ciclul de viata si rata distrugerii celulelor de sange, precum si infectii acute sau cronice
si alergii.

Celulele rosii (RBC) transporta hemoglobina (HGB) care in schimb transporta oxigenul.
Cantitatea de oxigen receptionata de tesuturi depinde de numarul si functionarea
celulelor rosii si hemoglobinei. Valorile MCV, MCH si MCHC reflecta marimea si
concentratia de hemoglobina a celulelor si sunt folosite in diagnosticarea diferitelor tipuri
de anemie.

Celulele albe (WBC) sunt mediatori ai inflamatiilor si ale raspunsului imun. Exista
diferite tipuri de celule albe care in mod normal apar in sange:

 Neutrofile
 Monocite
 Eozinofile
 Bazofile
 Limfocite

Hemoleucograma completa este o analiza care masoara urmatoarele cantitati:

 Numarul de globule rosii din sange - eritrocite (RBC)

 Numarul de globule albe din sange - leucocite (WBC)
 Cantitatea totala de hemoglobina din sange (HGB)
 Procentul de globule rosii (hematocrit) (HCT)
 Indici eritrocitari: volumul eritrocitar mediu (VEM), hemogoblina eritrocitara medie
(HEM), concentratia medie de hemoglobina (CHEM) si largimea distributie
eritrocitare (RDW)
 Media volumului globulelor (MCV) - marime globulelor rosii
 Media globulara a hemoglobinei (MCH)
 Concentratia medie a hemoglobinei (MCHC)
 Numarul de trombocite (PLT) si indici trombocitari: volumul trombocitar mediu
(VTM) si largimea distributiei trombocitare (PDW)
  Forma leucocitara

Pregatire pacient
 Hemograma se poate recolta à jeun (pe nemancate) sau postprandial (trebuie
totusi evitate mesele bogate in lipide care pot interfera cu anumiti parametri ai
hemogramei).

 Sexul, varsta pacientului, precum si anumite conditii cum ar fi: starea de soc,
varsaturi incoercibile, administrarea masiva de lichide i.v. etc., care pot duce la
deshidratarea, respectiv hiperhidratarea pacientului, precum si anumite
tratamente urmate de pacient trebuie comunicate laboratorului.

 Este de preferat evitarea pe cat posibil a stresului in momentul recoltarii.

 In cazul monitorizarii regulate (zilnic sau la doua zile) a anumitor parametri,

proba de sange pentru efectuarea hemogramei trebuie obtinuta in acelasi
moment al zilei (datorita fluctuatiilor fiziologice circadiene ale unor parametri).

Tehnica de recoltare

a. manual
b. semi-automat/automat (analizoare de hematologie)

A. MANUAL
 Sange capilar / venos recoltat pe anticoagulant
! Respectarea tehnicilor de recoltare si identificare a probelor

Parametri determinati :

1.nr. eritrocite: Pipeta Potain, lichid de dilutie Hayem, camera de numarare

Burker-Turck, M.O.V.N. :4-5 mil/mmc !!!Risc mare de eroare
2.nr. leucocite :Pipeta Potain,lichid de dilutie, camera de numarare Burker-
Turck,M.O.V.N. : 4000-10000/mmc
3.nr. trombocite :Pipeta Potain,lichid de dilutie, camera de numarare Burker-
Turck, M.O.V.N.150.000-400.000/mmc
4.hemoglobina (Hb):Metoda cu cianmethemoglobina, citire la spectrofotometru
V.N.: 12-16g/dl femei, 13-18g/dl barbate
5.hematocrit(Ht)-Inaltimea coloanei de eritrocite exprimata in % fata de inaltimea
coloanei de sange total -volumul ocupat de eritrocite in 100 ml sange total
6.indici eritrocitari:- volum eritrocitar mediu (VEM)
(Htx10)/ nr. EritrociteV.N.:80-95 fl
- concentratia eritrocitara medie in hemoglobina(CHEM)
(Hgx100)/Ht
V.N.:32-36g/dl
- continutul eritrocitar mediu in hemoglobina (HEM)
(Hgx10)/nr.eritrocite
V.N.:26-32pg
7. frotiu sanguine-formula leucocitara
(determinare semi-cantitativa procentuala a subclaselor de leucocite)
 Neutrofile
 Limfocite
 Eozinofile
 monocite
- morfologia celulara
- orientare asupra nr. de trombocite
! Atentie la intinderea frotiului si la coloratie

Avantaje:

-Destinate determinarii unui nr.variabil de parametri hematologici.

-Asigura numararea rapida, cu efectuarea automata a tuturor operatiilor, inclusiv
autocontrolul si curatarea resturilor de sange de pe tubul de prelevare
-curatarea automata a circuitelor
.-usor de folosit
-acuratete si reproductibilitate
- permit programe de control de calitate
- arhivarea datelor pt un nr. variabil de probe

Parametri masurati:
1.WBC= nr. de leucocite
2.RBC= nr. de eritrocite
3.HGB= concentratia de hemoglobina Hb
4.MCV= volum eritrocitar mediu VEM
5.MCH= continutul mediu in hemoglobina HEM
6.MCHC=concentratia eritrocitqara medie in hemoglobina CHEM
7.PLT= nr. trombocite
8.LY%= procent limfocite
9.MO%= procent monocite
10.GR%=procent granulocite
11.EO%= procent eozinofile
12.BA%=procent bazofile
13.LY=nr. limfocite
14.MO=nr.monocite
15. GR= nr. granulocite
16. EO=nr.eozinofile
17.BA=nr.bazofile
18. RDW=intevalul de distributie a eritrocitelor dupa marime
19.PCT=plachetocrit
20.MPV=volum trombocitar mediu
21.PDW= intevalul de distributie a trombocitelor dupa marime
22.Reticulocite

Specimen recoltat, recipient si cantitate recoltata:

– sange venos recoltat pe anticoagulant: EDTA tripotassium/dipotasium/disodium
(vacutainer cu capac mov/roz – K3 EDTA);

- la copii mici se poate recolta sange capilar din deget/calcai pe heparina (microtainer).

- se amesteca continutul prin inversiunea usoara a tubului de cca. 10 ori.

- tubul trebuie sa fie umplut cel putin trei sferturi pentru ca raportul sange/anticoagulant
sa fie optim (concentratia recomandata de EDTA este de 1.2 – 2.0 mg/mL de sange).

!!!Precautii:

 sangele capilar este preferat pentru efectuarea frotiului sanguin

necesar evaluarii morfologiei celulare
 omogenizare a tubului , pentru evitarea formarii de microcheaguri
 in caz de recoltare a sangelui venos, nu se recolteaza din vena prin
care se administreaza medicamente
 risc de infectie la locul punctiei in cazul pacientilor cu imunodepresie
 evitarea formarii de hematoame la locul punctiei venoase
 utilizarea corecta a garoului
 identificarea corecta a probei
 respectarea volumelor de recoltat
 intervalul de timp intre recoltare si determinare
 Cauze de respingere a probei

 tub incorect;
 specimen coagulat;
 specimen hemolizat;
 cantitate insuficienta.

Prelucrare necesara dupa recoltare – daca proba nu este trimisa imediat

la laborator trebuie refrigerata.
Stabilitate proba - 36-48 ore la temperatura camerei (18-26°C) sau la frigider (2–
8°C) – pentru determinarea hemoglobinei si numaratorile de celule. Este recomandat ca
probele sa fie analizate in primele 6 ore de la recoltare. Nu se recomanda depasirea
acestui interval pentru determinarea indicilor eritrocitari si hematocritului. Daca proba a
fost refrigerata, trebuie echilibrata la temperatura camerei inainte de a fi analizata.
Metoda de determinare – analizor automat pe principiul citometriei in flux cu
fluorescenta utilizand LASER semiconductor si focusare hidrodinamica.

Interpretarea rezultatelor

Valori normale

 Eritrocite RBC (variaza cu altitudinea):

o Barbati: 4.7 - 6.1 milioane celule/microlitru
o Femei: 4.2 - 5.4 milioane celule/microlitru
 Leucocite WBC: 4,500 - 10,000 celule/mcL
 Hematocrit HCT (variaza cu altitudinea):
o Barbati: 40.7 - 50.3 %
o Femei: 36.1 - 44.3 %
 Hemoglobina HGB (variaza cu altitudinea):
o Barbati: 13.8 - 17.2 g/dl
o Femei: 12.1 - 15.1 g/dl
 MCV: 80 - 95 femtolitru
 MCH: 27 - 31 pg/celula
 MCHC: 32 - 36 g/dl

Ce indica valorile anormale ?

Un numar mare de celule rosii (RBC) poate indica:

  Presiune mica de oxigen in sange
 Boli de inima congenitale
 Fibroza pulmonara
 Policitemia vera
 Dezhidratare (ca la o diaree puternica)
 Afectiuni renale

Un numar scazut de celule rosii (RBC) indica:

 Pierderi de sange
 Anemie (de diferite tipuri)
 Hemoragie
 Distrugerea maduvei osoase (de exemplu de la radiatii, toxine, fibroze, tumori)
 Deficienta eritropoietinei (efect secundar al afectiunilor de rinichi)
 Hemoliza (distrugerea globulelor rosii)
 Leucemie
 Malnutritie (deficiente de fier, folati, vitamina B12, vitamina B6)

Numarul scazut de celule albe (WBC) indica:

 Distrugerea maduvei osoase (de exemplu de la infectii, fibroze, tumori)

 Prezenta substantelor cito-toxice
 Colagenoze autoimune - boli vasculare (cum e lupus eritematos)
 Boli ale ficatului sau splinei
 Expunerea la radiatii

WBC crescut (leucocitoza) poate sa indice:

 Infectii
 Inflamatii (artrita reumatoida sau alergii)
 Leucemie
 Stres fizic sau emotional

Valoarea scazuta a hematocritului (HCT) indica:

 Anemii de diferite tipuri

 Hemoragii
 Distrugerea maduvei osoase (de exemplu de la radiatii, toxine, fibroze, tumori
 Hemoliza (distrugerea globulelor rosii) ca reactie la transfuzie
 Leucemie
 Malnutritie sau deficiente nutritionale
 Mielom multiplu
 Artrite reumatoide

Valoarea crescuta a hematocritului (HCT) indica:

  Dezhidratare
 Policitemia vera
 Oxigenare defectuoasa (fumat, boli de inima congenitale, altitudine mare)

Valoarea scazuta a hemoglobinei (HGB):

 Anemii de diferite tipuri

 Hemoragii

Cresterea hemoglobinei apare in eritrocitoza/policitemie.

Parametru Valori normale UM

F 0-1 ani 7-17.1
WBC 10*3/µl
B 0-1 ani 7-17.0
0.3 ani 3.7-5.3.0
RBC 10*6/µl
3-9 ani 3.9-5.1
0-1 ani 16-25
HGB 1-3 ani 10-15 g/dl

1-3 ani 35-43

HCT %
3-12 ani 31-43
F 1-3 ani 229-553
PLT 10*3/µl
B 1-3 ani 217-497
1-3 ani 25-31
MCH pg
3-16 ani 22-34
0.2-2.5 luni 83-121
MCV fl
3-36 luni 73-101
8-36 luni 26.34
MCHC g/dl
3-100 ani 32-36
NEUTROPHILS% 55-70 %
0-3 ani 0-8
NN %
3-16 ani 3-6
0-3 ani 17-16
NS %
3-16 ani 25-60
0-3 ani 1-5
EOZINOFILE% %
3-16 ani1-5
BAZOFILE% 0-1 %
LIMFOCITE% 0-3 ani 20-70 %
 3-16 ani 25-55
0-2 ani 1-12
MONOCITE% %
3-16 ani 1-8
PLASMOCITE 1-3 %
RETICULOCITE 5-15 %o
SIDEROCITE 0-3 %o
<10% din eritr.
Corpi Heinz
normale
Punctuatii bazofile 0-4 %o
FAL INDEX FAL=174
Vol sg 62-68 ml/Kg
10^3
BAZOFILE# 0-0.1
/uL
10^3
EOZINOFILE# 0.08-0.6
/uL
10^3
MONOCITE# 0.1-1.2
/uL
10^3
LIMFOCITE# 1.5-4.0
/uL
10^3
NEUTROPHILS# 2.5-7.0
/uL
PDW
P-LCR
PCT
RDW-SD
RDW-CV
OBSERVATII
MIELOCITE
METAMIELOCITE

HEMOGLOBINA :reprezinta componentul principal al eritrocitelor (95% din proteinele

citoplasmatice eritrocitare) si serveste ca vehicul pentru transportul O2 si CO2.
Metoda de determinare – Hb este determinata automat prin metoda fotometrica in
urma conversiei in SLS-Hb cu ajutorul unui surfactant Sodium Lauryl Sulfate.
LEUCOCITELE se impart in doua grupe principale: granulocite si a-/non-granulocite.
Granulocitele sunt denumite astfel datorita prezentei in citoplasma de granulatii distincte
si se identifica trei tipuri de granulocite in functie de afinitatile de colorare pe frotiul de
sange colorat Wright: neutrofile, eozinofile si bazofile.

Metoda de determinare – leucocitele sunt determinate de analizorul automat (dupa ce

hematiile sunt lizate, iar leucocitele sunt colorate cu o substanta fluorescenta cu
afinitate pentru acizii nucleici) prin metoda de citometrie in flux cu fluorescenta utilizand
LASER semiconductor

ERITROCITE reprezinta testul de baza pentru evaluarea eritropoiezei. Eritrocitele sunt

investigate in continuare prin masurarea concentratiei de hemoglobina si a
hematocritului, iar pe baza lor analizorul calculeaza indicii eritrocitari: VEM, HEM,
CHEM si RDW, care caracterizeaza din punct de vedere calitativ populatia eritrocitara.

Metoda de determinare – eritrocitele sunt numarate de analizorul automat in timpul

trecerii acestora printr-un orificiu prin care sunt dirijate intr-un singur rand prin metoda
de focusare hidrodinamica.

HEMATOCRITUL (VOLUMUL PACHETULUI DE CELULE) - masoara raportul dintre

volumul ocupat de eritrocite si volumul sanguin total.
Metoda de determinare – analizorul automat calculeaza hematocritul prin
determinarea numarului de eritrocite/L de sange si masurarea amplitudinii impulsurilor
in eritrocite prin metoda luminii dispersate

INDICII ERITROCITARI-Evaluarea eritrocitelor din punct de vedere al volumului si

continutului in hemoglobina se realizeaza prin masurarea sau calcularea urmatorilor
parametri:
Metoda de determinare – VEM este calculat dupa urmatoarea formula:

Hct (%) x 10

VEM = ——————
Nr.Er.(x106/?L)
Prin metoda automata VEM este determinat prin impartirea sumei volumelor eritrocitare
la numarul de eritrocite.

NUMARUL DE TROMBOCITE (NUMARUL DE PLACHETE)-Trombocitele sunt

fragmente citoplasmatice anucleate bogate in granule, rotund-ovalare, plate, in forma
de disc, cu diametrul de 2-4. Trombocitele sunt implicate in hemostaza si in initierea
proceselor de reparare tisulara si vasoconstrictie dupa injuria vasculara si in timpul
proceselor inflamatorii, aderarea si agregarea plachetara avand ca rezultat formarea
trombusului plachetar care astupa rupturile din peretii vaselor mici.
Metoda de determinare – trombocitele sunt numarate de analizorul automat prin
aceeasi metoda ca eritrocitele, in timpul directionarii lor intr-un singur rand printr-un
orificiu, prin metoda de focusare hidrodinamica.
O estimare a numarului de trombocite pe un frotiu de sange bine efectuat constituie un
control valoros al numarului de trombocite determinat prin metoda automata. In general,
cand frotiul este examinat cu obiectivul de 100x fiecare trombocit observat/camp
reprezinta ~10000 Tr x106/L. In consecinta, un frotiu normal trebuie sa prezinte in medie
cel putin 14 Tr/camp.