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Crecimiento y

metabolismo de las
bacterias
Mg. Ing. Victor Chávez Centeno
Tamaño

Célula animal Células Bacterianas


1 micra

10 micras
Metabolismo bacteriano
Metabolismo: conjunto de reacciones químicas que tiene
lugar en la célula.

Tres funciones específicas:


- obtener energía química del entorno, almacenarla, para
utilizar luego en diferentes funciones celulares,
- convertir los nutrientes exógenos en unidades
precursoras de los componentes macromoleculares de
la célula bacteriana,
- formar y degradar moléculas necesarias para funciones
celulares específicas, como por ejemplo, movilidad y
captación de nutrientes.
Metabolismo bacteriano
Secuencias de reacciones catalizadas
enzimáticamente, y se divide en anabolismo y
catabolismo.
Anabolismo: proceso por el cual la célula
bacteriana sintetiza sus propios componentes,
también se denomina biosíntesis.

Catabolismo: conjunto de reacciones


degradativas de los nutrientes para obtener
energía o para convertirlos en unidades
precursoras de biosíntesis.
Metabolismo bacteriano
• La energía es obtenida de reacciones de oxido-
reducción
– Transferencia de electrones o de átomos
enteros de hidrógeno, por lo que se conocen
también con el nombre de reacciones de
deshidrogenación.

• En las bacterias de interés médico los sistemas


de oxido-reducción que transforman la energía
química de los nutrientes en una forma
biológicamente útil, incluyen la fermentación y
la respiración.
Aerobiosis vs anaerobiosis

• Aerobios obligados
– Deben vivir en ambientes donde el oxígeno está
presente
• Anaerobios obligados
– Deben vivir donde no hay oxígeno.
– Obtienen su energía por procesos de
fermentación.
• Anaerobios facultativos
– Pueden vivir con o sin oxígeno
Nutrición Bacteriana
Desde el punto de vista biosintetico:
• Litotrofas: que sólo requieren sustancias
inorgánicas sencillas (SH2 S0, NH3, NO2-, Fe, etc.)
• Organotrofas: requieren compuestos orgánicos
(hidratos de carbono, hidrocarburos, lípidos,
proteínas, alcoholes...).
• Autotrofas: crecen sintetizando sus materiales a
partir de sustancias inorgánicas sencillas. El
concepto de autotrofía se limita a la capacidad de
utilizar una fuente inorgánica de carbono (CO2).
• Heterotrofas: su fuente de carbono es orgánica (si
bien otros elementos distintos del C pueden ser
captados en forma inorgánica).
Nutrición Bacteriana
Fotoautótrofos:
utilizan la energía solar y producen azúcares.
Quimoautótrofos:
necesitan sólo dióxido de carbono para obtener
energía de elementos inorgánicos.
Fotoheterótrofos:
son únicos y necesitan la luz solar para producir
energía, a partir de compuestos orgánicos.
Quimoheterótrofos:
utilizan moléculas orgánicas para producir su energía
necesaria.
Nutrientes
• Agua
• CO2
– Como fuente de carbono para reducirlo (f.a) u
oxidarlo (q.a.l.)
– Como aceptor de electrones (metanogénicas)
– Reacciones de carboxilación
• Macronutrientes
– C, H, O, N, P, S, K, Mg (reacciones enzimáticas)
• Micronutrientes o elementos traza
– Co, Cu, Zn, Mo
Reproducción bacteriana

• Fisión binaria
• Formación de nuevo ADN casi continuamente
• Intercambio genético:
– Transformación
• Genes tomados del ambiente que les rodea
– Conjugación
• Genes transferidos de célula a célula (pili)
– Transducción
• Genes transferidos por virus (fagos)
Crecimiento Bacteriano

• Atmósfera:
– Aeróbica, anaeróbica o microaerofílica
– Anaerobios facultativos u obligados
• Temperatura:
– 37 grados C usualmente
• Tiempo de incubación:
– La mayoría de bacterias clínicamente importantes crece en
24-48 horas
– Excepciones: las micobacterias necesitan meses para
crecer y otras bacterias no pueden ser cultivadas.
Crecimiento bacteriano

• Cuando existen buenas condiciones de


crecimiento, una bacteria crece ligeramente
en tamaño o en longitud.
• Una nueva pared celular se forma por el
centro formando dos células hijas,
conteniendo cada una, el mismo material
genético que la célula madre.
• Si el ambiente es óptimo, las dos células
hijas pueden dividirse en cuatro en 20
minutos.
Fases del Crecimiento bacteriano
• Fase LAG: El crecimiento es lento al principio,
mientras las bacterias se adaptan a los nutrientes que
están en su nuevo ambiente.
• Fase LOG: Una vez la maquinaria metabólica se ha
disparado, las bacterias se multiplican
exponencialmente, doblando su número cada pocos
minutos.
• Fase ESTACIONARIA: Al haber más y más m.o.
compitiendo por el alimento y los nutrientes, el
crecimiento acelerado se detiene y el número de
bacterias se estabiliza.
• Fase de MUERTE: Se forman productos tóxicos de
desecho, la comida se agota y las bacterias
comienzan a morir.
Crecimiento bacteriano
• REQUERIMIENTO PARA EL CRECIMIENTO
BACTERIANO: TEMPERATURA, OXÍGENO Y
NUTRIENTES.
TEMPERATURA
• Psicrófilas: crecimiento inferior a 20° C.
• Mesófilas: crecen entre 20 a 45° C.
• Termófilas: temperatura óptima: 45 a 60° C.
• Estenotermófilas: por encima de 60° C.
OXIGENO.
• Se clasifican en:
• Aeróbicas, anaeróbicas o microaerofílicas.
• Aeróbicas: desarrollan en presencia de oxígeno
atmosférico.
• Anaerobias: no emplean oxígeno; anaerobias
estrictas, atmósfera de oxígeno causan su muerte
(hay anaerobios en la boca).
• Anaerobios facultativos: como E. coli, crecen en
condiciones aeróbicas o anaeróbicas.
• Microaerofílos: requieren reducción presión
Oxigeno.
NUTRIENTES
• Algunas bacterias desarrollan en medios sencillos
formados por: sales, cloruro de amonio y glicerina.

• Otras son exigentes: tienen requerimientos


complicados para su desarrollo.

• Muchos no desarrollan en un medio definido: que


contengan sangre, suero, extracto de levadura,
peptona.
• Las rickettsias y las clamidias intracelulares
obligadas, no desarrollan en m. artificiales.
PRODUCCIÓN DE ENERGÍA
• Hay tres procesos fundamentales para la
producción de energía: respiración aeróbica,
respiración anaeróbica y fermentación, difieren
sobre todo por la molécula o moléculas que
sirven como aceptor terminal de electrones.

•Las bacterias metabolizan una cantidad muy


amplia de sustratos, que alimentan los ciclos
metabólicos en diversos sitios. Así hay bacterias
que producen energía a partir de ácidos.
RESPIRACIÓN AERÓBICA
• Deben contar con los ciclos metabólicos para
transformar estas sustancias en productos que
puedan metabolizarse aún más mediante vías
metabólicas centrales, como la vía de EMBDEN-
MEYERHOF (glucólisis) o el CICLO DE ACIDO
TRICARBOXÍLICO (ciclo llamado también
CICLO DE KREBS).

• Los aerobios y los anaerobios facultativos


metabolizan la glucosa en forma aeróbica
mediante la respiración aeróbica
RESPIRACION ANAEROBICA
• Algunos anaeróbicos y anaerobios facultativos
metabolizan los azúcares por vía anaeróbica a
través de la glucólisis y el ciclo de Krebs.

• Algunos microorganismos anaeróbicos y facultativos


emplean nitratos como aceptores finales de
electrones en condiciones anaeróbicas al
transformarlos en nitritos.

• Se utiliza la prueba de REDUCCION DE


NITRATOS, para determinar esta propiedad y así
ayudar a la identificación de microorganismo.
FERMENTACION
• Ocurre en microorganismos facultativos y en
algunos anaeróbicos que crecen en ausencia de
oxígeno atmosférico.

• Su característica es que en ácido orgánico actúa


como aceptor terminal de electrones.

• Algunos anaerobios del género Clostridium,


fermentan aminoácidos y producen sustancias
como cadaverina y putrescina a manera de
productos terminales, olor desagradable.
Procedimiento de la coloración
de Gram
Desarrollada en 1884 por el
médico danés Hans Christian
Gram

Ha sido una herramienta


importante en la taxonomía
bacteriana

Puede aplicarse a cultivos puros de


bacterias, o a muestras clínicas.
Tinción de Gram

Lugol
Cristal
violeta

Decoloración con
Alcohol-acetona

Gram-positivos
púrpura
Contraste
e.g. safranina Gram-negativos
Rojo o rosado
Cocos Gram-positivo Bacilos Gram-positivo

Cocos Gram-negativo Bacilos Gram-negativo


Cocos Gram-positivo Bacilos Gram-positivo
Anaeróbicos Anaeróbicos
Gram-positive
cocci

Cocos Gram-negativo Bacilos Gram-negativo


Anaeróbicos Anaeróbicos
Bacilos Gram-Negativo

• Bacterias Entéricas
– E. coli
– Salmonella
– Shigella
– Yersinia
– Pseudomonas
– Proteus
– Vibrio cholerae
– Klebsiella pneumoniae
Bacilos Gram-Negativo

• BGN fastidiosos
– Bordetella pertussis
– Haemophilus influenzae
– Campylobacter jejuni
– Helicobacter pylori
– Legionella pneumophila
• BGN Anaeróbicos
– Bacteroides fragilis
– Fusobacterium
Cocos Gram-Negativo

• Neisseria gonorrhoeae
– GONOCOCO
• Neisseria meningitidis
– MENINGOCOCO
• Ambos son diplococos
Gram-negativo
intracelulares
Cocos Gram-positivo

• Estafilococos
– Catalasa-positiva
– Cocos Gram-positive en
racimos
• Staphylococcus aureus
– coagulasa-positiva
• Staph. epidermidis
– Y otros estafilococos
coagulasa negativo.
Cocos Gram-Positivo

• Estreptococos
– Catalasa-negative
– Cocos Gram-positivo
cocci en cadenas y
parejas.
• Strep. pyogenes
• Strep. pneumoniae
• Viridans-type streps
• Enterococcus faecalis
Bacilos Gram-Positivo

• Clostridios
– Anaerobios
– C.perfringens
– C. tetani
– C. botulinum
– C. difficile
• Bacillus cereus
– Aerobio
• Listeria monocytogenes
– Anaerobio faculativo
Bacterias que no se tiñen con Gram

• Ocasionalmente son Gram-positivo


• Espiroquetas
• Bacterias intracelulares obligadas
Gram-positivo: (inusuales)

• Micoplasmas
– Organismos más
pequeños de vida libre
– No hay pared celular
– M. pneumonia, M.
genitalium
• Micobacterias
– Bacilos alcohol-ácido
resistentes, se tiñen con
Ziehl-Neelsen
– M. tuberculosis
– M. leprae
– M. avium
Espiroquetas

• Bacterias en espiral
delgadas
• Observables por
microscopía de
contraste de fases o
por coloración de
plata
– Treponema pallidum
– Borrelia burgdorferi
– Leptospira
Bacterias intracelulares obligadas

• Rickettsia
• Coxiella burneti
• Chlamydias
– C. trachomatis
– C. pneumoniae
– C. psittaci
Medios de Cultivo

• solución acuosa (líquida o incorporada a un


coloide en estado de gel) en la que están
presentes todas las sustancias necesarias
para el crecimiento de determinado(s)
microorganismo(s).
• Los medios de cultivo se pueden clasificar,
en primera instancia, en tres grandes tipos:
– Complejos o indefindos
– Sintéticos o definidos
– Semisintéticos
Medios de Cultivo: complejos
• Se desconoce su composición química exacta, ya
que son producto de realizar infusiones y
extractos de materiales naturales complejos.
• Ejemplos:
– Digeridos crudos de extracto de carne
– Digeridos de extracto de levadura
– Digeridos de peptona de carne o de soya
– Digeridos de caseína (de la leche).
• Con ellos se logra un tipo de medio rico
nutricionalmente, aunque indefinido
químicamente.
• Ideales para obtener un buen crecimiento
bacteriano.
• Sin embargo, con ellos no podemos tener un
control nutricional preciso.
Medios de Cultivo: sintéticos
• Se obtienen disolviendo en agua destilada
cantidades concretas de distintas
sustancias químicas puras, orgánicas y/o
inorgánicas.
• La composición concreta de un medio
sintético dependerá de la bacteria que
queramos cultivar
• Un medio definido para una bacteria con
grandes capacidades biosintéticas será
más sencillo que el medio definido de otra
bacteria con menores posibilidades
biosintéticas.
Medios de Cultivo: sintéticos
• Se obtienen disolviendo en agua destilada
cantidades concretas de distintas
sustancias químicas puras, orgánicas y/o
inorgánicas.
• La composición concreta de un medio
sintético dependerá de la bacteria que
queramos cultivar
• Un medio definido para una bacteria con
grandes capacidades biosintéticas será
más sencillo que el medio definido de otra
bacteria con menores posibilidades
biosintéticas.
Medios de Cultivo: semisintéticos

• "mezcla" de los anteriores


• llevan algunas sustancias químicas cuya
naturaleza y cantidad conocemos, junto
con sustancias de naturaleza y
composición indefinidas.
Tipos de Medios de Cultivo

• Líquidos • Selectivos
– permiten seleccionar un tipo
• Sólidos (o unos pocos tipos) de
microorganismos. S
– Origen líquido y – Inhiben el crecimiento de
ciertas bacterias, pero
se agrega un permiten el crecimiento de
otras.
coloide • Diferenciales
– Gelatina – permiten distinguir a simple
vista dos o más tipos de
– Agar-agar: más bacterias en función de su
distinto comportamiento
utilizado respecto de algún nutriente
del medio.
– Sílica gel

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