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INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL
IA
AR
CU
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RO
EFECTO DEL FACTOR DE SEVERIDAD Y TIEMPO DE
ALMACENAMIENTO SOBRE LAS CARACTERÍSTICAS
AG
AGROINDUSTRIAL
TE
TRUJILLO – PERÚ
BI
2017
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S
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
IA
ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE INGENIERÍA
AR
AGROINDUSTRIAL
CU
EFECTO DEL FACTOR DE SEVERIDAD Y TIEMPO DE
ALMACENAMIENTO SOBRE LAS CARACTERÍSTICAS FISICOQUÍMICAS
Y RECUENTO DE HONGOS MESÓFILOS DE PASTA DESAMARGADA DE
PE
TARWI (Lupinus mutabilis sweet) VARIEDAD CRIOLLA
RO
EFFECT OF THE FACTOR OF SEVERITY AND TIME OF STORAGE ON
THE CHARACTERISTIC CHEMICAL PHYSICAL AND RECOUNT OF
FUNGAL MESOPHILIC OF DESALKALOIDIZED PASTE OF ANDEAN
AG
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DEDICATORIA
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A Dios omnipotente por darme la vida e iluminarme y para hacer de mi sueño,
realidad. Y por ser la expresión más sublime y magistral de la creación.
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Para mis queridos padres, fuente de inspiración y respaldo en mis estudios y vida
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cotidiana. Con mucho cariño, el esfuerzo de este trabajo y de toda la vida universitaria,
para ustedes.
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Con inmensa gratitud y cariño para mi esposa Nelly, amiga y compañera fiel, que me
brinda su apoyo incondicional, cariño y comprensión para cumplir esta meta trazada.
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A mis hermanos, quienes fueron mi gran motivación para seguir adelante, por su
constante apoyo para cumplir este sueño.
DE
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AGRADECIMIENTO
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Agradezco principalmente a Dios ya que ha sido Él quien me ha bendecido con unos
padres increíbles, que han sabido inculcarme desde muy pequeño valores, los mismos
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que me han servido para alcanzar las metas propuestas.
PE
A mis hermanos que siempre me apoyaron, y a todas las personas que con sus
consejos me ayudaron a salir adelante.
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A la Universidad Nacional de Trujillo –Sede Huamachuco por permitirme formarme
profesionalmente, así como a todos los profesores que nos transmitieron sus
conocimientos mi reconocimiento más profundo.
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007-2014-FONDECYT.
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RESUMEN
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El objetivo del presente trabajo de investigación fue evaluar el efecto del factor de
severidad (considerado como la combinación de tiempo: 5, 15, 25 min y temperatura
de autoclave: 121ºC) con el posterior tiempo de almacenamiento (hasta 32 días a 16ºC
CU
y HR: 56% aproximadamente) sobre las características fisicoquímicas y recuento de
hongos mesófilos de pasta desamargada de tarwi (Lupinus mutabilis) variedad criolla
PE
con un contenido de sólidos al 24% p/p.
Entre las características fisicoquímicas evaluadas en la pasta de tarwi fueron
contenido de sólidos, pH, acidez titulable, sólidos solubles, índice el TBA,
RO
conductividad eléctrica y azúcares reductores.
La pasta de tarwi desamargada sin tratamiento térmico tuvo un tiempo de vida útil no
mayor de 4 días a condiciones de 16ºC y HR del 56%.
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S
ABSTRACT
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The objective of the present investigation work was to evaluate the effect of the factor
of severity (considered as the combination of time: 5, 15, 25 min and autoclave
temperature: 121ºC) with the later time of storage (up to 32 days to 16ºC and HR: 56%
CU
approximately) on the characteristic chemical physical and recount of fungal mesophilic
of paste andean lupine desalkaloidized (Lupinus mutabilis) creole variety with a content
PE
of solids to 24% p/p.
Among the characteristics chemical physical valuated in the andean lupine paste they
were contained of solids, pH, acidity titulable, soluble solids, index the TBA, electric
RO
conductivity and sugars reducers.
The paste of andean lupine desalkaloidized without thermal treatment not had a time of
useful life bigger than 4 days to conditions of 16ºC and HR of 56%.
AG
An increase of the factors of severity (Log Ro) in the thermal treatment of paste andean
lupine desalkaloidized it causes a descent of the pH, an increase of the acidity titulable,
a bigger oxidation of the fats, an increase of the electric conductivity, an increase of the
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ÍNDICE GENERAL
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Pág.
I
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DEDICATORIA
AGRADECIMIENTO II
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RESUMEN III
I. INTRODUCCIÓN 1
1.1 ANTECEDENTES 1
CU
1.1.1 EL TARWI Y SU COMPOSICIÓN 1
1.1.2 EFECTO DEL TRATAMIENTO TÉRMICO EN LEGUMINOSAS 6
1.1.3 FACTOR DE SEVERIDAD 9
PE
1.1.4 MICROBIOTA DE LAS LEGUMINOSAS 9
1.1.5 LA PASTA DE TARWI Y SU APROVECHAMIENTO RO 10
1.2 JUSTIFICACIÓN 16
V. RECOMENDACIONES
VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 39
46
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VII. ANEXOS
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I.- INTRODUCCIÓN
1.1. ANTECEDENTES
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El tarwi, altramuz, lupín o lupino es una semilla de la familia de las leguminosas
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(legumbre), originaria de América del Sur (Prochile, 2011). El tarwi es una leguminosa
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anual, perteneciente a la familia Fabaceae del género Lupinus. Ésta leguminosa se
cultiva tradicionalmente en los Andes desde los 1,500 msnm (Vinicio, 2010). Dos
culturas antiguas, la egipcia y la andina, hace por lo menos cuatro mil años, fueron las
CU
que por primera vez llegaron a domesticar y utilizar en su alimentación dos especies
de Lupinus: el Lupinus luteos en Egipto y el Lupinus mutabilis en los Andes (Carrillo,
1956).
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El grano de Lupinus mutabilis es rico en proteínas y grasas, con mayor frecuencia, su
RO
contenido proteico es superior al de la soya (Tabla 1) (Palacios y col., 2004). Sus
proteínas y aceites constituyen más de la mitad de su peso, estudios realizados en
más de 300 diferentes genotipos muestran que la proteína varía de 41,0 a 51,0 % y el
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aceite de 14,0 a 24,0 % (Gross y col., 1988). En base al análisis bromatológico, posee
en promedio proteína 35,5 %, aceites 16,9 %, fibra cruda 7,65 %, cenizas 4,15 % y
carbohidratos 35,77 % (Jacobsen y Mujica, 2006). Las globulinas corresponden a la
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(%)
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Tegumento
Cotiledón
Amargo
Semilla
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Ortega y col. (2010) reportan que las semillas de lupino contienen nitrógeno total 7,35
%, carbono 55,95 %, hidrógeno 9,83 % y oxigeno en 21.35 %. La fracción fibrosa de la
semilla está contenida principalmente en el tegumento, representando el 11,03 % de la
semilla y tiene un alto contenido de fibra y carbohidratos.
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El contenido de proteínas en el chocho es tan alto como en los granos de soja. Las
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globulinas corresponden a la mayor fracción proteica, siendo la albúmina la restante.
Las globulinas presentan un amplio punto isoeléctrico entre pH 4–6 con solubilidad
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mínima de nitrógeno entre 10-20 % (Gross y col., 1988).
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presentes en el grano de tarwi son la rafinosa y los α-galactósidos. La Tabla 2 resume
la composición individual de oligosacáridos y el contenido de α-galactósidos en las
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muestras de tarwi de la variedad Inti y Linea 2150. El principal oligosacárido es la
estaquiosa con cerca del 70% del total. El segundo azúcar más importante encontrado
es la rafinosa con 17%, seguido de la sacarosa (10% aproximadamente) y verbascosa
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(6% aproximadamente). El contenido de α-galactósido es aproximadamente 13.5% del
peso seco.
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sangre sino al colon donde son fermentados por bacterias intestinales sacarolíticas,
que utilizan los carbohidratos como fuente de energía; la fermentación de estos
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compuestos por parte de las bacterias conduce a una reacción que resulta en la
producción de gases como el dióxido de carbono, el hidrogeno, el metano, entre otros.
Esta reacción, es la responsable de la flatulencia, del aumento de la motilidad
intestinal, náuseas, contracciones musculares y diarreas. Los oligosacáridos de la
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muestra la comparación de la composición química del tarwi con otras leguminosas.
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Tabla 3. Porcentajes de proteína en varias especies de Lupinus (g/100g)
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Lupinus Proteína (%)
L. mutabilis 39.0 – 52.0
CU
L. angustifolius 33.2 – 35.5
L. hispaniscus 43.9 – 46.9
L. albus 39.2 – 43.3
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Fuente: Ortega y col. (2010)
Humedad 9 8 12 12
Proteina 51.07 40 22 27
Grasa 20.44 18 1.6 42
Fibra 7.35 4 4.3 2
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análisis de los lípidos crudos ha demostrado que los triglicéridos constituyen el 71% de
los lípidos totales, el remanente está compuesto por fosfolípidos (14,9%), esteroles
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libres 5,2%, glicolípidos (3,5%), esteroles y esteres de ceras (0,5%), ácidos grasos
libres (0,4%) y 0,4% de hidrocarbonos y material ceroso no identificado (Glencross,
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2004).
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Tabla 5. Composición química de ácidos grasos en el grano de Lupinus mutabilis
Ácidos %
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Oleico (Omega 9) 40,4
Linoleico (Omega 6) 37,1
Linolénico (Omega 3) 2,9
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Palmítico 13,4
Palmitoleico 0,2
Esteárico 5,7
Mirístico 0,6
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Araquídico 0,2
Behénico 0,2
Cociente Polisat / Satur 2,0
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Fuente: Vinicio (2010)
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Composición de Cómputo de
Patrón de aminoácidos aminoácidos (**)
aminoáciodos
Aminoácidos
* (mg/ g
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proteínas) Lupinus Lupinus Lupinus Lupinus
mutabilis albus mutabilis albus
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Isoleucina 28 40 41 - -
AR
Leucina 66 70 64 - 97
Lisina 58 57 45 98 78
Metionina+cistina 25 23 25 92 -
CU
Fenilalanina+tirosina 63 75 93 - -
Treonina 34 37 33 - 97
PE
Triptófano 11 9 11 82 -
Valina 35 RO 38 37 - -
Histidina 19 - - - -
(**) Se indican sólo los aminoácidos limitantes, en %
Fuente: (*) Morón (2005) y (**) Tapia y col. (2006).
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2012).
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El grano de tarwi también es una valiosa fuente de vitamina B en sus formas como
tiamina (B1), rivoflamina (B2), niacina (B3). En la Tabla 8 se muestra las principales
vitaminas presentes en el Tarwi.
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Tabla 8. Contenido de vitaminas de semillas de tarwi (Lupinus mutabilis)
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Vitaminas (mg/100 g)
B-caroteno 0.09
AR
Tiamina 0.51
Riboflabina 0.42
CU
Niacina 4.10
Fuente: Baldeón (2012)
PE
También es reconocido que en general las leguminosas contienen un importante
componente de isoflavonas, de importancia por su capacidad terapéutica, actuando
RO
como estrogénicas en el balance hormonal en las mujeres, pudiendo combatir la
osteoporosis, además de actuar como importantes fuentes de principios antioxidantes
(Tapia, 2015).
AG
Las pastas a base de leguminosa con alto porcentaje de humedad no son estables y,
por tanto, debe emplearse algún método de procesamiento para preservarlos y lograr
mayores tiempos de almacenamiento (Mulley y col., 1975). Entre las técnicas
CA
producto y que afectan a la calidad sensorial y al valor nutritivo del mismo, como ser la
destrucción de vitaminas, desnaturalización de proteínas, caramelización de azúcares,
BL
Todas las leguminosas tienen una serie de compuestos, además de los que nos
nutren, que son las proteínas, grasas, hidratos de carbono, vitaminas y minerales los
denominados “antinutricionales”. Los factores antinutricionales pueden clasificarse
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como termo estables y termo lábiles; los factores termoestables incluyen: factores
antigénicos, oligosacáridos y aminoácidos no proteicos tóxicos, saponinas,
estrógenos, cianógenos, fitatos, así mismo, entre los factores termolábiles se
encuentran, los inhibidores de proteasas (tripsina y quimotripsina), lectinas,
S
goitrogenos y antivitaminas (Belmar, 2001).
IA
Estos compuestos se consideraban antinutritivos porque interfieren en el
AR
aprovechamiento de algunos componentes nutritivos, como las proteínas, o bien
pueden resultar tóxicos como las lectinas o los alcaloides. Investigaciones al respecto
intentaban eliminarlos completamente, bien por mejora genética clásica o bien
CU
aplicando tratamientos térmicos (por ejemplo, cocción con o sin presión) o
tecnológicos (como germinación o extrusión). Es por ello que estos compuestos, en
PE
dosis bajas, tienen efectos beneficiosos en el organismo. Por eso se les denomina
compuestos no nutritivos (Burbano, 2014).
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Durante el tratamiento térmico las biómoleculas como carbohidratos, proteínas, lípidos
y vitaminas sufren alteraciones en su estructura y composición fisicoquímica. Los
gránulos de almidón no son solubles en agua fría, aunque pueden absorber cierta
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El calor moderado para los ingredientes ricos en proteínas puede ser beneficioso para
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reduce la solubilidad de las mismas en proporción al grado de calentamiento. Además,
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existe susceptibilidad de sus aminoácidos a reacciones de desulfuración,
deshidratación, oxidación y de descomposición. La cistina, es la más sensible al calor,
AR
puede desulfurarse y formar H2S, la cisteína produce dehidroalanina, igualmente
puede existir reacciones de deshidratación de la treonina y la serina, y de oxidación de
la cisteína y metionina (Obregón y col., 1996).
CU
La desnaturalización, que se define como la pérdida de las estructuras secundaria,
PE
terciaria y cuaternario sin hidrólisis del enlace peptídico, es el fenómeno de daño más
frecuente en proteínas; siendo básicamente el rompimiento de enlaces disulfuro, inter
e intramoleculares, de los puentes de hidrógeno, de los hidrófobos y de los iónicos. La
RO
mayoría de las proteínas de tipo globulinas experimentan el proceso de
desnaturalización cuando se calientan por encima de 60–70ºC (Obregón y col., 1996).
AG
En oleaginosas y granos con contenidos altos en grasa, los tratamientos térmicos con
aplicación de presión liberan la grasa encapsulada en las células vegetales haciéndola
más accesible y aumentando el valor energético del producto (Apelt, 1987). El proceso
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degradativo de los lípidos ocurre primero por el consumo de oxígeno hasta que la
concentración de radicales libres alcanza cierto nivel denominado periodo de
inducción. Durante este período no se detecta rancidez hasta que la concentración de
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Por otro lado, los lípidos insaturados se pueden oxidar a hidroperóxidos, peróxidos
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compuestos volátiles y no volátiles. Los productos de descomposición no volátiles se
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forman por oxidación térmica (compuestos hidroxi, alcoxi-sustituidos, epoxi y ceto),
hidrólisis (ácidos grasos libres, mono y diglicéridos) y ciclación (monómeros cíclicos)
AR
(Badui, 2006).
CU
1.1.3 FACTOR DE SEVERIDAD
PE
de severidad (R0 o log R0). La teoría está basada en el factor hidrólisis de
biopolímeros, combinando los efectos de la temperatura, y el tiempo de reacción en un
único parámetro. El factor de severidad es el logaritmo o el área bajo la curva del
RO
procesamiento térmico producto del remplazo de valores de temperatura empleando
en cada unidad de tiempo durante todo el tratamiento térmico. Es de suponer que el
tratamiento térmico afectará la composición de la pasta de tarwi sufriendo cambios en
AG
………………………….. (Ec. 1)
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S
IA
Se ha establecido que las distintas variedades de granos no presentan grandes
diferencias entre sí, respecto a las poblaciones microbianas. Los mohos, las levaduras
AR
y la mayoría de las bacterias mesofílas presentes, son propias de las plantas. En los
granos mayoritariamente hay presencia de Cladosporium, Aspergillus, Fusarium,
Alternaria entre otros. En tanto los contaminantes bacterianos (coliformes,
CU
enterococos, E. coli) son aportados por los pájaros, insectos y roedores, los cuales
están ecológicamente asociados a los granos (Downes, 2001).
PE
La microbiota normal de los granos de cereales comprende mohos (102-104/g),
levaduras y hongos levaduriformes (102-104/g), bacterias aerobias (102-106/g),
RO
coliformes (102-104/g), E. coli (<102 -103/g), actinomicetos (103-106/g) (Downes, 2001).
Se considera que los contaminantes bacterianos como coliformes, enterococos y E.
coli son aportados por los pájaros, insectos y roedores, los cuales están
AG
La palabra pasta es el término que se emplea para designar a la masa que tiene un
porcentaje igual o mayor de sólidos naturales totales al 24% (CODEX STAN 57-1981).
CA
Las materias primas para pastas provenientes de plantas de alto contenido proteíco se
derivan principalmente de la soya, arveja, lupino, quinua, habas y garbanzo, que
TE
La pasta de tarwi es una de las mayores fuentes de proteína de origen vegetal con que
se cuenta actualmente, este hecho se debe a la característica única de los granos de
BL
tarwi en relación con otras leguminosas, teniendo alto contenido de leucina y lisina.
Los granos de esta leguminosa desde el punto de vista alimenticio pueden contribuir
de manera significativa a disminuir el déficit proteico de la población, por ser superior a
BI
las demás leguminosas (fréjol, lenteja, haba, arveja), en cuanto al contenido total y
calidad de la proteína constituye un valioso aporte nutricional cuyo potencial debe
explotarse en mejor forma (Haro y Nieto, 1998).
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RO
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Una utilidad al suero de leche combinado con la leche de tarwi fue propuesto por
Gonzales (2011). Para ello el grano entero desamargado e hinchado fue sometido a
un proceso de licuado en una proporción grano: agua de 1:2. Se formularon tres tipos
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de vaca, 40% de leche de tarwi (50% de grano hinchado con 50% de agua) y 1,48%
de pulpa de tuna tiene mayor aceptabilidad mediante prueba hedónica de escala 1-9
sobre en el color (6,1), sabor (7,0) y olor (6,4). Al parecer la mayor proporción de leche
de vaca genera más aceptabilidad. Trabajos similares como los de Castañeda y col.
S
(2008) así lo corroboran, al realizar 2 mezclas de diferentes concentraciones (YSPT1:
IA
70 % leche en polvo + 30 % de leche de tarwi), (YSPT2: 80 % de leche en polvo + 20
% leche de tarwi). En ella los atributos sensoriales como aroma y sabor no
AR
presentaron diferencia estadística significativa; sin embargo existió mayor preferencia
por los panelistas para la proporción YSPT2 presentando un nivel de agrado
moderado (3,89) para una escala de 1 a 5. Baldeón (2012) propone un flujograma de
CU
procesamiento de yogurt con sustitución parcial de leche de tarwi, el cual se muestra
en la Figura 2.
PE
RO
AG
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CA
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Yobyn-3 (40% de leche de vaca, 3% de leche en polvo, 34% de tarwi, 20% de jalea de
piña, 1% de azúcar, 2% de gelatina alimenticia y agua), se utilizaron cartillas de
expresión facial, donde se expresaron los gestos de agrado y/o desagrado que
mostraron los escolares que consumieron los productos. El producto de mejor
S
aceptación contiene 40% de leche de vaca, 34% de tarwi precocido, 20% de jalea de
IA
piña y 2% de gelatina alimenticia. Según la degustación al 80% de los niños, les
agradó la bebida, mientras que al 50% de los niños, le gustó yobyn-ll y a un 50% de
AR
niños, no les agradó, ni les gusto la bebida.
CU
mermelada de mashua (Tropaeoleum tuberosum) y de leche de chocho (Lupinus
mutabilis) con el propósito de enriquecerlo sin alterar sus características
PE
organolépticas. Se determinó que un 12% de mermelada de mashua y 15% de leche
de chocho (proporción agua:grano hinchado desamargado; 2:1) mejora la
aceptabilidad del producto por parte de los consumidores en características de color,
RO
olor y aspecto sugiriendo su consumo antes de los 17 días debido a que presenta alto
contenido de azúcares los cuales tienden a fermentarse. Asimismo se observó que
una mayor dosificación de mermelada de mashua merma la aceptabilidad
AG
del Perú son las denominadas cachangas, que es una especie de tortilla grande
crocante hecha a base de harina de trigo. Una de las alternativas de mejora a este
producto la realizó Amador y col. (2015) evaluando el grado de aceptabilidad de la
CA
mencionadas.
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sensorialmente usando la prueba de Ranking. El análisis estadístico de los datos
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mostro una preferencia significativa por la mermelada con 10 por ciento de HEL
(p<0.05). Para determinar el grado de aceptabilidad se empleó el test hedónico facial
AR
comparando esta formulación con una mermelada control con fructuosa como
edulcorante. El análisis estadístico usando el test de Student no determinó diferencias
significativas entre ella (<0.05). Para evaluar la actividad hipoglicemiante de la harina
CU
entera de lupino se seleccionaron en forma voluntaria siete pacientes diabéticos
adultos No Insulina. Dependientes los que fueron sometidos a la prueba de tolerancia
PE
a la glucosa. Los resultados de la prueba demostraron que la presencia de lupino en la
mermelada disminuyo la velocidad de glucosa intestinal, pues la concentración de
glucosa postprandial fue significativamente inferior comparándola con la mermelada
RO
control de fructuosa.
formulación, fue sustituida por harina de lupino. Romero y Medina (2004) evaluaron
cinco formulaciones de mermelada con una adición de 5, 7.5, 10 y 15% de harina
entera de lupino (HEL). Las diferentes mermeladas fueron sometidas a un panel de
CA
agradó a la mayoría de los jueces fue con el porcentaje de sustitución hasta un 7.5%
de HEL.
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componente de las pizzas y, finalmente, en postres como torta de manzana con tarwi
(Tapia, 2015).
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y cóctel (Olmedo, 2012).
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A nivel industrial existen algunos productos nacionales y extranjeros resumidos en la
AR
Tabla 9 que utilizan la harina/pasta de tarwi para aplicaciones alimentarias tales como:
CU
Marca Producto Características
Biosagesse 1 Harina de Constituye una fuente proteíca, libre de gluten
lupino
PE
Bio-in2 Fusillini di riso e Fideos a base de harina de arroz semiintegral y harina
lupino de lupino (20%)
Dayalet3 Harina de Recomendado para pan y productos de pastelería. Libre
lupino de gluten.
RO
Heinz4 Penne Productos libre de gluten. Hecho a base de harina de
Spaghetti maíz, papa y lupino.
Macaroni
Campos de Harina de tarwi Importante fuente de proteína (entre 40 a 56%) y grasa
AG
Perutambo6
BioMarket- Galletas de Galletas Nutritivas y Fortificadas.
Perutambo6 Tarwi
BioMarket- Panetón Enriquecido con Harina de Tarwi, Kiwicha, miel,
Perutambo6 Fortificado castañas, higos, pasas, ajojonlí y yogurt.
CA
Fuente:
TE
1 https://www.amazon.es/Harina-Altramuces-org%C3%A1nicas-biol%C3%B3gicas-
ecol%C3%B3gicos/dp/B00AYCSJKW/ref=sr_1_4?s=grocery&ie=UTF8&qid=1511530977&sr=1-4
2 https://www.laspesasenzaglutine.com/Bio-in-Fusillini-di-Riso-e-Lupino-Bio-350-g
IO
3 https://www.dayelet.com/es/harina-de-altramuz.html?SID=3ku5gr84u7ghl3nnie8qh7tem2
BL
4 https://www.laspesasenzaglutine.com/Bio-in-Fusillini-di-Riso-e-Lupino-Bio-350-g
5 http://ecotiendaorganica.com/web/secciones/producto_detalle.php?idprod=173
BI
6 https://www.perutambo.com
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S
7.1 JUSTIFICACIÓN
IA
El tarwi o chocho (Lupinus mutabilis) es una leguminosa con elevado contenido
proteico (41-51%) y grasa (14-24%) que bien puede ser convertido en harina o en
AR
forma de pasta con propósitos alimentarios. Sin embargo, su difusión como alimento
altamente nutritivo esta relegado, primero por el escaso fomento que reciben muchos
de los productos andinos y segundo porque se desconoce el comportamiento
CU
fisicoquímico y microbiológico de la pasta con fines alimentarios. Las posibilidades
para reemplazar a la soya en los países templados de Europa, han despertado el
PE
interés de su investigación (Tapia, 2015).
Desde un enfoque de carácter agronómico la simbiosis con las bacterias del género
RO
Rhizobium la planta de tarwi es capaz de fijar nitrógeno del aire e influenciar las
condiciones nutricionales del suelo, mejorando el contenido de materia orgánica. Se
establece que puede fijar entre 60 a 120 kilos de nitrógeno por campaña (Tapia, 2015).
AG
escolares y porque no mejorar los productos ofrecidos actualmente por los programas
sociales del Estado Peruano como es el caso de los desayunos escolares que brinda
el Programa “Qali Warma”.
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A pesar del gran potencial que posee el tarwi, son escasas las investigaciones
orientadas a su aprovechamiento como elemento enriquecedor y los resultados que se
han obtenido de estos estudios, no han sido aplicadas a gran escala, debido al
insuficiente apoyo gubernamental para impulsar la producción y la incorporación de
S
esta leguminosa en programas de alimentación (Brito, 2005). Es por esto, que esta
IA
investigación nace bajo la premisa de dar a conocer el comportamiento que tienen
algunas variables fisicoquímicas de la pasta de tarwi sometida en diferentes tiempos
AR
de tratamiento térmico y almacenamiento y permita a futuro desarrollar nuevos
productos a base de pasta de tarwi, y así facilitar su incorporación en sistemas
alimenticios de consumo humano gracias a su gran aporte nutritivo y enorme potencial
CU
de transformación agroindustrial.
PE
Es de conocimiento que el tarwi es una materia prima que se produce en el Ande
Liberteño y que tiene un potencial de industrialización que permitirá combatir el nivel
RO
de desnutrición en los habitantes de la zona rural. El presente trabajo de investigación
permitirá revalorizar esta leguminosa que forma parte de nuestra identidad cultural,
para ello se estableció el siguiente problema: ¿Cuál será el efecto del factor de
AG
acidez titulable.
Determinar el efecto del factor de severidad y tiempo de almacenamiento de
BL
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S
IA
II. MATERIALES Y METODOS
AR
2.1 Materia prima
CU
Se utilizó semillas de tarwi (Lupinus mutabilis) variedad criolla proveniente del distrito
de Huamachuco, Provincia de Sánchez Carrión, Departamento de La Libertad.
PE
2.2 Material de vidrio
RO
Frascos de vidrio de 250 ml
Buretas de 50 ml
Fiolas de 50, 100 y 250 ml
AG
Placa de Petri
Probetas de 25 ml y 100 ml
Tubos de ensayo de 10 ml
CA
Ácido 2-Tiobarbitúrico
Ácido acético glacial
BL
Azul de metileno al 1%
Cultivo agar papa
Etanol 96° GL
BI
Fenolftaleína
Solución de hidróxido de sodio a 0.1N
Solución de Feling A
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Solución de Feling B
Tricloroacético 7.5%
S
IA
2.4 Instrumentos y equipos
AR
Espectrofotómetro GENISYS 10S UV-VIS
Balanza analítica RADWAS AS 220/C/2 (máx 220 ± 0.01)
Balanza semi analítica, marca METTLLER TOLEDO, modelo ML 4002.
CU
peso máximo 4200g, d = 0.01g.
pH – metro digital INOLAB 720 SET marca WTW.
PE
Autoclave automático digital (modelo AUTLP 50).
Agitador y calentador magnético, marca TERMO SCIENTIFIC, modelo
SHKE4450-1CE
RO
Brixómetro (0 - 40%)
Equipo conductímetro eléctrico, marca WTW SERTES
Cámara de flujo laminar ESCO modelo EFD 4A2
AG
Licuadora OSTERIZER
Destilador de agua BRAND (4L/hora)
TE
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S
IA
2.6 Metodología
2.6.1 Método: Experimental
AR
2.6.2 Proceso de desamargado del grano de tarwi
El retiro de alcaloides se realizó por el método semi-industrial el mismo que está
representado en el flujograma de la Figura 3.
CU
PE
RO
AG
DE
CA
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S
Una vez obtenido el grano entero y desamargado se procedió a obtener la pasta
IA
según flujograma de la Figura 4.
AR
CU
PE
RO
AG
DE
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Lavado. Los granos de tarwi se lavaron con agua destilada con el propósito eliminar
restos de hipoclorito presentes en su superficie.
Triturado. El proceso de triturado se realizó en una licuadora casera en una
proporción grano/agua 1:1 (p/p) obteniendo una pasta homogénea con un contenido
S
de sólidos totales superiores al 24%. La masa total de la pasta se dividió en dos
IA
condiciones:
AR
Condición I: Pasta de tarwi sin tratamiento térmico conocida como blanco, la cual se
almacenará en frascos estériles y cerrados a condiciones ambientales. Se dispuso de
5 frascos, los mismos que se evaluaron sus propiedades fisicoquímicas y recuento de
CU
hongos mesófilos en los días 0, 2,4,6,8 día.
PE
Condición II: Pasta de tarwi sometida a tratamiento térmico en su propio frasco a
temperatura de 121ºC y tiempo de mantenimiento de autoclave de 5, 15 y 25 min, la
cual se almacenará a condiciones ambientales para evaluar el efecto del factor de
RO
severidad (combinación tiempo-temperatura de autoclave) más el tiempo de
almacenamiento sobre las características fisicoquímicas y recuento de hongos
mesófilos. Cada frasco utilizado contuvo aproximadamente 400 gramos de pasta.
AG
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S
Variables dependientes (Y)
IA
- pH
AR
- Acidez titulable
PASTA DE TARWI - Contenido de sólidos solubles
(≥24% sólidos totales) - Conductividad eléctrica
- Índice del TBA
CU
- Azúcares reductores
- Recuento de hongos mesófilos
PE
Factor de severidad
(121ºC) a 5, 15 y 25 Evaluación a los 0, 8, 16, 24 y 32 días.
Calor
minutos RO
- pH
- Acidez titulable
AG
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S
conductividad eléctrica, azúcares reductores) de la pasta de tarwi y el recuento de
IA
hongos mesófilos se realizó un análisis de varianza (ANOVA).
La hipótesis de ANOVA establece que todas las medias son iguales. El ANOVA es una
AR
técnica estadística para comprobar si son iguales las medidas de más de dos
tratamientos mediante el análisis y la comparación de diversos tipos de varianza
muestral.
CU
En el trabajo experimental se establece un nivel de significancia de α=0.05 y un valor
de ´´F´´ tabular con F (k-1, n-k); donde K= número de tratamientos, siendo estos el
PE
factor de severidad correspondiente a los tiempos de 0, 5, 15 y 25 minutos de
tratamiento térmico y ´´n´´ el número de muestras en ´´k´´ tratamientos. En la Tabla 11
se muestra los datos muéstrales aleatorios independientes en la pasta de tarwi.
RO
Tabla 11. Datos muéstrales aleatorios independientes
AG
Repeticiones R2 R2 R2
R3 R3 R3
CA
Donde:
IO
R= repeticiones (constituye los valores medibles para cada variable dependiente: pH,
BL
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Las sumas de cuadrados del total (SCT), de las columnas (SCC) y del error (SCE)
se calcularán utilizando las siguientes.
S
IA
AR
CU
PE
En la Tabla 12 se simplifica las operaciones a realizar para la determinación del F
RO
calculado.
(columnas)
CA
SCT SCE+SCC
IO
Si el F cal > F tabular es un indicador que existe diferencia significativa entre los
tratamientos.
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S
propiedades fisicoquímicas y recuento de hongos mesófilos en la pasta
desamargada de semillas tarwi
IA
La Tabla 13 muestra las propiedades fisicoquímicas y recuento de hongos mesófilos
AR
de la pasta desamargada de tarwi con un contenido de sólidos totales del 24% p/p en
función al tiempo de almacenamiento en frascos herméticos y estériles a condiciones
CU
de ambientales de 16ºC y humedad relativa del 56% aproximadamente.
PE
con la acidez, conductividad eléctrica y recuento de hongos mesófilos de manera
directa. El valor de pH inicial del grano de tarwi fue de 5.53, el mismo que se acidifica
RO
con el transcurrir el tiempo. Su valor inicial es cercano a lo reportado por Apunte y
León (2012) que establecen valores entorno a 5.86 ± 0.02. Se ha establecido que los
cereales y leguminosas no presentan valores de pH muy bajos, así lo demuestra la
AG
harina de avena (pH: 6.02), trigo (pH: 5.70) y soja (pH: 6.40) (Venegas y col., 2009)
0 2 4 6 8
% Sólidos 24,3 ±0,1 24,3 ±0,2 24,3 ±0,1 24,3 ±0,1 24,2 ±0,2
pH 5,23 ±0,01 5,02 ±0,02 4,98 ±0,02 4,91 ±0,03 4,82 ±0,01
TE
2 2 3 4 4
Índice del TBA(mg de
39,0 ±0,2 39,0 ±0,1 40,6±0,3 43,6±0,1 46,8±0,2
malonaldehído/kg de muestra)
BL
% Azúcares reductores 0,41 ±0,3 0,44 ±0,1 0,47 ±0,1 0,51 ±0,2 0,60 ±0,1
(UFC/g) /30 h./x10^6 3 18 30 43 65
BI
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S
microbiana.
IA
El porcentaje de acidez de la pasta de tarwi desamargada a condiciones ambientales
AR
(15ºC) aumenta durante los días de almacenamiento, pudiendo llegar hasta un 3,55%
al octavo día (expresado como ácido oleico). Es de considerar que la acidez de las
sustancias grasas es muy variable. Generalmente las pastas frescas o recién
CU
preparadas no contienen ácidos grasos libres o si los contienen los tienen en muy
pequeñas cantidades. Al envejecer, especialmente si no han estado protegidos de la
PE
acción del aire y la luz su acidez aumenta lentamente al principio y con cierta rapidez
después (Badui, 2006). Se puede considerar que la presencia natural de la acidez libre
en las grasas a condiciones ambientales puede ser el resultado de la hidrólisis o
RO
descomposición lipolítica de algunos triglicéridos deducidos mayoritariamente por
acción microbiana (Badui, 2006).
AG
contienen magnesio, fósforo y potasio. Gross y Tuesta (1977) establecen que el calcio
se encuentra principalmente en la cáscara, mientras que el fósforo se halla en el
núcleo. Hay que tener presente que la pasta generada en el trabajo experimental fue
CA
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S
probablemente a la baja calidad de agua que tiene Huamachuco. Es de recordar que
IA
la provincia no goza de agua potable como servicio primario.
AR
3.2 El factor de severidad y su influencia en el tratamiento térmico
CU
“factor de severidad” en la intensidad del tratamiento térmico de la pasta desamargada
de tarwi. En ella se observa que la etapa de enfriamiento (desde 121ºC hasta 45ºC)
PE
aporta entre el 51-76% del factor de severidad. Esto amplio aporte se debe a que el
proceso de enfriamiento del autoclave se realiza a condiciones ambientales, sin ningún
sistema de enfriamiento rápido (agua tipo ducha o por inundación). Por otra parte las
RO
condiciones ambientales como la temperatura del laboratorio influye en la variabilidad
de este parámetro.
AG
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S
sólidos), se realizó un proceso de tratamiento térmico a vapor a 121ºC (en autoclave) y
IA
tiempos de 5, 15 y 25 min generando factores de severidad (Log Ro) de 2.24 , 2.33 y
2.42 respectivamente. En ella se observó que al aumentar el tiempo de tratamiento
AR
térmico se genera un pequeño descenso del valor de pH y un ligero aumento del
porcentaje de acidez expresado como ácido oléico. En la Tabla 15 se presenta el
efecto del factor de severidad y tiempo de almacenamiento sobre el pH y la acidez de
CU
la pasta desamargada de semillas de tarwi.
PE
Tabla 15. Efecto del factor de severidad y tiempo de almacenamiento sobre el pH y la
acidez de la pasta desamargada de semillas de tarwi
5,46 1,72
2,24 16 5,44 2,00
24 5,34 2,00
32 5,32 2,00
DE
0 5,45 1,13
8 5,56 1,71
2,33 16 5,40 2.00
24 5,37 1.99
CA
32 5,29 1.99
0 5,42 1,10
8 5,52 1,62
TE
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S
valores de pH de las legumbres producen un incremento de dicho valor cuando estas
IA
son procesadas térmicamente, debido probablemente a la solubilización de
aminoácidos básicos. Por otro lado, el ligero descenso del valor de pH y consecuente
AR
aumento de la acidez de la pasta de tarwi con el incremento del tiempo de
almacenamiento se deba mayoritariamente a la acción microbiana que origina una
ligera acidificación del medio.
CU
Autores como Lawford y Rousseau (1993) consideran que un aumento del factor de
severidad en medios muy acuosos generan un descenso del valor de pH del medio
PE
debido al desprendimiento de grupos acetilos que se encuentran como sustituyentes
(grupos adheridos) en la cadena de hemicelulosa perteneciente a la cáscara del tarwi.
RO
Se establece que en procesos de tratamiento térmico las uniones éter heterocíclicas
de las hemicelulosas son las más susceptibles a este tipo de reacción, generando
oligosacáridos de distinto grado de polimerización y liberando los grupos acetilo unidos
AG
eléctricas mayores (Badui, 2006). Por otro lado, Tinsky y col. (1995) establece que
debido a la multiplicación microbiana se produce un cambio en la composición iónica
de los alimentos originando un aumento en los valores de conductividad eléctrica.
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S
121,7 respectivamente (Tabla 16). Esta correlación directa la explica Persano y Piro
IA
(2004) al sostener que la intensidad del tratamiento térmico origina hidrólisis de las
cadenas de biopolímeros produciendo electrolitos, sales minerales disueltas, ácidos
AR
orgánicos y aminoácidos.
CU
conductividad eléctrica, índice de TBA y unidades formadoras de colonia (UCF/g) en
pasta desamargada de semillas de tarwi
PE
Índice deTBA
Tiempo (días) Conductividad
Log Ro (mg de (UCF/g)/30 h/
a condiciones eléctrica
malonaldehído/kg 10^6
ambientales (µS/cm) RO muestra)
0 74,5 57,7 0,0
8 79,4 62,4 3,0
2,24 16 79,4 78,0 22,0
24 88,5 65,5 37,0
AG
2,33
24 118,2 95,2 31,0
32 123,4 85,8 43,0
0 121,7 142,0 0,0
CA
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S
un proceso de exhausting y el espacio de cabeza era considerable (mitad de frasco).
IA
La autoxidación es el deterioro más común de las grasas y aceites y se refiere a la
AR
oxidación de los ácidos grasos insaturados, pero también se presenta con otros
compuestos de interés biológico, como la vitamina A y los carotenoides (Badui, 2006).
En la Tabla 16 se observa la tendencia de los valores de conductividad eléctrica por
CU
efecto del factor de severidad a la que es sometida la pasta de tarwi. Tratamientos
más intensos llevan consigo mayores valores de conductividad eléctrica. La tendencia
PE
mayoritariamente generalizada es que a medida que aumenta el tiempo de
almacenamiento el índice de TBA también aumenta. Bernal y col. (2003) establecen
que la oxidación de lípidos es un fenómeno espontáneo e inevitable que se da en
RO
productos con alto contenido graso como la harina de pescado y granos oleaginosos
como el tarwi y la soja.
AG
de ácidos grasos libres de 1 a 2.5% en los primeros 15 días y 5.5% en los primeros 45
días.
BI
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S
los alcoholes derivados de su reducción, son los responsables de los olores
IA
desagradables que desarrollan los alimentos durante su procesado o almacenaje,
siendo la lipoxigenasa la responsable principal del proceso y que se inactiva por
AR
acción de tratamiento térmico (Zamora y col. 1991).
Por otra parte Zamora y col. (1991) consideran que la maceración, molienda y
CU
homogeneización de tejidos normalmente desencadena una rápida lipólisis debido a
que las enzimas lipolíticas son expuestas a contacto con los sustratos lipidícos. De
PE
esta manera tanto los triglicéridos de reserva como los lípidos de las membranas
pueden ser hidrolizados. Esto podría explicar la lipólisis que frecuentemente se
produce después de la molienda de las semillas oleaginosas o la rápida producción de
RO
volátiles procedentes de la degradación lipídica que sigue a la homogeneización.
tarwi
BL
tratamiento térmico (2ºBrix) y después de este para un factor de severidad de 2.42 fue
de 4ºBrix (Tabla 17), esto se debería probablemente a la hidrólisis parcial de la
fracción amorfa del almidón (la más fácil de hidrolizar) más que a la fracción
lignocelulósica. Taherzadeh y col. (1997) consideran que la hidrólisis de los materiales
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S
interacción con proteínas y elementos minerales factores que influyen en el proceso
IA
hidrolítico.
AR
Tabla 17: Efecto del factor de severidad y tiempo de almacenamiento sobre los sólidos
solubles y azúcares reductores en la pasta desamargada de semillas de tarwi
CU
Tiempo (días) a Sólidos %
PE
Log Ro
condiciones Solubles Azúcares
ambientales (ºBrix) reductores
0 RO 3 0,86
8 4 0,86
2,24 16 4 0,86
24 4 1,05
32 4 1,05
AG
0 3 0,94
8 4 0,94
2,33 16 5 0,93
24 5 0,96
DE
32 5 1,00
0 4 1,04
8 5 1,04
CA
2,42 16 6 0,97
24 6 1,22
32 6 1,24
TE
Por otro lado el ligero aumento de azúcares reductores (de 0,41 a 1,04% expresado
como glucosa equivalente) de la pasta desamargada de tarwi después del tratamiento
IO
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S
sólidos solubles y azúcares reductores para un mismo tiempo de almacenamiento a
IA
diversos factores de severidad se realizó la prueba DLS (Diferencia límite significativa)
(Anexo 11) determinando una limitada diferencia para estas dos variables.
AR
Después del tratamiento térmico, la pasta de tarwi desamargada presenta un ligero
oscurecimiento al aumentar la intensidad de tratamiento térmico. Esto se debería a
que tiene lugar la reacción de Maillard, producida por condensación química entre
CU
aminoácidos y azúcares reductores (Dendy, 2001). Entre los productos de la reacción
de Maillard se incluyen compuestos volátiles de bajo peso molecular como alcoholes,
PE
cetonas, aldehídos, éteres, ésteres y componentes heterocíclicos como el furfural
(Khan y col., 1995). También se forman compuestos menos volátiles con peso
molecular medio-alto, tales como polifenoles, polipéptidos y pigmentos (Mastrocola y
RO
col., 2000). Se ha establecido que los furanos, productos predominantes de la reacción
de Maillard, son los responsables del color caramelo (Shibamoto, 1989).
AG
Por otro lado, Obregón y col. (1996) establecen que la desnaturalización de proteínas
por efecto del tratamiento térmico dan como consecuencia la disociación en grupos
hidrofóbicos/hidrofílicos en sus subunidades, permitiendo un mayor exposición de de
DE
Por otra parte, no se descarta que parte del empardeamiento de la pasta de tarwi
TE
crecimiento microbiano; pero los mecanismos implicados no son bien conocidos; así
mismo parece que ciertos microorganismos muestran más tolerancia que otros a la
BI
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S
0,7 (Warmbier y col., 1976). Se tiene que recordar que la pasta de tarwi presentó un
IA
valor de pH inicial de 5.23 y un contenido de agua del 76% lo cual favorece el
empardeamiento.
AR
CU
PE
RO
AG
DE
CA
TE
IO
BL
BI
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IV. CONCLUSIONES
S
pasta desamargada de tarwi provoca un descenso de los valores de pH y un
aumento de la acidez titulable expresada como ácido oleico. Después de
IA
realizada el tratamiento térmico, el tiempo de almacenamiento de la pasta a
AR
condiciones ambientales hasta 32 días ocasiona un aumento de la acidez y
una disminución del pH.
CU
Un aumento de los factores de severidad (Log Ro) en el tratamiento térmico de
pasta desamargada de tarwi provoca una mayor oxidación de las grasas
reflejándose en un incremento de Índice TBA (expresado como mg de
PE
malonaldehído/kg muestra). Una vez generada estás estructuras producto del
tratamiento hidrolítico térmico, el tiempo de almacenamiento de la pasta a
RO
condiciones ambientales hasta 24 días provoca en su mayoría un incremento
en los índices de TBA por exposición de ácidos grasos a la acción de la luz.
AG
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V. RECOMENDACIONES
S
(sin tegumento) y desgrasados con el fin de evitar la oxidación de los lípidos en
IA
su interior.
AR
Investigaciones posteriores podrían evaluar la acción de aditivos como los
antioxidantes (butil-hidroxianisol o butil-hidroxitolueno) en el grado de oxidación
de lípidos y de controladores microbianos (bisulfito de sodio o sorbato de
CU
potasio) en la pasta de tarwi desamargada.
PE
Investigaciones posteriores podrían determinar mediante técnicas de
cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) la presencia de etanol o ácido
RO
acético producto de la posible fermentación de la pasta desamargada de tarwi
sometida a distintos factores de severidad y tiempos de almacenamiento.
AG
tratamiento térmico.
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S
IA
AR
CU
PE
ANEXOS RO
AG
DE
CA
TE
IO
BL
BI
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ANEXO 1
Fundamento
S
El fundamento de la determinación del contenido en sólidos es el secado en estufa a
IA
105ºC, lo que elimina el agua libre de la materia prima a evaluar y nos permite
AR
cuantificar su peso remanente que constituiría los sólidos no volátiles. Dependiendo
del tipo de material y de las condiciones ambientales una estructura vegetal puede
tener un porcentaje de sólidos diferente.
CU
PE
Procedimiento experimental
Donde:
TE
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ANEXO 2
S
Fundamento:
IA
AR
Se determinó la concentración de iones hidrógeno con un pH-metro calibrado.
Procedimiento:
CU
Se lavó bien el electrodo del pH-metro con agua destilada, secándose con papel
absorbente.
PE
Se calibró el pH-metro a pH 7.0 y 4.0 con las correspondientes soluciones tampón. Se
lavó el electrodo con agua destilada y finalmente se secó con papel absorbente.
RO
Se introdujo el electrodo en la pasta de tarwi a medir el pH.
AG
DE
CA
TE
IO
BL
BI
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ANEXO 3
S
Fundamento:
IA
Es un parámetro que nos permite definir la calidad de la pasta. Su acidez depende del
grado de hidrólisis que sus ácidos grasos van teniendo y se van incrementando como
AR
consecuencia de que la materia prima ha sido recogida del suelo, por aplicación de
temperaturas elevadas y mala conservación.
CU
La determinación del porcentaje de acidez es determinada por el contenido en gramos
de ácidos grasos libres presentes en 100 gramos de pasta de tarwi. Generalmente se
expresa en función al ácido libre predominante, que generalmente es el ácido oleico.
PE
Procedimiento: RO
Se obtuvo una alícuota de pasta de tarwi en un vaso Pyrex de 250 ml, con un peso
conocido, se adicionó 4 a 6 gotas de fenolftaleína y se tituló con solución de NaOH
AG
…………………….… (ec. 3)
Donde:
A.G.L.: Ácidos grasos libres
CA
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ANEXO 4
S
IA
Fundamento:
AR
Los grados ºBrix representan los sólidos solubles totales en la pasta de tarwi y su
determinación se realizó con refractómetro digital, previamente calibrado con agua
destilada.
CU
Procedimiento:
PE
Para determinar los sólidos solubles en la pasta de tarwi fue necesario el uso del
refractómetro digital el cual proporcionó una lectura en ºBrix a la temperatura corregida
RO
a 20ºC.
AG
DE
CA
TE
IO
BL
BI
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ANEXO 5
S
IA
Campo de aplicación:
Esta norma es aplicable en grasas y aceites, harina de pescado, de pollo, de carne y
AR
alimentos semi húmedos para animales.
CU
Fundamento:
Esta prueba es un indicador del grado de oxidación de los ácidos grasos y detecta el
inicio de las reacciones de rancidez. La adición de TBA da como resultado la aparición
PE
de pigmentos coloreados cuando reacciona con un aldehído y otros productos de la
degradación oxidativa.
RO
Reactivos:
Solución de Ácido 2-Tiobarbitúrico (NHCSNHCOCH CO). Pesar 0,2883 g en
2
AG
Procedimiento:
Se tomó 5 gramos de pasta en un vaso
Se agregó 25 ml de TCA (tricloroacético) al 7.5% a la muestra y se agitó
Se centrifugó a 5000 rpm/10 minutos en tubos de ensayo de vidrio
CA
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ANEXO 6
S
IA
Fundamento:
AR
Las disoluciones acuosas se caracterizan por presentar electrolitos. En ellas la
conducción de electricidad al aplicar un campo eléctrico se debe al movimiento de los
iones en disolución, los cuales transfieren los electrones a la superficie de los
CU
electrodos para completar el paso de corriente.
La medición de la conductividad eléctrica es un parámetro indirecto para determinar la
PE
incidencia de la carga microbiana en un alimento; así mismo el grado de hidrólisis que
sufren las cadenas de los biopolímeros a la acción del tratamiento térmico.
RO
Procedimiento:
Se lavó el electrodo del conductimetro con agua destilada para posteriormente ser
AG
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ANEXO 7
S
IA
Fundamento:
Este método se basa en determinar el volumen de la solución de prueba que se
AR
requiere para precipitar totalmente todo el cobre presente en una cantidad de solución
de Fheling.
CU
Equipos y materiales
Balanza analítica
PE
Cocina eléctrica
Matraz Erlenmeyer de 100ml
Bureta de 50 ml
RO
Fiolas de 100, 250 ml
AG
Reactivos
Solución de Fheling “A”
Solución de Fheling “B”
Azul de metileno 1%
DE
Procedimiento:
CA
bureta de 50 ml.
Azúcares totales
Esta metodología se realizó específicamente para determinar de manera indirecta el
IO
Titulación
Se dispuso de 10 ml de solución de Fheling (5 ml de Fheling A y 5 ml Fheling
BI
B) en un matraz de 250 ml
Se adicionó 10 ml de agua destilada, se mezcló y se llevó a ebullición por 2
min.
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S
de muestra deba ser superior a los 15 ml.
IA
Cálculos:
AR
…….. (ec. 4)
CU
f = Factor de Fehling (g glucosa/ml Fheling)
PE
Determinación del factor de fehling (f)
RO
Se dispuso 5 ml de solución Fheling A y 5 ml de solución Fheling B en una fiola
de 250 ml, añadiendo posteriormente 20 ml de agua destilada y algunas perlas
de vidrio (por triplicado). La solución preparada se llevó a ebullición durante 2
AG
Cálculos:
f = (ml de sol. gastados * % sol. glucosa * 10 ml de sol. Fehling) /1000 (ec. 5)
IO
BL
Al realizar esta determinación por triplicado se tomó el valor promedio de los valores
obtenidos.
BI
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ANEXO 8
S
IA
Fundamento
El método se basa en inocular una cantidad conocida de muestra, en un medio de
AR
cultivo selectivo específico, aprovechando la capacidad de este grupo microbiano de
utilizar como nutrientes a los polisacáridos que contiene el medio. La hidrólisis de
CU
estos compuestos se efectúa por enzimas que poseen estos microorganismos. La
sobrevivencia de los hongos y levaduras a pH ácidos se pone de manifiesto al
inocularlos en el medio de cultivo acidificado a un pH de 3.5. Así mismo, la
PE
acidificación permite la eliminación de la mayoría de las bacterias. Finalmente, las
condiciones de aerobiosis y la incubación a una temperatura de 30 ºC ± 1 ºC dan
RO
como resultado el crecimiento de colonias características para este tipo de
microorganismos.
AG
Procedimiento
1. Se pesó 1.0 g de muestra en un tubo de ensayo de vidrio previamente esterilizado
y se adicionó 9 ml de agua destilada.
DE
diluciones sean necesarias. Se utilizó una pipeta estéril para cada dilución.
4. Se tomó placas Petris esterilizadas con medio de cultivo en cantidad de la tercera
TE
hongos mesófilos.
BL
obtenidos.
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ANEXO 9
S
TABLA 18: Factores de severidad para el proceso de tratamiento térmico a 121ºC
IA
por 5 min
121ºC (5 min)
AR
Temperatura
(ºC) min seg min Ri Trapecios
50 0 0 0 0,03371439
51 0 10 0,16666667 0,03607938 0,00581615
CU
52 0 18 0,3 0,03861026 0,00497931
53 0 29 0,48333333 0,04131868 0,00732682
54 0 39 0,65 0,04421708 0,00712798
PE
55 0 48 0,8 0,04731881 0,00686519
56 0 59 0,98333333 0,05063811 0,00897938
57 1 10 1,16666667 0,05419025 0,00960927
58 1 20 1,33333333 0,05799157 0,00934849
59 1
RO
30 1,5 0,06205954 0,01000426
60 1 41 1,68333333 0,06641287 0,01177664
61 1 56 1,93333333 0,07107158 0,01718556
62 2 5 2,08333333 0,07605708 0,01103465
AG
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103 18 46 18,7666667 1,22555013 0,39512768
CU
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56 317 17 317,283333 0,05063811 0,47172762
AR
55 326 36 326,6 0,04731881 0,45631596
54 335 14 335,233333 0,04421708 0,39512992
53 345 46 345,766667 0,04131868 0,45048833
CU
52 355 11 355,183333 0,03861026 0,37633206
51 365 2 365,033333 0,03607938 0,36784644
50 375 16 375,266667 0,03371439 0,35711144
49 386 27 386,45 0,03150443 0,3646819
PE
48 397 19 397,316667 0,02943933 0,33112776
47 408 2 408,033333 0,0275096 0,30515134
46 419 25 419,416667 0,02570636 0,30288748
45 431 24 431,4 0,02402132 0,29795166
RO
AG
DE
CA
TE
IO
BL
BI
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ANEXO 10
S
IA
TABLA 21: Análisis de varianza del factor de severidad y tiempo de almacenamiento en
el pH de pasta desamargada de semillas de tarwi
AR
Suma de Cuadrado
Fuente Cuadrados gl Medio Razón-F Valor-P
CU
EFECTOS PRINCIPALES
A:Factor de severidad 0.01204 2 0.00602 60.2 <0.0001
B:Tiempo de almacenamiento 0.18032 4 0.04508 450.8 <0.0001
INTERACCIONES
PE
AB 0.04216 8 0.00527 52.7 <0.0001
RESIDUOS 0.003 30 0.0001
TOTAL 0.23752 44
RO
TABLA 22: Análisis de varianza del factor de severidad y tiempo de almacenamiento
AG
Suma de Cuadrado
Fuente Cuadrados gl Medio Razón-F Valor-P
DE
EFECTOS PRINCIPALES
A:Factor de severidad 0.271829 2 0.135914 2875.48 <0.0001
B:Tiempo de almacenamiento 4.26477 4 1.06619 22557 <0.0001
INTERACCIONES
CA
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S
EFECTOS PRINCIPALES
A:Factor de severidad 37424.5 2 18712.3 246214 <0.0001
IA
B:Tiempo de almacenamiento 3526.05 4 881.513 11598.9 <0.0001
INTERACCIONES
AR
AB 1535 8 191.874 2524.66 <0.0001
RESIDUOS 2.28 30 0.076
TOTAL 42487.9 44
CU
TABLA 24: Análisis de varianza del factor de severidad y tiempo de almacenamiento
en el sólidos solubles (°Brix) de pasta desamargada de semillas de tarwi
PE
Suma de Cuadrado
Fuente Cuadrados gl Medio Razón-F Valor-P
EFECTOS PRINCIPALES
RO
A:Factor de severidad 19.6 2 9.8 98000 <0.0001
B:Tiempo de almacenamiento 19.2 4 4.8 48000 <0.0001
INTERACCIONES
AG
EFECTOS PRINCIPALES
A:Factor de severidad 61532.1 2 30766.1 904884 <0.0001
B:Tiempo de almacenamiento 9439.45 4 2359.86 694077 <0.0001
IO
INTERACCIONES
AB 15418.3 8 1927.29 566850 <0.0001
BL
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Razón-
Fuente Suma de Cuadrados gl Cuadrado Medio F Valor-P
S
EFECTOS PRINCIPALES
A:Factor de severidad 0.248606 2 0.124303 3655.9 <0.0001
IA
B:Tiempo de
almacenamiento 0.245731 4 0.0614328 1806.8 <0.0001
AR
INTERACCIONES
AB 0.0706536 8 0.0088317 259.76 <0.0001
RESIDUOS 0.00102 30 0.000034
CU
TOTAL 0.566011 44
PE
TABLA 27: Análisis de varianza del factor de severidad y tiempo de almacenamiento en
las unidades formadoras de colonias (UCF/g) /30 h./x10^6 de pasta desamargada de
semillas de tarwi RO
Suma de Cuadrado Razón-
Fuente Cuadrados gl Medio F Valor-P
EFECTOS PRINCIPALES
AG
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ANEXO 11
S
(pH, ACIDEZ, CONDUCTIVIDAD ELÉCTRICA, SOLIDOS SOLUBLES, INDICE DE
TBA, AZÚCARES REDUCTORES, UNIDADES FORMADORAS DE COLONIA)
IA
AR
TABLA 28: Prueba de Rango Múltiple para el pH (Porcentaje LSD: 95,0)
Tiempo de
Factor de Media
almacenamiento Sigma LS Contraste Sig. Diferencia +/- Límites
CU
severidad LS
(días)
2.33 5.45 4.09E-10 2,24 - 2,33 * 0.06 1.61E-09
0 2.42 5.42 4.09E-10 2,24 - 2,42 * 0.09 1.61E-09
PE
2.24 5.51 4.09E-10 2,33 - 2,42 * -0.03 1.61E-09
2.24 5.46 6.67E-03 2,24 - 2,33 * -0.10 2.62E-02
8 2.42 5.52 6.67E-03 2,24 - 2,42 * -0.06 2.62E-02
RO
2.33 5.56 6.67E-03 2,33 - 2,42 * 0.04 2.62E-02
2.33 5.40 6.67E-03 2,24 - 2,33 * 0.04 2.62E-02
16 2.24 5.44 6.67E-03 2,24 - 2,42 0.00 2.62E-02
AG
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TABLA 29: Prueba de Rango Múltiple para la acidez (Porcentaje LSD: 95,0)
Tiempo de
Factor de +/-
almacenamiento Media LS Sigma LS Contraste Sig. Diferencia
severidad Límites
(días)
2.33 1.127 3.83E-03 2,24 - 2,33 * 0.063 1.51E-02
S
0 2.42 1.095 3.83E-03 2,24 - 2,42 * 0.095 1.51E-02
IA
2.24 1.190 3.83E-03 2,33 - 2,42 * 0.032 1.51E-02
2.33 1.708 2.13E-10 2,24 - 2,33 * 0.009 8.35E-10
AR
8 2.42 1.620 2.13E-10 2,24 - 2,42 * 0.097 8.35E-10
2.24 1.717 2.13E-10 2,33 - 2,42 * 0.088 8.35E-10
2.33 2.000 6.67E-03 2,24 - 2,33 0.000 2.62E-02
CU
16 2.42 1.717 6.67E-03 2,24 - 2,42 * 0.283 2.62E-02
2.24 2.000 6.67E-03 2,33 - 2,42 * 0.283 2.62E-02
2.33 1.996 7.88E-03 2,24 - 2,33 0.004 3.09E-02
PE
24 2.42 1.776 7.88E-03 2,24 - 2,42 * 0.224 3.09E-02
2.24 2.000 7.88E-03 2,33 - 2,42 * 0.220 3.09E-02
2.33 1.994 5.77E-03 2,24 - 2,33 0.006 2.27E-02
RO
32 2.42 1.641 5.77E-03 2,24 - 2,42 * 0.359 2.27E-02
2.24 2.000 5.77E-03 2,33 - 2,42 * 0.353 2.27E-02
* Indica una diferencia significativa.
AG
TABLA 30: Prueba de Rango Múltiple para la conductividad eléctrica (uS/cm) (Porcentaje LSD: 95,0)
Tiempo de
Factor de +/-
almacenamiento Media LS Sigma LS Contraste Sig. Diferencia
DE
severidad Límites
(días)
2.33 74.50 1.20E-07 2,24 - 2,33 * 47.2 4.73E-07
0 2.42 108.60 1.20E-07 2,24 - 2,42 * 13.1 4.73E-07
CA
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TABLA 31: Prueba de Rango Múltiple para los sólidos solubles (°Brix) (Porcentaje LSD: 95,0)
Tiempo de
Factor de +/-
almacenamiento Media LS Sigma LS Contraste Sig. Diferencia
(días) severidad Límites
2.33 2.97 3.04E-02 2,24 - 2,33 * 1.1 1.19E-01
S
0 2.42 3.03 3.04E-02 2,24 - 2,42 * 1.04 1.19E-01
2.24 4.07 3.04E-02 2,33 - 2,42 -0.06 1.19E-01
IA
2.33 4.02 8.68E+00 2,24 - 2,33 16.04 3.41E+01
8 2.42 4.03 8.68E+00 2,24 - 2,42 16.03 3.41E+01
AR
2.24 20.06 8.68E+00 2,33 - 2,42 -0.01 3.41E+01
2.33 3.99 1.48E-01 2,24 - 2,33 * 2.04 5.82E-01
16
CU
2.42 5.02 1.48E-01 2,24 - 2,42 * 1.01 5.82E-01
2.24 6.03 1.48E-01 2,33 - 2,42 * -1.03 5.82E-01
2.33 4.01 2.55E-02 2,24 - 2,33 * 2.05 1.00E-01
24 2.42 5.03 2.55E-02 2,24 - 2,42 * 1.03 1.00E-01
PE
2.24 6.06 2.55E-02 2,33 - 2,42 * -1.02 1.00E-01
2.33 4.02 6.67E-02
RO 2,24 - 2,33 * 2.03 2.62E-01
32 2.42 5.02 6.67E-02 2,24 - 2,42 * 1.03 2.62E-01
2.24 6.05 6.67E-02 2,33 - 2,42 * -1 2.62E-01
* Indica una diferencia significativa.
AG
TABLA 32: Prueba de Rango Múltiple para el índice de TBA (Porcentaje LSD: 95,0)
Tiempo de
Factor de
almacenamiento Media LS Sigma LS Contraste Sig. Diferencia +/- Límites
severidad
DE
(días)
2.33 57.72 3.00E-02 2,24 - 2,33 * 84.24 1.18E-01
0 2.42 85.80 3.00E-02 2,24 - 2,42 * 56.16 1.18E-01
2.24 141.96 3.00E-02 2,33 - 2,42 * -28.08 1.18E-01
CA
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TABLA 33: Prueba de Rango Múltiple para azúcares reductores (Porcentaje LSD: 95,0)
Tiempo de
Factor de +/-
almacenamiento Media LS Sigma LS Contraste Sig. Diferencia
(días) severidad Límites
2.33 0.855 3.13E-02 2,24 - 2,33 * 0.185 1.23E-01
S
0 2.42 0.936 3.13E-02 2,24 - 2,42 0.104 1.23E-01
IA
2.24 1.040 3.13E-02 2,33 - 2,42 -0.081 1.23E-01
2.33 0.855 2.81E-02 2,24 - 2,33 * 0.188 1.10E-01
8
AR
2.42 0.936 2.81E-02 2,24 - 2,42 0.107 1.10E-01
2.24 1.043 2.81E-02 2,33 - 2,42 -0.081 1.10E-01
2.33 0.863 6.09E-02 2,24 - 2,33 0.043 2.39E-01
CU
16 2.42 0.867 6.09E-02 2,24 - 2,42 0.039 2.39E-01
2.24 0.906 6.09E-02 2,33 - 2,42 -0.004 2.39E-01
2.33 0.976 2.84E-02 2,24 - 2,33 * 0.177 1.12E-01
PE
24 2.42 1.052 2.84E-02 2,24 - 2,42 0.101 1.12E-01
2.24 1.153 2.84E-02 2,33 - 2,42 -0.076 1.12E-01
2.33 1.000 3.76E-02 2,24 - 2,33 * 0.24 1.48E-01
32
RO
2.42 1.069 3.76E-02 2,24 - 2,42 * 0.171 1.48E-01
2.24 1.240 3.76E-02 2,33 - 2,42 -0.069 1.48E-01
* Indica una diferencia significativa.
AG
TABLA 34: Prueba de Rango Múltiple para unidades formadoras de colonias (UFC) (porcentaje LSD:
95,0)
DE
Tiempo de
Factor de
almacenamiento Media LS Sigma LS Contraste Sig. Diferencia +/- Límites
(días) severidad
2.33 2 1.92E-01 2,24 - 2,33 * 2 7.56E-01
CA
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