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DETERMINACIÓN DE CATIONES (Na+, NH4 +, K+, Fecha Actualización:
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CROMATOGRAFIA IONICA

PROCEDIMIENTO TECNICO
DETERMINACIÓN DE CATIONES EN AGUA RESIDUAL (Na+, NH4 +, K+, Ca2+ y Mg2+ )
POR CROMATOGRAFÍA IONICA

RELACIÓN DE VERSIONES

VERSIÓN DESCRIPCIÓN FECHA

0 Emisión del documento. 13/11/2018

ELABORÓ REVISÓ APROBÓ

Marcela Andrea Zambrano

Jhon Henry Barrios Marcela Andrea Zambrano Tutora de Cromatografía
Estudiante de Ingeniería de alimentos Tutora de Cromatografía

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1. OBJETIVO.
Este procedimiento tiene como objetivo describir el procedimiento del análisis para
determinar el contenido de sodio, amonio, potasio, calcio y magnesio llevado a cabo en
el Laboratorio de Análisis Fisicoquímico en una empresa de tratamiento de aguas

2. ALCANCE.
La presente norma inicia con la recepción de la muestra por parte del Analista del
Laboratorio, se finaliza con el cálculo y registro de los resultados del análisis, en el
sistema de información del laboratorio por parte también del Analista. Este procedimiento
es ejecutado por el personal del Laboratorio de análisis fisicoquímico de la planta de
tratamiento de agua residual

3. DEFINICIONES.

Agua residual: incluyen las aguas usadas, domésticas, urbanas y los residuos líquidos
industriales o mineros eliminados, o las aguas que se mezclaron con las anteriores
(aguas pluviales o naturales)

Iones: es un átomo o un grupo de átomos que tiene una carga neta positiva o negativa,
La pérdida de uno o más electrones a partir de un átomo neutro forma un catión, un ion
con carga neta positiva. Por ejemplo, un átomo de sodio (Na) fácilmente puede perder
un electrón para formar el catión sodio, que se representa como Na+. Por otra parte,
un anión es un ion cuya carga neta es negativa debido a un incremento en el número de
electrones. Por ejemplo, un átomo de cloro (Cl) puede ganar un electrón para formar el
ion cloruro Cl-

4. DOCUMENTOS DEROGADOS.
N.A

5. CONSIDERACIONES GENERALES

5.1 PRINCIPIO DEL METODO

Fundamento el principio básico de la cromatografía de intercambio iónico es que

las moléculas cargadas se adhieren a los intercambiadores de forma reversible de
modo que dichas moléculas pueden ser asociadas o disociadas cambiando el
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ambiente iónico. La separación mediante intercambiadores iónicos se realiza por lo

general, en dos fases: en la primera las sustancias a separar se unen al
intercambiador utilizando condiciones que originan una unión fuerte y estable; a
continuación, se eluye de la columna con buffers de diferentes pH o diferente fuerza
iónica, compitiendo los componentes del buffer con el material por los sitios de
unión. R + A - es un intercambiador aniónico en la forma A - y B - representa a los
aniones en la disolución.

5.2 LIMITACIONES E INTERFERENCIAS

N.A

6. DESARROLLO

6.1 EQUIPOS Y MATERIALES

Cromatógrafo de líquidos binaria Waters® modelo 2695, un automuestreador Waters®

modelo 717 plus y un detector de conductividad Waters® modelo 432.
Fase estacionaria una columna metrosep C6 de 250x4.0 mm de Metrohm®, empacada
con partículas de diámetro de 5 (im y, como fase móvil, una mezcla de HNO3 y ácido
dipicolínico de igual concentración (1.7 mM, Sigma-Aldrich), en modo isocrático a un
flujo de 0.9 mL/min.
Balones volumétricos de 100 mL
Balanza analítica XS 205 D.
Pipetas volumétricas.
Jeringa de 5,0 mL
Filtro de PVDF de 0,22 µm (Referencia SLGVX13NK)

6.2 REACTIVOS Y SOLUCIONES

6.2.1 Ácido nítrico trazable al NIST (IC-4 High-Purity Standards)

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6.2.2 ácido dipicolínico trazable al NIST (IC-4 High-Purity Standards)

6.2.3 Estándares para Calibración e Identificación. Se requieren estándares de todos los

componentes a ser analizados. Se usara sodio, amonio, potasio, calcio y magnesio

6.3 PREPARACIÓN DE SOLUCIONES.

Intervalo lineal y de trabajo. Con este fin se preparan estándares de concentración de

los cinco analitos comprendidos entre 0.05 y 100 mg/L en agua MilliQ. El intervalo
mencionado anteriormente se seleccionó con base en dos criterios, la Repetibilidad de la
respuesta del detector y a su respectiva desviación estándar.

Precisión. Se determinó para tres niveles de concentración (1, 25 y 75 mg/L) de cada

analito. Cada concentración fue preparada por quintuplicado de manera independiente y
analizada también por quintuplicado. La evaluación de este parámetro de calidad se
realizó mediante el cálculo del porcentaje de desviación estándar relativa (% DER).

Exactitud. El parámetro de exactitud se calcula a partir de la inyección de cinco

disoluciones independientes que contenían Na+, NH4 +, K+, Ca2+ y Mg2+ para tres
niveles de concentración (5, 50 y 100 mg/L). Con los valores de área determinados y los
parámetros de regresión calculados de las curvas de calibración, se determinó la
concentración de cada estándar y se comparó con el valor conocido.

Nota: todas esta alícuotas se preparan a partir de un estándar de 1000 mg/L en un balón
aforado de 100 mL

Ejemplo: preparar una concentración de 25 mg/L a a partir de la de 100 mg/L

C1V1=C2V2

V2= 100mL* 25 mg/L / 1000 mg/L = 2,5 mL de la solución estándar de 1000 mg/L y llevarlo
a 100 ml en balón con agua tipo 1

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6.4 CLASIFICACION DEL TIPO DE ANALISIS

Critico

6.5 MUESTREO, ALMACENAMIENTO, ACONDICIONAMIENTO E IDENTIFICACIÓN

DE LA MUESTRA.

Identificación de la muestra: en la etiqueta del frasco se debe contar con la siguiente

información:

Tipo de material: El recipiente en el cual se recibe la muestra debe estar identificado con
el nombre del agua residual

Lugar de procedencia: El recipiente en su etiqueta debe tener fecha, lugar, hora de

muestra, quien la tomo, temperatura de cadena de frio.

7. PROCEDIMIENTO.

7.1 ACONDICIONAMIENTO DE EQUIPO Y COLUMNA.

7.1.1 Instale y acondicione la columna de acuerdo con las instrucciones del fabricante o
proveedor, teniendo en cuenta que se acople la entrada de la columna al puerto de
inyección y la salida de la columna a la entrada del detector de conductividad

7.1.2 Primero lo que se debe hacer es una purga de aire en seco a la bombas para evitar
burbujas, posteriormente colocar un flujo de 0,2 mL/min de fase móvil para evitar un
datos en la bombas, cada 10 minutos subir el flujo hasta cuando se llegue a 0,6 mL/min
encender el detector y dejar estabilizando la línea base este proceso tarda alrededor de
de 2 a tres horas una mezcla de HNO3 y ácido dipicolínico de igual concentración (1.7
mM, Sigma-Aldrich), en modo isocrático a un flujo de 0.9 mL/min.

7.1.3 a través del software verifique las condiciones operativas según lo especificado

7.1.4 Inicie el sistema desde el software y estar seguro que ya está estable el equipo (3
hora aproximadamente y corra un estándar) y dé el mensaje de listo para operar (Run)

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Nota 1: Verifique por medio del software que los parámetros que se programaron son los
que están reportados por el sistema.
Nota 2: ya con el equipo estable y asegurado los estándares de calidad solo es programar
ya que se cuenta con automuestrador para más detalle referirse a manual del equipo

7.1.5 Tome una alícuota de la muestra y fíltrela usando una jeringa por un filtro de Millex
-PVDF0,22 µm. transfiera el filtrado a vial de 2,0 mL.

7.2 LINEALIDAD.

7.2.1 Garantice la linealidad del sistema de cromatografía liquida antes del análisis de las
muestras

7.2.2. Establezca la linealidad del inyector divisor, para determinar el valor y los límites
apropiados para los parámetros.

7.2.3 Verifique la linealidad del detector de conductividad. La gráfica de área de picos

versus la concentración de estándares preparados en el intervalo de concentración de
interés debe ser lineal. Si la gráfica no es lineal, deben preparar nuevamente los
estándares y llevar a cabo el procedimiento. En caso de que se repita la no linealidad se
debe incrementar la razón de partición o disminuir el rango de sensibilidad del detector.

7.3 CALIBRACIÓN Y ESTANDARIZACIÓN.

7.3.1 Identificación: determine el tiempo de inyectando cantidades de cada uno, ya sea

separadamente o en mezclas conocidas, en las proporciones esperadas en la mezcla

Ejemplo. Tiempos de retención de iones hallados

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7.3.3 Prepare cinco estándares considerando la composición de la muestra, inyéctelos y

corra los cromatogramas. Tome los valores resultantes de los cromatogramas para hacer
la curva de calibración.

7.3.4 El cálculo de la desviación estándar relativa de los factores de respuesta para cada
analito debe ser menor al 1%. Si es mayor analice los resultados, de manera que si
alguno de los cinco estándares muestra la desviación, proceda a hacer la curva con al
menos tres de los cinco estándares, de lo contrario repita el procedimiento.

7.4 PROCEDIMIENTO DE ANÁLISIS.

7.4.1 Ajuste las variables de operación del instrumento a los valores especificados,
mediante el software (Ver water e 2695 separations module OPERATION MANUAL).

7.4.2 Ajuste la sensibilidad instrumental de tal forma que cualquiera de los componentes
pueda ser detectado e integrado a una concentración mínima de 0.002% en masa,
mediante opciones del software.

7.4.3 Inyecte 0.5 L de muestra en el puerto de inyección y comience el análisis.

7.4.4 Obtenga el cromatograma y el reporte de picos e integración.

7.5 DETERMINACION DE RESULTADOS.

7.5.1 Cálculo de factores de respuesta de la curva de calibración

7.5.1.1 Identifique con los tiempos de retención de los estándares puros

7.5.1.2 Tome del cromatograma las áreas de cada uno de los analitos en cada uno de
los cinco estándares inyectados.

7.5.1.3 Calcule el factor de respuesta

7.5.1.4 Calcule, el promedio, la desviación estándar y el porcentaje de la desviación

estándar relativa.

7.5.2.1 como ya se tiene la regresión lineal de la curva se realiza una interpolación para
obtener la concentración de los iones
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7.6 REGISTRO E INFORME

Los datos generados de los análisis se registran en el sistema digital de la empresa
teniendo en cuenta el lote de inspección, fecha y el número de la muestra que se ha
analizado correspondiente al despacho, para que se desplieguen las variables a registrar.
Igualmente una vez estén los datos en el sistema se imprime el informe y guarda dicho
registro en una carpeta destinada para tal fin.

8. DETERMINACION DE LABORATORIOS EXTERNOS

Cualquier Laboratorio de Análisis Fisicoquímicos acreditado ante la ONAC

9. ASPECTOS DE SEGURIDAD Y SALUD OCUPACIONAL

Es responsabilidad del analista, tomar las medidas de seguridad personal y para la

preservación de equipos e instalaciones, para ello tener en cuenta:

9.1 Use gafas protectoras y guantes.

9.2 Revisar las fichas de seguridad de reactivos

9.3 Consultar Almacenamiento de reactivos químicos

9.4 En caso de emergencia llamar a los teléfonos de emergencia.

10. ASPECTOS AMBIENTALES

Es responsabilidad del analista, el uso adecuado de reactivos y equipos que permitan el

buen desarrollo de su trabajo sin que este tenga un impacto negativo sobre el medio
ambiente. Es necesario para los analistas previamente conocer y manejar los siguientes
procedimientos:

 Almacenamiento de reactivos químicos

 Desactivación y neutralización de desechos químicos
 Lavado y descontaminación del material
 Manejo de derrames químicos

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11. DOCUMENTOS RELACIONADOS

No aplica

12. BIBLIOGRAFIA

 water e 2695 separations module OPERATION MANUAL

 Neue U. D. (1997). HPLC Columns theory, Technology, and Practice. Wiley-Vch,
Nueva York, EUA, 405 pp. [ Links ]
 http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0188-
49992016000300293

13. Control de las Revisiones

Revisión Fecha de la Consideraciones de Cambios en el documento.

revisión

Para mayor información sobre este documento dirigirse a quienes lo elaboraron, en nombre de la dependencia
responsable:

Jhon Henry Barrios Velasquez

Jhonbar18@hotmail.com
LABORATORIOS UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA

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