UNIVERSIDAD DE CUENCA

FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS

LABORATORIO CLÍNICA

BIOQUÍMICA I

PRÁCTICA #5

TEMA: IDENTIFICACIÓN DE GLÚCIDOS BASADA

EN DISTINTOS FUNDAMENTOS QUÍMICOS

INTEGRANTES: STEFANY GARRIDO Y NIXÓN

HIDALGO

DOCENTE: Q.F REINA MASERO M. MSC.

SEGUNDO CICLO

MARZO 2019 – AGOSTO 2019

Introducción:

Las reacciones de deshidratación y condensación con fenoles y la reacción de

las aldosas con las aminas son pruebas basadas en fundamentos químicos.

Estas reacciones permiten generalmente la identificación de hidratos de

carbono. En el ámbito de salud, sobre todo en el campo de laboratorio clínico,

en al área de bioquímica clínica son muy importantes ya que ayudan a

diagnosticar ciertos tipos de enfermedades relacionadas con los hidratos de

carbono como la diabetes. Si una prueba es positiva es porque las reacciones

determinan la presencia de glúcidos.

OBJETIVO GENERAL

 Comprender los distintos fundamentos químicos para la identificación de

hidratos de carbono mediante las reacciones correspondientes.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

 Reconocer los diferentes tipos de glúcidos a través del uso de reactivos.

 Aprender las principales técnicas para el reconocimiento de glúcidos.

 Comprender el fundamento químico de las reacciones al identificarse un

glúcido.
1. Reacciones de deshidratación y condensación con fenoles.

Los ácidos inorgánicos se forman por la combinación del hidrógeno con el metal.
Algunos ácidos minerales o blancos como los ácidos clorhídrico y sulfúrico son
capaces de deshidratar, quitando una molécula de agua a los glúcidos ya sean
monosacárido, disacárido o polisacárido. Los resultados obtenidos de esta
reacción son solubles en agua y suelen ser incapaz de presentar un color. Pese
a esto, se los puede reconocer mediante la reacción de condensación ya que
reaccionan con los fenoles y van otorgar resultados estables y con un color
específico (1).

1.1 Reacción de Molish:

Se denomina reacción de Molish en honor a Hans Molish. La reacción de Molish

es una prueba general cualitativa que permite la identificación de hidratos de
carbono y además tiene la propiedad de teñirlos. Los monosacáridos,
disacáridos y polisacáridos van a reaccionar con fenoles comúnmente con α-
naftol como también con el resorcinol y el timol en presencia de un ácido mineral
para formar sustancias con un color representativo. Se trata de una reacción de
deshidratación que los carbohidratos experimentan por la presencia del ácido
sulfúrico y clorhídrico (1). Esta reacción da como resultado sustancias complejas
coloreadas de violeta, rojo y púrpura. Debido a que después de la deshidratación
del glúcido, se polariza produciendo un carbocatión que se estabiliza con los
pares electrónicos libres del oxígeno del fenol (2).

1.2 Reacción De Seliwanoff:

Esta prueba se la utiliza para distinguir entre aldosas y cetosas a través de una
prueba química que confirme si poseen el grupo funcional que las identifica a
cada una. Esta prueba se basa en el principio de que al calentar una cetosa esta
se deshidrata más rápido que las aldosas
El reactivo contiene resorcinol y acido clorhídrico concentrado, la hidrolisis acida
de los oligosacáridos y polisacáridos nos da azucares simples.
Las cetosas deshidratadas reaccionan con el resorcinol haciendo que la muestra
presente un color rosa, o rojo cereza (3).
2.0 Reacción de las aldosas con las aminas aromáticas

Se utiliza la amina (O- toluidina) para la determinación de Aldo sacáridos en

ácido acético caliente. Se fundamenta en la reacción de la glucosa al
condensarse su grupo funcional con la O-toluidina en un medio con ácido acético
formando una mezcla equilibrada de glucosamina. Este procedimiento es rápido
sencillo y sensible que no necesita desproteinizacon y utiliza un único reactivo
estable. El color final es específicamente para la glucosa (Aldosa). Al añadir
tiourea al reactivo nos va a dar como resultado un color verde transparente. Este
método nos permite identificar aldosas de cetosas (4).

Materiales y reactivos:
 Tubos de ensayo
 Gradilla
 Pipetas serológicas
 Solución alcohólica de alfa-naftol y ácido sulfúrico.
 Solución de resorcinol
 Reactivo de o-toluidina en ácido glacial
 Reactivo de seliwanoff
 Ácido clorhídrico diluido (HCl)
 Lugol

Muestras:

 Glucosa
 Fructuosa
 Lactosa
 Almidón
 Jugos de fruta (naranja, uva o piña)
Procedimientos:
Reacción de Molish

 Disponer de 2 tubos de ensayo rotulados A y B.

 Colocar un ml de un glúcido en el tubo A y ml de jugo de fruta en el B.
 Añadir 3 gotas de alfa-naftol a cada tubo.
 Agregar 1ml de ác. sulfúrico por las paredes del tubo.

Reacción Con O-Toluidina

 Disponer dos tubos de ensayo marcados A Y B

 Colocar 0.5 ml de solución de glucosa en el tubo A y 0.5ml de fructosa en el
tubo B.
 Añadir en cada tubo 1 ml de reactivo de O-toluidina y colocarlos en baño
maría durante 5 minutos.

Reacción de selinawanoff

 Disponer dos tubos de ensayo marcados A y B

 Colocar 0,5 ml de la solución de glucosa en el tubo A y o,5 ml de la solución
de fructosa en el tubo B.
 Añadir 1 ml de reactivo de selinawanoff a los dos tubos y colocarlos en baño
hirviente durante 5 minutos y observar los cambios de coloración
Conclusiones:
Los glúcidos o carbohidratos son biomoléculas que poseen diferentes
propiedades las cuales podemos identificar a través de diferentes pruebas
agregándole reactivos para determinar sus propiedades entre ellas tenemos la
reacción de molish que se basa en la deshidratación de los carbohidratos para
obtener un aldehído a través de la presencia de acido sulfúrico o acido
clorhídrico, también tenemos la prueba de seliwanoff cuyo principio se basa en
distinguir aldosas de cetosas a través del uso de calor ya que las cetosas se
deshidratan más rápido que las aldosas para reaccionar con el resorcinol
produciendo un color rojo y por ultimo tenemos la reacción con O-toluidina para
la determinación de aldohexosas sobre toda la glucosa en un medio con ácido
acético.
Referencias Bibliográficas:

1. Cordero P, Alvarez M. Manual de prácticas de bioquímica. 1ra edición.

Cuenca; 2004. 152 p.

2. Lehninger A. Principios de Bioquímica. Editorial Omega.

ISBN:8428214107. ISBN-13:9788428214100. Barcelona España. 2006

3. REACCIÓN DE SELIWANOF - LABORATORIOS DE BIOQUÍMICA

[Internet]. [citado 13 de abril de 2019]. Disponible en:
https://sites.google.com/site/laboratoriosbioquimica/bioquimica-
i/carbohidratos/reaccion-de-seliwanof

4. López GR, Vidal EG, Frómeta DL, Arroyo VM. Evaluación De Glucemia Por
El Método De O-Toluidina. Archivo Médico de Camagüey [Internet]. 2007
[citado 13 de abril de 2019];11(2). Disponible en:
http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=211118015005