TÍTULO: IDENTIFICACIÓN BACTERIANA DEPENDIENTE DE CULTIVO

Palabras clave Identificación, cultivo diferencial, clasificación

RESUMEN
Este informe hace referencia a la identificación bacteriana dependiente de cultivo. La
identificación y clasificación de microorganismos permite estudiar a los agentes causantes de
enfermedades y relacionados con el hombre. Se realizaron diferentes cultivos bacterianos y se
identificó fenotípicamente en base a sus características observables. Se obsevaron las
características morfológicas de la bacteria en distintos medios. Escherichia coli presenta
coloración roja en el medio McConkey.
INTRODUCCIÓN
Antecedentes.
En el siglo XIX se produjo la transformación del sistema de clasificación basado en la idea de
Linneo que había conseguido una sistemática filogenética para los metazoos. El éxito de este
sistema residía en la complejidad morfológica de animales y vegetales, el estudio de la
ontogenia y el conocimiento de los fósiles existentes. Ante estas circunstancias, los primeros
microbiólogos reconocieron las ventajas de esta clasificación e intentaron trasladarla hasta los
microorganismos, pero la simplicidad morfológica de los microorganismos, las características
de su desarrollo y la ausencia de fósiles condujeron estos planteamientos hacia el desarrollo
de nuevos métodos de clasificación [CITATION Han13 \l 3082 ].
Justificación.
Una de las tareas fundamentales del laboratorio de microbiología es la identificación de los
microorganismos implicados en procesos clínicos o que tienen relación con el hombre.
Además el conocimiento del mundo bacteriano y su organización de acuerdo a un modelo
filogenético permite responder cuestiones básicas relacionadas con la naturaleza de las
bacterias, su pleomorfismo, la dificultad de su aislamiento y cultivo, así como la
investigación de un número suficiente de caracteres que proporcionasen diferenciaciones
útiles para su identificación.
Marco teórico.
La taxonomía es la ciencia de la clasificación y está constituida por dos subdisciplinas: la
identificación y la nomenclatura. La taxonomía bacteriana convencional consiste en clasificar
las bacterias mediante: características morfológicas (carácter Gram, esporas, flagelos, etc.),
tipo de metabolismo (QOH, QLA, FLA, etc.), características bioquímicas (sustratos y
productos metabólicos), tolerancia a condiciones ambientales (diferentes gases, temperatura,
pH, etc.), sensibilidad a los antibióticos, patogeneidad, entre otros [ CITATION UNC14 \l
3082 ].
Actualmente, la identificación bacteriana se realiza por medio de métodos convencionales,
basados en las características fenotípicas, puesto que su realización y coste los hace más
asequibles, se basa en las características observables de las bacterias, como su morfología,
desarrollo, y propiedades bioquímicas y metabólicas. Los métodos genotípicos suelen
reservarse para las bacterias que no se pueden identificar con métodos convencionales. Los
esquemas tradicionales de identificación fenotípica bacteriana. El cultivo es el método
diagnóstico de elección; permite el aislamiento del microorganismo implicado, su
identificación, el estudio de sensibilidad a los antimicrobianos y facilita la aplicación de
marcadores epidemiológicos, para ello, es esencial la correcta elección del medio de
crecimiento y las condiciones de incubación [ CITATION Fer10 \l 3082 ].
Objetivos:
Objetivo general

Realizar la identificación bacteriana trabajando mediante la siembra de E. coli en distintos

medios de cultivo preparados en el laboratorio y establecer para cual las pruebas dan positivo.
Objetivos específicos
 Observar el comportamiento que presentan las bacterias frente al medio de
cultivo que se encuentren inoculadas.
 Interpretar detalles de coloración del medio que pueden dar lugar a la
presencia de la bacteria en dicho cultivo.
 Identificar por medio de la prueba de indol si E. coli y B. subtilis presentan
triptofanasa.
Hipótesis
El cultivo de Escherichia coli en el medio McConkey tiene coloración roja.
MATERIALES Y MÉTODOS
Se realizaron las tinciones de los cultivos puros respectivos para caracterizar forma,
agrupación y tinción de la bacteria. Se sembró en los medios de cultivo específicos de cada
bioquímica, de acuerdo a las instrucciones que se le darán y siguiendo la clave de
identificación correspondiente. Se incubó por 24 horas a 37ºC y se observaron los resultados.

RESULTADOS
En la Fig. 1, se observa el cambio en TSI, en la izquierda se encuentra el medio inicialmente,
al comparar con el de la derecha existe cambio de coloracion y formacion de gas en la base,
con lo cual la prueba da que la bacteria es productora de gas.
 Fig.1, Comparación de medio TSI antes y después de la siembra.

En la Fig.2 tenemos la prueba de indol, la cual da positivo en medio SIM.

Fig.1, Medio SIM, prueba de indol positiva.

Fig. 3 E. coli, no se alimenta de citrato, por tanto el medio permanece igual, y la bacteria no
crece.
 Antes Después

Fig.2, Prueba negativa en citrato.

Fig.4, E. coli, la urea no es fuente de alimento para la bacteria, con lo cual la prueba es
negativa, no hay variacion en el medio.

Antes Después

Figura 3, Prueba negativa en urea, no hay crecimiento.

Fig. 5, los medios MRVP, al de la izquierda que se le aplicó α-naftol +KOH, la prueba dio
negativo no hay presencia de acetilmetilcarbinol, y el de la derecha aplicando rojo de metilo
dio positivo, por lo cual la bacteria es productora de ácidos.
 Antes Después

Fig.4, Tubos de MR-VP Normal(izquierda), prueba de Voges-Proscauer y Rojo de metilo(derecha)

Fig.6, prueba de fermentación positivas tanto para glucosa y lactosa, E. coli, genera
fermentación de estos azúcares.

Antes Después
Fig.5, Fermentación de glucosa y lactosa por E. coli.

Fig.7, la bacteria muestra crecimiento en agar MacConkey, como se observa la coloración

rosada, lo que demuestra fermentacion de lactosa.
 Fig.6, Crecimiento de E. coli en agar MacConkey.

DISCUSIÓN
CONCLUSIONES
 Escherichia coli, es una bacteria productora de gases, que genera ácidos, y su fuente
de carbono son los azúcares.
 La enzima ureasa no se encuentra presente en E. coli.
 Los compuestos que suelen usar para la fermentación de carbohidratos son lactosa y
glucosa principalmente.
 El agar MacConkey es indicador de la presencia de microorganismos fermentadores
de lactosa.

BIBLIOGRAFÍA
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https://www.seimc.org/contenidos/documentoscientificos/procedimientosmicrobiologia/sei
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Mateos P. (2010). Obtenido de CONTROL DE LAS POBLACIONES MICROBIANAS: ESTERILIZACION Y

DESINFECCION: La destrucción de los microorganismos por incineración es una práctica
rutinaria en los laboratorios. Las asas de siembra se calientan a la llama de mecheros
Bunsen. La incineración también se utiliza en la eliminación de residuos hospitalarios

Montes M. et al. (2005). Estudio taxonómico polifásico de bacterias procedentes de ambientes

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https://www.tdx.cat/bitstream/handle/10803/2394/2.INTRODUCCION.pdf

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