PROCARIOTAS

Biología general
informe 2

yury Lorena Bernal Saldarriaga

Danna Sofia Galvis Villalba
Daniela Rodero Navarrete

OBJETIVOS:
● OBJETIVO GENERAL:Identificar por medio del microscopio las
bacterias procariotas y realizar cultivos con estas para observar su
evolución.
● OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
1. Reconocer el concepto de bacterias procariotas para así
diferenciarlas con las bacterias eucariotas
2. conocer el procedimiento de la tinción de gram y tinción
simple para teñir las bacterias y poder observarlas de mejor
manera en el microscopio
3. conocer las propiedades de algunas bacterias para la
realización de cultivos bacterianos
4. conocer las agrupaciones de las colonias para poder
clasificarlas según lo observado en la evolución de los
cultivos

INTRODUCCIÓN
Según los conocimientos obtenidos sobre células procariotas por medio de
esta práctica lograremos identificar cada una de las bacterias teniendo en
cuenta sus propiedades y sus características para así poder clasificarlas en
grupos más pequeños ,con procedimientos como la tinción de gram ya que sin
teñir la bacteria es muy difícil identificarla con exactitud ,así sus rasgos físicos
van hacer más evidentes y con ello saber en este caso el estado de su
peptidoglucano , su agrupación y en general su composición .
También teniendo en cuenta conocimientos previos podemos identificar según
las caracteristicas físicas que presenta un cultivo bacteriano su forma de
clasificación , ya que muchas bacterias son muy parecidas morfológicamente
lo que hace que sea muy difícil diferenciarlas , sin embargo por medio de los
cultivos estas se multiplican ( ya que las bacterias no pueden ser estudiadas de
forma independiente si no solo en poblaciones), de estos se obtienen colonias
, así sus rasgos van a ser más evidentes y podemos diferenciarlas con mayor
facilidad .cabe aclarar que las condiciones en las que se encuentre la bacteria
influyen en su resultado, esta tiene que estar sometida a factores como
temperatura, ph ,humedad ,luz, etc uno de estos factores que es realmente
importante es el medio donde se realiza la siembra, ya que existen varios tipos
de formas para realizar la siembra, sin embargo esta solo se puede realizar en
el agar debido a que es el único medio junto con algunos líquidos donde se
pueden realizar este tipo de siembras.

MATERIALES Y MÉTODOS

● MATERIALES:

MATERIALES CANTIDAD UNIDAD DE

MEDIDA
Microscopio de luz 1 unidad
Rejillas micrométricas 1 unidad
Aceite de inmersión 1 unidad
Goteros 1 unidad
Cajas de Petri con Agar 2 unidad
Nutritivo
Solución salina 100 ml
Colorantes para tinción de 1 Kit completo
Gram
Azul de metileno, fucsina y 1 frasco
safranina
Metanol 1 unidad
Micropreparados 1 unidad
Asas de bacteriología e 1 unidad
hisopos
 Mecheros 1 unidad
Laminas y laminillas 1 caja
Marcador de vidrio 1 unidad

● MÉTODOS:

NOMBRE PROCEDIMIENTO
Tinción simple con sujetamos el asa sobre el mechero durante unos segundos hasta
el frotis bacteriano llegar a su mayor temperatura ( este paso lo realizamos dos o tres
veces), con el asa caliente lo enfriamos en una parte fértil de la caja
de petri y tomamos una pequeña muestra de la bacteria .Previamente
en el portaobjetos pusimos una pequeña cantidad de agua y con la
muestra ya tomada frotamos hasta que la mezcla se volviera un tanto
homogénea , esta mezcla la pasamos cuidadosamente por el mechero
hasta que el agua se evaporó .Ya listo el frotis bacteriano, cubrimos la
mezcla con safranina por un minuto y lo lavamos, al secarse
completamente pusimos un cubreobjetos y lo observamos en el
microscopio
Tinción gram con Realizado ya el frotis bacteriano previamente explicado , le añadimos
el frotis bacteriano a la mezcla cristal violeta por un minuto , pasado el minuto lo
lavamos, posteriormente añadimos lugol también por un minuto y
lavamos, luego decoramos con el alcohol-acetona por
aproximadamente treinta segundos y lavamos y por último teñimos
con safranina también por un minuto y lavamos, al secarse la
preparación añadimos el cubreobjetos e hicimos la observación en el
microscopio
cultivo de bacterias frente al mechero calentamos hasta su máxima temperatura el asa,
tomamos la caja de petri y enfriamos en una parte fértil,
posteriormente tomamos una pequeña muestra con el asa , hicimos
la siembra , primero haciendo tres líneas horizontales , volvimos a
realizar el procedimiento y al sembrar hicimos tres líneas verticales,
donde solo la primera debía tocar una de las horizontales ,
realizamos de nuevo el procedimiento donde solo la primera podía
tocar una de las líneas previamente hechas luego las líneas las
hicimos de manera horizontal en el otro extremo y por último
realizamos nuevamente el procedimiento y donde el sembrado lo
 realizamos en forma de espiral , cerramos nuestro cultivo y
esperamos aproximadamente 24 horas para poder ver los cambios.

● RESULTADOS:

TABLA 1: BACTERIA E.COLI

NOMBRE IMAGEN OBJETI RESULTADO
VO
BACTERIA 4X Al observar la
E COLI bacteria en los
objetivos
4x,10xy 40x no
pudimos
detectar con
exactitud las
características
10X de esta , sin
embargo al
observarla en el
objetivo 100x
pudimos
identificar
algunos rasgos
lo que nos llevó
a deducir que la
40X
bacteria hace
parte del grupo
de los bacilos
debido a que en
ella abundan
pequeñas
 100X partículas
alargadas, y
gracias a su
color podemos
diferenciarla
como una
bacteria gram
positiva.

TABLA 2 : BACTERIA BACILUS SUBTILIS

NOMBRE IMAGEN OBJETIVO RESULTADO

BACTERIA 4X con las imágenes

BACILUS obtenidas de la bacteria
SUBTILIS en el microscopio
realmente no es muy
clara la estructura y la
forma de la bacteria
sin embargo podemos
encontrar que tiene una
10X textura un tanto
parecida a la e.coli
con rasgos alargados lo
que nos lleva a deducir
que pertenece al grupo
de los bacilos y es una
bacteria gram negativa
por su grosor y su
coloración

100X
 TABLA 3:RESULTADOS CULTIVOS

BACTERIA IMAGEN RESULTADO

E.COLI MORFOLOGIA
MACROSCÓPICA:plana

COLONIA:Filamentosa

BORDES DE LA
COLONIA: lobulado

FROTIS BUCAL MORFOLOGIA

MACROSCÓPICA:
Papilosa

COLONIA:Puntiforme

BORDES DE LA
COLONIA:Dentado
BACILUS SUBTILIS MORFOLOGIA
MACROSCÓPICA: Plana

COLONIA:Irregular

BORDES DE LA
COLONIA: Ondulado

ANÁLISIS DE RESULTADOS :

Las bacterias observadas en la práctica a pesar de que a simple vista tienen una
contextura bastante similar al observarlas en el microscopio tienen características
bastante diferenciales .
las células procariotas debido a que no cuentan con un núcleo y organelos es muy
complejo verlas e identificarlas , sin embargo gracias al procedimiento realizado
llamado tinción de gram se nos facilitó saber si la bacteria es gram positiva o gram
negativa con solo su decoloración, gracias a esta clasificación podemos obtener
información de la bacteria , datos importantes que diferencian las bacterias gram
positivas de las gram negativas como la composición y estructura de la pared celular,
presencia de una membrana externa en el caso de las gram negativas y el grosor del
peptidoglicano.
Con el análisis realizado con respecto a la tabla 1 y la tabla 2 podemos ver que la
bacteria E. coli tiene rasgos que no es fácil identificar la identidad de la bacteria
ya que tiene características muy similares a las de una bacteria gram positiva y
también a las de una gram negativa , sin embargo con respecto a su estructura
concluimos que es gram positiva debido a que no encontramos en ella presencia de
membrana u otros rasgos que están presentes en una gram negativa.
Con respecto a la bacteria bacillus subtilis podemos evidenciar una capa gruesa de
peptidoglicano donde esto nos llevó a clasificarla en una bacteria gram negativa por
esta razón la bacteria tiene una decoloración azul , también observamos sus formas
alargadas en su estructura lo que nos llevó a clasificarlas en el grupo de los
bacilos,sin embargo nuestros datos son erróneos debido a que la bacteria bacillus
subtilis en una bacteria gram positiva.

en el caso de los cultivos, todos presentan formas totalmente diferentes sin embargo
fue muy complejo clasificarlas .
En el caso de la bacteria E. coli pudimos reconocer características similares con las
colonias filamentosas ya que tienen formas un tanto alargadas y su borde gracias a
que tiene puntas redondeadas se encuentra dentro de los bordes lobulados
En el frotis bucal encontramos una colonia puntiforme porque como su nombre lo
indica la mayoría de su textura son puntos gruesos y su borde es dentado gracias a
que los mismos puntos lo forman y en el caso del cultivo con la bacteria bacillus
subtilis la clasificamos en la colonia de los irregulares debido a que su aspecto es
bastante indefinido.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

● LIBRO BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

● LIBRO INTRODUCCION A LA BIOLOGÍA
● DOCUMENTAL CELULA EUCARIOTA Y PROCARIOTA-OSGAM