American Journal of Chinese Medicine. 2011;39(6):1275-90.

Antioxidant, anti-inflammatory and antiproliferative activities

of Kalanchoe gracilis (L.) DC stem.
Lai ZR, Ho YL, Huang SC, Huang TH, Lai SC, Tsai JC, Wang CY, Huang GJ, Chang YS.

Source
School of Chinese Pharmaceutical Sciences and Chinese Medicine Resources, China Medical University,
Taichung, Taiwan.
Abstract
Oxidative stress and inflammation are related to several chronic diseases including cancer and
atherosclerosis. Kalanchoe gracilis (L.) DC is a special folk medicinal plant in Taiwan. The aim of this
study was to evaluate the antioxidant, anti-inflammatory and antiproliferative activities of the
methanolic extract and fractions of the stem of K. gracilis. TEAC, total phenolic compound content,
total flavonoid content, DPPH radical scavenging activity, reducing power, inhibition of NO production
in LPS-induced RAW264.7 cells, and inhibition of cancer cell proliferation were analyzed. Among all
fractions, the chloroform fraction showed the highest TEAC and DPPH radical scavenging activities. The
chloroform fraction also had the highest content of polyphenols and flavonoids. Chloroform fractions
also decreased LPS-induced NO production and expressions of iNOS and COX-2 in RAW264.7 cells. The
antiproliferative activities of the methanolic extract and fractions were studied in vitro using HepG2
cells, and the results were consistent with their antioxidant capacities. Chloroform fractions had the
highest antiproliferative activity with an IC(50) of 136.85 ± 2.32 μg/ml. Eupafolin also had good
pharmacological activity in the antioxidant, anti-inflammation and antiproliferative. Eupafolin might
be an important bioactive compound in the stem of K. gracilis. The above experimental data indicated
that the stem of K. gracilis is a potent antioxidant medicinal plant, and such efficacy may be mainly
attributed to its polyphenolic compounds.
PMID:

22083996

[PubMed - indexed for MEDLINE]

Fuente: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22083996

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razón del uso en los mismos, de un lenguaje médico que no está a mi alcance. Para cualquier
duda consultar a especialistas.

Actividad antioxidante, anti-inflamatoria y antiproliferativa

de Kalanchoe gracilis (L.) DC vástago.
Lai ZR , Ho YL , Huang SC , Huang TH , Lai SC , Tsai JC , CY Wang , Huang GJ , YS Chang .

Fuente
Facultad de Ciencias Farmacéuticas de la china y la medicina china de Recursos de la Universidad
Médica de China, Taichung, Taiwan.
Abstracto
El estrés oxidativo y la inflamación están relacionados con varias enfermedades
crónicas, incluyendo el cáncer y la aterosclerosis.
Kalanchoegracilis (L.) DC es una planta medicinal popular especial en Taiwan. El objetivo de este
estudio fue evaluar las propiedades antioxidantes, antiinflamatorios y antiproliferativas del extracto
metanólico y fracciones del vástago de K. gracilis. TEAC, contenido total de compuesto fenólico, el
contenido total de flavonoides, actividad captadora de radicales DPPH, reducción de la potencia, la
inhibición de la producción de NO en las células RAW264.7 inducidos por LPS, y la inhibición
de cáncer Se analizaron la proliferación celular. Entre todas las fracciones, la fracción de cloroformo
mostró la más alta TEAC y actividades de captación de radicales DPPH. La fracción de cloroformo
también tuvo el mayor contenido de polifenoles y flavonoides. Fracciones de cloroformo también
disminuyeron LPS indujo la producción de NO y la expresión de iNOS y COX-2 en las células
RAW264.7. Las actividades antiproliferativas del extracto metanólico y las fracciones se estudiaron in
vitro usando células HepG2, y los resultados fueron consistentes con sus capacidades
antioxidantes. Fracciones de cloroformo tenían la mayor actividad antiproliferativa con una CI (50)
de 136,85 ± 2,32 g / ml. Eupafolin también tenía buena actividad farmacológica en el antioxidante,
antiinflamatoria y antiproliferativa. Eupafolin podría ser un compuesto bioactivo importante en el tallo de
K. gracilis. Los datos experimentales anteriores indicaron que el vástago de K. gracilis es una planta
medicinal que actúa como potente antioxidante, y dicha eficacia puede atribuirse principalmente a sus
compuestos polifenólicos.
PMID:

22083996

[PubMed - Medline]
Fuente: http://oncocomplementos.blogspot.com/2013/11/kalanchoe-sus-estudios-clinicos.html

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17078679

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22666293

Conclusiones de otro studio:

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3361180/

Discussion
K. gracilis is a traditional Chinese medicinal herb commonly used for the treatments of injury,
pain, and inflammation; such effects have also been evidenced in animal experiments of
formalin-induced nociception and λ-carrageenan-induced inflammation recently [2]. This study
demonstrated K. gracilis leaf extract exhibiting the antiviral activity against EV71 and CVA16 in
vitro and in vivo (Figures (Figures33–8, Supplemental Table 1). The results indicated K.
gracilis exhibiting antiviral effects similar to other species in the Kalanchoe genus. For
example, K. pinnata Pers. has been shown with significant antiviral activity against Herpes
Simplex and Epstein-Barr viruses [16]. K. farinacea inhibits in vitro replication of Influenza A
and Herpes Simplex Virus Type 1 [15]. K. brasiliensis possesses anti-inflammatory and
immunosuppressive effects on zymosan-induced inflammation in mice [33]. Extracts
of Kalanchoe farinacea have in vitro antiviral activity against Influenza A and Herpes Simplex
Type 1 [15]. Together with the results and the previous reports, herb species in the Kalanchoe
genus could possess active antiviral compounds.
HPLC and UV/vis absorption spectra demonstrated the chemical contents and the fingerprint
profile of K. gracilis leaf extract of ethyl acetate layer by using a photodiode array detector
(Figure 1). The relative amounts of ferulic acid (~7.59% w/w), quercetin (~0.33% w/w), and
kaempferol (~0.16% w/w) were also identified in K. gracilis leaf extract of ethyl acetate layer
and were found to be in agreement with identified flavonoids of K. gracilis in previous reports
[3–5]. Flavonoids exhibit multiple functions, of which inhibition on viral replication [11–14] is
among. In the present study, quercetin was demonstrated to possess concentration-dependent
antienteroviral activities with the IC50values of 39.63 μg/mL for EV71 and 59.53 μg/mL for
CVA16 (Figure 5). However, anti-enteroviral activity of quercetin was less effective than that
of K. gracilis leaf extract (Figure 4). K. gracilis leaf extract is suggested to contain other potent
anti-enteroviral components besides quercetin. Phytochemically, Kalanchoe species are known
to contain flavonoids (e.g., teolin, quercetin, quercitrin, kaempferol, eupafolin), glycosidic
derivatives of eupafolin, bufadienolides, and coumarins [4, 5, 16], of which bis- and tetra-
coumarins have been shown with inhibitory effects on the activity of HIV-1 integrase [7], while
bufadienolides can reduce the activation of Epstein-Barr virus early antigen [16]. In addition,
many active compounds of natural products have been identified as potential anti-EV71 agents,
including gallic acid (IC50 = 0.8 μg/mL) [34], allophycocyanin (IC50 = 0.056 μM) [35],
chrysosplenetin (IC50 = 0.2 μM), penduletin (IC50 = 0.2 μM) [36], and aloe-emodin (IC50 =
0.14 μM) [37]. This study revealed that quercetin showed a specific anti-EV71 activity (IC50 =
39.6 μg/mL), but might be less potent than the active compounds of natural products in above
previous reports. Therefore, active phytochemical contents of K. gracilis leaf extract against
EV71 and CVA16 should be further characterized.
In the evaluation of cytotoxicity of K. gracilis leaf extract, it was shown that it manifested less
cytotoxicity in comparison with ferulic acid, quercetin, and kaempferol. Not only that, it showed
better antiviral activities against EV71 and CVA16 as compared to the three marker components
(Figures (Figures22–4, Supplemental Figure 1). K. gracilis leaf extract at the concentration of
50 μg/mL potently inhibited 90% yield production of both viruses in RD cells (Figure 3). Also,
IC50 value of K. gracilis leaf extract against EV71 and CVA16 were 35.88 μg/mL and
42.91 μg/mL, respectively (Figure 4), while the therapeutic index of K. gracilis leaf extract
against EV71 and CVA16 ranged from 23 to 28. A literature survey indicated some extracts of
Chinese herbs exhibiting anti-EV71 activities in vitro, such as Houttuynia cordata Thunb (IC50 =
125.9 μg/mL) [38], Woodfordia fruticosa Kurz (IC50 = 1.2 μg/mL) [34], Salvia
miltiorrhiza (IC50 = 585 μg/mL) [39], Pueraria lobata (IC50 = 0.028 μg/mL) [40], and Glycyrrhiza
uralensis (IC50 = 0.056 μg/mL) [41]. Therefore, K. gracilis leaf extract exhibited moderately
potent anti- EV71 and CVA16 activities.
Although pre- and post-treatments of K. gracilis leaf extract exhibited time differences, the two
treatments reached 90% viral reductions (Figure 6), implying that antiviral activity of K.
gracilis leaf extract could be associated with targeting viral proteolytic enzymes, viral RNA
replication machinery, and host cell factors, and even reducing virus-induced cytopathogenesis,
or inducing host antiviral responses. Because enterovirus 2A protease cleaves viral polyproteins
and cellular factors in which regulates in apoptosis and nuclear-cytoplasmic trafficking of NF-κB
[31, 32], viral 2A protease was selected as the possible target by K. gracilis leaf extract. In
vitro recombinant 2A protease and cell-based FRET assays indicated K. gracilis leaf extract
inhibited the enzymatic activity of viral 2A proteases in a concentration-dependent manner
(Figures (Figures77 and and8).8). In addition, K. gracilis leaf extract significantly reduced the
EV71-induced apoptosis, such as decreasing proform and active form of caspase 9 in EV71-
infected cells (Supplemental Figure 3). Likewise, K. gracilis leaf extract abated the up-regulation
of IL-6 and RANTES gene expressions due to EV71 and/or CVA16 infection (Figure 9) which
correlated with down-regulation of virus-induced NF-κB-mediated signaling (Supplemental
Figure 2). Therefore, K. gracilis leaf extract exhibited an inhibitory effect on enteroviral 2A
protease. This action might be in agreement with the decrease of virus-induced apoptosis and
NF-κB-mediated proinflammation. Our future perspective would be to purify and identify
potent K. gracili compounds as viral 2A inhibitors.
It has been shown that significant increases in the levels of IL-1β, IL-6, IL-10, IL-13, IFN-γ, and
TNF-α are detected in the serum and cerebral spinal fluid of EV71-infected patients [23, 42–45].
Moreover, elevation of IL-1β, IL-6, and TNF-α in CSF strongly correlates with clinical severity
and is believed to be responsible for EV71-induced immunopathogenesis [26, 44, 46]. Clinically,
treatment of anti-IL-6 neutralizing antibodies increases survival rates, reduces tissue damage,
and activates immune cells, but could not affect the viral loads in EV71-infected neonate mice
[47]. We demonstrated K. gracilis leaf extract concentration dependently reduced IL-6 mRNA
levels upregulated by EV71 or CVA16 infection in RD cells (Figures 9(a)–9(c)). Moreover, we
suggested significant inhibitory effects of K. gracilis leaf extract on in vitro replications of EV71
and CVA16 (Supplemental Figure 1, Figures Figures44–6) associated with its potent inhibition
on viral 2A protease activities (Figures (Figures77 and and8).8). Therefore, a combination of
effective compounds of K. gracilis leaf extract shows a potential therapeutic approach against
enteroviral infection.
In conclusion, K. gracilis leaf extract contains effective compounds with anti-enteroviral
activities. K. gracilis leaf extract possesses potent effects in inhibiting enzymatic activities of
viral 2A protease and reducing virus-induced expression of pro-inflammatory cytokines IL-6 and
RANTES. K. gracilis leaf extract could be a safe and potential therapeutic agent against
enteroviral infection.

Discusión

K. gracilis es una hierba medicinal china tradicional comúnmente utilizada para los tratamientos de
lesión, dolor e inflamación; Tales efectos también han sido evidenciados en experimentos con animales
de nocicepción inducida por formalina y la inflamación inducida por λ-carragenano recientemente [2].
Este estudio demostró que el extracto de hojas de K. gracilis exhibía la actividad antiviral frente a EV71 y
CVA16 in vitro e in vivo (Figuras 33-8, Tabla Suplementaria 1) Los resultados indicaron que K. gracilis
exhibía efectos antivirales similares a otras especies en el género Kalanchoe Por ejemplo, se ha
demostrado que K. pinnata Pers presenta una actividad antiviral significativa contra los virus Herpes
Simplex y Epstein-Barr [15], K. farinacea inhibe la replicación in vitro del virus de la gripe A y del virus del
herpes simple tipo 1 [15]. Brasiliensis posee efectos antiinflamatorios e inmunosupresores sobre la
inflamación inducida por zimosan en ratones.33 Los extractos de Kalanchoe farinacea tienen actividad
antiviral in vitro contra la gripe A y el herpes simpletipo tipo 1. [15] Junto con los resultados y los
informes anteriores, la hierba Las especies del género Kalanchoe podrían poseer compuestos antivirales
activos.

Los espectros de HPLC y de absorción de UV / vis demostraron el contenido químico y el perfil de huella
dactilar del extracto de hoja de K. gracilis de capa de acetato de etilo usando un detector de matriz de
fotodiodos (Figura 1). También se identificaron las cantidades relativas de ácido ferúlico (~ 7,59% p / p),
quercetina (~ 0,33% p / p) y kaempferol (~ 0,16% p / p) en el extracto de hojas de K. gracilis de acetato
de etilo Encontró estar de acuerdo con los flavonoides identificados de K. gracilis en informes anteriores
[3 - 5]. Los flavonoides presentan múltiples funciones, de las cuales se encuentra la inhibición de la
replicación viral [11 - 14]. En el presente estudio, se demostró que la quercetina posee actividades
antienterovíricas dependientes de la concentración con valores IC50 de 39,63 μg / mL para EV71 y 59,53
μg / mL para CVA16 (Figura 5). Sin embargo, la actividad anti-enteroviral de la quercetina fue menos
eficaz que la del extracto de hojas de K. gracilis (Figura 4). Se sugiere que el extracto de hojas de K.
gracilis contenga otros componentes anti-enterovirales potentes además de la quercetina.
Fitoquímicamente, se sabe que las especies de Kalanchoe contienen flavonoides (por ejemplo, teolin,
quercetina, quercitrina, kaempferol, eupafolin), derivados glucosídicos de eupafolin, bufadienolides y
cumarinas [4, 5, 16], de los cuales bis- y tetracummarinas Mostrada con efectos inhibitorios sobre la
actividad de la integrasa de VIH-1, mientras que bufadienolides puede reducir la activación de Epstein-
Barr virus antígeno temprano [16]. Además, se han identificado muchos compuestos activos de
productos naturales como posibles agentes anti-EV71, incluyendo ácido gálico (IC50 = 0,8 μg / mL) [34],
aloficocyanina (CI50 = 0,056 μM) [35], crisósplenetina (IC50 = 0,2 Μ M), penduletin (IC50 = 0,2 μ M) [36],
y aloe-emodin (IC50 = 0,14 μ M) [37]. Este estudio reveló que la quercetina mostró una actividad anti-
EV71 específica (IC50 = 39,6 μg / mL), pero podría ser menos potente que los compuestos activos de los
productos naturales en los informes anteriores anteriores. Por lo tanto, los contenidos fitoquímicos
activos del extracto de hojas de K. gracilis contra EV71 y CVA16 deberían caracterizarse adicionalmente.

En la evaluación de la citotoxicidad del extracto de hojas de K. gracilis, se demostró que se manifestó

menos citotoxicidad en comparación con el ácido ferúlico, la quercetina y el kaempferol. No sólo eso,
mostró mejores actividades antivirales contra EV71 y CVA16 en comparación con los tres componentes
marcadores (Figuras (Figuras 22-4, Figura 1) .El extracto de hojas de K. gracilis a la concentración de 50
μg / mL inhibió de forma potente el 90% de rendimiento La producción de ambos virus en células RD
(Figura 3) También, el valor de IC50 del extracto de hojas de K. gracilis contra EV71 y CVA16 fue 35,88 μg
/ mL y 42,91 μg / mL, respectivamente (Figura 4), mientras que el índice terapéutico de K. Gracilis
extracto de hoja contra EV71 y CVA16 varió de 23 a 28. Una encuesta de la literatura indicó algunos
extractos de hierbas chinas que exhiben anti-EV71 actividades in vitro, como Houttuynia cordata Thunb
(IC50 = 125,9 μ g / mL), Woodfordia fruticosa Kurz (CI50 = 1,2 μg / mL) [34], Salvia miltiorrhiza (IC50 =
585 μg / mL) [39], Pueraria lobata (IC50 = 0,028 μg / mL) [40] y Glycyrrhiza uralensis (IC50 = 0,056 μg /
mL ) [41] Por lo tanto, el extracto de hojas de K. gracilis exhibió actividades moderadamente potentes
anti-EV71 y CVA16.

Aunque los tratamientos previos y posteriores al extracto de hojas de K. gracilis presentaron diferencias
de tiempo, los dos tratamientos alcanzaron 90% de reducción viral (Figura 6), lo que implica que la
actividad antiviral del extracto de hojas de K. gracilis podría estar asociada con enzimas proteolíticas
virales Maquinaria de replicación de ARN y factores de la célula huésped, e incluso reducir la
citopatogenia inducida por el virus, o inducir respuestas antivirales del huésped. Debido a que el
enterovirus 2A proteasa escinde las poliproteínas virales y los factores celulares en los que se regula en
la apoptosis y el tráfico nuclear-citoplásmico de NF-κ B [31, 32], viral 2A proteasa fue seleccionado como
posible blanco de K. gracilis extracto de hoja. La proteasa 2A recombinante in vitro y los ensayos de FRET
basados en células indicaron que el extracto de hojas de K. gracilis inhibía la actividad enzimática de las
proteasas 2A víricas de una manera dependiente de la concentración (Figuras 77 y 8) .8). Además, el
extracto de hojas de K. gracilis redujo significativamente la apoptosis inducida por EV71, como la
disminución del proformo y la forma activa de la caspasa 9 en las células infectadas con EV71 (Figura 3).
Del mismo modo, el extracto de hojas de K. gracilis disminuyó la regulación de las expresiones de los
genes IL-6 y RANTES debido a la infección EV71 y / o CVA16 (Figura 9), que se correlacionó con la
regulación negativa de la señalización mediada por NF-κB inducida por virus Figura 2). Por lo tanto, el
extracto de hoja de K. gracilis exhibió un efecto inhibidor sobre la proteasa 2A enteroviral. Esta acción
podría estar de acuerdo con la disminución de la apoptosis inducida por virus y NF-κ B mediada por la
proinflamación. Nuestra perspectiva futura sería purificar e identificar potentes compuestos de K. gracili
como inhibidores virales 2A.

Se ha demostrado que se detectan aumentos significativos en los niveles de IL-1β, IL-6, IL-10, IL-13, IFN-γ
y TNF-α en el suero y el líquido cefalorraquídeo de pacientes infectados con EV71 [ 23, 42 - 45]. Por otra
parte, la elevación de IL-1β, IL-6 y TNF-α en el LCR se correlaciona fuertemente con la gravedad clínica y
se cree que es responsable de EV71 inducida por immunopathogenesis [26, 44, 46]. Clínicamente, el
tratamiento de los anticuerpos neutralizantes anti-IL-6 aumenta las tasas de supervivencia, reduce el
daño tisular y activa las células inmunes, pero no pudo afectar las cargas virales en los ratones neonatos
infectados con EV71 [47]. Se demostró K. gracilis extracto de hoja de concentración de forma
dependiente reducido IL-6 mRNA niveles upregulated por EV71 o CVA16 infección en RD células (Figuras
9 (a) -9 (c)). Además, se sugieren efectos inhibitorios significativos del extracto de hojas de K. gracilis en
las repeticiones in vitro de EV71 y CVA16 (Figura 1, Figuras 44-6) asociado con su potente inhibición de
las actividades de la proteasa 2A viral (Figuras 7 y 8) 8. ). Por lo tanto, una combinación de compuestos
eficaces del extracto de hoja de K. gracilis muestra un enfoque terapéutico potencial contra la infección
enteroviral.

En conclusión, el extracto de hoja de K. gracilis contiene compuestos eficaces con actividades anti-
enterovirales. El extracto de hoja de K. gracilis posee potentes efectos en la inhibición de las actividades
enzimáticas de la proteasa 2A viral y en la reducción de la expresión inducida por el virus de las
citoquinas pro-inflamatorias IL-6 y RANTES. El extracto de la hoja de K. gracilis podría ser un agente
terapéutico seguro y potencial contra la infección enteroviral.

Kalanchoe gracilis Hance, 1870:

Ubicacion:

http://tai2.ntu.edu.tw/Specimen/specimen.php?taiid=052247

http://kc08316214.pixnet.net/blog/post/41661687-%E4%BC%BD%E8%97%8D%E8%8F%9C

http://image.digitalarchives.tw/ImageCache/00/61/44/31.jpg