CATENA RESPIRATORIE SI FOSFORILAREA OXIDATIVA

Sist mitocondrial care cupleaza resp cu

generare de ATP=fosforilare oxidatv(confera
orgnsm aerobe capacitatea de a capta o
cantitate foarte mare de enrgie libera din
cel,in comparatie cu orgnsm anaerobe). La
niv mitocondriei enzimele lantului resp
colecteaza si transp acest potential reducatr
si il directioneaza spre molec de O2.R finala
este combinarea H + O2 si formarea molc de
apa H2O.
• Catena resp cuprinde 3 pompe de protoni
legate prin 2 transportori mobili de elctrni.
Electrn sunt transf de la NADH spre O2 printr-un
lant alc din:NADH-Q reductz,Citocrom
redctz,Citocrom oxidz.
• “Curgerea” electrnlr prin aceste compleze
conduce la scoaterea protonilor in afara
matricei mitocondriale
• UBIQUINONA transp electrn preluati si de la
FADH2-produsi prin oxidarea succinatului in
cadrul ciclului acizilor tricarboxilici-la citocrom
oxidaza. Are o struct chinonica lunga de care
este fixata o catena izoprenoidica lunga.
CITOCROMUL C ,o proteina mica,preia electrni de
la citocromul reductaza si ii aduce la citcrm
oxidza, componenta finala a lantului.
-contine un nucleu hem ca grupare prostetica si
are dat acestei struct cul galbena. Ionul Fe situat
in centrul nucleului hem isi poate schimba
starea de oxidare prin aceasta schimbandu-se
transp electrnlr. Grp hem este protoporfirina IX
la fel ca hemul Hb si mioglbinei.Grp hem din
citocrom sunt legate covalent de partea
proteica prin punti tip eter realizate intre grp-SH
ale cisteinei din catenele polipetidice si grp vinil
CLUSTERELE FE-S . Joaca un rol esential intr-o
serie de R redox din sistemele biologice. Sunt
struct cristaline ce contin atat sulf anorganic cat
si sulf prov de la cisteina. Ionul de fier poate
trece usor de la Fe3+ la Fe2+ realizand transp
electrn
NADH-Q REDUCTZ-struct are dim mai mare decat
a ribozomului este insuficient descifrata. Are
formal literei L si prez 2 parti distincte:
O parte hidrofoba,orizontala,inserata in memebr,
contine lanturile polipeptdcecodificate de
ADNul mitocondrial.
Partea situata vertical cont proteine aflate in
afara membrnei spre int matricii mitocondriale.
NADH se fixeaza pe un situs de pe portiunea
vert a complx pt a-si transf potentialul reduc
catre FMN. Acest potential curge spre cele 3
clustre 4Fe-4S si apoi fixat de ubiquinona.De
aici poten red este transf catre catre un cluster
2Fe-2S iar in final catre o mol mobila de
ubiquinona din miezul hidrofob al membrnei
mitocndr interne.
TRECEREA POT REDUC. PRIN NADHQ-REDUCTZ
ETAPA I=consta in legarea NADH+transf
potentialului sau redox care FMN care constit
grp prostetica a complxlui.FMN trece in FMNH2.
NADH + H+ + FMN  FMNH2 + NAD+
ETAPA II=electrn sunt apoi transf de la FMNH
catre o seri de clustere Fe-S,cel de-al doilea tip
de grp prostetice ale complx NADH-Q redctz.
ETAPA III=electrn din clustrele Fe-S ale NADH-Q
redctz sunt transmisi coenzimei Q.
CITOCROM REDUCTZ(COMPLEXUL III) este cea de-a2a
pompda de protni din catena resp.Are ca trasnp de
electrn=citocromii.Contine 2 tipuri de citocromi=Cit
b si Cit C1. Contine o proteina Fe-S si cateva lanturi
polipetidice.Functia citocr.redctz este de a canaliza
transf electrn adusi de ubiquinol la citocrmC
(hidrosolubil) si de a pompa concomitent protoni in
afara matricei mitocndrale. Ubiquinolul transf unul
din cei 2 electrn clusterului Fe-S al complexului.
Electrn este apoi pasat secvential citocromului c1 si
apoi cit C care-l scoate afara din complexul II.
In cursul unui ciclu complet de acest fel 2 molec
de Ubiquinol (QH2) sunt oxidate pt a forma 2
molecl de ubiquinona (Q). Iar o molec de
ubiquinona este redusa la ubiquinol. Aceasta
aparenta complicare rezolva transf electrn de la
un transportor bivalnt (QH2) la un transp
monovalent(cit.C) Componenta reductz care
cuprinde citocromul b constit in esenta un
sistem de reciclare care face posibila utlzrea
ambilor elctrn transp de ubiquinol.
CITOCROM OXIDAZA(COMPLX IV) Catalizeaza
transf electrn de pe ferocitocrm C(citcrm C
redus) catre molecula de O,acceptorul final
4citcr C(2+)+4 H+ +O2 -> 4 citC(3+)+2H2O
4 electrn sunt canalizati spre reducerea de
completa a O2 si concomitent sunt “pompati” in
afara matricei in total 4 protoni
-cuprinde 10 subunitati dintre care 3 sunt
codificate de genomul mitocondrl
-contine 2 nuclee Hem A si 2 ioni de Cupru notati
Cu A si Cu B .Cele 2 nuclee hem au propr redox
diferite .
Hemul se afla aproape de Cu A in subunitatea II a
complexului,iar hemul a3 estein apropierea ionului
Cu B in subunitatea I. Citocrm C redus transf electrn
sau clusterului hem a-CuA.Dupa aceea electrn este
transf clusterului a3-CuB.La niv acestei struct O2
este redus printr-o serie de pasi la 2 molcle H2O. O2
constituie un aceeptor terminal de elctrni ideal
deoarece:are afinitate mare pt ellectrn ceea ce
asigura o forta termodinamica puternica de
canalizare a acestora/spre deosebire de alti
acceptori de electrn O2 molecular
reactioneazafoarte lent cu H in absenta
catalizatorilor sau a unor factori activati/transf a 4
electr conduce la un produs complet netoxic
In complexul citcrm oxidza O2 este fxatintre ionii
Fe3+ si CU2+ ai centrului a3-CuB.Cicluc de
reducere debuteaza cu acest centru complet
oxidat (Fe3+-Cu2+).Primul electrn cedat de
citcrm C-redus este captat de Cu2+ care trece in
Cu+.Cel de-al doilea electrn reduce Fe3+ la
Fe2+.Ionul Fe2+ din centrul a3-CuB complet
redus fixeaza O2. O2 capteaza cate un electrnde
la cei doi ioni metalici ai centrului formand un
intermediar peroxid.Intrarea in centru a unui
nou electron si a 2H+ conduce la ruperea puntii
peroxidice. Unul din atomii deO2 este fxat de
Fe3+ iar cel de-al 2lea ntegrat intr-o molecula
de apa,este fixat de Cu2+
DOVEZI EXPERIMENTALE CARE SUSTIN T.
MITCHELL
1.Transp de electrn generza un gradient de
protoni int-ext.Val ph-ului in ext matricei este
cu 1.4 unitati <decat in int,iar potent de membr
creat este de 0.14V,partea ext fiind incarcata
pozitiv.2.ATP este sintetzt cand se creeaza acest
gradient de ph.chiar daca nu exista transp de
elctrn.3.In veziculele cu membr lipidica obt in
lab,continand in membr o proteina bacteriana
cu act de pompa de protn si ATP sintetaza,se
realiz sinteza ATP.Se demosntrz ca lantul resp si
ATP sunt sisteme separate legate prin forta
generata de gradientul de protn.
4. NADH-Q redctz,cit reductz si cit oxdza
pompeaza protoni in ext matricei.Intoarcerea
prtnlor in matrice conduce la sinteza ATP de
catre ATP sintaza. 5.Este esentiala pastrarea
intacta a membrn si conserv unui compartiment
perfect inchis pt realiz fosforilarii oxidative la
niv mitocon.
Sinteza ATP cuplata cu resp nu se produce in lizate
mitocondriale. 6.Subst cu rol de transp
membrnri de protni determ distrugerea
gradientului de prtn si decupleaza astfel
oxidarea de fosforilarea ADP.
ATP-SINTAZA MITOCONDRIALA este realiz de un
complx moleclr fixat pe membr intrna
mitocondrl denumit ATP-aza/ATP-sintaza
sistemul moleclr catalizand R in ambele sensuri
Obsrv la microscpl electrn,compx are aspectul
unor vezicule sferice situate pe fata interna a
memebrn.Aceste vezicule denumite subunitati
F1 ale ATP-sintazei sunt fixate pe membr
interna printr-o alta subunitate F0(segmn
hidrofob care strbate membrn si constituie
canalul pt protoni din cadrul complx moleclr.)
F1 este subunit care catalzeza sintz ATP.