Enfermedades causadas por la contaminación ambiental en Japón incluyen

Itai-Itai enfermedad, causada por el cadmio (Cd) de la contaminación en

Jinzu Río (Maruzeni et al., 2014), y Niigata la enfermedad de Minamata,
que fue causada por el mercurio (Hg), la contaminación en el Río Agano (Hara
et al., 2013). Intoxicación por arsénico fue causado por el arsénico (as) de la conta
minación en
Río Mekong en Camboya (Sampson et al., 2008). Diversas enfermedades
incluyendo cáncer y enfermedades cardiovasculares se han sugerido
para ser causado por el plomo (Pb) y el Cd de la contaminación en Hengshine Río e
n
China (Wang et al., 2011). Así, la presencia de metales tóxicos de los contaminante
s en el agua del río es un mundo de peligros para la salud humana.
Más de 120 L de agua son necesarios para la producción de 1 kg
de cuero en las tenerías (Farenzena et al., 2005). Si los elementos tóxicos son
se utiliza en las curtiembres, las aguas residuales de las tenerías, sin la adecuada
depuración podría causar una enorme contaminación del agua. Ambiental
la contaminación causada por las aguas residuales de curtiembre industrias es en re
alidad un
problema en todo el mundo (Belay, 2010; Bharagava y Mishra, 2018;
Saxena et al., 2016).
La contaminación ambiental en un área construida de curtiembres en
Hazaribagh en Dhaka City, Bangladés ha sido reportado (Anawar
et al., 2000). Se ha sugerido que 7,7 millones de litros de líquido
de residuos por día a partir de las curtiembres (Azom et al., 2012) podría ser un
contaminantes de origen de Río Buriganga y canales en Hazaribagh. Desde
riesgos para la salud de los trabajadores de curtiembres en Hazaribagh también ha
n sido
reportado (Tinni et al., 2014), canal de agua que contienen las aguas residuales
a partir de las curtiembres y Río Buriganga agua, que se utiliza como un
de suministro de agua doméstica (Rahman y Al Bakri, 2010), debe ser un
peligro de salud para los residentes. Sin embargo, hay una falta de información sob
re la contaminación con elementos tóxicos de Hazaribagh y
la contaminación con elementos tóxicos provenientes de otras fuentes en Buriganga
Río.
La Organización Mundial de la Salud (OMS) sugiere 50 mg/L de Cr como
la salud-valor de referencia basado en agua potable (OMS, 2017).
Cromo (Cr) en general, existe en el entorno, ya sea como hexavalente Cr [Cr(VI)] o
trivalente Cr [Cr(III)]. Cr(VI) ha tóxicos, genotóxicos efectos mutágenos y carcinóg
enos, causando negativos para la salud
problemas tales como lesiones de la piel, ulceración y perforación del
tabique nasal, perforación de tímpano, disminución de la espermatogénesis
y el carcinoma de pulmón. (Bharagava y Mishra, 2018; Mishra y
Bharagava, 2016). En contraste, el Cr(III) es generalmente considerado como
no tóxico, aunque varios estudios recientes han sugerido posibles
peligros para la salud de Cr(III) (Fan et al., 2015). La Agencia Internacional
para la Investigación del Cáncer (IARC) clasificó en categorías de Cr(VI) y Cr(III) co
mo un
Grupo 1 carcinógeno (cancerígeno para los seres humanos) y un Grupo de 3
carcinógeno (no clasificable en cuanto a su carcinogenicidad para los seres humano
s),
respectivamente (Campo y de la Cruz, 2012). Por lo tanto, cancerígenos toxicidad
de la suela de la exposición a Cr(III) se cree limitada (Biedermann y
Landolph, 1990; IARC, 2016). Por lo tanto, hay más interés en
la remoción de Cr(VI) que en la remoción de Cr(III). Por otra parte, no ha
habido ningún estudio que muestra la relación de Cr(VI) y Cr(III) en el canal de ag
ua
a partir de las tenerías y en el Río Buriganga de agua. Si ambos Cr(VI) y
Cr(III) se detectan en el agua, la proporción debe ser considerado,
especialmente a la hora de estimar los posibles riesgos a la salud debido a coexpos
ure a Cr(VI) y Cr(III).
La contaminación ambiental y riesgos para la salud de arsénico (as) y
bario (Ba) en las zonas rurales de Bangladesh han sido reportados (Kato
et al., 2013; Kumasaka et al., 2013; Ohgami et al., 2016; Thang et al.,
2011; Yajima et al., 2018, 2015, de 2012). El exceso de exposición a Como ha
ha informado a aumentar diversos riesgos de salud, incluyendo los riesgos de
la piel hiperpigmentada (Yajima et al., 2018, 2017), la diabetes (Drobn
un
et al., 2013), pérdida de la audición (Li et al., 2017) y los cánceres de la
de la vejiga (Chen et al., 2003), pulmón (Putila y Guo, 2011) y de la piel
(Yajima et al., 2015). QUE sugiere la salud basado en la guía
valor Como en el suministro de agua potable de 10 mg/L (OMS, 2017). Los aument
os de
varios de toxicidad relacionados con problemas de salud, como la hipertensión
(Perry et al., 1989), disfunción renal (Dietz et al., 1992), de la audiencia
pérdida (Ohgami et al., 2012) y la carcinogénesis (Thang et al., De 2011,
2015b) causada por el exceso de exposición al Ba han sido reportados. QUE
sugiere la salud-valor de referencia basado para Ba en el agua potable
como 1300 mg/L (OMS, 2017). En este estudio, Como y Ba así como Cr
fueron investigados en el canal de agua que contienen las aguas residuales de la
curtiembres en Hazaribagh y en el Río Buriganga en Dhaka City,
Bangladesh. Después de enfocarse en Cr, el contaminante con mayor
nivel, nuestro amplio estudio consistió en 1) el medio ambiente
vigilancia, 2) evaluación de riesgos de salud y 3) desarrollo de un
depurativo para establecer medidas contra la contaminación ambiental y riesgos pa
ra la salud humana. Nuestra propuesta de medida para los
Cr a la contaminación causada por las aguas residuales de curtiembres en Hazariba
gh en
Dhaka City podría ser un modelo útil para abordar el medio ambiente
la contaminación generada a partir de curtiembres en diversas áreas del mundo.
2. Materiales y métodos
2.1. El muestreo y análisis de los elementos
Las áreas de muestreo del Río Buriganga de agua y canal de agua
que contienen las aguas residuales de curtiembres en Hazaribagh en Dhaka City,
Bangladesh (Anawar et al., 2000) se muestra en la Fig. 1A. Muestreo
las botellas estaban llenos tomaron muestras de agua después de enjuagar el interi
or
de cada botella se tomaron muestras de agua. Las botellas fueron transferidos
desde Dhaka City, Bangladés a la Ciudad de Nagoya, Japón después de ser
almacenar a temperatura ambiente durante un par de semanas. Después de que la
s muestras tenían
se guarda a 4 C en la Universidad de Nagoya, Japón, el total de los niveles de Cr, C
omo
y Ba se midieron mediante el uso de masas de plasma acoplado inductivamente
espectrometría de masas (ICP-MS) (7500cx, Agilent Technologies Inc, CA)
siguiendo el método descrito anteriormente (Kato et al., 2013). El
especies químicas de Cr fue analizado por cromatografía líquida de alta presión (HP
LC) (SCL-10AVP, Shimazu Corporation, Japón) icp-ms mediante un Cr especiación c
olumna (G3268-80001,
30 mm 4,6 mm, Agilent Technologies, Inc.). El nivel de Cr(VI) en
cada una de las muestras se cuantificó mediante el Software MassHunter (Agilent
Technologies, Inc.). El nivel de Cr(III) se calcula restando
el Cr(VI) a nivel del total de la Cr de nivel.
Este estudio fue aprobado por el Comité Ético de Nagoya
Universidad (aprobación no. 2013-0070) en la Ciudad de Nagoya y la Ética
Comité de Chubu Universidad (aprobación no. 250007) en Kasugai
La ciudad en Japón.
2.2. Línea celular y de las condiciones de cultivo
Un humano inmortalizado cutánea celular de los queratinocitos HaCaT línea
(Boukamp et al., 1988; Calay et al., 2010) fue suministrado por Eppelheim, Aleman
ia. El método para la cultura de los queratinocitos HaCaT fue
se ha descrito anteriormente (Yajima et al., 2015). Brevemente, las células HaCaT f
ueron
cultivadas en Eagle Modificado de Dulbecco del Medium (DMEM Baja
la glucosa, Wako) suplementado con 10% de suero fetal bovino (FBS)
y 1% de penicilina/estreptomicina/anfotericina B suspensión (Wako)
a 37 ° C en 5% de CO2 humidificado incubadora.
2.3. Supervivencia de la célula de ensayo
El cromo(VI) óxido (CrO3, Wako, Japón) y básico de cromo
sulfato (Cr(SO4)OH, Yoshida Química Industrial Co., Japón) fueron
se utiliza como cromo hexavalente y cromo trivalente, respectivamente. Después d
e la hambruna con 1% de suero fetal bovino (FBS) durante 16 h,
Los queratinocitos HaCaT fueron cultivadas en presencia o ausencia de
se indican las concentraciones de Cr(VI) a Cr(III). La mitad de la media
se intercambian cada día durante el cultivo. Después de 0, 1, 3, 5 y 7
días de incubación, la supervivencia de los queratinocitos HaCaT fue investigado por
una supervivencia de la célula de ensayo siguiendo el método descrito
anteriormente (Yajima et al., 2012).
2.4. Ensayo de formación de colonia
Los efectos de la exposición al Cr(VI) y/o Cr(III) en anchorageindependent de creci
miento de los queratinocitos HaCaT fueron investigados por
un ensayo de formación de colonia como la descrita anteriormente (Yajima et al.,
2015) con ligeras modificaciones. Las células HaCaT que había sido muerto de ham
bre
de 16 h, se pre-incubaron en presencia o ausencia de la
indica las concentraciones de Cr(VI) y/o Cr(III) durante 2 días. El
los queratinocitos fueron transferidos a 1% de metilcelulosa/Dulbecco del
Modified Eagle's Medium (DMEM) suplementado con 10% de FBS y
continuamente se incubaron en presencia o ausencia de la misma
las concentraciones de Cr(VI) y/o Cr(III) en Costar Ultra-Bajo apego placas de 96 p
ocillos (Corning, NY, Estados unidos) a una densidad de
1.6 de 103 células por pocillo. El número de colonias con diámetros de
50 mm se contó.
2.5. El análisis por inmunotransferencia
El análisis por inmunotransferencia se realizó por el método anteriormente
se describe (Akhand et al., 1999). Los anticuerpos monoclonales de ratón para aTU
BLIN (Sigma-Aldrich, MO, Estados unidos) y MEK1/2 y
fosfo-ERK1/2 (Thr202/Tyr204) (Señalización Celular Tecnología, MA,
Estados unidos), el conejo de anticuerpos monoclonales para fosfo-MEK1/2
(Ser217/221) (Señalización Celular Tecnología) y policlonales de conejo
los anticuerpos de ERK1/2 Y AKT y fosfo-AKT (Ser473) (Celular
Tecnología de señalización) fueron utilizados como primera anticuerpos. Policlonal d
e cabra anticuerpos IgG de ratón y de IgG de conejo conjugado con
peroxidasa (Merck) fueron utilizados como segundo anticuerpos.
2.6. La adsorción de cromo por HT-MF
Nuestro original de magnesio y de hierro hydrotalcite-como el compuesto [Mg(II)4-
Fe(III)2(OH)12]
2�[NO3xCO3$zH2O]2- (MF-HT) fue
elaborado según el método descrito previamente (Kato
et al., 2013; Kumasaka et al., 2013). Brevemente, 300 ml de una solución de
0.67 M de Mg(NO3)2 y 0,33 mM de Fe(NO3)3 fue poco a poco fue entregado por
cae en 525 ml de 1 M de Na2CO3 solución, después de la cual los precipitados fuero
n desarrollados. Los precipitados fueron filtrados bajo
la reducción de la presión y seco por más de 16 h. Después de que el sólido
la estructura había sido analizados mediante el uso de un difractómetro de rayos X,
el
la capacidad de adsorción de MF-HT (tamaño de las partículas: <250 mm) para el C
r(VI)
y Cr(III), que fue examinado. Las soluciones que contienen las concentraciones indi
cadas de Cr(VI) a Cr(III) se sacudían con el 1% (w/v) de MF-HT
a 300 rpm, durante el indicado periodo de incubación. Después de la centrifugación
(21600 g, 10 min), Cr niveles en los sobrenadantes de HNO3 diluido por
hasta un 1% de concentración final se midieron por ICP-la SEÑORA de Incubación d
e 60 minutos fue utilizado para obtener la adsorción de Langmuir
isoterma, y la incubación durante 1 min fue utilizado para las muestras de agua
en Hazaribagh para la aplicación práctica de MF-HT.
2.7. Análisis estadístico
Los análisis estadísticos se realizaron mediante la prueba de Dunnett y la
Prueba de Mann-Whitney de acuerdo a los métodos anteriormente
se describe (Kato et al., 2004; Ohgami et al., 2016) mediante el uso de JMP Pro
software (versión 11.0.0) (SAS Institute Inc., NC, USA).
3. Resultados
3.1. Los niveles de Cr, y licenciado en agua de Río Buriganga y canales, en el
Hazaribagh
De Muestreo (Fig. 1A), se realizó en la región aguas arriba (a)
y proximal (d) y distal (e) las regiones aguas abajo de Buriganga
Río después de la definición de la confluencia (c) de Río Buriganga y canales
de curtiembres en Hazaribagh (b) como un punto de base. Las concentraciones de
(mg/L) de las formas solubles de Cr (Fig. 1B), Como (Fig. 1C) y Ba (Fig. 1D) en
agua de 5 secciones se muestran. La media de los niveles de Cr en el canal de agua
en
Hazaribagh y en el Río Buriganga de agua a partir de la confluencia y
proximal y distal de las regiones aguas abajo se acerca 5160 veces, 5-
veces, 4 veces y 1 veces mayor que la media del nivel de Cr en el Río Buriganga de
agua de la región aguas arriba, respectivamente (Fig. 1B).
Sin embargo, la media de los niveles de Como y Ba en el canal de agua en Hazariba
gh y
Río Buriganga de agua desde la parte de arriba, la confluencia, y proximal y distal d
e las regiones aguas abajo fueron similares (Fig. 1C y
D).
A continuación, Cr contaminación se centró en la debido a que el nivel de Cr fue
252 veces y 2211 veces más altos que los niveles de Ba y Como,
respectivamente, en el canal de agua en Hazaribagh. Nuestro análisis de química
especies mostró que la media de la concentración de Cr(VI) [6.7 mg/L (0,1 mM)]
y la media total de la concentración de Cr [14284.7 mg/L (274.7 mM)] en
canal de agua en Hazaribagh (Fig. 1E). Las concentraciones máximas
de Cr(VI) y Cr(III) se 38.1 mg/L (0,7 mM) y 88697.3 mg/L
(1705.7 mM), respectivamente.
3.2. Efectos de la exposición a Cr(VI) a Cr(III) en anchorageindependent crecimient
o
Un estudio anterior mostró que el canal de agua en Hazaribagh
(UNICEF (United Nations Children's Fund), 2010; Watch, 2012)
además del Río Buriganga agua (Rahman y Al Bakri, 2010)
se utiliza para lavar y bañarse por los residentes. Para examinar la
riesgo potencial para la salud de la suela de la exposición al Cr(VI) y Cr(III), una co
lonia
ensayo de formación se realiza después de una supervivencia de la célula de ensay
o por
el uso de humanos no tumorales queratinocitos HaCaT (Figs. 2 y 3).
4. Discusión
Nuestro monitoreo ambiental en amplias zonas de Río Buriganga
y canales, en Hazaribagh proporcionado evidencia más directa de
Hazaribagh dependiente de la contaminación con Cr y Hazaribaghindependent la co
ntaminación con Como y Ba en el Río Buriganga. Desde
el nivel de Cr es > 2000 veces y >200 veces mayor que la de los niveles de
de Como y Ab, respectivamente, en el canal de agua en Hazaribagh, nos hemos cen
trado
en el Cr de la contaminación. No ha habido ningún estudio que muestra biológica
efectos de coexposure a Cr(VI) y Cr(III). Por lo tanto, la biológica
efectos de coexposure a la gama de proporciones molares de Cr(VI) y
Cr(III) en el canal de agua en Hazaribagh fueron examinados usando humano
no tumorales de la piel de los queratinocitos. Nuestro ensayo de formación de colon
ia
demostrado por primera vez que coexposure a Cr(VI) y Cr(III)
de forma sinérgica promovido la transformación de la actividad de los queratinocito
s HaCaT. MEK/ERK y AKT, que regulan la actividad de transformación
(Thang et al., 2015a; Yajima et al., 2015), se activaron sinérgicamente por coexpos
ure a Cr(VI) y Cr(III). Sinérgico de la promoción de
La transformación de la actividad por coexposure a 0,001 mM Cr(VI) y 1 mM
Cr(III), que se encuentran en el rango de los ratios en el agua de la Ciudad de Dha
ka,
también fue demostrado en nuestra colonia ensayo de formación de uso humano no
ntumorigenic pulmonar epitelial de las células Beas-2B (ver Complementaria
Fig. S1 en línea). Nuestros resultados usando el plural de las células humanas siem
pre
pruebas más sólidas de la sinérgico de la promoción de la transformación de
actividad por coexposure a Cr(VI) y Cr(III). Nuestros resultados también parcialme
nte
reveló el mecanismo molecular de la sinérgico de la promoción.
Dado que nuestros resultados mostraron un efecto sinérgico cuando está de baja to
xicidad
Cr(III) se presente junto con la alta toxicidad del Cr(VI), ambos
Cr(VI) y Cr(III) deben ser eliminados eficazmente. Nuestro análisis de
ingeniería ambiental por el uso de las isotermas de Langmuir mostró
que nuestro original MF-HT podría absorber al máximo 9.0 mg/g Cr(VI)
y 1041 mg/g Cr(III) en la teoría. A nuestro conocimiento, el Cr(III)
eliminación de la capacidad de MF-HT es mayor que la de cualquier otro previament
e reportados depuratives evaluadas por la isoterma de Langmuir
(ver Tabla Suplementaria S1 en línea). Ya que el costo de MF-HT fue
calcula el 0,7 centavos de dólar por kg de informes anteriores (Gillman,
2006; Kato et al., 2016), MF-HT, depurativo de bajo costo y alta
eficacia, podría ser una herramienta fuerte de medidas contra la contaminación am
biental y riesgos para la salud causados por las aguas residuales de
curtiembres. Desde Cr contaminación de las aguas del canal en Hazaribagh podría
en realidad ser remediadas por MF-HT, proponemos que la MF-HT ser