Enterobacteriaceae.

Introducción.
La familia Enterobacteriaceae es un grupo
grande de bacterias Gramnegativas, son
saprofitos en el tracto digestivo en los
humanos, pero cuando se encuentran en
otra parte del cuerpo, se suelen asociar a
patologías (1).

Las Enterobacterias tienen 3

características fundamentales para su
identificación en el laboratorio: reducen los
nitratos a nitritos, son fermentadores de la
glucosa y son oxidasa negativos.

Las pruebas bioquímicas son

fundamentales para la determinación de
Enterobacterias, ya que hacen parte del
proceso de diagnóstico que se lleva en el
laboratorio. Aunque las pruebas
bioquímicas son de gran importancia para
el diagnóstico, existen otros pasos que
ayudan al diagnóstico en el laboratorio
como: coloración de Gram, siembra en
agar E.M.B ó Mac Conkey y agar sangre, y
por último, pruebas de resistencia
antibióticas (2). Dentro de estas pruebas
bioquímicas encontramos: prueba citrato,
TSI, LIA,UREA, SIM, motilidad, FEA, RM,
VP, malonato y nitrato.

Diagrama 1. Procedimiento del repique

de la bacteria en el agar sangre, Mac
conkey y EMB.

Metodología.
 Diagrama 3. Procedimiento para realizar
Diagrama 2. Procedimiento para realizar
una siembra en estría en tubo.
una siembra mixta en tubo.
Diagrama 4. Procedimiento para realizar
Diagrama 5. Procedimiento para realizar
una siembra en picadura en tubo.
una suspensión en medio líquido.

Resultados.
 Tabla 3. Resultados de pruebas
Tabla 1. Resultados de pruebas bioquímicas para Klebsiella pneumoniae.
bioquímicas para Escherichia coli.

Tabla 4. Resultados de pruebas

Tabla 2. Resultados de pruebas bioquímicas para Serratia marcescens.
bioquímicas para Enterobacter cloacae.

Tabla 5. Resultados de pruebas

bioquímicas para Citrobacter freundii.
Tabla 6. Resultados de pruebas Discusión.
bioquímicas para Citrobacter diversus.
En la práctica se usaron distintas bacterias,
las cuales eran desconocidas para
nosotros con el fin de identificarlas luego
de realizar las distintas pruebas
bioquímicas.

En la siguiente tabla se mostraron todos

los resultados posibles de cada prueba,
para cualquier microorganismo,
especificando los cambios que se generan.

Tabla 7. Resultados de pruebas

bioquímicas para Klebsiella oxytoca.
Tabla 8. Resultados de cada una de las
pruebas bioquímicas.
Con los resultados obtenidos (ver tablas 1
a 7), se tiene que algunas pruebas nos
ayudan para la diferenciación de cada uno
de los microorganismo pertenecientes a la
familia Enterobacteriaceae usados (
Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae,
Enterobacter cloacaea. Serratia
marcescens, Citrobacter freundii,
Klebsiella oxytoca y Citrobacter diversus)
en esta práctica.
En primer lugar, con la prueba CIT (citrato),
se pudo observar que la única bacteria que
no usaba el citrato como única fuente de
carbono y las sales amónicas como única
fuente de nitrógeno fue Escherichia coli.
La siguiente prueba realizada fue la de TSI,
este medio contiene 3 azúcares
principalmente: lactosa, sacarosa y
glucosa. En este caso, todas las bacterias
fermentan la glucosa, acidificando el medio
en el fondo, dando un color amarillo como
era de esperarse, ya que es una
característica primordial en los
microorganismos pertenecientes a la
familia Enterobacteriaceae. Pero no todas
las bacterias lograron la fermentación de
sacarosa, como lo fueron: Serratia
marcescens, Citrobacter freundii y
Citrobacter diversus, con lo cual el medio
en la parte superior se basificó dando
como resultado un color rosa/ fucsia.
En tercera lugar el medio LIA, el cual es
usado principalmente para la
diferenciación de bacterias del género
Salmonella, con capacidad de fermentar la
lactosa sobre la base de producción de
H2S y la actividad de la enzima lisina
descarboxilasa, arrojaron como resultados
para casi todos los microorganismos K/K,
lo que quiere decir que se presentó la
actividad de la enzima lisina
descarboxilasa, exceptuando a Citrobacter
diversus, el cual generó un resultado de
K/A indicando la ausencia de dicha
enzima. En cuanto a la producción de H2S,
se pudo observar que las bacterias
pertenecientes al género Citrobacter y
Klebsiella oxytoca lo generaron,
concordando con los datos teóricos.
Por otra parte, la prueba UREASA
consiste en determinar la presencia de la
enzima ureasa en ciertos
microorganismos, para dar lugar a dióxido
de carbono CO₂ y amoniaco. Es de vital
importancia para la diferenciación de
algunas especies pertenecientes a la
familia de las Enterobacterias, como lo son
Escherichia coli y Serratia marsescens, ya
que estas dentro del grupo de las bacterias
fermentadoras de lactosa generan un
resultado negativo.

Otras de las pruebas realizadas fueron RM
( rojo de metilo) y VP ( Voges Proskauer),
que consisten en el establecimiento de la
capacidad de algunos microorganismos de
fermentar la glucosa con producción de
ácido por la vía ácido mixta o con
producción de acetoína por la vía
butanodiólica. Como resultados se vieron
RM +: Escherichia coli, Citrobacter freundii
y Citrobacter diversus y VP +: Klebsiella
pneumoniae, Klebsiella oxytoca, Serratia
marsescens y Enterobacter cloacae
cumpliendo con los resultados
establecidos en la bibliografía.
Siguiendo con las pruebas, la siguiente
que se realizó fue MAL ( malonato), este se
usa de manera primordial para la
diferenciación de coliformes y otros
microorganismos, en especial
Enterobacter y Escherichia coli,
basándose en el consumo de malonato,
siendo positivo y negativo respectivamente
para estas bacterias.
En cuanto a la prueba MOT (motilidad) es
usada para identificar la capacidad de
movimiento que tienen ciertos
microorganismo, en el caso de las
Enterobacterias, es de gran importancia
para distinguir ciertos géneros como
Shigella y Klebsiella, debido a que estas
presentarán como resultado un negativo,
tal cual sucedió en este caso con Klebsiella
pneumoniae y Klebsiella oxytoca.
Continuando se ejecutó la prueba FEA
(fenilalanina desaminasa) que se basa en
establecer a los microorganismos que
someterán a la fenilalanina a desaminarse
oxidativamente para producir ácido fenil
pirúvico y amoniaco. En esta ocasión todos
los resultados conseguidos fueron
negativos.
Ya casi culminando la práctica se llevó a
cabo la prueba SIM (sulfuro, indol,
motilidad) que es usado para identificar
algunas bacterias de la familia
Enterobacteriaceae por la producción de
H₂ S, formación de indol y motilidad tal
cual lo dice su nombre.
Por último, se efectuó la prueba de
Nitratos, que como anteriormente había
sido mencionado, todas las bacterias
pertenecientes a esta familia lo realizan,
por lo tanto, todos los resultados obtenidos
fueron positivos.
También se usaron medio como el Mac
Conkey, este medio se utiliza para
diferenciar a las bacterias que son
fermentadoras de la lactosa o no. En esta
práctica todas las bacterias son
fermentadoras de la lactosa, ya que virar el
color del medio a rosado.
El medio EMB y sangre, se utilizan para
observar el crecimiento representativo de
cada bacteria. El medio EMB ayuda a
diferenciar bacterias que producen el brillo
metálico representativo como el E.coli y K.
pneumoniae.
Conclusión.
● Se logró identificar que para la
diferenciación de microorganismos
pertenecientes a la familia
Enterobacteriaceae la forma más
eficaz son las distintas pruebas
bioquímicas, ya que permiten
visualizar los distintos cambios
que se generan en los medios
según la reacción que se origina
en ellos.
Referencias.
1. Puerta-García, A y Mateos-
Rodríguez, F. (2010).
Enterobacterias. Medicine.
2010;10(51):3426-31. Tomado de:
http://www.facmed.unam.mx/depto
s/microbiologia/pdf/Enterobacteria
s_Medicine2010.pdf
2. Merino, L y Lösch, L. Universidad
nacional del nordeste. Medicina-
microbiología. Tomado de:
http://ecaths1.s3.amazonaws.com/
catmicromed/APUNTE%20Enterob
acterias.pdf
3. Fernández A., García C., Sáez J.,
Valdezate S. (2010).
Procedimientos en microbiología.
Tomado de:
https://www.seimc.org/contenidos/
documentoscientificos/procedimien
tosmicrobiologia/seimc-
procedimientomicrobiologia37.pdf