Informe 1.

Identificación de biomoléculas
Aroz Natalia & Hermida Salazar Tatiana.
Facultad de ciencias básicas, programa de química, V semestre
Laboratorio de Bioquímica
Recibido, 5 de septiembre de 2016
Resumen

En la práctica de laboratorio se realizó la identificación de biomoléculas como los

carbohidratos, lípidos y proteínas en nueve muestras diferentes papa, manzana, naranja,
yema de huevo, clara de huevo, pan, leche, yogurt y aceite. Se realizaron cinco tipos de
pruebas diferentes, la primera fue identificación de carbohidratos por su poder reductor con
el reactivo de Fehling, la segunda fue la identificación de carbohidratos complejos por
medio de Lugol, la tercera fue la identificación de lípidos por su solubilidad e interacción
con sudan III, la cuarta fue identificación de proteínas con reactivo de Biuret y la quinta y
última prueba fue la identificación de proteínas con la reacción Xantoproteica, en la cual se
emplea HNO3 .
Palabras claves: biomoléculas, identificación, lípidos, carbohidrato, proteína y pruebas
cualitativas.
Abstract

Key words

Metodología

Preparación de las muestras

En el caso de la papa y la manzana se retiró la corteza del alimento, se partió en cuadrados

y macero en el mortero agregando agua en pequeñas cantidades, cuando se encontró una
masa homogénea se filtró pasándolo por una gaza, se colocó el líquido extraído, en un vaso
de precipitado. A la naranja se exprimió el zumo y se llevó a un vaso precipitados, Al huevo
se separó la clara de la yema en dos vasos de precipitados, para la muestra de pan se macero
con un poco de agua hasta obtener una pasta homogénea y suave y se coloca en un vaso de
precipitados, con las muestras de leche, yogurt y aceite son se le realizo ninguna preparación
y solo se colocaron en un vaso de precipitados. A todas las muestras se les rotulo como se
muestra en la tabla 1.

#Muestras

1 2 3 4 5 6 7 8 9

Papa Manzana Naranja Clara Yema Pan Leche Yogurt Aceite

Tabla 1. Muestras.
Identificación de carbohidratos mediante su poder reductor.
Se rotulo 9 tubos y se añadió 1 mL de cada de las muestras y dos tubos de controles
rotulados. Se agregó 1 mL de Feling A e inmediatamente 1 mL de Fehling B a cada uno de
los tubos, Se homogenizo la muestra e inmediatamente se llevó a un baño en el termostato
de 80°C durante 5 min.
Identificación de carbohidratos complejos (Polisacáridos).
Se rotulo 9 tubos y se añadió 1 mL de cada de las muestras y dos tubos de controles
rotulados. Se agregó 4 gotas de Lugol, se mezcló fuertemente.
Identificación de lípidos por solubilidad e interacción con colorantes
Se rotulo 9 tubos y se añadió 1 mL de cada de las muestras y dos tubos de controles
rotulados. A la primera serie de 9 tubos se agregó 1mL de agua se dejó reposar y se anotó el
número de fases que se formó, Se añadió 4 gotas de sudan III y se agito.
A la segunda serie de 9 tubos agrego 1mL de cloroformo se dejó reposar y se anotó el
número de fases que se formó, Se añadió 4 gotas de sudan III y se agito.
Identificación de proteínas con el reactivo de Biuret
Se rotulo 9 tubos y se añadió 1 mL de cada de las muestras y dos tubos de controles
rotulados. Se agregó 1 mL del reactivo de Biuret a cada uno de los tubos, se homogenizo la
muestra.
Identificación de proteínas con la reacción Xantoproteica.
Se rotulo 9 tubos y se añadió 1 mL de cada de las muestras y dos tubos de controles
rotulados. Se agregó 1 mL del sln de HNO3 concentrado a cada uno de los tubos, se
homogenizo la muestra.

Resultados y discusión

Identificación de carbohidratos mediante su poder reductor.

Control
Control positivo Muestras
TA

negativo
ES

sln sln sln

PU

Agua 1 2 3 4 5 6 7 8 9
ES

glucosa sacarosa almidon

R

coloración
- - - + - + + - - + + + -
marrón

Identificación de carbohidratos complejos (Polisacáridos).

Al realizar la prueba se obtuvieron los resultados en la tabla 3, en el cual nos muestra que
solo fue positiva, es decir, que se encontro presencia de polisacaridos en la papa(muestra 1)
y el pan(muestra 6).
Control
Control positivo Muestras
TA

negativo
ES
PU

sln sln
Agua sln glucosa 1 2 3 4 5 6 7 8 9
ES
R

sacarosa almidón
complejo
- - - + + - - - - + - - -
violeta

Tabla 3. Identificación de carbohidratos complejos (Polisacáridos).

En el caso de la papa se observo en el fondo del tubo una precipitacion de color purpura
oscura casi negra y la solucion se torno un poco mas amarillenta, que se debe a la
amilopectina que es un componente del almidón de cadena ramificada, forma hélices
mucho más cortas, y las moleculas de yodo son incapaces de juntarse. Al romperse o
hidrolizarse el almidón en unidades más pequeñas de carbohidrato el yodo es capas de
reaccionar tomando la colorecion amarillenta.*
Figura . Amilopectina

No se observo una cantidad grande de amilopectina ya que no fue tan notorio el cambio de
color. La amilosa es otro componente del almidon de estrutura lineal tambien presente en
la papa, al filtrar la papa se fue mucho de este componente del almidon en la gaza, por lo
que no fue mucho el solido presente teñido de prupura oscuro.

Figura . Amilosa

Figura. Lugol
En el pan se encontro gran cantidad de amilasa y estaba mas disuelta en la disolucion ya
que se torno toda la solucion purpura oscuro, esto se debe que le pan esta hecho
principalmente de harina de trigo en la cual encontramos un 70% de almidon.*La
identificacion se da por el lugol compuesto por una solución de Yodo metálico y yoduro de
potasio(figura ). El yodo es muy poco soluble en agua, por eso se prepara el reactivo de
Lugol mediante la disolución de yodo en agua en presencia de yoduro de potasio. Esto hace
que el complejo de iones triyoduro lineal sea soluble.* El ion triyoduro se desliza en la
fracción helicoidal del almidón (amilosa) causando un color purpura-negro intenso. La
reacción se da de ese color, debido a que los átomos de yodo se introducen en las espirales
de amilosa(figura).

Figura. Union del yodo con la amilosa.

Identificación de lípidos por solubilidad e interacción con colorantes
En esta prueba se observan en dos oportunidades la presencia de lípidos, primero en la
solubilidad, los lípidos son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella
se dividen en pequeñísimas gotas formando una emulsión de aspecto lechoso, que es
transitoria, pues desaparece en reposo por reagrupación de las gotitas de grasa en
una capa que, por su menor densidad, se sitúa sobre el agua. Por el contrario, las
grasas son solubles en disolventes orgánicos como el cloroformo, pero sin embargo también
se formaron 2 o más fases por la presencia de agua en todas las muestras y otras sustancias.
Por otra parte está la tinción de sudan III, que tiñe de rojo al triglicérido y otros lípidos.
Control Control
TA Muestras
ES negativo positivo
U
SP ácido
RE Agua
oleico
1 2 3 4 5 6 7 8 9
Serie I
1 2 1 1 1 2 2 2 2 2 2
(agua)
Tinción
- - - - - - 1 1 1 1 1
roja
Serie II
2 2 2 2 2 3 2 3 2 2 2
(cloroformo)
Tinción
- 2 2 2 2 - 2 3 1 2 2
roja
Tabla 3. Identificación de lípidos por solubilidad e interacción con colorantes

En común las dos series dieron positivas yema, pan, leche, yogurt y el aceite. Y en la serie II dio
adicional la papa, manzana y naranja, creo que esto sucedió por que la concentración de lípidos en
esas muestra eran muy bajas. Al estar con agua no se observa muy bien el cambio de color, Pero al
estar disueltos el lípido en el cloroformo se observa más fácil la tinción. En las tablas de nutrición de
estos alimentos aparece contenido graso menos en la clara de huevo. En manzana por ejemplo
encontramos ácidos: glutámico, linoleico, málico, oleico, palmítico y cafeico,* de estos ya tenemos
conocimiento que el ácido oleico se tiñe con el sudan III como se observó en la prueba de control.
Por otro lado tenemos a los lácteos, la leche y el yogurt que ya tienen gran cantidad de triglicéridos
y otros lípidos como el ácido oleico*, Este ácido graso monoinsaturado de la serie omega 9, se
encuentra casi en todas las grasas. Básicamente lo que sucede con el sudan III es que es un tinte
solubles en grasas.

Identificación de proteínas con el reactivo de Biuret

Control Control
A T

Muestras
ES

negativo positivo
PU
ES

Agua Albumina 1 2 3 4 5 6 7 8 9
R

Biuret - + - - - + + + + + -

Identificación de proteínas con la reacción Xantoproteica.

Control Control
TA

Muestras
ES

negativo positivo
PU
ES

Agua Albumina 1 2 3 4 5 6 7 8 9
R

Xantoproteíca - + + - - + + + - + -

Conclusiones

 El Lugol tiñe de purpura oscuro o negro al compuesto del almidón amilosa y de

amarillo a la amilopectina.
  El pan y la papa tiene almidón, y el Lugol solo identifica el carbohidrato almidón y
sus componentes.
 Los lípidos son insolubles en agua y solubles en solventes orgánicos, pero no es una
buena forma de identificas los lípidos por que no se distingue bien cuando hay
pequeña cantidad de lípidos en la muestra.
 El sudan III es una tinta que sirve para identificar lípidos principalmente los
triglicéridos.


Referencias

 Química Orgánica". Morrison y Boyd 5º Edición

 Akers, A. A.; Hoseney R. C. (1994). «Water-soluble dextrins from α-amylase-
treated bread and their relationship to bread firming». Cereal chemistry (en inglés)
71 (3): 223-226.
 Fundamentos de Química Analítica. Skoog, West, Holler y Crouch. Ed. Thomson.
8º Edición
 United States Department of Agriculture, www.usda.gov
 Chow, Ching Kuang Fatty Acids in Foods and Their Health Implications, 2000;
CRC Press; ISBN 0-8247-6782-9.
 S.L., Botanical-online. «Alimentos ricos en omega 9». www.botanical-online.com
(en español de España). Consultado el 27 de abril de 2016.