Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
LABORATORIO DE BIOQUIMICA
PRACTICA Nº 10
OBJETIVOS
Materiales reactivos
Beaker de 200 y 500 ml sacarosa
Espátula lugol
Pipetas de 5 y 10ml hidroquinona al 0,5%
Mortero peróxido de hidrógeno al 3%
Cápsulas de porcelana ( 2 ) cloroformo
Frasco lavador etanol
Probeta de 50 ml fehling A y B
Embudo levadura (debe traerla cada grupo
Bomba de vacío de práctica 4 días antes).
Papel filtro.
PROCEDIMIENTO.
Se enjuaga la boca dos o tres veces con agua para eliminar los restos de comida.
Se mide en una probeta 30 ml de agua destilada y con ella se enjuaga la boca por espacio de 3 a 5 min .
el líquido recogido se filtra a través de un algodón y el filtrado se utiliza para los siguientes ensayos.
En dos tubos de ensayo se vierten 3 ml de solución de almidón al 1%, en uno de ellos se agrega 3ml de
agua y en el otro 3ml del preparado enzimático y se introducen en un baño de maría a 40ºC por 5min.
Tomando una gota de cada tubo y combinándola con una gota de lugol en una cápsula de porcelana.
Repita esta operación a los 10, 15, 20,25 y 30 min.
Al tubo que contiene la enzima se le agregan 0.5ml de fehling A y 0.5ml de fehling B o en su defecto
1ml de reactivo de benedict. Coloque a calentar hasta que ebulla. Observe.
Se trituran 50 g de levadura de cerveza con 3 g de carbonato de calcio hasta formar una pasta
homogénea que se coloca en un beaker de 200ml. Se añaden 13 ml de cloroformo y se deja por 4 días a
temperatura ambiente, alejado de los roedores, después de los 4 días se filtra y al filtrado se le agrega
un volumen igual de etanol, el precipitado se lava con mínimas cantidades de alcohol y éter y se seca al
vacio, una solución al 1% de esta sustancia se utiliza para el experimento.
En dos tubos de ensayo se vierten en cada uno 2.5 ml de la solución de sacarosa al 1% y 2.5 ml de
solución de invertasa, en uno de ellos previamente calentado hasta ebullición. Ambos tubos de ensayo
se colocan en un baño de maría a 30ºC por 5 min.
Para determinar el poder reductor se toma 0.5ml de cada tubo de ensayo y se le agregan 0.5ml de
fehling A y 0.5ml de fehling B, y se calienta hasta que comience a ebullir. Observar lo que sucede.
Se trituran 2.5 g de papa y se trasladan para una probeta y se le agrega agua hasta completar 20 ml. Se
deja en reposo durante 10 min, y se filtra.
Se toman dos tubos de ensayo, en uno se vierte 1 ml de extracto enzimático y en el otro 1 ml de agua
destilada. A cada uno se le agrega 1 ml de solución de hidroquinonoa al 0,5% y 1ml de solución de
peróxido de hidrógeno al 3%.
Preguntas.
BIBLIOGRAFÍA:
PLUMER, D.T. Introducción a la bioquímica práctica. México. MaGraw- Hill Latinoamericana, S.A.