INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS

BIOLÓGICAS

SISTEMAS DE CONTROL DE CALIDAD

PROFESORES:
M en C Aura Hernández Olicón
M en C Mónica Rivera Rosas
QBP Cinthya Salimah Martínez Reyes

ALUMNO:
Valdes Ortiz Alvaro A.
PRÁCTICA:
VALIDACIÓN DE SUEROS HEMOCLASIFICADORES DE GRUPO SANGUÍNEO
“ABO”
GRUPO:
5QV2
SECCIÓN:
3
FECHA DE ENTREGA
12/06/2018
INTRODUCCIÓN
La inmunohematología es parte de la hematología, que estudia los procesos inmunes
relacionados con los elementos sanguíneos del organismo. Uno de los aspectos más importantes
de la inmunohematología es el estudio de los grupos sanguíneos.
La mayoría de los individuos desarrolla anticuerpos frente antígenos ABO alogénicos, aunque no
haya sido expuesto a eritrocitos extraños. Esta sensibilidad se debe al contacto con epítopos,
idénticos que expresan una gran cantidad de bacterias. Los anticuerpos contra los antígenos
ABO, son muy frecuentes, lo que hace especialmente importante la verificación de los grupos del
donante y del receptor antes de llevar a cabo transfusión sanguínea. Esta es una de las razones
de rutina por las cuales se deben emplear tres antisueros: anti-A, anti-B y anti-AB. Su
identificación es importante desde el punto de vista transfusional, pues si son clasificados
erróneamente como O y transfundidos a un receptor O pueden ocasionar una reacción hemolítica
grave.
La determinación de este sistema por norma comprende de dos fases, la primera es la prueba de
determinación de antígeno (en una suspensión de eritrocitos con cada uno de los antisueros
hemoclasificadores) también llamada prueba directa; y la prueba indirecta o determinación de
anticuerpo (en el suero del mismo paciente que se reta con células de fenotipo conocido A1, A2,
B, O). El control de calidad que se realiza a estos reactivos viene descrito en la Norma Oficial
Mexicana NOM-253-SSA1-2012, para la disposición de sangre humana y sus componentes con
fines terapéuticos. (2)(3)

OBJETIVO

 Realizar las pruebas de control de calidad a los sueros hemoclasificadores.

 Validar o rechazar de acuerdo a procedimientos normalizados los reactivos usados.
 Determinar el grupo sanguíneo de una muestra de sangre problema, en forma directa con
sueros hemoclasificadores.
 Determinar el grupo sanguíneo de una muestra de suero problema, en forma indirecta con
células de fenotipo conocido A1, A2, B, O.
 Validar o rechazar resultados obtenidos de acuerdo a resultados de control de calidad.

FUNDAMENTO
La determinación de grupo sanguíneo ABO por norma comprende dos fases: prueba de
determinación de antígeno o prueba directa (en eritrocitos) y la prueba indirecta o de
determinación de anticuerpos (en suero).
El control de calidad a los sueros hemoclasificadores (hemotipificadores) se realiza de acuerdo a
la Norma Oficial Mexicana NOM-253-SSA1-2012.
MÉTODOS
Prueba de Especificidad

INICIO

Lavar con sol salina (9g

Lavar 3
NaCl/L) eritrocitos del
veces
grupo A1, A2, B y O

Preparar una suspensión

de cada uno de los
grupos de los eritrocitos
del 3 al 5% en sol salina
(9g NaCl/L)

Colocar en un
tubo dos gotas Para cada
del reactivo y dos grupo de
gotas de la eritrocitos
suspensión

Centrifugar 30
seg a 3000 rpm

Leer los tubos

FIN
 Prueba de Avidez

INICIO

Lavar con sol salina (9g

NaCl/L) eritrocitos Lavar 3
apropiados veces

Colocar una gota en un

portaobjetos y añadir
una gota del mismo
volumen del antisuero a
probar.

Rotar el Mezclar las dos

portaobjeto de gotas con un
En un área
lado a lado aplicador y tomar
de 25 mm
durante la el tiempo hasta
de diámetro
observación observarse
aglutinación

Registrar el tamaño
de cúmulos al final
de 2 minutos

FIN
Prueba de Potencia o Título

INICIO

Hacer diluciones 1:2

seriadas del
hemoclasificador
con sol salina (9g
NaCl/L)

Colocar en cada
Un
tubo un volumen de
volumen
la suspensión de
igual al de
eritrocitos apropiada
la dilución

Centrifugar 30
seg a 3000 rpm

Resuspender
suavemente
De acuerdo a
lo
especificado
Leer los
en el
tubos
apartado de
interpretació
FIN n
Tipificación. Prueba Directa.

INICIO

Centrifugar la muestra Guardar el

y lavar con sol salina suero para
(9g NaCl/L) eritrocitos prueba inversa

Preparar una
suspensión con los
eritrocitos del 3 al 5%
en sol salina (9g NaCl/L)

Colocar en un
tubo dos gotas Montar un
del reactivo y dos autotestigo y el
gotas de la control para Rh
suspensión

Centrifugar 30
seg a 3000 rpm

Leer los tubos

FIN
Tipificación. Prueba inversa.

INICIO

Lavar con sol salina (9g

Lavar 3
NaCl/L) eritrocitos del
veces
grupo A1, A2, B y O

Preparar una suspensión

de cada uno de los
grupos de los eritrocitos
del 3 al 5% en sol salina
(9g NaCl/L)

Colocar en un tubo
dos gotas del suero Para cada
obtenido previamente grupo de
y dos gotas de la eritrocitos
suspensión

Centrifugar 30
seg a 3000 rpm

Leer los tubos

FIN
RESULTADOS
BITÁCORA DE RESULTADOS FECHA: 05/06/2018
Validación de los sueros hemoclasificadores

Resultados y observaciones:

Tabla 1. Sueros y eritrocitos utilizados.

Anti-sueros hemoclasificadores Eritrocitos de tipo conocido
Tipo Marca
Anti A LAFON A1 y A2
Anti B LAFON B
Anti AB LAFON A1, A2, B
Anti D LAFON O

Tabla 2. Código de color del sistema ABO y Rh.

Anti-suero Color del suero Color del bulbo
Anti-A Azul Azul
Anti-B Amarillo Amarillo
Anti -AB Transparente Negro
Anti-d Transparente Negro

Normativa que establece las especificaciones sanitarias de los reactivos hemoclasificadores:

NOM-253.SSA1-2012.

Tabla 3. Características físicas, titulo, avidez y especificidad.

Anti-suero Físicas Titulo Avidez (seg) Especificidad
Anti α-A A1: 26
1:64 A1 y A2
A2: 60
Caduco, sin
Anti α-B 1:512 B: 90 B
turbidez ni
Anti α-AB A1: 60
precipitado y sin
1:128 A2: 98 A1, A2, B
partículas.
B: 76
Anti α-D - - -
(-)Prueba negativa

Tabla 4. Prueba directa e inversa (muestra problema).

Directa Inversa
Anti α- Anti α- Anti α- Anti α- At A1 A2 B O Tipo
A B AB D
- - - + - + + + - O+
DISCUSIÓN
Los antisueros evaluados se encontraban caducos por lo que no se podrían utilizar para la
tipificación sanguínea, ya que estos son anticuerpos y por lo tanto de naturaleza proteica, que al
estar expuestos al ambiente pueden perder sus características o en un caso extremo que las
pierdan por completo. La ausencia de precipitado y de partículas nos indica que el manejo que
se le ha dado previamente a los antisueros es correcto ya que de haber precipitado o partículas
podríamos decir que se encuentran contaminados.
En caso de que los antisueros no se encontraran caducos se tendrían que tomar en cuenta las
siguientes consideraciones según la norma.
Tabla 5. Título mínimo aceptable según la norma.
GRUPO
SANGUINEO O
SUBGRUPO DE TÍTULO MÍNIMO
SUERO LOS ACEPTABLE
ERITROCITOS
DE PRUEBA
A1 256
A2 128
ANTI A
A1B 128
A2B 8
B 256
ANTI B A1B 64
A2B 128
A1 256
A2 64
ANTI AB
B 256
A2B 64

Tabla 6. Resultado de avidez según la norma.

 Tabla 6. Resultados de especificidad según la norma.

Para el antisuero anti-A el título que se obtuvo no cumple con el que especifica la norma. Para la
prueba de avidez tampoco cumple ya que el tiempo que tarda en llevarse a cabo la reacción
rebasa el tiempo especificado por la norma, la única prueba que pasa es la de especificidad ya
que este antisuero solo reacciona con su antígeno homólogo (A1 y A2).
Para el antisuero anti-B el título que se obtuvo cumple con las especificaciones de la norma. Para
la prueba de avidez sobrepasa el tiempo de reacción por lo tanto no pasa esta prueba, pasa la
prueba de especificidad ya que únicamente el antisuero aglutina con las células B.
Para el antisuero anti-AB el título el que se obtuvo cumpliría con las especificaciones de la norma
si este fue evaluado con células A2 ya que para A1 o B no cumpliría. Para la prueba de avidez
no cumple con lo especificado ya que con todas las células probadas sobrepasa el tiempo de
reacción, con la prueba de especificidad se evidencia que efectivamente reacciona con sus
antígenos homólogos (A1, A2 y B).
El antisuero anti-D no cumple con ningún parámetro ya que el resultado para todas las pruebas
fue negativo (sin aglutinación), esto se pudo deber a que las células utilizadas eran Rh-, ya que
no se conocía si las células tipificadas previamente eran Rh+ o Rh-.
Debido a que los todos los antisueros no cumplen con una o algunas de las especificaciones, no
es posible emitir el resultado de tipificación de la muestra aunque la prueba directa e inversa
concuerden con el resultado.

CONCLUSIONES

 Se debe hacer cambio de antisueros por unos nuevos (no caducos) para poder tener la
certeza de que estos conservan sus características y así poder realizar una tipificación de
calidad.
 Se deben realizar las pruebas de potencia (título), avidez y especificidad cada que se van
a usar los antisueros y cada que se cambie de lote.
 El resultado de la muestra es el grupo O+, pero no se puede reportar ya que los antisueros
no cumplen con las especificaciones de la NOM-253-SSA1-2 012, aunque la prueba
directa e inversa concuerden.
REFERENCIAS
1. López, D., Jiménez, C., et al. (2009). Verificación de la funcionalidad de los reactivos
hemoclasificadores (sistema ABO y Rh) como parte del control de calidad interno.
Medigraphic.
2. NOM-253-SSA1-2012
3. Óscar Rojas Espinosa. (2006). Inmunología (de memoria). México, DF: Panamericana.
Pp. 351-366.