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�ndice
1 Origen
2 Marcadores gen�ticos que se usan en gen�tica forense
3 Tipos de ADN en los que se estudian los marcadores gen�ticos
3.1 ADN nuclear
3.2 ADN mitocondrial
3.3 Polimorfismos del cromosoma Y
4 T�cnicas para analizar los polimorfismos del ADN extra�do
5 Individualizaci�n de las muestras biol�gicas
6 Criminal�stica
6.1 Muestras dubitadas e indubitadas
7 An�lisis de muestras biol�gicas
8 Exclusi�n e inclusi�n
9 Investigaci�n de la paternidad
10 La probabilidad de paternidad
11 �ndice de paternidad
12 Identificaci�n de restos cadav�ricos
13 Cat�strofes masivas
14 Bases de datos
15 Bibliograf�a
Origen
La gen�tica forense no surge como tal, sino que evoluciona a partir de otra rama
conocida como hemogen�tica forense; nace a principios del siglo XX, cuando Karl
Landsteiner describe el sistema ABO de los hemat�es y Von Durgen y Hirschfeld
descubren su transmisi�n hereditaria. El objetivo de esta ciencia era la
identificaci�n gen�tica en cr�menes y casos de paternidad. Inicialmente, las
investigaciones se centraban en el estudio de ant�genos eritrocitarios (sistema
ABO, Rh, MN), prote�nas s�ricas y enzimas eritrocitarias. Con el estudio de dichos
marcadores pod�a incluirse o excluirse una persona como posible sospechoso por
poseer una combinaci�n gen�tica igual o diferente a la del vestigio biol�gico
hallado en el lugar de los hechos.
Las caracter�sticas m�s importantes del ADN nuclear para identificaci�n humana son:
No obstante, hay que tener en cuenta que, aunque ocurre con muy baja frecuencia, se
ha detectado la existencia de deleciones en esta regi�n del cromosoma Y, de tal
forma que una muestra masculina podr�a asignarse err�neamente como femenina. En
este caso, el an�lisis de marcadores espec�ficos del cromosoma Y permitir�an una
correcta asignaci�n del sexo. El inconveniente que presenta el estudio de
marcadores concretos del cromosoma Y, es que se heredan sin cambios significativos
en una misma familia de padre a hijo, de modo que nos permiten identificar a un
var�n de la familia pero tendremos que estudiar otros marcadores para distinguir
entre abuelo, padre, hijo, etc.
Despu�s de una extracci�n de ADN en muestras que se encuentran en muy mal estado de
conservaci�n, se obtienen fragmentos de s�lo 100-200 nucle�tidos debido a su estado
de degradaci�n (rotura), con el agravante de que muchas veces estas muestras van
acompa�adas de ADN bacteriano. Por el contrario las muestras de tejido fresco
proporcionan fragmentos de ADN de m�s de 10.000 nucle�tidos.
ADN mitocondrial
Existen numerosas mitocondrias en cada c�lula (entre 250 y 1000 seg�n el tipo
celular, las necesidades metab�licas y el tipo funcional) y varias copias de ADN
mitocondrial en cada mitocondria, es decir, existen mayor cantidad de copias de
ADNmt que de ADN nuclear por c�lula, de forma que hay una sola copia de ADN nuclear
en una c�lula mientras que puede haber miles de copias de ADNmt. Este hecho hace
que en muestras forenses muy cr�ticas (con escasa cantidad de ADN o con ADN en mal
estado) tenga m�s �xito el an�lisis de ANDmt que el de ADN nuclear. Sin embargo, el
ADNmt presenta una peculiaridad, se hereda �nica e �ntegramente de la madre, sin
que exista ninguna combinaci�n con el material del padre. Por este motivo se dice
que es un genoma haploide.
La causa de que no exista mezcla con el material del padre es la siguiente: las
mitocondrias del espermatozoide se localizan en el cuello (entre la cabeza y la
cola), con el fin de aportar la energ�a que esta c�lula necesita para mover la cola
y desplazarse en busca del �vulo. Al producirse la fecundaci�n solo penetra en la
c�lula femenina la cabeza del espermatozoide (con el ADN nuclear) quedando fuera la
cola y el cuello, y con �l todas las mitocondrias. Esto hace que el padre no aporte
dicho material a su descendencia.
El elevado n�mero de copias por c�lula que hace alguna de ellas resista las
condiciones adversas sin ser degradada.
Su peque�o tama�o. Esto facilita la conservaci�n en el tiempo a pesar de que las
condiciones no sean apropiadas: al ser m�s peque�o que el ADN nuclear la
probabilidad de verse afectado es menor.
Estas 2 caracter�sticas garantizan las estabilidad postmortal y una mayor
resistencia que el nuclear.
No es espec�fico de cada persona, sino que se asocia a todas las personas que
proceden de la misma madre, abuela materna, etc.
S�lo es �til cuando se trata de hacer estudios por v�a materna, de modo que permite
identificar a cualquier persona (hombre o mujer) frente a su madre, no frente a su
padre.
Presenta gran dificultad t�cnica por lo que restringe su uso a laboratorios
especializados.
Este tipo de ADN se utiliza sobre todo en los casos siguientes:
Cuando existe una gran degradaci�n de las muestras por las malas condiciones de
conservaci�n en que permanecieron hasta que fueron encontradas en lugar del crimen
o por la antig�edad que tienen. En este caso el ADN mitocondrial se encontrar� en
mejor estado que el nuclear debido a su mayor n�mero de copias por c�lula. Tal es
el caso de restos �seos y dientes antiguos o sometidos a condiciones extremas.
Cuando la cantidad de muestra de que se dispone es m�nima (pelos sin bulbo por
ejemplo). Un pelo con bulbo caduco o un fragmento de pelo contendr� una cantidad de
ADN nuclear tan escasa que en principio los an�lisis de estas muestras mediante ADN
nuclear resultar� negativo.
En la identificaci�n de restos biol�gicos y el establecimiento de una relaci�n
familiar cuando no se dispone de los progenitores y no queda m�s remedio que
realizar una comparaci�n con familiares m�s lejanos. Si se trata de familiares v�a
materna tendr�n exactamente el mismo ADN mitocondrial aunque se trate de familiares
lejanos. Un estudio de ADN nuclear en estos casos ser�a poco informativo ya que
cuanto m�s alejada sea su relaci�n familiar, menos alelos compartir�n.
Cuando existe un sospechoso en un hecho delictivo pero se dispone de muestra de la
cual no se conoce su procedencia, se puede recurrir al estudio del ADN mitocondrial
de un familiar relacionado matrilinialmente para excluirlo.
Polimorfismos del cromosoma Y
El cromosoma Y s�lo existe en varones y todos los individuos varones emparentados
por l�nea paterna comparten el cromosoma Y (casi en su totalidad) pues se hereda
directamente de padres a hijos sin mezclarse con ning�n material procedente de la
madre. Por tanto, s�lo es posible identificar linajes paternos mediante el estudio
de su cromosoma Y, mientras que no es posible identificar individuos. Respecto a
los polimorfismos del cromosoma Y se analizan microsat�lites (STRs).
No es �nico de cada persona, sino que es com�n para todos los pertenecientes a un
linaje paterno com�n.
S�lo se puede aplicar a los hombres de modo que en un estudio de paternidad, no
sirve para determinar si un hombre es padre de una mujer.
Existen varios casos especiales en los cuales el an�lisis de los polimorfismos del
cromosoma Y son de gran utilidad:
Casos de paternidad:
Casos de paternidad en los que no se dispone de material biol�gico de la madre. Nos
bastar� con disponer de la muestra del padre y compararla con la del presunto hijo
para comprobar si ambas presentan id�nticos polimorfismos Y.
En casos complejos en los que falta el padre, pero tenemos por ejemplo al abuelo.
Casos de mezclas en agresiones sexuales:
Agresiones en las que el semen del sospechoso var�n se encuentra mezclado con
c�lulas de una v�ctima mujer: los polimorfismos del cromosoma Y son detectados de
forma m�s sensible en el ADN de un individuo a pesar de que �ste se encuentre
inmerso en una gran cantidad de ADN femenino. Con marcadores nucleares esto no
ocurre pues se detecta antes el material femenino sobre todo si la cantidad de
c�lulas epiteliales femeninas es muy superior al n�mero de espermatozoides. Adem�s,
el uso de polimorfismos de ADN del cromosoma Y nos permite incluir o excluir a un
sospechoso c�modamente.
Delitos en los que el agresor es un individuo azoosp�rmico: los individuos
azoosp�rmicos tienen ausencia de espermatozoides en el eyaculado. Los
espermatozoides son la mayor fuente de ADN en las muestras de semen, por lo que un
individuo azoosp�rmico tiene mucho menos ADN seminal para el an�lisis. La cantidad
de ADN por mililitro (mL) en el semen de un individuo esp�rmico es aproximadamente
de 450 microgramos (�g) en los espermatozoides, y de 30 �g en los leucocitos y
c�lulas epiteliales.
Por ello, en un individuo azoosp�rmico, el contenido de ADN es aproximadamente de
s�lo el 6.3% del contenido en un individuo esp�rmico. Por las mismas razones que en
el caso anterior, es posible la detecci�n de ADN de las c�lulas epiteliales y los
leucocitos en eyaculados de individuos vasectomizados aunque se encuentre mezclado
con ADN de la v�ctima.
El tipo de sondas que se utilizan en esta t�cnica pueden ser de dos tipos:
Sondas Uni-locus (SLP): La t�cnica permite detectar loci minisat�lites �nicos. Son
espec�ficas para una regi�n de un determinado cromosoma. Se unen a secuencias
largas de nucle�tidos y presentan mayor variabilidad que las sondas multi-locus.
Como resultado se observan una o dos bandas por individuo, seg�n sea homocigoto o
heterocigoto. El patr�n de bandas obtenido con estas sondas se denomina perfil
unilocus de ADN o �DNA profiling�. Se utiliza principalmente en investigaciones de
paternidad porque identifica loci minisat�lites muy informativos.
Sondas Multi-locus (MLP): permiten identificar simult�neamente muchas regiones
hipervariables. Son sondas de 10 a 15 nucle�tidos que se repiten m�ltiples veces y
tras el revelado se observan de 10 a 20 bandas por persona. Este patr�n de
m�ltiples bandas es caracter�stico de cada individuo, constituye algo as� como su
�huella dactilar de ADN� y se conoce como huella gen�tica multilocus o �DNA
fingerprint�.
Las sondas multi y uni-locus presentan una serie de ventajas e inconvenientes
seg�n:
La cantidad de ADN que se necesita est� entre 20 y 100 ng, cantidad dif�cil de
conseguir en casos de criminal�stica en los que los indicios biol�gicos encontrados
son m�nimos.
En cuanto a la calidad del ADN, es muy dif�cil encontrar en buen estado toda la
cantidad de ADN que se necesita para un an�lisis con sondas mono-locus.
El tiempo requerido para este tipo de an�lisis es de dos o tres d�as, debido a la
necesidad de tener que utilizar m�s de una SLP.
El hecho de que se requieran cantidades elevadas de ADN hace que normalmente, con
el primer an�lisis se consume la totalidad de la muestra, con lo que se dificulta
un contraste de pruebas o una posterior revisi�n del caso.
Todas estas limitaciones se superaron tras la aparici�n de una t�cnica muy �til, la
reacci�n en cadena de la polimerasa (PCR: Polymerase Chain Reaction).
Tejidos: las muestras suelen estar relacionadas sobre todo con la identificaci�n de
cad�veres en los que han comenzado los procesos de putrefacci�n. Los mejores
resultados se obtienen con m�sculo esquel�tico tomado de las zonas que se est�n m�s
preservadas de la putrefacci�n.
Huesos y dientes: estas muestras se obtienen de los cad�veres ya esqueletizados y
son las m�s problem�ticas en cuanto a identificaci�n gen�tica. Los huesos largos
(f�mur o h�mero) y los molares (muelas) son las muestras que ofrecen mejores
resultados. La extracci�n de ADN a partir de este tipo de restos es m�s larga y
costosa que en los casos anteriores.