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a).- CL50
Para el calculo de CL50 generalmente se usa el análisis Probit (con simple ajuste). en un
experimento típico de pruebas de toxicidad aguda se tiene la siguiente situación:
Concentración de la sustancia o dosis (d)
Número de individuos (n)
Número de organismos muertos o afectados (r)
Porcentaje de efecto (p)
�=(𝑟/𝑛)𝑥100
La representación gráfica de p x d, o relación dosis respuesta, genera una curva parabólica que muchas
veces presenta dificultades en la construcción de un modelo lineal. Una forma de abordar este problema
es trnaformando d (dosis) a una escala logarítmica X = log (d), lo cual mostrará una relación dosis-
respuesta de forma S, o sigmoidea normal; de esta manera la distribución de p vs X será de tipo normal.
Posteriormente, mediante la tablas de Probit swe transforma p (porcentaje de efecto) a unidades probit
(buscando en una tabla de distribución normal el valor de z correspondiente a una probabilidad
acumulada igual a p y sumandole a continuación cinco unidades), se obtiene una distribución de puntos
en un sistema bivariado de tipo lineal, los cuales se procesan según un análisis de regresión típico. Vale
la pena enfatizar que elñ probit es una transformación sobre la tasa de efecto (p), y la ecuación generada
es de la forma:
�=𝑎+𝑏𝑥
〖��〗 _50= 〖 10 〗
^𝑥5
b).- Chi cuadrado
Bondad de ajuste
�^2= ∑▒(𝑟−𝑟´)^2/(𝑛�
´(1−�´))
Para el cálculo de la CE50 o CL50 por este método es necesario contar, por lo menos, con dos porcentajes
intermedios del efecto esperado (valores entre 0 y 100%).
Con los resultados obtenidos en los ensayos de toxicidad aguda de efluentes con Dunallella. magna se construye
la tabla 1, con los siguientes datos:
Inicial
Final
y 6.00 �=𝑎+𝑏𝑥
5.50
f(x) = 1.9249168045x + 1.6986684778 y = 1.6987 1.9249 X
R² = 0.9845048214
5.00
y= 5
4.50
3.00
0.7 0.8 0.9 1.0 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9 2.0
log(x)
Xsup = 2.00
𝑆=(𝑥_( 𝑠𝑢�) Xinf = 0.80
−𝑥_𝑖𝑛𝑓)/(𝐸_𝑠𝑢� Esup = 5.67
−𝐸_𝑖𝑛𝑓 ) Einf = 3.36
�=5+((𝑥−𝑚))/𝑆
S= 0.5191642
0.51951
m= 1.72
S= 0.51916
z+5
Log(x) N Probit Calc p Np Npx NpX2
2.0 20 5.55 0.71 14.1665 28.33 56.67
1.7 20 4.97 0.49 9.75307 16.57 28.15
1.4 20 4.39 0.27 5.41593 7.57 10.58
1.1 20 3.81 0.12 2.34102 2.57 2.82
0.8 20 3.23 0.04 0.76842 0.61 0.49
32.445 55.6538 98.7058
S= 0.51916
x= 1.71533
m= 1.72
𝐸𝐸���( 〖��〗 _50 )={𝑆^2 [1/(∑▒��)+(𝑚−𝑥)^2/
(∑▒���−𝑥^2 )]}^0,5
EECL50 = 9.05899
42.827 < 51.886 < 60.945
α= 0.0005
K= 3
χ2 17.73
χ2 (calc) 0
7.00
mortalidad
x mg/l log(x) Y z p r 6.00
1 0 1.6987 -3.3013 0.00 0.0
10 1 3.6236 -1.3764 0.08 f(x) =1.7
2.5336817603x + 4.6927935366
5.00
20 1.30103 4.20305 -0.7969 0.21 R² = 0.7971887946
4.3
30 1.47712 4.54201 -0.458 0.32 6.5 4.00
40 1.60206 4.78251 -0.2175 0.41 8.3
50 1.69897 4.96905 -0.031 0.49 9.8 3.00
60 1.77815 5.12146 0.12146 0.55 11.0
70 1.8451 5.25033 0.25033 0.60 12.0 2.00
80 1.90309 5.36196 0.36196 0.64 12.8
90 1.95424 5.46042 0.46042 0.68 13.5 1.00
-0.6 -0.5 -0.4 -0.3 -0.2 -0.1 0 0.1 0.2 0.3 0.4
100 2 5.5485 0.5485 0.71 14.2
y = 4.6928 2.5337 X
log(x) nt r p z y =z+5
0.3 -0.5229 5 0.5 10 -1.2816 3.72 y= 5
0.8 -0.0969 5 0.75 15 -1.0364 3.96
1 0 5 1.25 25 -0.6745 4.33 𝑥_5= 〖���〗 _10 X= 0.12
1.5 0.17609 5 3 60 0.25335 5.25 〖��〗 _50
2 0.30103 5 4 80 0.84162 5.84 〖��〗 _50= CL50 = 1.32
〖 10 〗 ^𝑥5
5.55 5.67 -0.13 5.13
4.97 4.87 0.09
4.39 4.33 0.06
3.81 3.72 0.09
3.23 3.36 -0.13
Método Probit
Para el cálculo de la CE50 o CL50 por este método es necesario contar, por lo menos, con dos porcentajes
intermedios del efecto esperado (valores entre 0 y 100%).
Con los resultados obtenidos en los ensayos de toxicidad aguda de efluentes con Dunallella. magna se construye
la tabla 1, con los siguientes datos:
Inicial
Final
�=(𝑟/𝑛)
Interseccion = 1.69867
pendiente = 1.92492 r=n�
0.45 7.81
z+5
Log(x) N Probit Calc p Np Npx NpX2
2.0 20 5.55 0.71 14.1665 28.33 56.67
1.7 20 4.97 0.49 9.75307 16.57 28.15
1.4 20 4.39 0.27 5.41593 7.57 10.58
1.1 20 3.81 0.12 2.34102 2.57 2.82
0.8 20 3.23 0.04 0.76842 0.61 0.49
32.445 55.6538 98.7058
S= 0
x= 1.71533
m= 0.00
𝐸𝐸���( 〖��〗 _50 )={𝑆^2 [1/(∑▒𝑁�)+(𝑚−𝑥)^2/
(∑▒𝑁�𝑥−𝑥^2 )]}^0,5
EECL50 = 0
51.886 < 51.886 < 51.886
α= 0.0005
K= 3
χ2 17.73
χ2 (calc) 0
7.00
mortalidad
log(x) Y z p r 6.00
0 1.6987 -3.3013 0.00 0.0
1 3.6236 -1.3764 0.08 f(x) =1.7
2.5336817603x + 4.6927935366
5.00
1.30103 4.20305 -0.796947361 0.21 R² = 0.7971887946
4.3
1.47712 4.54201 -0.457989297 0.32 6.5 4.00
1.60206 4.78251 -0.217494723 0.41 8.3
1.69897 4.96905 -0.030952639 0.49 9.8 3.00
1.77815 5.12146 0.121463342 0.55 11.0
1.8451 5.25033 0.250329217 0.60 12.0 2.00
1.90309 5.36196 0.361957916 0.64 12.8
1.95424 5.46042 0.460421406 0.68 13.5 1.00
-0.6 -0.5 -0.4 -0.3 -0.2 -0.1 0 0.1 0.2 0.3 0.4
2 5.5485 0.5485 0.71 14.2
y = 4.6928 2.5337 X
log(x) nt r p z y =z+5
-0.5229 5 0.5 10 -1.2816 3.72 y= 5
-0.0969 5 0.75 15 -1.0364 3.96
0 5 1.25 25 -0.6745 4.33 𝑥_5= 〖���〗 _10 X= 0.12
0.17609 5 3 60 0.25335 5.25 〖��〗 _50
0.30103 5 4 80 0.84162 5.84 〖��〗 _50= CL50 = 1.32
〖 10 〗 ^𝑥5
Método Probit
Ejemplo de CL50 pór método Probit
Para el cálculo de la CE50 o CL50 por este método es necesario contar, por lo menos, con dos porcentajes
intermedios del efecto esperado (valores entre 0 y 100%).
Con los resultados obtenidos en los ensayos de toxicidad aguda de efluentes con Dunallella. magna se construye
la tabla 1, con los siguientes datos:
Inicial
Final
y 6.50 �=𝑎+𝑏𝑥
6.00
f(x) = 1.7188262054x + 2.5502721959 y = 2.5503 1.7188 X
5.50 R² = 0.9159129778
5.00 y= 5
4.50
𝑥_5= 〖���〗 _10 X= 1.43
4.00 〖��〗 _50
〖��〗 _50= CL50 = 26.62 %
3.50
〖 10 〗 ^𝑥5
3.00
0.7 0.8 0.9 1.0 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9 2.0
log(x)
TABLAS DE ESTADISTICA DISTRIBUCION NORMAL
% 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
0 #VALUE! 2.67 2.95 3.12 3.25 3.36 3.45 3.52 3.59 3.66
10 3.72 3.77 3.83 3.87 3.92 3.96 4.01 4.05 4.08 4.12
20 4.16 4.19 4.23 4.26 4.29 4.33 4.36 4.39 4.42 4.45
30 4.48 4.50 4.53 4.56 4.59 4.61 4.64 4.67 4.69 4.72
40 4.75 4.77 4.80 4.82 4.85 4.87 4.90 4.92 4.95 4.97
50 5.00 5.03 5.05 5.08 5.10 5.13 5.15 5.18 5.20 5.23
60 5.25 5.28 5.31 5.33 5.36 5.39 5.41 5.44 5.47 5.50
70 5.52 5.55 5.58 5.61 5.64 5.67 5.71 5.74 5.77 5.81
80 5.84 5.88 5.92 5.95 5.99 6.04 6.08 6.13 6.17 6.23
90 6.2815516 6.34 6.41 6.48 6.55 6.64 6.75 6.88 7.05 7.33
Xsup = 2.00
𝑆=(𝑥_( 𝑠𝑢�) Xinf = 0.80
−𝑥_𝑖𝑛𝑓)/(𝐸_𝑠𝑢� Esup = 6.28
−𝐸_𝑖𝑛𝑓 ) Einf = 4.16
�=5+((𝑥−𝑚))/𝑆
S= 0.5671324
0.5818
m= 1.43
S= 0.56713
α= 0.05
K= 3
χ2 7.81473
χ2 (calc) 2.52636
2.53 7.81
z+5
Log(x) N Probit Calc p Np Npx NpX2
2.0 20 5.55 0.71 14.1665 28.33 56.67
1.7 20 4.97 0.49 9.75307 16.57 28.15
1.4 20 4.39 0.27 5.41593 7.57 10.58
1.1 20 3.81 0.12 2.34102 2.57 2.82
0.8 20 3.23 0.04 0.76842 0.61 0.49
32.445 55.6538 98.7058
S= 0.56713
x= 1.71533
m= 1.43
𝐸𝐸���( 〖��〗 _50 )={𝑆^2 [1/(∑▒𝑁�)+(𝑚−𝑥)^2/
(∑▒𝑁�𝑥−𝑥^2 )]}^0,5
EECL50 = 6.42276
20.1991 < 26.6219 < 33.0446
1.00
c
0.90
100 18
0.80
50 12
25 8 0.70
12.5 5 0.60
6.25 4 0.50
x r
0.40
6.25 4 4 9%
12.5 5 9 19% 0.30
25 8 17 36% 0.20
50 12 29 62% 0.10
100 18 47 100% 0.00
47 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
�=(𝑟/𝑛)𝑥100
La representación gráfica de p x d, o relación dosis respuesta, genera una curva parabólica que muchas
veces presenta dificultades en la construcción de un modelo lineal. Una forma de abordar este
problema es trnaformando d (dosis) a una escala logarítmica X = log (d), lo cual mostrará una relación
dosis-respuesta de forma S, o sigmoidea normal; de esta manera la distribución de p vs X será de tipo
normal.
�=𝑎+𝑏𝑥
〖��〗 _50= 〖 10 〗
^𝑥5
Ejemplo de CL50 pór método Probit
Para el cálculo de la CE50 o CL50 por este método es necesario contar, por lo menos, con dos porcentajes
intermedios del efecto esperado (valores entre 0 y 100%).
Con los resultados obtenidos en los ensayos de toxicidad aguda de efluentes con Dunallella. magna se construye
la tabla 1, con los siguientes datos:
Inicial
Final
y 6.50 �=𝑎+𝑏𝑥
6.00
f(x) = 1.5329052094x + 2.9738429499 y = 2.9738 1.5329 X
R² = 0.916096209
5.50
5.00 y= 5
4.50
𝑥_5= 〖���〗 _10 X= 1.32
4.00 〖��〗 _50
〖��〗 _50= CL50 = 20.98 %
3.50
〖 10 〗 ^𝑥5
3.00
0.7 0.8 0.9 1.0 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9 2.0
log(x)
3.50
3.00
0.7 0.8 0.9 1.0 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9 2.0
log(x)
Xsup = 2.00
𝑆=(𝑥_( 𝑠𝑢�) Xinf = 0.80
−𝑥_𝑖𝑛𝑓)/(𝐸_𝑠𝑢� Esup = 6.28
−𝐸_𝑖𝑛𝑓 ) Einf = 4.43
�=5+((𝑥−𝑚))/𝑆
S= 0.6517563
0.65236
m= 1.32
S= 0.65176
α= 0.05
K= 3
χ2 7.81473
χ2 (calc) 4.65556
4.66 7.81
z+5
Log(x) N Probit Calc p Np Npx NpX2
2.0 20 5.55 0.71 14.1665 28.33 56.67
1.7 20 4.97 0.49 9.75307 16.57 28.15
1.4 20 4.39 0.27 5.41593 7.57 10.58
1.1 20 3.81 0.12 2.34102 2.57 2.82
0.8 20 3.23 0.04 0.76842 0.61 0.49
32.445 55.6538 98.7058
S= 0.65176
x= 1.71533
m= 1.32
𝐸𝐸���( 〖��〗 _50 )={𝑆^2 [1/(∑▒𝑁�)+(𝑚−𝑥)^2/
(∑▒𝑁�𝑥−𝑥^2 )]}^0,5
EECL50 = 6.67074
14.3094 < 20.9801 < 27.6509
1.00
c
0.90
100 18
0.80
50 12
25 8 0.70
12.5 5 0.60
6.25 4 0.50
x r
0.40
6.25 4 4 9%
12.5 5 9 19% 0.30
25 8 17 36% 0.20
50 12 29 62% 0.10
100 18 47 100% 0.00
47 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100