Genetica si mitocondrială anormalitati in Tulburari din spectrul autismului: O revizuire

Revizuim starea curentă a rolului și funcției ADN-ului mitocondrial (mtDNA) în

etiologia tulburărilor din spectrul autismului (ASD) și interacțiunea genelor nucleare si
mitocondriale. Nivelurile ridicate de lactat raportat la aproximativ unul din cinci copii cu ASD
poate indica implicarea mitocondriilor in metabolismul energetic si dezvoltarea creierului.
Tulburările mitocondriale includ epuizarea, scăderea cantității sau mutații ale mtDNA defecte
care produc in reactii biochimice din cadrul mitocondrie. Un subgrup de indivizi cu
manifestelor ASD copie numarul de variatie sau deleții ADN mici / duplicări, dar mai putin de
20 la suta sunt diagnosticați cu o singură condiție gene, cum ar fi sindromul X fragil. Restul
respondenților cu ASD au anomalii cromozomiale (de exemplu, duplicărilor 15q11-Q13), alte
cauze genetice sau multigenic sau defecte epigenetice. Urmatoarele tehnici de secventiere ADN
generatie va permite o mai bună caracterizare a anomaliilor genetice si moleculare in ASD,
inclusiv defecte in genomul mitocondrial mai ales la copiii mai mici.

Leo Kanner a descris autismul în 1943 la 11 copii manifestând de retragere de la

contactul uman cât mai devreme de varsta de 1 an, originile postularea in viata prenatale
[1]. Manualul de Diagnostic si Statistic al Mental Disorders IV-Text Revizuită (DSM-IV-TR),
descris autismul ca o tulburare neurocomportamental complex caracterizat prin deficiențe în
interacțiunea socială, abilități de comunicare casate și un comportament stereotip repetitive cu
debut inainte de 3 ani [2 ]. Mai multe condiții, inclusiv autismul complet sindromul (tulburarea
autistă), sindromul Asperger și tulburarea pervazivă de dezvoltare Nespecificată Altfel (PDD-
NOS) sunt acum grupate ca Tulburari din spectrul autismului (ASD), de asemenea, cunoscut
sub numele de tulburări pervazive de dezvoltare (PDD) [2-4] .

Simptomele de ASD incepe de obicei in copilarie timpurie cu dovezi de dezvoltare

întârziată înainte de vârsta de 3 ani. Academia Americana de Pediatrie recomanda screening-ul
autismului pentru identificarea timpurie si de interventie cu cel putin varsta de 12 luni și din
nou la 24 de luni. scale de evaluare utile in stabilirea diagnosticului sunt Autism Diagnostic
revizuit intervievarea (ADI-R) și de diagnosticare de observare Programul autismului (ADOS),
in asociere cu prezentare clinică [5, 6].

Etiologia ASD este complexa si cuprinde rolul genelor, mediului (epigenetica) și

mitocondrii. Mitocondriile sunt organite celulare care funcționează pentru a controla producția
de energie necesară pentru dezvoltarea creierului și activitatea. Cercetătorii identifică din ce în
ce anomalii mitocondriale la copii mici cu ASD, deoarece cazurile cele mai severe prezente
precoce cu caracteristici ale ASD. O mai bună conștientizare și de testare genetica si biochimice
mai precise și mai detaliate sunt acum disponibile pentru pacienții mai tineri, prezentand
intarziere de dezvoltare sau probleme de comportament.

Studii epidemiologice și de familie sugerează că factorii de risc genetici sunt

prezente. Cauzele monogene pot fi identificate în mai puțin de 20 la suta din subiecti cu
ASD. Subiecții rămași au alte cauze genetice sau multigenic și / sau influențe epigenetice, care
sunt factorii de mediu alterează expresia genelor, fără a modifica secvența de ADN [7-
10]. Factori epigenetice in ASD au fost revizuite de către Grafodatskaya et al. [11]. Riscul de
recurență pentru ASD variază în funcție de sex pentru al doilea copil să fie afectate (4%, în
cazul în care primul copil afectat este de sex feminin și 7% în cazul în care un mascul). Rata de
recurență crește la 25-30% în cazul în care al doilea copil este, de asemenea, diagnosticat cu
ASD. Studiile au aratat ca printre gemeni identici, în cazul în care un copil are ASD, atunci
celălalt are o șansă de 60-95% de a fi afectate.

Sindromul Fragile X si scleroza tuberoasă sunt cele mai comune condiții unice de gene
asociate cu ASD. Mai frecvente anomalii cromozomiale in autism non-duplicarea este
sindroame regiunii 15q11-Q13, reprezentând 5% din pacientii cu autism. microdeletions mari
în 16p11.2 cromozomiale și 22q regiuni reprezintă încă 1% din cazuri [12]. Creșterea rapidă a
incidenței ASD în ultimii 30 de ani, în afară de îmbunătățirea identificării, indică factorii de
mediu care acționează asupra predispoziții genetice în esență neschimbate care implica ADN-
ul nuclear si mitocondrial deoarece novo schimbari de in gene sunt puțin probabil să apară atât
de repede. conditii genetice si citogenetice specifice asociate cu ASD sunt cuprinse într-un
comentariu recent [13].

Rolul și importanța testării genetice pentru persoanele cu ASD este bine recunoscut [14],
cu diferite studii care arată randamente de 6% până la 40%, cu metode de testare noi [15,
16]. Studiile timpurii de către Miles și Hillman [15] testat 94 de copii diagnosticați clinic cu
TSA și a constatat că 6 din 94 (6%) au avut tulburări genetice identificabile. Herman și
colab. [17] a constatat ulterior cauze genetice în 7 din 71 (10%) subiecții cu ASD. Schaefer și
Lutz [16] au folosit o abordare genetică clinică de nivel trei pentru a identifica cauzele in 32 de
copii diagnosticați clinic cu ASD, si raportate constatarile genetice pozitive la 13 subiecți
(40%). Acestea au inclus 5% cu anomalii cromozomiale de înaltă rezoluție, 5% cu sindrom X
fragil, 5% cu sindromul Rett (defecte genetice MECP2 la femele), 3% cu mutațiile genei PTEN
la cei cu un cap de circumferință> 2,5 SD, aproximativ 10% cu alte sindroame genetice (de
exemplu, scleroza, tuberoasă) și 10%, cu mici ștergeri sau duplicări identificate folosind
microarrays cromozomiale.
 Analiza cromozomială de înaltă rezoluție detectează 3 la 5 anomalii de dimensiuni
megabazelor; Cu toate acestea, noua tehnologie care utilizează ADN-ul sau cromozomiale
microarray pot identifica anomalii de 100 de ori mai mici. Prin urmare, microdeletions și
duplicări poate fi acum identificat cu microarrays la persoanele cu ASD care au avut anterior
de testare citogenetică normală. Copiii cu ASD arată o prevalență mai mare a microdeletions și
duplicări, implicând în special regiunile de cromozomi 1q24.2, 3p26.2, 4q34.2, 6q24.3 si 7q35,
inclusiv cele cu ASD non-sindroame [18]. Prin urmare, în cazul în care analiza citogenetica este
negativ diagnosticat clinic ASD, testarea pentru microdeletions si dublurile cu tehnici noi este
justificată.
Shen și colaboratorii [19] au studiat rezultatele testelor genetice de la un grup de 933 de
pacienți cu ASD inclusiv karyotypes G-banded, testarea fragile X si microarrays
cromozomiale. Ei au raportat karyotypes anormale la 19 852 de pacienți (2,2.%), Teste
anormale X fragil la 4 din 861 pacienți (0,5%) și eliminări de microarray identificate sau
suprapunerilor în 154 din 848 pacienți (18,2%). Cincizeci și nouă de 154 de subiecți (38,3%)
au fost asociate cu variante cunoscute tulburare genomice cu posibila semnificație pentru
ASD. Cu excepția ștergeri recurente sau duplicări ale cromozomului 16p11.2 [20] și
15q13.2q13.3 cromozomul [21], cele mai multe modificări numărul de copii au fost unice.

Wang și colab. [22] au raportat rezultatele unui studiu de asociere genomului la nivel de
3101 subiecți reprezentând 780 familii cu copii afectați și un al doilea grup de 1.204 subiecți
afectați împreună cu 6,491 controale. Toate subiectele lor au fost de origine europeană. Ei au
descoperit o asociere puternica cu șase nucleotide polimorfisme între cadherin 10 (CDH10) și
caderină 9 (CDH9) gene. Ultimele doua gene codifica molecule de adeziune de celule
neuronale. Aceste descoperiri au fost replicate in doua cohorte independente si sa demonstreze
o asociere cu susceptibilitatea la ASD.

Sebat și colab. [23] au studiat 165 de persoane cu autism grupați în 118 familii simplex
fara antecedente familiale de autism si 47 de familii multiplex cu mai multe afectate frații și le-
au comparat cu grupurile de control fara autism. Ei au raportat că 10,2% (12 din 118) familiilor
simplex au prezentat variantele număr de copii (CNVs), 2,6% (2 din 77), cu CNVs la persoanele
cu autism din familii multiplex și 1% (2 din 196) cu CNVs între normal în curs de dezvoltare
copii. Majoritatea CNVs au fost de tipul de ștergere. Astfel, CNVs au fost semnificativ mai
frecvente in forma sporadice de autism decat la cei cu antecedente familiale din cauza mutatii
singure gene nu detectabile prin deleția ADN sau analiza duplicarea.

Ca rezultat al cercetării în secvențe de nucleotide, microdeletions și duplicări la copii cu

ASD pot fi acum identificate inclusiv proteina sintaxin de legare 5 (STXBP5) și 1 (NLRR1)
gene leucina neuronale repeta bogat. Sintaxin 5 reglează transmisia sinaptică la crăpătura
presinaptic și este cunoscut de a inhiba formarea de sinapse. Sintaxin 1 de proteine este crescut
la cei cu autism de mare de functionare. Rolul NLRR1 la nivelul sinaptic este necunoscut, dar
se crede a fi legat de creșterea neuronală [24].

Un număr de copii autism studiu variatie genomului la nivel raportat de Glessner et

al. [25] într-un grup mare de cazuri ASD, comparativ cu lotul martor au aratat ca genele
NRXN1 si CNTN4 joaca un rol. De asemenea, au descris noi gene de susceptibilitate, NLGN1
si ASTN2 care codifica moleculele neuronale de celule-adeziune si alte gene implicate in caile
ubiquitin (UBE3A, PARK2, RFWD2 și FBXO40), două rețele de gene importante exprimate
in sistemul nervos central.

Următoarea secvențierea ADN generație este în prezent în curs de desfășurare, care să

permită detectarea rapidă și eficientă a mutații la nivelul ADN-ului nuclear si mitocondrial
(mtDNA) in investigatii umane si de a deveni o parte a workup clinice.Heteroplasmy sau
existența mai multor tipuri de mtDNA în interiorul celulelor unui individ, este detectabil
folosind tehnici de genetică moleculară standard care se concentreaza pe regiuni hipervariabile
ale genomului mitocondrial. Cu high-throughput urmatoarea generatie secventiere a mtDNA
uman complet, care este mai rapid și mai puternic, detectarea precisă a heteroplasmy pot fi
făcute de-a lungul genomului mitocondrial nu doar în regiunile hipervariabile situate în
citoplasmă celulei care permite studiul de corelare cu boli.

Recent, Li și colab. [26] esalonate in genomul mitocondrial de 131 persoane sanatoase

de origine europeana. Ei au identificat 37 heteroplasmies la frecvența de 10% sau mai mare la
32 de persoane și situat la 34 de locuri diferite ale mtDNA care indică faptul că variația apare
frecvent în ADNmt. Aceste variații pot avea un impact asupra nivelurilor de energie și influența
dezvoltarea creierului si functia. Următoarea generație secvențiere ar trebui sa ofere perspective
noi in aspecte genomului de variație ADNmt sau heteroplasmy utili în studiul tulburărilor
umane, inclusiv autism.

Cu un procent semnificativ de copii cu autism prezinta cu anomalii metabolice (de

exemplu, niveluri ridicate de lactat) și alte tulburări biochimice, identificarea tulburari
mitocondriale este critica pentru tratamentul precoce. Lung disfuncția mitocondrială în picioare
poate duce la complicații de sănătate majore și daune. Dacă identificate precoce, tulburări
mitocondriale pot fi gestionate cu longevitate si a calitatii vietii. interventie medicala si terapii
sunt acum disponibile pentru a viza în mod specific defectul biochimic in mitocondrie si de a
imbunatati functia si bioenergie de utilizare și de a diminua insultele neurologice care ar avea
loc dacă sunt lăsate netratate.
 Efecte metabolice erori înnăscute de metabolism pot contribui la cel puțin 5% din cazuri
cu ASD [27]. Deficienta anumitor enzime în tulburări metabolice duce la o acumulare de
substanțe care pot provoca efecte toxice asupra creierului in curs de dezvoltare, contribuind la
ASD. Un exemplu comun este fenilcetonurie, o condiție autozomal recesiva care duce la
niveluri de fenilalanină excesive, retard mintal și ASD, în cazul în care nu-controlat dieta. Alte
afecțiuni înrudite includ erori de purina metabolism (deficit adenylosuccinase și deficit de
adenozin deaminazei), sindroame de deficiență de creatina, sindromul Smith-Lemli-Opitz,
deficit de biotinidase și histidinemia. screening-ul precoce și tratamentul acestor condiții ar
putea avea un impact pozitiv in prevenirea progresului bolii. De exemplu, prevalența
persoanelor afectate cu fenilcetonurie a scăzut de la 20% până la 6%, cu detectarea precoce in
timpul copilariei si interventie dietetice pentru a controla aportul de fenilalanină [28, 29]. Odata
ce anomalii mitocondriale sunt mai bine elucidate, intervenția preventivă în mod similar, pot
deveni disponibile

Mitocondriile sunt organite intracelulare în citoplasmă cunoscut sub numele de casele

de putere ale celulei. Acestea joacă un rol crucial în adenozin 5'-trifosfat (ATP), producția prin
fosforilare oxidativ (OXPHOS). Ultimul procedeu se realizează prin lanțul de transport de
electroni formată din complex I (NADH: oxidoreductaza Ubiquinone sau dehidrogenaza),
Complex II (Succinat: oxidoreductaza Ubiquinone), Complex III (coenzima Q: Citocromului c
reductaza sau citocromul complex BC1) și IV Complex (citocrom c oxidaza) necesară pentru a
converti surse de alimentare a energiei celulare. Sistemul de transport al electronilor este situată
în membrana internă a mitocondriilor și conține proteine codificate de atât ADN-ul nuclear si
mitocondrial [30]. Aproximativ 100 de proteine codificate de ambele gene mitocondriale și
nucleare sunt necesare pentru asamblarea complexelor pentru lanțul respirator [31,
32]. Genomul mitocondrial codifica 13 dintre aceste 100 de proteine

ADN-ul mitocondrial uman (mtDNA) este o moleculă de ADN dublu catenar circular
conținută în mitocondrie și moștenit numai de la mama. Antecedentelor evolutive sunt plasmide
bacteriene. Fiecare mitocondriei conține 2-10 copii mtDNA organizate în nucleoizii
[33]. Această organizație este important să se realizeze separarea, replicarea și transcrierea
ADNmt [33, 34]. La om, 100-10,000 copii separate ale ADNmt sunt de obicei prezente per
celulă, deși ovulului conține aproximativ 50,000-5,000,000 mitocondrii [33-35] fiecare
mtDNAs conținând, în timp ce celulele spermatice au doar aproximativ 50-100 mitocondrii
fiecare.
 Mitocondriile sunt organite dinamice care produc siguranța și fisiune prin schimbarea
forme și dimensiuni pe toată durata de viață a celulei. Până în prezent, mitocondriile nu poate
fi încă cuantificat cu exactitate, dar ADNmt pot fi analizate. La mamifere, fiecare moleculă
ADNmt dublu catenar circular este format din 15,000-17,000 de perechi de baze conținând un
total de 37 de gene (pentru producerea de 13 proteine de fosforilare oxidativă utilizate pentru a
genera ATP, 22 gene pentru ARN de transfer și două pentru ARN ribozomal) (vezi Fig .
22). Cand o mutatie apare într-un ADNmt celular, creează o populație mixtă intracelulare de
molecule mutante si normale cunoscute sub numele de heteroplasmy. Atunci cand o celula se
divide, este o chestiune de noroc dacă mtDNAs mutante va fi împărțit într-o singură celulă fiică
sau alta. Prin urmare, în timp, procentul de mtDNAs mutante în diferite linii de celule pot deriva
spre fie mutant pur sau normal (homoplasmy), un proces cunoscut sub numele de segregare
replicativ, care apoi impactul asupra energiei celulare și a bolilor umane
tulburări mitocondriale pot prezenta în copilarie sau mai tarziu in viata. boli umane
mitocondriale datorate homoplasmy pentru toate exemplarele mutante mtDNA adesea prezente
mai devreme în copilărie. Heteroplasmy poate implica doar cateva exemplare mutante cu
copiile rămase fiind afectate. Indivizii cu tulburări mutaționale heteroplasmic nu pot afișa
simptome pana la maturitate sau dupa mai multe diviziuni celulare, prin care un număr de prag
de mitocondrii anormale cu alele mutante duce la boală. Boala Neuropatia cu slăbiciune
musculară, ataxie, și retinita pigmentară (NARP) este cauzata de T8993G mutatii mtDNA
heteroplasmic. Când heteroplasmy este prezentă în mai puțin de 10 la suta din copii, concluziile
NARP sunt de obicei absente. La 10-70 la suta, adult NARP debut este prezent, iar la 70-100
la suta din copilarie sindromul Leigh apare. Alte exemple de boli mitocondriale cunoscute
includ Epilepsie Mioclonică cu Heliu Zdrențăroșilor Red (MERRF) și afecțiunea cunoscută sub
numele de Mitocondriile Encephalomyopathy, lactică Acidoza și episoade stroke-like
(MELAS) (rezumate de Wallace
In productia ATP mitocondrii, radicalii liberi de oxigen și specii reactive de oxigen
(ROS) sunt produse și apoi îndepărtate în mod normal din celule prin enzimele anti-
oxidant. Atunci când producția de ROS și radicali liberi depășește limita, stres oxidativ se
produce, care este, ROS se combina cu lipide, acizi nucleici si proteine in celulele care duc la
moartea celulei prin apoptoză sau necroză [39]. Deoarece celulele creierului au limitat
activitatea antioxidantă, un conținut de lipide ridicat și cerințe ridicate de energie, este mai
predispus la efectele stresului oxidativ.
Coleman și Blass în [41] au fost primii care se leagă la bioenergie tulburări ale
metabolismului cu TSA. Ei au raportat acidoză lactică la patru copii cu autism. Ulterior, Laszlo
și colab. [42] a raportat serotonina a crescut, acid lactic și nivelurile de piruvatului la copii cu
autism. Lombard [43], apoi a propus ca mitocondriale defecte de fosforilare oxidativ poate
produce metabolismul anormala a creierului la copii cu autism, ceea ce duce la acidoză lactică
și scăderea concentrațiilor plasmatice de carnitină. In schimb, Correia și colab. [44] au studiat
196 de copii cu autism si a constatat ca 17% au avut un nivel ridicat de acid lactic și 53 au avut
un lactat ridicat la raportul piruvat. In plus, biopsii musculare efectuate in 30 de copii cu autism
au aratat un defect mitocondriale, in 7 dintre copii. Biopsiile musculare studiate de Tsao și
Mendell [45] în două fete care nu au legatura cu autism au aratat deficit de I si coenzima Q10
complex deficit partial într-o fată și deficiență parțială a complecșilor II, III și IV în
cealaltă. Ambele fete au avut serice normale de aminoacizi, amoniac, lactat, acizi organici urina
si karyotyes normale precum si studii de ADN negative pentru Rett și sindroame fragile X.
Recent, Shoffner si colegii [46] au studiat 28 de copii diagnosticați cu TSA pentru boli
mitocondriale si a constatat un nivel ridicat de lactat, piruvat și alanină în sânge, urină și lichidul
cefalorahidian în 14 dintre copii. Folosind biopsii musculare, au identificat un complex
mitocondrial I defect 50% (14/28) dintre copiii afectati, complexul I combinat și III defecte de
18% (5/28), I complex combinat, III și IV defecte de 18% (5/28) și izolate defecte V complexe
în 14% (4/28). Șaptezeci și unu la sută (20/28) dintre copii au avut fosforilarea anormală
oxidativă după efectuarea studiilor de evaluare a proteinelor pe subunități selectate pentru
complexe I, II, III și IV. Rezultatele lor au sugerat o legătură chiar mai mare intre ASD si
afectare a functiei mitocondriale. (Vezi Tabelul 11 pentru un rezumat cunoscute defecte
genetice mitocondriale si nucleare in ASD).

Defecte Gene mitocondriale

Cazuri timpurii raportate de Graf si colegii [47] furnizează exemple de mutații mtDNA și
defecte enzimatice. Ei au descris un frate și soră cu ARN de transfer ADNmt G8363A mutații
(tRNAlys). Băiatul în vârstă de la 3 ani in îndeplinit criteriile de diagnostic pentru autism la 4
ani și au prezentat o rată de mutație de 60% în țesutul muscular și 61% în sânge. markerii
mitocondriali nivelelor de lactat și piruvat au fost normale, în urma unui test de carbohidrați
încărcare. Activitatea lanțului mitocondriilor respirator (MRC) a fost măsurată pentru
complexe I, II, III, IV și sintetazei citrat. Acest băiat a avut activitate de mare pentru nivelul
enzimelor mitocondriale sugerat de raporturi complexe I la sintetazei citrat, dar activitatea
normală pentru complexele II, III și IV. Sora sa, la varsta de 6 ani a fost diagnosticat cu
sindrom Leigh, o tulburare care afecteaza creierul neuro si se manifesta intre 3 luni si 2 ani
din cauza mutatii ale ADNmt sau gene nucleare care implică în principal I.

Ea a fost dovedit a avea aceeasi mutatie mtDNA dar prezent la un nivel de 86% în mușchi și 82% în
sânge, cu nivele de lactat crescute și activitate scăzută de enzime mitocondriale. Acest studiu de
mutatii G8363A mtDNA in autism subliniază importanța markerilor biochimici mitocondriale și
mutații mtDNA care necesită investigații suplimentare.
În plus, Pons și colab. [48] au urmat cinci copii care nu au legătură cu ASD și au raportat
activitatea enzimatică a lanțului respirator anormal. O mutatie a genei ADNmt la poziția
A3243G a fost găsit în patru din cele cinci copii. nivelurile de acid lactic cerebrale mari au
fost identificate prin spectroscopie de rezonanță magnetică a creierului în trei dintre cele cinci
subiecți. Un copil cu ASD a avut o sora mai mare cu sindromul deleție mtDNA (MDS), adică,
o cantitate scăzută de mtDNA cu un număr redus de molecule mtDNA per celulă. MDS este o
tulburare autozomal recesiva caracterizata printr-un defect cantitativ în numărul de copii sau
cantitatea de ADNmt si recent a doua gene strâns legat nucleare, DGK si TK2. Sora a avut loc
epuizarea mtDNA sau mutatii in cele doua gene nucleare. Cu toate acestea, ei au avut mtDNA
epuizarea în mușchii scheletici la un nivel de 72%. Aceste constatari subliniaza importanta
A3243G mtDNA mutatie in ASD si anchetatorii propus ca mutatii sau epuizarea de ADNmt
ar trebui să fie investigate în alți copii care se prezintă cu ASD.
Oliveira și colab. [49] au raportat până în prezent singura populatie pe baza constatării de copii cu
ASD si disfunctie mitocondriala. Ei au identificat un nivel ridicat de lactat în 14 din 69 de copii cu ASD.
High-lactat-piruvat raporturi de nivel a avut loc în 11 din cele 14 copii; biopsii musculare deltoid au
fost efectuate in cei 11 copii pentru anomalii ale lanțului respirator. mutații punctiforme au fost
examinate în mtDNA la pozițiile G8363A, A3243G, T3271C, T3256C si T8356C, precum și nivelurile
mtDNA sau depleții. In timp ce 5 dintre cei 11 copii au prezentat tulburări respiratorii mitocondriale
definite, folosind criteriile clinice și de laborator de diagnostic raportate de Bernier et al. [50], dar nu
au fost observate defecte genetice mtDNA. Mai târziu, Oliveira și colab. [51] a raportat la conditiile
medicale genetice si asociate care apar la copii cu ASD si au aratat 5 la suta cu tulburari
cromozomiale, 4 la suta cu tulburari mitocondriale, 3 la suta cu tulburari singure gene, 3 la suta cu
boli infectioase, 3 la suta cu sindroame genomice sau defecte congenitale iar restul cazurilor având
idiopatică cauze (necunoscute). Studiul lor a confirmat în continuare rolul lanțului de transport de
electroni in mitocondrie si autism. Cu toate că nu au găsit mari eliminări în ADN-ul mitocondrial, lipsa
de analiză pentru microdeletions, mutații și epuizarea ADNmt limitări ale studiului.
Un studiu interesant de Fillano et al. [52] ilustrează importanța mitocondriilor la copii cu caracteristici
ale ASD. Ei au evaluat 12 de copii cu sindrom HEADD (hipotonie, epilepsie, autism si intarzieri de
dezvoltare) pentru anomaliile mitocondriale prin examinarea activității lanțului de transport al
electronilor respirator, structura mitocondrială și deleții sau mutații punctiforme ale genelor mtDNA
sau cantitatea de mtDNA prezentă. Ei documentate scaderea activitatii complexelor respiratorii
mitocondriale (I, III, IV și V), în principal în enzime codificate de ADNmt, în șapte din opt discipline
studiate. Cu toate acestea, șapte persoane au avut structura mitocondrială normala in timp ce cinci
au scăzut sau sărăcit cantități de ADNmt. În fine, defecte structurale în mitocondriile au fost gasite in
trei dintre cele patru disciplinele studiate. Interesant, sapte copii cu defecte de enzime mitocondriale
nu au prezentat mutații sau defecte structurale in mitocondrie si numai un singur copil cu o mutatie
nu a avut defecte enzimatice. Astfel, este prea preliminar pentru ipoteza ca defecte enzimatice sunt
independente de mutatii mtDNA sau defecte structurale.
Prezența defectelor enzimatice la o vârstă mai este necunoscut. Mai multe studii sunt necesare
pentru a urma acești copii în viață mai târziu. In acest studiu, mtDNA mutații punctiforme nu au fost
observate, deși s-a observat o mutație 7.4kb mtDNA într-un copil. Ulterior, Pons și colab. [48] a
constatat că 72% din genomul ADNmt a fost absent sau sărăcit într-un copil cu PDD care au
antecedente de sindrom de epuizare ADNmt într-o soră mai mare. Utilizarea tehnicilor genetice mai
noi, cum ar fi microarrays mtDNA și secvențierea împreună cu gene nucleare înrudite (codare și non-
codare ARN) va fi utilă pentru a caracteriza genomul mitocondrial de status epuizare sau mutații.

Relația dintre gene nucleare

 Studiile analizate de Smith et al. [53] legate de gene nucleare și ADNmt din ASD, de exemplu,
gena nucleară, SLC23A12. Aceasta gena cea mai importanta localizată pe cromozomul 21q31 codifică
o proteină purtătoare de legare de calciu utilizat de către mitocondrii. Este implicată în schimbul
aspartatului de aminoacizi pentru glutamat în membrana internă a mitocondriilor pentru utilizarea în
lanțul de transport de electroni. Ramoz și colab. [54] a identificat două polimorfisme unice de
nucleotide (SNPs-rs2056202 și rs2292813), in gena SLC25A12 asociate cu ASD in studiul lor de 411 de
familii. Această asociere a fost confirmată de Seguarado et al. [55] și de Silverman și colab. [56].
Un studiu recent de Ezugha et al. [57] dintr-un bărbat în vârstă de 12 ani cu facies dismorfice,
dizabilitatea intelectuală, autism, epilepsie și slăbiciune picior identificate scaderea activitatii
complexelor mitocondriale I și IV. O ștergere 1 Mb a fost găsită pe banda cromozomul 5q14.3. Ei au
sugerat că trăsăturile observate în acest copil au fost in concordanta cu disfuncția mitocondrială și o
genă nucleară este localizată pe cromozomul 5 care codifică pentru proteine implicate în activitatea
acestor complexe mitocondriale. Correia și colab. [44] a studiat, de asemenea, legătura acestei gene
într-o suplimentare de 241 de familii si a constatat un nivel ridicat de lactat și raportul lactat /
piruvat. Cu toate acestea, ei nu au găsit SNPs pentru gena SLC23A12 în familiile lor cu autism. De
asemenea, Chien și colab. [58] au studiat 465 de persoane cu TSA, dar nu a descoperit nicio
modificare SNP in gena

Rolul genomului nuclear în ADN-ul mitocondrial Replication, Întreținere și Epuizarea

Replicarea ADN-ului mitocondrial și întreținere este reglată de enzime, care sunt proteine
codificate de gene de ADN nuclear [59]. O astfel de genă nucleară este ADN polimeraza gamma 1
(POLG1) care codifică polimeraza ADN-ul mitocondrial [60]. Această genă este implicată în
producerea de ADNmt și a fost legată de diferite condiții mitocondriale. Prin urmare, mutatii in gene
nucleare necesare pentru replicarea ADNmt pot afecta funcția ADNmt.
Studiile au examinat rolul genelor nucleare în provocarea epuizării ADNmt genomului și
tisulare condițiile specifice [61, 62]. Mandel si colegii [61] a observat simptome neuronale cu valori
crescute ale acidului lactic în 19 copii cu deoxiguanosine kinazei mutațiile genei dGUOK și insuficiență
hepatică, cu reducerea activității a complexelor mitocondriale I, II și IV. Cu toate acestea, activitatea
enzimei de complex II, care este codificată de ADN-ul nuclear, a fost normal la acești pacienți. Mai
mult, analiza cantitativă ADNmt a arătat un raport de ADN redus ADNmt / nuclear de 8-39% în
probele de ficat de la șapte dintre copii.
Principala furnizare de dNTPuri necesare pentru energie provine din calea de salvare a
deoxinucleozid reglementata de doua enzime mitocondriale DGK și TK2, codificate de genomul
nuclear [63, 64]. Prin urmare, Mandel și colab. [61] a examinat gene nucleare si a constatat ca DGK a
suferit mutatii la pacientii cu rapoarte reduse mtDNA / nucleare ADN. Un studiu similar de Saada et
al. [62] în două din patru persoane cu cunoscute mitocondriale sărăcită miopatie au aratat o mutatie
in gena nucleara TK2. Aceste doua studii sprijinite in continuare ca genele nucleare sunt legate de
ADNmt, dar sunt necesare mai multe cercetari pentru a determina rolul lor in autism si pentru
identificarea mtDNA defecte genetice, mutații sau pentru starea de epuizare ADNmt asociate cu
defecte ale genomului nuclear aferente.
gamma Polymerase (POLG1) este o polimerază importantă enzimă responsabilă pentru
ADNmt repararea replicare și baze excizie [60]. Gena nucleară care codifică enzima POLG1 este
localizată pe cromozomul 15q25 banda [65, 66]. Orice mutatie in aceasta gena va avea un impact
procesele de replicare si reparare mtDNA. Interesant, la oameni, disomiei materne 15 (ambele 15s
cromozomiale de la mama) este văzută în aproximativ 25% dintre subiecții cu sindrom Prader-Willi
(PWS), cele mai frecvente cauze cunoscute sindromal obezității morbide la om [67]. PWS este
frecvent asociat cu ASD în special la subiecții cu PWS datorită disomiei materne 15 și asociată cu o
rată metabolică mai scăzută [68]. De aceea, disomiei materne 15 în PWS ar putea influența
activitatea genei POLG1.
Studiile au arătat că mutațiile sau tulburări ale genei POLG1 cauza ștergerile de gene mtDNA.
In plus, autismul este legat de defecte ale cromozomului uman regiunii 15q11-q13 inclusiv dublurile
inverted găsite în aproximativ 5% din cazuri cu autism [12]. Filipek și colab. [69] în continuare a
raportat că subiecții cu duplicări 15q11-Q13 și ASD au crescut mitocondrii si mitocondriale blocarea
lanțului respirator la IV complex, dar nivelele de lactat nu au fost semnificativ crescute. In timp ce
acest studiu nu a examinat pentru mutatii mtDNA, acesta a stabilit o legatura intre gene in nucleul
specific pe cromozomul 15q11-Q13 și o interacțiune cu functiei mitocondriale, la subiecții cu autism.
Van Goethem și colab. [70] a arătat că autozomal dominant opthalmoplegia extern
progresivă (adPEO) se datorează mutațiilor genetice POLG1 care duc la deleții mtDNA. In afara de
POLG1, tipul autozomal dominant al PEO a fost legată de gena Twinkle pe cromozomul 10q [35] și
gena ANT1 pe 4q cromozomiale [71]. Aceste mutații ale genei nucleare sunt cunoscute de a provoca
perturbații mtDNA.
POLG1 a fost legată de multe condiții în afară de adPEO. De exemplu, provoaca autozomal
recesiva PEO, neuropatie senzorială-ataxic, dizartrie și opthalmoplegia (SANDO), juvenil Spino
cerebeloase sindrom ataxia epilepsie (SCAE) și Alpers-Huttenlocher poliodystrophy hepatopathic.
Aceste encephalomyopathies sunt cauzate de mitocondriale intergenomic diafoniei nucleare
anormale legate de mutatii ale genei POLG1 și deleții mtDNA. Această legătură puternică între gene
nucleare și genomul ADNmt este susținută în continuare de o prevalență de 2% dintre indivizii din
populația generală care transportă acest defect gene nucleare [59].
O altă genă nucleară care poate provoca anomalii multiple mtDNA inclusiv duplicări, deleții și
mutații punctiforme este timidin fosforilaza (TP) [72, 73]. Gena nucleară TP este localizată pe
cromozomul 22q13 [74] și codifică enzima citosolic reglarea nivelurilor de nucleozide pirimidinice
prin catabolismul timidin phosphorolytic la timidina și riboză [75]. encefalopatie Mitocondriile
neurogastrointestinal (MNGIE) rezultă din pierderea activității TP. Prin urmare, studiile de mai sus au
arătat că mutațiile genelor nucleare TK2, DGK, Plog, Twinkle, ANT1 și TP poate cauza deleții și depleții
ale ADNmt, implicare și frecvența acestora în ASD necesită investigații suplimentare.
In cele din urma, stresul oxidativ și gena metilare (epigenetica) sunt ambele considerate a
juca un rol în producerea ASD. Stresul oxidativ in celulele creierului din cauze genetice sau de mediu,
conduce la scăderea activității metionină sintetazei [76]. acțiunea Metionina sintaza implică două
procese: a) stimulate de dopamină metilare fosfolipid care este necesară pentru sincronizarea
activității normale a creierului în timpul atenție; și b) metilarea ADN-ului care taceri activitatea genei.
In timpul metilare ADN-o grupare metil se adaugă la citozină-fosfat-guanina site-ul (CpG) și citozina
metilat este transformată în 5-metilcitozină; deci, inactivare expresia genelor. Acesta este un proces
normal. Se poate propune ca importantă interacțiunea dintre metabolismul metionină și metilarea cu
reacțiile globale de folat si a metabolismului B12 este reglată prin reacții mitocondriali reducere /
oxidare care controleaza metilare gene nucleare (epigeneticii sau methylomics) și metabolismul
glutationului. Atunci când deranjat, acest proces contribuie la ASD [77]. Când activitatea sintetazei
metionină este afectata, copiii pot manifesta afectare atenționale si alte simptome de la expresia
genelor defect care duce la ASD.
Deth și colab. [78] au raportat în continuare implicarea diferitelor gene în procesul de
metilare cu cele mai importante fiind metil-CpG-legare (MeCP2) proteine. proteina MeCP2 anormala
este legata de sindromul Rett și ASD [79]. MeCP2 participă la tacere genei prin legarea genelor
metilate din creier. Orice mutatie a acestei gene are un impact asupra stării de expresie a genelor
metilate cunoscute și, prin urmare, interferează cu epigeneticii.
Stresul oxidativ este de asemenea cunoscut de a provoca deleții ale genelor mtDNA in
modele de soareci [80]. De exemplu, în mod cronic administrat injecții intraperitoneale de agent
chimioterapeutic, doxorubicină, la soareci a dus la o eliminare a 4KB mtDNA în mușchiul inimii. În
plus, Lu și colab. [81] a confirmat indirect aceste constatări prin raportarea deleții mtDNA in
imbatranire a pielii de la oameni cu cresterea radicalilor liberi de oxigen și specii reactive de oxigen și
să sprijine în continuare baza pentru examinarea ADNmt sau deleții de gene in ASD.
Pentru a evalua în continuare pentru disfuncția mitocondrială și anomaliile mtDNA, Giulivi și
colab. [82] limfocite recent studiate la 10 copii cu ASD si 10 controale cu vârste între 2 și 5 ani.
Rezultatul masurilor incluse capacității oxidative fosforilare la nivelul celulei, numărul de copii
ADNmt, rata mitocondriale producției de peroxid de hidrogen, și nivelurile plasmatice de lactat și
piruvat. Majoritatea copiilor cu TSA (6 din 10) au avut activitate mai scăzută decât mitocondriale I
complex gasit in controale. Niveluri mai ridicate de piruvat plasmatică a apărut la 8 din 10 copii cu
ASD comparativ cu lotul martor compatibile cu o activitate piruvat dehidrogenază inferior. Prin
urmare, copiii cu ASD au avut rate mitocondriale de producție mai ridicate de peroxid de hidrogen
față de martori. Studiile au aratat genomului mitocondrial overreplication ADN-ul mitocondrial in 5
copii cu deleții ASD și mtDNA care implică codificare pentru citocrom b în 2 copii cu ASD segmentul.
Prin urmare, copiii cu ASD au fost mai susceptibile de a avea disfunctie mitocondriala, ADNmt
overreplication, și / sau eliminări mtDNA decât de obicei in curs de dezvoltare pentru copii.
Pe scurt, rolul mitocondriilor și defectele mitocondrial sunt discutate în relație cu ASD. Mai
multe studii au legat autism la defecte ale fosforilării oxidative codificate de ADNmt împreună cu
interacțiunea dintre gene nucleare. Indivizii cu fenotip ASD arata in mod clar boala mitocondriale
primar genetice bazate pe. Studii suplimentare cu cele mai recente tehnologii genetice, cum ar fi
urmatoarea generatie secventiere, microarrays, bioinformatică și testele biochimice vor fi necesare
pentru a determina prevalenta si tipul defectelor mitocondriale in ASD. Elucidarea anomalii
moleculare care rezulta din defecte mitocondriale sau genetice la persoanele cu ASD poate conduce
la optiuni de tratament mai bune și rezultate.

Autorii recunosc familiile cu autism, care a stimulat întreprinderea acestei reexaminări. Acest
studiu a fost sustinut de Centrul pentru Autism din Kansas Cercetare si Formare (KCART) și să acorde
NICHDs HD02528. Mulțumim Carla Meister pentru pregătirea ei expert al manuscrisului

Cuvinte cheie: tulburari din spectrul autismului (ASD), ADN-ul mitocondrial (mtDNA mutații)
și epuizarea, stres oxidativ, gene nucleare, lactat / piruvat raporturi, cauzalitate genetică.

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3145262/