Mix 50 ml of reagent solution with 1.

0 ml of Ferrozine
IRON solution (3.). Linearity
in vitro DIAGNOSTIC REAGENT KIT Chromogen reagent can be used after 10 minutes. The method is linear up to a concentration 170 mol/l.
Colorimetric ferrozine method
Stable for 7 days at 2 - 8 °C Normal value
without deproteinization
Also for Analyzers Sample Women 8.8 – 26.3 µmol/l
Serum or heparinized plasma Men 10.6 – 28.3 µmol/l
Cat. No.: 33124-2-99-80 Package: 5 x 25 ml
Do not use hemolyzed samples. Quality control
33121-2-99-80 10 x 100 ml
Stable for 7 days at 2 - 8 °C
Any control serum applicable to this method.
Test principle
Procedure Recommended: Reanorm U
Iron is separated from transferrin by means of guanidium Reapath U
hydrochloride in a slightly acidic medium and reduced by Wavelength: Hg 578 nm
REA-kon I.
ascorbic acid. Ferrous ions form a coloured complex with Spectrophotometer: 562 nm
REA-kon II.
ferrozine. Light path: 1 cm
Temperature: + 25 °C or +37 °C Storage, stability
Reagents Pipette into test tubes The kit is stable up to the expiry date stated when stored at
1. Buffer solution pH 5.0 SB S B1 B2 St1 St2 +15 - +25 C.
sodium acetate 170 mmol/l Reagent 1.0 ml - 1.0 ml - 1.0 ml -
guanidium hydrochloride 4 mol/l solution Note
thiourea 10 mmol/l Chromogen Only iron-free glassware should be used. The use of
detergents - 1.0 ml - 1.0 ml - 1.0 ml disposable plastic tubes is recommended.
reagent
2. Ascorbic acid Sample 0.2 ml 0.2 ml - - - - The reagent solution and chromogen solution should be
3. Ferrozine solution 40 mmol/l Redist. water - - 0.2 ml 0.2 ml - - kept in tightly closed bottles.
4. Standard 17.9 mol/l Standard (4.) - - - - 0.2 ml 0.2 ml Buffer solution (1.) and ferrozine solution (3.) contain
Mix and incubate for 10 min at 25 C or 5 min at 37 C. sodium azide as stabilizer. Do not swallow. Avoid contact
Preparation and stability of Reagent Solution
Read absorbance (A) within 30 minutes. with skin and mucous membranes. It can be removed with
Cat. No.: 33124-2-99-80 plenty of water.
Dissolve one bottle of Ascorbic acid (2.) in 25 ml of Buffer SB = Sample blank B1 = Blank1 St1 = Standard1
solution (1.) Reference
S = Sample B2 = Blank2 St2 = Standard2
Lawrence L. Stookey: Anal. Chem., 42, 779-781 (1970)
Cat. No.: 33121-2-99-80
Calculation
Dissolve one bottle of Ascorbic acid (2.) in 100 ml of Reg.. No: HU/CA01/2329/05
Buffer solution (1.) AS  AB
Using a standard: Iron (mol/l) = x 17.9
Stable for 7 days at 2 - 8 °C ASt  AB REANAL FINECHEMICAL Co.
1147 Budapest, Telepes u. 53. HUNGARY
(Yellow coloration does not disturb the assay.) where AS  AS - ASB , Phone: +36-1-251-3999, +36-1-4677-500 Fax: +36-1-252-1339
AB  AB2 - AB1 ,
Preparation and stability of Chromogen Reagent
ASt=ASt2 -ASt1 .
Cat. No.: 33124-2-99-80
Mix 12.5 ml of reagent solution with 0.25 ml of Ferrozine Using a factor: Iron (µmol/l)= (AS - AB) x F
solution (3.).
Wavelength 562 nm Hg 578 nm
Cat. No.: 33121-2-99-80
Factor (F) 215.1 234
 50 ml munkaoldatot összekeverünk 1,0 ml Ferrozin
VAS oldattal (3.).
in vitro DIAGNOSZTIKAI REAGENS KÉSZLET A színreagens 10 perccel a készítés után használható. Faktorral: Vas (µmol/l)= (AM- AV) x F
Kolorimetriás, ferrozinos módszer,
Felhasználható: 2 - 8 °C -on tárolva 7 napig Faktor értékei
fehérjementesítés nélkül
Automatákhoz is Minta Hullámhossz 562 nm Hg 578 nm
F 215,1 234
Hemolízismentes szérum vagy heparin plazma.
Cikkszám: 33124-2-99-80 Kiszerelés: 5 x 25 ml A mérést erősen lipémiás szérumból nem lehet elvégezni. Linearitás
33121-2-99-80 10 x 100 ml
Minta eltartható: 2 - 8 °C -on tárolva 7 napig A módszer 170 µmol/l vas tartalomig lineáris.
Módszer
Mérés Normál érték
A vasat a transzferrinről guanidin-hidrokloriddal enyhén Hullámhossz: Hg 578 nm Nő 8,8 - 26,3 µmol/l
savas közegben leválasztjuk, majd aszkorbinsavval Spektrofotométeren: 562 nm Férfi 10,6 - 28,3 µmol/l
redukáljuk. A vas(II) ferrozinnal színes komplexet képez. Fényút: 1 cm
Hőmérséklet: + 25°C-on vagy +37°C-on Minőségi ellenőrzés
Reagensek Minden kontroll szérummal, amely ezt a módszert
Eljárás
1. Puffer oldat pH 5,0 alkalmazza.
nátrium-acetát 170 mmol/l Kémcsövekbe pipettázunk Ajánlott: Reanorm U
guanidin HCl 4 mol/l Mv M V1 V2 St1 St2 Reapath U
tiokarbamid 10 mmol/l Munkaoldat 1,0 ml - 1,0 ml - 1,0 ml - REA-kon I.
detergensek Színreagens - 1,0 ml - 1,0 ml - 1,0 ml REA-kon II.
2. Aszkorbinsav oldat
Tárolás, stabilitás
3. Ferrozin oldat 40 mmol/l Minta 0,2 ml 0,2 ml - - - -
4. Standard oldat 17,9 mol/l Desztillált víz - - 0,2 ml 0,2 ml - - +15 - +25°C-on tárolva felhasználható a dobozon
Standard - - - - 0,2 ml 0,2 ml feltüntetett időpontig.
Munkaoldat készítése
oldat (4.) Megjegyzés
Cikkszám: 33124-2-99-80 Összekeverjük és 25 °C-on 10 percig, vagy 37 °C-on
Egy üveg Aszkorbinsavat (2.) oldunk 25 ml Puffer oldat- Ügyeljünk az üvegedények nagyfokú tisztaságára. Célszerű
5 percig inkubáljuk, majd leolvassuk az abszorbanciát (A).
ban (1.). egyszerhasználatos műanyag csöveket használni.
A mérést 30 percen belül végezzük el.
Az elkészített munkaoldatot és színreagens oldatot jól
Cikkszám: 33121-2-99-80
Mv=Minta vak V1=Vak1 St1=Standard1 záródó üvegedényben tároljuk.
Egy üveg Aszkorbinsavat (2.) oldunk 100 ml Puffer oldat-
M =Minta V2=Vak2 St2=Standard2 A puffer oldat (1.) és a ferrozin oldat (3.)
ban (1.).
konzerválószerként nátrium-azidot tartalmaz, amely
Felhasználható: 2 - 8 °C -on tárolva 7 napig Számolás mérgező. Bőrre ne kerüljön! Bő vízzel eltávolítható.
(A sárga elszíneződés nem zavarja a mérést.)
Irodalom
Színreagens oldat készítése AM  AV
Standarddal: Vas (mol/l) = x 17,9 , Lawrence L. Stookey: Anal. Chem., 42, 779-781 (1970)
ASt  AV
Cikkszám: 33124-2-99-80 Reg.szám: HU/CA01/2329/05
12,5 ml munkaoldatot összekeverünk 0,25 ml Ferrozin ahol AM  AM - AMv ,
REANAL FINOMVEGYSZERGYÁR RÉSZVÉNYTÁRSASÁG
oldattal (3.). AV  AV2 - AV1 , 1147 Budapest, Telepes u. 53.
Cikkszám: 33121-2-99-80 ASt ASt2 -ASt1 . Telefon: 251-3999, 4677-500 Telefax: 252-1339