MINISTERIO DE SALUD COMITÉ EDITOR

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD

Ministro

Dr. Alvaro Vldal Rívadenevra

Presidente

Víceministro
Dra. Aída Palacios Ramirez

Econ. Carlos Rodríguez Cervantes

Secretario Técnico

Dr. Cesar Cabezas Sánchez

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD

Miembros

Jefe

Q F. Zulema Arévalo Chong

Dr Luis Fernando LlanosZavalaga

Dr. Jorge Barnaby Rodríguez

Subjefe
Dr. Zuño Burstein Alva

Dra. Aida Cecilia PalacIos Ramirez

Lic. Iván Gómez-Sanchéz Prieto

Dr Alfredo Guillén Oneeglío

Centro Nacional de Salud Pública

Dr. César Náquíra Velarde

Dra. Susana Zurita Macaluou

Lic. Margarita Rodríguez Gutarra

Directora General

Dr Víctor Suarez Moreno

Centro Nacional de Alimentación y Nutrición

Dra. ;::rine Samalvídes Cuba

Dr. Napoleón Chávez VillaruGva

Director General
Editor

Dr Leonid Leeca Gareía

Centro Nacional de Control de Calidad

Dra. Rosa Guevara Ormeno

Asistente editorial

Directora General

Lic. Janíel Cardenas Rojas

Centro Nacional de Productos Biológicos

QF. Ricardo Valera Sáncl,cz

Secretaria

Director General
Sr'a. Rocío Solís Agurto

Centro Nacional de Salud Ocupacional y

Protección del Ambiente de Salud

Dr Enrique P. Swayne Diaz

Director General

Centro Nacional de Salud Intercultural

Dr Carlos del Agu',la Campos

Director General

Dirección:

Instituto Nacional de Salud

Capac Yupanqui 1400. Uma 11, Peru.

Diseño y Dlagramación: Te!. (0511 )471-9920 Anexo 162

María Elena Córdova Burgos

BRUCELOSIS: DIAGNÓSTICO

SEROLÓGICO y VACUNAS

Elaborado:

M. V. Silvia Herrera B.
M. V. Marlene Cardenas C

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD

Centro Naciona I de Prod uctos Bio lógicos

2003

3
Catalogación hecha por el Centro de Información y Documentaclon Científica del INS

Herrera B, Silvia; Cardenas C .. Marlene

Diagnóstico y prevenCión de la brucelosis I Elaborado por Silvia Herrera B. y Marlene
Cárdenas C. Lima: Ministerio de Salud. Instituto Nacional de Salud, 2003.
57 p. 21 cm.

1. BRUCELOSIS i diagnóstico 2. BRUCELOSIS ¡ prevención y control

1. Herrera B., Silvia
11. Cárdenas C .. Marene
111. Instituto Nacional de SalucJ (Peru)
IV. Perú. Ministerio 08 Salud

ISBN 9972-857-36-0
Hecho el Depósito Legal N' 1501132003-2535

©Ministerio de Salud, 2003

Av. Salaverry cuadra 8 Jesú~ María. l IIna. Peru
Tell.. (51-1) 431-0410

©Instituto Nacional de Salud. 20C3

Cápac Yupanqui 1400. Jesús María. Lima. ~enj
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e-mail: l2QJillI!illi1tru.!¡rul~~I.Ql¿JlSl
Página Web: illlP:l!W!'I'~I~~.JJl,tIi.J&

Publicación aprobClda R.J. N 41 0-2CJ3--,J -OP Díl N S

Portada: Personal del ce:1tro manipular'ldo liofilizadora.

Se autoriza su reproducción total o parcial siempre y cUClndo se cite la fuente

 Conlanide

Prese nta c i ón ~~---~-~------------------------ ------ ----------------- 7

Capítu lo 1; Genera Iidades ------------------------------------- 9

Capítulo 1\; Diagnóstico de la enfermedad ---------------- 17

Capítu lo 111; Pruebas diagnósticas 23

Capítulo IV; Antígenos para el diagnóstico

de la brucelosis 27

Capítulo V: Vacunas para la prevención de la

brucelosis animal-------------~------------------- 45

Capítulo VI: Especificaciones de los productos 49

Cap ít u lo VII; B íosegur idad -----~-~-----------~ ---------- -------­

Bibliografía 57

5
La presente publicación tiene por finalidad aportar en la solución
de la problemática que representa la brucelosis como enfermedad
zoonótica de repercusión en la salud pública y pecuaria.

En ese contexto, el Instituto Nacional de Salud, a través del Centro

Nacional de Productos Biológicos, viene invirtiendo esfuerzos a fin
de impulsar el desarrollo de técnicas para el diagnóstico y
prevención de la b~ucelosls, buscardo hacer frente a esta
enfermedad.

Las investigaciones científicas que se van desarrollando constituyen

la herramienta fundamental en la generación de nuevos
conocimientos y enfoques para los programas sanitarios y por ende,
todo esfuerzo que conlleve a la realización de mejoras por el bien
de la salud pública y pecuaria, servirá para afrontar las necesidades
y problemas nacionales.

Es importante considerar que la orientación de las medidas de

control y prevención deben ser aunadas en trabajos coordinados
entre el sector salud y agropecuario a fin de optimizar las tareas
dirigidas al control de la enfermedad.

Esperamos que la presente publicación sea de utilidad para el

personal involucrado en los programas de prevención y control de
la brucelosis, a fin de afianzar los criteriOS de diagnóstico y
prevención de esta enfermedad.
6
S30VOI1VH3N39

Brucelosls: Diagnóstico Serológlcl) y Vacunas INS

ESPECIES DEL GÉNERO Brucella

10
¡,,'

~*INS Brucelosis: Diagnóstico Serológico y Vacunas

Conceptos generales

Definición
La brucelosis tambien llamada «fiebre malta» es una enfermedad zoonótica
infecciosa importante. Afecta a la mayoría de especies animales de sangre caliente,
el hombre es sólo un huésped accidental. Es de difusión mundial y, a pesar de
haber sido erradicada en países industrializados, continúa siendo un grave problema
de salud pública, así como para la producción animal y la economía de algunas
regiones.

Agente etiológico
I.a enfermedad es causada por diferentes del Brucella, el cual
tiene las siguientes caracteristicas:
• Cocobacllos Gram negativos, de O, a 0,7 iJm de ancho por 0,6 a 1,0 iJm de

• No forman cápsula, esporas, ni

• No toman coloración
• [\;0 son ácido resistentes, pero pueden resistir la decoloración por áCidos débiles
o álca:is,
• Son aerobios e inmóviles. Algunas cepas requwren CO :5% 10°/0) para su
crecimiento.
• Tienen metabolismo :espiratorio (oxidatlvo)
• Son organismos intracelulares
• A la observación m estár soles, en parr;jas, forr"ando cadenas cortas
o pequerlOs
• En cultivo en medios SÓlidos, colonia; Son vi', bies del segundo
cuarto día de creclrr,iento Sd tarnare varia entre (1,5 Y 1,0 mm, Son
tra'lSpareíltes, con bordes enteros y Il3a

Características bioquímicas del género Brucella

• Catalasa
• Hidrolizan ia úrea.
• OXldasa pOSitiva.
• Reduce'l nitratos a nitr,'OS (cor I ,n de B OVIS)
Brucelosis: Diagnóstico Vacunas

• Producen hidrógeno sulfurado.

• Indol
• No hidrolizan la gelatina ni Ilsan la sangre
• Reacción negativa al roJO de metilo.
• Temperatura óDtma de crec,mi'"'lto de 3TC.
• pH de crecimiento entre 6,0 a 7,0.

Especies y características del género Brucella

• Brucella melitensis. Crece en presencia de fucslna básica y tionina, produce
trazas de en mediO peptonado, posee un antígeno M predominante,
patógeno para caDrinos y OVinos otras animales y humanos. Presenta
3 blovares.

• Bruce/la abartus. Para su cultiv::J y desarrollo requiere de CO (5,0%-10,0%),

Crece en presencia de fucslna básica, pero inhibido por ía tionlna. F'osee
por lo general un antígeno A predominante. Presenta 7 bJOvares. Infec'a
preferentemente a vacunos. produce abortos infecciosos en vacas y también
infecta a otros animales y al hombre.

• Bruce/la suís, Crece en presencia de tionina. Posee un antígeno A ,nante.

Infecta preferentemente a los patógena para otras animales
y para el hombre (excepto, el biovar 4 que afecta a renos). Presenta 4 biovares.

• Bruce/la avis. ReqUiere adición de CO" no produce H2 S. Son oXldasa negativa.

No reduce nitratos a nitritos, su desarrolo es inhibido por metil violeta pero
crece en presenc:a de fucslna básica y tíonina. No presenta AyM
de las Brucellas I,sas. Presenta un antígeno de superficie rugosa (R), que
presenta reacciones cruzadas on otras Brucellas rugosas. Infecta
prinCipalmente a los ovinos y prOduce epididimitis en carneros. No es
para otras especies animales ni para humanos.

• Brucel/a canís. Su crecimiento es Inhibido por CO 2 y por fucsina, pero no por

tionina. No produce H,S. No poseen Ay M. Forman sedimento mucoso
en medios líquidas. Presenta ant:geno de superfiCie (R). Infecta prinCipalmente
a canes de ambos sexos y se ha aislado en humanos.

• Brucella neatamae. Es nxidasa negativa, produce H 2 S, No crece en fucSlna

báSica, pero en tionina, Ha Sido alsaéa en ratas del deSierto de
Utah (USA) y no es para otras animales ni para el hombre.

12
 Brucelosls Diagnóstico Serológico y Vacunas

Estructura antigénica
Como otras bacterias Gram negativas, la envoltura ceiuar de
Brucella está formada por una membrana Interna, lll'a membrana externa y un
plásmico intermedio que contiene aigunas enzimas y proteínas
re1ccionadas con el transporte y I~n gel ICO denominado peptidoglicano.
de la forma e integridad osmótica de bacteria.

La membrana externa contiene fosfolipidos dlstrlbuídos asimétricamente, proteínas

y un (LPSJ, consideraao el Éste último incluye
dos
• liso de lipopol!sacárído (S-LPS .
• rugoso de I (R-LPS)

Estos com liSOS o rugosos se presentar eje '~erdo a laasíflcación revisada

para las c:epas lisas o rugosas del género B'ijCeila

El factor de virulencia es el I~acálido (LPS) de la celular del

Ismo. Las c:epas lisas que contlenel' PS son más virulentas y
resístentes a la muerte intracelu'ar por leuc.ocitos poimorfon"cleares Además, el
Bruce!/a puede sobrevivi' y mulri Wl monGC y del
sstema retícL!oendotelal (SRE) Laocaiz;1Clón el SRF puede explicar las
il1all ifestacíones clíni as d como I:nfoade.lopatías,
la y las comp:lcacione,

m,e parrlc' ",n o'iJebasYd:narías:

corlple'Ce!ltc. Les LP:'; sltuacl(j'; el" la

y
las y la activ,dad
de las vacunas. Les NI.., ¡ pO!1 8 re1ac,(;!'ados con les S,LPS,
la prueba de lilmurOO,fus:ón 'adlal lra dlfe'elc los animales
lOS ínmu'lizacos.

Se producen reacciones cruzad.,:, e'e:: e

y [scherichia callO: 116
N(0:30) de Kauffrlan Wh;te,
cllolerae y YerSlI7la enterocol;tica O:
Slml' tud Isacár:dcs su'
::aractenzan por mos~ra! títu
com f~ Ieme 'lta r las.

13
Brucelosis: Diagnóstico Serológico y Vacunas

Patogenia y cuadro clínico de la enfermedad

La idad a la Irfecclór depende del estado Inmunitario y nutncional del
irdividuo, del tamaño y vía de penetración dellnóculo y de la de Bruceíla.

Las formas de ,nfección son la . el cor:tacto directo, la :nhalaclón y la

inoculación accidental. En el hombre la fuente más probable de infección es po'
ingestión. La leche y sus derivados, en la crema y el ql:eso fresco
principalmente de caprinos Infectados, representan en nuestro medio
la fuente más probable de infección. En los animales la vía de introducción
del lo representan las mucosas de la las vías respiratorias
y la

En el momento de la cantidades de

el BruceiJa al
EXiste una bacteriemla transitoria.

Los microorganismos del Brucelia al ser Intracelulares facultativos pueden

permanecer dentro las cé,uiasfagocitlcas y estar de los mecanismos
normales de defensa del Son capaces de sobreVIVir y mUltiplicarse
dentro de las células del SRE y asoc:ados.

La bacteriemia en el infectado se a través del cuadro

clíniCO en el hombre y en 105 anlmaies.

Cuadro clínico en el hombre

Brucelosis aguda: El oenodo de incuoaClón es variable entre 1 a semanas. Los
síntornas Incluyen deb'lidad, cefa:ea y do:or muscular o artlc:Jlar. Es caracter:stlca
la sudoración copiosa, especialrrente en la noche. o de
escalofríes. Es comúl' la y suele el
un aumento de tem PEratu;a Cuando la enfer:T!edad es , :3
gráfica de ~:n patrón ondulante, de el nombre de
"fiebre ondulante n.

Brucelosis crónica: enferrT edad Sf:onSlcera crónica cuando o recurre

por IJn per:odo '11ESeS o ·nás. Se dtribuyen síntomas de inflLenza recurrente,
acompafíaoos de deh,'ldad. cefalEa, J¡)lor rnuscJlar o artiCular y sudoracló'l

14
7
',,, Brucelosis: Diagnóstico Serológico y Vacunas

Complicaciones: Las frecuentes son tromboflebltis, epidid u

ilis y artritis espeCialmente en caderas, rodillas y hombros,

Cuadro clínico en los animales

Siguiendo la bacterlemia por el II1greso rrcr::!orgalismo Bruceffa,
tiene gran afindad por los órganos reproductores del maCho y la hembra,

Brucelosis aguda: El el i¡nico Principal es el aborlo

el último tercIo de iÓl, ello está asociado la prodUCCión de un
compuesto natural del el entrítol (ausente el ú:er::J de las
TamDlén se presenta de placentél, e Infert:lidad
los rnac~lOs, el signo Ills y la orquitis,

Las bacterias también se tales como 'as

maMarras yos [01 la CC:1S guiente
del MicroorganiSMO por la leche,

Brucelosis crónica: En oras se prese'lta mehlls, segu ida por I nfertl i idad:
mientras que en los machos, La fcrnac:ón de
Situados en las bolsas
cracI10s y 'l;'Tlbras,

Respuesta inmune
la bacteria e
anticuerO::J" e I:~A,

¡cuerpos del IsOt: i~;M apareee1 ,~n: i,ego de la Infección.

por el IS::!tIPO Ambú'i aUMe las
sernanas, facll nde la ¡r resslencla as
I feCCiones, ¡\¡o la recuperac: 'ón de un
:sm::! mediado por L'as, l_:,s idol activados
itoqulnas que activan aos mae Doder bactericida
rtraceluiar, El paciente Infectado !T'uest'c ,'.'1e :utánea de
retardada a variOS de BrU,.·C'!!a

la c!eleccón de (In;Tur;O~,:otl 1;1 se ,jebe considerar:

Brucelosis; Serológico 1 Vacunas INS

• Las IgM se forma'l precornente entre los y 7 días y alcanzan su entre los
13 y 21 días,
• Las IgG se forman simultáneamente entre los 14 y 21 días y alcanzan su
máxima concentración entre los 28 y 42 días,
• Tanto en el hombre como en los animales la infección natural estimula la
simultánea o ligeramente dlferioa de las IgM e IgG, pero mientras las
IgM declinan y tienden él desaparecer las IgG se estabilizan y perssten por
largo
• En casos crónicos de brucelos:s humana y anilT'al la clase principal de
Inmunoglobina presente y muchas veces la única, es la IgG
• En el hombre y anllT'ales la desaparición de la sigl1lfica,
eliminación de la infección,

Fenómeno de zona
Ocurre cuando un suero no aglutina en as diluciones lT'ás bajas, mientras en las
diluciones lT'ás altas ocurre L,na aglucinación ,ntensa,

Este fenómeno se explica por la presencia de incompletos ',univalentes"

que, aunque se unen al antígeno, no producen la segunda fase de la reacción, es
decir, la agregación, Estos anticuerpos pertenecen a la clase IgG.

El fenómeno de zona ha sidc demostrado en sueros de título alto y en indiViduos

con infecciones de curaCión.

16
LI
(J'1(J31"n:l3~N3
'11 3(J OallSON9'11(J
.1

Brucelosls: Diagnóstico Serologico y Vacunas \ INS

Diagnóstico de la enfermedad
El diagnóstico se basa eCl IJS siguientes aspectos:
• Diagnóstico clínico.
• Diagnóstico
• Diagnóstico cc""'r;,,.,,r·,,

Diagnóstico bacteriológico
Para el diagnóstico bacteriológico se debe conSiderar la toma de muestra del
enfermo.

Toma de muestra en el hombre

El aislamiento de Bruce/la e:¡ el hombre se logra a partir de sangre clrcula:¡te,
cuando el paciente se encuentra en estado de bacteriemia. Tambien se sugiere el
cultivo de médula ósea, nódulos linfáticos que hayan presentado inflamaCión,
líquido sinovial o biopsias de hígado, cuando existe sospecha de casos crónicos o
cuando no se ha aislar de la sangre.

Los cultivos sólo deben realizarse en laboratorios diseñados con un nivel de

bioseguridad tipo 11, por la característica Infecciosa del microorganismo al
pertenecer al grupo de 3.

La muestra debe ser de 5 mL. a 10 ML de sangre o de 0,5 :r.L a 1 mL de aspirado

de médula ósea y se usar medio bifáSICO RUlz Castañeda. El ,ento
consiste en Incubar la muestra a 3rc y bañar la fase sólida con la líquida dos
veces por día hasta observar el desarrollo de los microorganismos en cualquiera de
las dos fases. Es conveniente conservar las muestras hasta los 35 días en estufa
antes de desecharlos como

Toma de muestras en animales

Para el aislamiento ce Br,Jcelía a par:ir de U'l anlfTlal VIVO, las muestras más
favorables son las secrecicnes vag! Ilales y ia ieche tomada en el momento del
parto o poco cuanco el núr'18ro de bacterias excretadas es máxi:r.o (10")

18
Brucelosls: Vacunas

Diagnóstico serológico
SI bien el aislamiento representa a prLeba ce infección por eXisten
métodos d e : : o J L e ;:lroporClonan información acertada y
permiten Ufla acción oportul2, para e tratamiento y control de la enfermedad el
casos de brotes ICOS.

El d permite rea!lzar Lfla evalLaclón de la respuesta Inrlune

del enfermedad efl forma y sencilla. Las de su
aspectos:
• usadas en el diagnóstico de la bruceosls I'umana y anima.
• Detectan de IgM.lgG i , e IgA
• Frente una infección los a'"tcLerpos IgM son :os en aparecer, seguidos
de los
• Tener que an'icL,erpcs IgM agluclnan más Intensamente que os
al ser rloléCL. as fl'ás volum:losas y poseer mayor número de sitios de
reacc ión.
• Los son termoiábl:es, mientras que los son terrfloestables.
• Las inm Ilnas IgM pierden la actiVidad aglJtinante con
reductores como el 2-Mer,:aptoetanol. mientras que as no la

ser detectadas me,jlante el uso ce este reactivo.

• El título de un suero es la más alta dilUCión eue causa ~In determinado

de aglutinación.

~,,,~I".~,,.~ de la b'ucelosis se utilizan las ientes

• Prueba er
• Prueba efl placa
• Prueba en tubo.
• Prueba rosa de
• Prueba anillo en leche.

Además de estas, existen pruebas complementarias, como la prueba 2

que, ntamente con la prueba en tubo, un

certero de infección por Brucelia y permite realizar el seguimiento del

Las comolementarias permiten resolver diferentes problemas, tales como:

• correctamente el mayor número de casos, especialmente crónicos,
eue :nuchas veces permanecen ocultos o de diagnóstico incierto.
• Evitar o disminuir las reacciones IIlespecíflcas.
• Evidenciar la de anticuerpos incoTlpletos.
• Efectuar la lancla epldem eficaz y ce mayor cobertura.

20
 INS Brucelosls. Diagnóstico y Vacunas

Diagnóstico clínico en el hombre

Objetivo
Diagnosticar en forma rápida y segura. El diagnósÍICo se basa en el cuadro clínico
de la enfermedad y en la respuesta Inmune del paciente.

Manifestaciones clínicas
• Fiebre, pérdida de peso, escalofríos, sudoración, cefalea, anorexia, fatiga,
astenia, mialgias y artralgias, entre los síntomas más comunes.
• Los síntomas se presentan generalmente de 1 a 3 semanas posteriores a la
infección, en algunos casos aparece más tarde.
• Complicaciones: osteoarticulares (30% -40% de los casos), artritis, sacroileítis,
bursitis, litis, hepáticas (mayormente en infeccIOnes por Brucella
melitensís).
• Complicaciones neurológicas en <2% de los casos, siendo las meningitis
aguda o crónica los síndromes más comunes.

Respuesta inmunológica
La infección por Brucel/a conduce a una respuesta humoral con la producción de

anticuerpos o inmunoglobulinas.

Presencia y evolución de las fnmunoglobulinas:

• 1 - 2 d' semana posinfección: Presencia de IgM.

• 2,1, - 3" semana posinfeccíón' PresenCia de IgG.

Caracterización inmunológica del paciente

• Pacientes agudos: Presencia de IgG (deteCCión mediante prueba rosa de
Los anticuerpos IgM aglutinan intensamente y llegan a títulos de
1/400, med iante la prueba en placa o en tubo.
• Pacientes crónicos, Persistencia de IgG (detección por 2-mercaptoetanol,
fijación de complemento o rosa de bengala).

Transmisión del germen al hombre

• No se transmite de un individuo a otro.
• Transmisores más comunes: cabras, ovejas, vacas y cerdos
• Fuentes de infección: productos de aborto. placenta, fetos, sangre, onna, semen,
descargas vaginales, ¡eche, subproductos de !a leche, legumbres yagua
contaminada.
• Susceptlbifldad: el hombre y todos los animales doméstiCOS son susceptibles.
Brucelosis: Diagllóstlcc Scrológlco y VaCL13S , I
"

Diagnóstico en animales
Objetivo
Identificar al animdl infectado proJagador de la enfermedad. El se
basa e1 la respLesta y el abor~o I nfecc lOSO.

Manifestaciones clínicas
El por la placenta. mamaria.

El síntoma iDal ual ocurre en el último tercio de la

Durante el parto normal o aborto de un animal infectado. se liberar
gran cantidad de rr (lOl') c;ue contam inan los pastos, agua y el
medio ambiente.

Respuesta inmunOlógica
Presencia y evol ucón de las 1 li'las
• 1" 2· il seman2 la de
• 2 1 ) - 3'" se'l:ana nfe· c,ón: PresenCia de

Caracterización irnlLJ de la enferr¡:eaad er los animales:

• Agudos: Preser·~,a oe
IgM
la prueba en
Crónicos: detecclon ¡:lar on de
com de benga

Transmisión del germen en animales

• Se transm:e un Indlvlauo a J~ro (animal - ar,mal : anmal nombre)
• Material aborte.JJ irfec'ado por contiene 10' ulas
• Las secreclone'. illfectaoJas ailmentos contaminados representan
una in1 pertartE: I liente
• Los arimales se nfectar la.
y por cel,racto.
• Las mucosas ser fá.~ ¡lnentE' bies. constituyen la
de entrada. La~ vacas I luego de la , eliminan en
el calostro y leche ¡lasta la tercera semana. pe re cuande 'lay masti!rs
interstic,al la Ir!Jeracíén de Bruce/Ja es Por heces y orina tamlJién
se elll'1ína Brucelfa, pero en rl"2nOr nLJlllere.

22
tl
SV:J liSO" N9VI [J
SV93nHd
IIIOIOIJdB;)

Brucelosis: Diagnóslico Serológlco y Vacunas

Pruebas para el diagnóstico de la brucelosis

Prueba en placa
• Prueba in vítro, rápida y sencilla
• Detecta anticuerpos IgM e IgG c al igual que la prueba lenta en tubo.
• Proporciona el título de la reacción de aglutinación.
• Permite su aplicación en gran escala en las campañas de control y erradicación.

Prueba rosa de bengala (Card test ode la tarjeta)

• Prueba in vitro, y sencilla
• Representa la prueba "screemng" o tamlzaje.
• Es una prueba de alta sensibilidad y especificidad debido a su pH ácido.
• Procedimiento cualitativo rápido de macroscópica que se efectúa
con una sola dilución y Que detecta principalmente anticuerpos IgG 1
• El colorante rosa bengala nc n~nguna acclór. en la actividad sera lógica y
se puede reemplazar por::Jtros coarantes de acrldlna. Su función es faclitar la
observación de la reaccié'n.

Prueba en tubo
• Prueba in vitro realizada en tubos
• Es llamada también prueba lenta en tubos al necesitar 48 horas para la lectura
de las reacciones de aglutinación.
• Método para corroborar los resultados de otras pruebas serológlcas
• Detección de amicuerpo e IgG .

Prueba 2 - mercaptoetanol
• Prueba selectiva que detecta solamente la presencia de IgG).
• Se basa en que los anticuerpos Igr.¡ se degradan debido a la-acción de ciertos
compuestos que contienen el radical tiol, tales como el 2-mercaptoetanol. Las
moléculas de IgG ,en cambio, no sufren un efecto que altere su actividad para
las reacciones aglutinantes
• En el hombre esta se det)e en el d de rutina.

24
 Bruulc,s s Vacunas

• Infecta,ios les an: 'Orslste!' ,:;urante más y

• ,rnetcaptoetélnOI '~~fec' -; rron ~lurnanos

Prueba de anillo en leche

•
•
• IgM e
• r,la:::ló: Janttativa

• lera lll'.)n xrn," un anillo

25
 SIS013~nHB
Vl 3(] O~llSON9VI(]
'"
13 VHVd SON3911NV
'"
 Brucelosls: Diagnóstico Sefl,luglco y y1CI:r]d;,

ANTíGENOS DE Brucella
Prueba en placa
Descripción
El antígeno es una
abortus cultivadas I jet 'Vddas pO'
calor y teñiCas de

Composición
El antgeno cont¡erle l: B uct:?/la
abortus cepa 111
y colorantes verde

Indicaciones
ReactiVo para
lumara yanimal.
Ig\1 e IgG¿ en e
er lál1ll

Conservación
Durante el almace¡'a'T 11
8"[.

Precauciones y recomendaciones
• Agitar el frasco ante' de
• No exponer el JI

• No congelar
• Usar material IIITIIJ ;a : l ntamnaclón del

Presentación

Frasco de 5 I'IL Oo!

Procedimiento para la prueba en placa

Matenales
a. Aglutinoscoplo, ura COI)1 negro de 45 Cín de
ancho y 15 de ele una placa de vidrio marcada con
12. ue se sostiene cerca de la

28
 ,INS Bruce;osls: Serológico y Vacunas

de la caja de manera que pueda qutarse y ponerse

uz emootrada que permite ilurnina, ot)licuarn'~nte la rnelcla de suero

La estará de una ta;:la de vld,'o

b. rv1 o pipetas de graduadas ~ara vetE:' 0,08 rnL, 0,04 rnL,

mL, 0.01 mL y 0,005 mL.

c Gotero calibrado para 0.03 mL por gota o rnl=ropl

d. Mezc:ado,es de ala,'Tlbre grueso doblado o

e. ReloJ.

Procedimiento
a. Los sueros y el antígeno deber esta, a ternperatura ambiente.
b. Con la Bang inclinada 45" en é:ontacto con la placa, depositar 0,08
rnL, 0.04 mL. 0,02 rnL, 0,01 mL 'y l,005 rr,L de 'lluestra de suero en Uliil
courn de la placa.
c. suavernente el y.,,1 goteru en POSICión vertical, delar caer
una del antígeno sobre cuadrante:on suero.
d. Mezclar cUldadosarnellte el suero y ::'1tígeno con rnezcladores de alambre, en
forma rcular, ernpezando por la dlll,clon mas ata (0,005 rnLl.
e. Levantar la placa y agitar core suave movimiento rotatorio.
f. Colocar la placa en el y marcar el por 8 minutos,
g. de 4 minutos, rotar en forma circular.
r. Al cabo de 8 rnnuto:ó. real inmec!atan'ene:a tura

lectura
AglutinaCión completa: In .de· urlOS "os '1 Inayor

incorn pleta: celU'ar ~gILJtl:,:C1as AglutinaCión menor

Reacc!ón J\I:Sénc Ce "gl !tlnac'

Interpretación de los resultados

E': 'lurnanos se : ',!Lile, ;It va ,ir ,c dlIUé:IÓn 1/200. Un

"',tu CJC' I'S "ons' ) ~rb,:' lIIJo.

t.', de anll1la;eS vacu '11510""'; come Jositlvo una dilución de

Un título de 1/ ~OO 3dO r':O[lO En animales no
vacuraaos un título en la dll es ~:()f]' !derado pOSitiVO.

29
Brucelosis: Diagnóstico Serológlco y Vacunas

Procedirmento
a Diluir el al 17~. : mL del + 99 mL de soluelo!'
salina a! 0,85%.
b Diluir el fenal a! 0,5% en uClón salina a 0,85% Ejemplo: 0,5 mL de fenol
+ 99,5 mL de solUCión salina ai 0.85%
c Colocar en la gradilla una hileras de cinco tubos de 13 x 100 mm.
d Con una pipeta colocar 0,08 mL 0,04 mL, 0,C2 mL 0,01 mL y 0.005
mL de suero en fondo de :ada tUJa.
e Agregar 2 mL de so Jción saira fenal ada a cada tubo.
f Agitar la illa para las muestras.
g Incubar 3rC por 48 horas.

lectura
La lectura se realiza sobre un fondo negro con una luZ que atraviesa los tubos.
I_as determinaciones se basan en la claridad turbidez de la mezcla y en la
firmeza de los grumos al agitar suavemente los tubos.

Aglutinación Completa: El líqUido de la cnezca suero aparece claro

con una sedimentación de grumos al falda del :ubo, que al agitarlo suavemente
se suspenden en el do.

Aglutinación Incompleta: La mfzcla suero - se presenta parcialmente

clara, que al suavemente tJbo 3Da r ece una leve de grumos.

AglutinaCión Negativa: La mezc a suere - aparece turbia, a una suave

agitación no aparecen grumos.

Interpretación de los resu Itados

En sueros humanos se considera como tíLo una dilución 1/200. Un
título de l/lOO es conSiderado sólo COf'lC presuntivo.

En sueros de animales vacunados se corsidera como DOSltivo una dilución de

1/200. Un título de l/lOC es conSiderado como En animales no
vacunados un títuio en la dilución l/lOO es consicerado POSItiVO.

32
Brucelosis: Diagnóstico Serologlco y Vacunas

Procedimiento de la prueba anillo en leche

Materia/es
a. Tubos de 12 x 75 mm de v drlo claro y completamente limpios
b. Gradillas de alambre para sostener los tubos.
c. Pipeta de 2 mL y 10 mL o dispensador automático.
d. Gotero calibrado para 0,03 mL por gota o microplpeta de 30 fJL
e. Puntas para micropipetas ('lpS).
f. Estufa a 3rc.
Toma de muestras
INDIVIDUAL: Tomar 10 mL de leche oe la vaca problema.

REBAÑOS: Tomar 50 mL de cada p,)ol de 10 vacas, identificándolas.

Es conveniente refrigerar prevldmente 2S muestras de leche por una noche

antes de procesarlas.

Procedimiento
Técnica de la prueba para muestras !nc1/v/duales:
Llevar a temperatura ambiente las nuestras y el antígeno.
a.
b. Homogeneizar la muestra de leche problema.
c. Colocar 1 mL de la muestra de leche en un tubo.
d. Agregar una gota (0.03 mL del antí¡,;eno a cada tubo. mezclar bien. No debe
quedar antígeno erl las parc"des del 'ub0
e. Incubar a 37"C por :lIla hor;¡

Técnica de /a prueba ron d/!ur Iones.

Esta prueba se utiliza para el dlagnós:ico cuantitativo en la leche del animal
sospechoso para saber el títlllc Infecta·lte.

a. En una fila de 10 tullOS, cOIJCar 2 r I~ de leche problema en el prllller tubo y 1

mL de leche negativa en los slgulen:es 9 tubos, para realizar dilUCiones dobles
b. Transvasar 1 mL de leche del primer tubo al segundo y homogelleizar.
Posteriormente trasvasar lmL del segundo al tercero. homogeneizar y continuar
así hasta el último tubo dei que se descarta 1 mL.
c. Agregar una gota (0.03 mL del an'igeno a cada tubo y mezclar.
d. Incubar a 37" C po' 1 hora y leer.

36
,nNS
!\
"0.,:>",:::·::--'0:1', Brucelosis Diagnóstico Serológico y Vacunas

Técnica de la prueba para un rebaño:

Las muestras refrigeradas de cada pool de 10 vacas se llevan a temperatura ambiente
al igual que antígeno.

a. Homogeneizar la muestra de cada pool de leche.

b. Colocar 2 mL del pool en un tubo.
Agregar una gota (0,03 mU del antígeno a cada tubo y mezclar. No debe
quedar antígeno en las paredes del tubo.
d. Incubar a 3rC por una hora.

Lectura
Anillo de crema color blanco y columna de leche color púrpura.
+ Anillo de crema y columna de leche del mismo color púrpura o casi igual.
++ Anillo crema de color púrpura más pronunciado que la columna de leche.
+++ Anillo crema púrpura oscura. la columna de leche tiene aún un poco de
color.
++++ Anillo crema de color púrpura oscu:c, la CO'umna de leche blanca.

Dificultades en la interpretación de la prueba

• Escasez o exceso de crema,

• Leche pasteurizada.
• Leche de vacas con mastitis pueden dar falsos positivos.
• No toda vaca infectada elimina anticuerpos por la leche po' io que se recomienda
la prueba serológica anual al rebaño.

Interpretación
Para muestras individuales la formaCión del anillo fuertemente teñido por el antígeno
es Indicativo de infección. Si a esta muestra se realiza la prueba con diluciones,
un título en la dilución 1:16 o superior se correlaciona generalmente con infección
por Brucel/a. Se sugiere que cuando exista un título de infección en la prueba de
anillo, el hato pase por una prueba serológlca.
Brucelosls: Diagnóstico Serologlco v VacuIl2';

Procedimiento de la prueba anillo

en leche

Prueba para muestras individuales

YObem3 di
~r:11er V

,;eg:"11dc tubo

iv1uestra de
lectura
leche

Prueba con diluciones

1 mL de Ic'che
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1"1.
I J': l' "':..f

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Interpretación de los resultados

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38
Brucelosls: Diagnóstico Serológico y Vacunas IruS

• Prueba rosa de bengala, prueba ráD'da que detecta específicamente anticuerpos

de tipO IgG descartándcse reaCllones cruzadas.

Conservación
Durante el almacenamiento y transporte el kit debe mantenerse entre 2'C y 8C.

Procedimiento de la prueba
La prueba en placa y rosa de bengala deben realizarse en forma simultánea, tenlelldo
en cuenta el procedimiento de cada prueba descritas anteriormente.

Interpretación del kit

TíTULO + REACCiÓN INTERPRETACiÓN

PLACA ROSA BENGALA
¡
~-

~-~---
1/25 - ---- ~~~----
- -
Negativo
l/50
-1--- ---­
____ ---+ ____Negatlvo __
11100 Presuntlvo( ,)
1/25 ~_.

-- + -~
-------
Positivo
---------- ---- -

l/50 + Positivo
---lllob- -----

+
._- ----- --­ ----- ----~.--

POSitiVO
---­

En la interpretaCión le los rE"suitado; la reacCión positiva en la prueba rosa de

bengala es Indicativo de infecCión pcr Bruceila. La prueba en placa determina el
grado de Infección de", pacie:lle. Corsiderar qué títulos en las diluciones 1/25 y
l/50 se deben a reacciones cruzadas

Precauciones y recomendaciones
• Agitar los antígenos antes de usa,
• No exponer al sol
• No congelar.

Presentación
• Antígeno en placa. 4 frascos de :5 'llL para 160 pruebas.
• Antígeno rosa de :lellgala 1 frasco de 5 mL para 160 pruebas.

40
 Brucelosis: Diagnóstico Serológlco y Vacunas

Kit de diagnóstico de brucelosis prueba complementaria

El kit contiene :
• Antígeno en tubo.
• Reactivo 2-mercaptoetanol.
• Suero control positivo.
• Suero control negativo.

Descripción
• Antígeno en tubo, suspensión de células de Brucella abortus cultivadas en
fermentación e inactivadas por calor. Se presenta como una suspensión
blanquecina.
• Reactivo 2-mercaptoetanol, reactivo a base de compuesto que contienen el
radical tlol cuya acción es degradar los anticuerpos IgM detectando únicamente
anticuerpos de tipo IgG 2 ,

Composición
Antígeno en tubo, contiene 4,5% de células Brucella abortus cepa 1119-3 y

solución salina fenolada al 0,5%.

Reactivo 2-ME, compuesto que contiene el radical tiol.

Indicaciones

El kit contiene dos pruebas, que al realizarse en forma simultánea, detectan

diferentes inmunoglobulinas, teniendo un mejor conocimiento de la respuesta

inmune del paciente.

• Prueba en tubo, antígeno para el diagnóstico in vitro de la brucelosis humana

y animal. Detecta anticuerpos IgM e IgG 2 mediante la técnica de aglutinación
seriada en tubo.

41
Brucelosis: y Vacunas INS

• Prueba 2-mercaptoetanol, prueba se'ectiva que detecta la de

anticuerpos Se basa en la degradación de los anticuerpos IgM debido a
la acción de compuestos que contienen el radical tiol, como el
Es útil para detectar infectados crónicos en los que la prueba de
estándar presentar títulos baJos, dado que el suero contendrá
exclusivamente anticuerpos IgG,

Conservación
Durante el almacenamiento y transporte el kit debe mantenerse entre 2°C y 8"C,

Precauciones y recomendaciones
• Agitar el antes de usar.
• Reconstituir los sueros con 5 mL de agua destilada estéril
• No exponer al sol.
• No

Presentación del kit

• Antigeno en tubo, frasco de 1 mL para 25 pruebas en tubo y 2 ME),
• Reactivo 2 -ME: frasco de 1 mL pa'a 25 pruebas (prueba en tubo y 2 ME).
• Suero control positiVO liofilizado: frasco de 2,5 mL.
• Suero control negativo liofilizado: frasco de 2,5 mL,

Procedimientos de la prueba complementaria

Materiales
a. Tubos de 13 x 100 mm de Vidrio claro y completamente lim
b, Gradilla de alambre para sostener los tubos
c. o Bang, graduadas para verter 0,08 mL, 0,04 mL, 0,02
mL, 1mL y 0,005 mL,
d. Pipetas de 10 mL o dispensador automático.
e. Estufa a 3JOC,
1. Material de vidrio balones) para la dilución del

Procedimiento
a. Diluir el al 2%. Ejemplo: 2 mL del + 98 mL de solución
salina al 0,85%,
b. Diluir el 2-mercaptoetanoi 0,1 molar (Mol= 78,13). 0,78 mL
;,nrn"TArl,n, + 99,22 rrL de solUCión salina al 0,85%,

e, Diluir el fenol al 1% en solución salina al 0,85%. EJerrplo: 1 mL de fenol + 99

mL de solución salina al 0,85%.

'if1;i»:

42
 Brucelosls: Diagnostico Serológico y Vacunas

d. Colocar por cada muestra dos hileras de cinco tubos de 13 x 100 (marcadas
como T y M). Una hilera se destina para la prueba en tubo y la otra para
prueba 2-mercaptoetanol.
e. Con una pipeta Bang colocar 0,08 mL, 0,04 mL. 0,021lL 0,01 mL y 0,005
mLde suero en el fondo de cada tubo.
f. Agregar 1 mL de solución saina fenal ada a la hilera T.
g. Agregar 1 mL de solución de 2-mercaptoetanol él la hilera M.
h. Esperar 30 minutos.
i. Agregar 1 mL de la solución del a todos los tubos (hilera T y M)
j. Agitar la gradilla para homogeneizar las muestras.
k. Incubar a 3rC por 48 horas.

le ctura del kít

La lectura se realiza sobre un fondo negro con una uz que atravleza los tubos.
Las determinaciones se basa:l en la claridad c tLrbdez de la mezcla y en la
p'esencla de grumos al ag.tar suavemente lOS tubos

Aglutinación completa: elI de la meZé la suerc - antigeno aparece claro, con

una sedimentaCión de grumos al fondo del tubo qJe al agitarlo suavemente se
su penden en el líOUldo.

Aglutinación negativa: el líquido de la mez:~la aparece turbia y a

una suave no aparecen grumos.

Interpretación del kit

TUBO 2 - ME INTERPRETACiÓN
(Títulos) (Títulos)
1/25
1/50
1/100
1/100 1/25
\') Se rcp8tir la i'1l,,:ba y PI

En la Interpretación de los resul:ados. la reacción positiva en la prueba

2 -m ercaptoeta nol es i nd Icatlvo de ¡nfecc Ión por Brucel la. La prueba en tu bo
deterrmna el grado de Infección del paCiente. Considerar, en la prlJeba en tubo,
qué títulos en !as diluciones 1/25 y l/50 se deben a reacciones cruzadas.
 Brucelosis: Diagnóstico Serológlco y Vacunas INS

PROCEDIMIENTO DE LA PRUEBA EN TUBO

2-MERCAPTOETANOL

Ag 2ME SS fenolaoa

2mL miME 1 mL lenel

+ +
98mLSS 99.22 r'lL SS 99 mL SS

(a) (b) (e)

(ti (h)
Pipeta . J'

Colocar ColoGar Coloca'

o.mi 1'1L. 1 mL. Ag

0,04 1 rnL SS 1 mL2~ME
0.02 mi Suero
mL
mL
T M
T 1\:1

2~ME[ 2~'1lercaptoetanol
ss Solllcíón salllla

Nola: Se debe prepa'ar "nmero la' slllliclenes (Igelra) b y el y alsloc la IJatena de Unos (d. el ,ara:a realiLwól tle la IHlleila
Los sueros Seran depositados de a la I:gllra id. el segllido I 111 de soIUC:O'1 salina lenolada ¡SS» para la fila tubos
T" de ¡ mi de 2~ME para :a ha 1Ir: tlibos '11. 'mlmen!e agrega 1 mi del antígeno al 2%. ilgva al. a tooa la calería de lurJos de las
filas Ty M. Se re/. iza la ieel",a al [31m de 48 'mas en estufa a 37°r.

44
 ·¿~';M¡;.\)lR!¡¡_""_""_'_IIIW;
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lVWINV SIS0133nH8
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Vl VHVd SVNn3VA
 Brucelosis: Diagnóstico "",cloc"cn laclInas

VACUNA Brucella melitensis CEPA REV -1

Descripción
La vacuna es una sus[lensíon je saciados de Brucel/a
cepa Rev en feWlentaCI\!f1 uresenta en forma I:ofll
una Ila blanquecI1a aCOfT In frasco di I dyente estén í

Composición
• Cabras Jóvenes: La vacuna ~ont 1 " x 1C' gérrlenes I rn L.
• Cabras adultas: La vaouna contler 1 x gérr:lenes / rlL.
• de liofilización.

Indicaciones
Para inmunización de:aprlnos ~:abras se vaCU'lan entre los y 6 meses.
tanto que cabras adultas s.: vaCl;n·ill los Illeses de edad, No se vacunan
has.

Dosis
F'ara cabras y ilj l! Itas: 1 v subcutánea.

Precauciones y recomendaciones
• Mantener durante el almacenamiento y transporte e'ltre 2"C a 8'C.
• Terer uldado en ,a reconstitución de la vacuna, extraer el diluyerte e
irtroduclrlo al liófllo y agitar sl:avemente hasta lograr una susperslón

Presentación
Vacuna liofilizada y diluyente x lOIllL , 10 oasIs.

46
 INS Brucelllsis: Serológlco y Vacunas

VACUNA Bruce//a abortus CEPA 19

W
! ..

~
'~O!l~.
~
~~
~

DiluY'i'CC'·· de 13
F'i1s: o ): l

Descripción
La vacuna es una de no dlso~lados de Bruce//a abortus cepa
9 producida en fermentación, Se presenta en forina liofi'izada como una oastilla
blanquecina acompañada de un frasco e luyelte '"stéril.

Composición
La vacuna contelle 10 ,1 inL en un medio soporte
Ilofilzación, Cada cosis m contieni" 60 mi millones de

Indicaciones
Para la InmunizaCión de terneras a E: rrieses tle edad, No se machos
y no requ ¡eren revacu nac Ión,

Dosis
S mL via sVlcutál'ea,

Precauciones y recomendaciones
• Mantener durante el almacenarnlento y trar'sp,xte entre 2"C a 8°C,
• Tener cudado en la reconst:!uclón de la vacuna, extraer el diluyente e
introdUCirlo al !Iófilo y agitar suavemente hasta lograr una
homogérea,

Presentación
Vacuna liofilizada y di por 4 dOSIS,

47
611
SOl~nOOHd
SOl 30 S3NOI~V:JI~I:J3dS3
Brucelosis: Diagnóstico Sera lógico y Vacunas

Rangos de normalización de antígenos recomendados por la

Organización Mundial de Salud

Antígeno pH Volumen celular

PLACA 6,4 -7,0 10-12%
TUBO 6,4 7,0 4,5%
ROSA DE BENGALA 3,65 8,0%
ANILLO EN LECHE 4,0 4,3 4,0%

Rangos de normalización de vacunas

recomendados por la Organización Mundial de Salud

Vacunas Células/mL Dosis I gérmenes

Bruceila abortus cepa 19 10-12 x 10" I 60,000 millones
,
i .. _­
!
Brucella mefitensis cepa re\, 1 1·2 x lO" 1.000 millones
cabras jóvenes
-------~_. .~-

Brucelia melítensis cepa Re ¡ 1 1x1 100 mil

cabras adultas (dosis reduc,ja
¡g
OVOIHn93S0lB

 Bioseguridad
Definición
ConjLJnto de normas rendlent,'s el 1klimlzar lOS aCCidentes de

Bioseguridad en el laboratorio
Objetivo
Pro:eger al laborator!sta de Il!lerlte género
pertenece al dé ;~e irefecclón en el hombre pero nc
transm ite de LJn

Principales vías ¡I

• :YOpl penetra él
tas mucosas del 'racto IPtesTnal estornacal gastrico 10
ácido)
• Contacto, gual'tes. penetrar¡
piel y por cJntlval
• Inllalación, i'Tportancia Los aerosoles se :Jroducell en ,él

de actiVidades cJf'l la::lOratorio.

52
 INS BruceloSlS y Vacunas

Bioseguridad en el campo
• EVitar el consumo de queso fresco en áreas endém ,caso
• Usar vestimenta protectora: vetennarios v técniCOS.
Precaución en ia manipu'aclón de cadáveres de alimales.
• Ubres y (Jtero mayor riesgo. No deben ser abiertos 11 derramar
su c01tenldo.
Eliminar rr;atenal co:1tamlnado come abortos y desinfectar las
contall i nadas.

Diseño del laboratorio

Diseño adecuado del laboratorio
• ¡,islamiento geográfico.
Control de acceso.
• física: áreas para reactivos Inflamab,es
Evita' la recircl,lacló1 de aire medlante3xtracto r es.
• Pres,ó:l de aire

Equipos y técnicas de seguridad eficientes

Cabinas de seguridad po! I para el Buce/la l.f~vitar turbulenCias de
airel.
• Filtros hepa, eficie,lcla 99% oara Jlas de J,13 n' crones de d:ámetro.
pro:ectoras: 'nandlles de llanga larga, 'o y punos estrechos
• Mascarillas descartables: reducen 2 logaritmos nÚl1ero de
de aire inhalado: T<po N95,
• pe:as: evitar; contaminaCión a mucosas
• Guantes: eVitan la pe:letrac1ór de m por "lendas o abrasiones
de la
• Asasl ne deber exceder íos de 10';;ltuc pé'a 1" zar la ViOrac Ión,

Buenas técnicas microbiológicas

Remlsiór de muestras: reclp:e'lte :rr:.mpll! ester:lzaole, desca'tao:e y
cubierto.
• de ruti:la,
• Uso de deSinfectantes

53
Bruceiosis: Diagnóstico Serológico y Vacunas

Grupo de riesgo en relación con el tiempo de laboratorio

Grupo de riesgo lugar Microorganismos

Baci/tus subtilis
Escaso individual EnS"llanzas básicas
Escherichia co/i
y comunitario

11 Servicios básIcos de hospital

Salmonella
R individual y ce nivel ::lfImano. Laboratorio
la hepatitis
comun,tar1o limitado y salud

111
Ind IVld ual elevado Laooratorlo de
y comunitario limltaco izado

IV Laboratoros que traoajan con

Fiebre aftosa,
Elevado IndiVidual peligrosos
Ebola, Dengue, VIH
comunitario

54
 INS Brucelosis Diagnóstico Serológico y Vacunas

Desinfección de ambientes y superficies

• Luz ultravioleta: c01trol semestral. Se r,,,':omie1Ca 10 iJwicm laboratorio y
20 en áreas contaminadas
• Hipoclorltodesodio:E1 :5g/L ppml relaclonl:18paramaterial
autopsias.

A canpo abierto desinfectar con 'lIpoclorito al 20%

o con cal aoa2ada. El
material abortado puede contener hasta _0 12 céluas de
• Formol: desinfectante: (5%) Para deslnfe:clón de ambientes usar:
25 mL+15 g. Permanga1ato de
• Alcohol: 70%
• Yodo: 0,075 (75
• Fenal: Al 5%, balO nivel de inactvaclór por sustancias organlcas.

Descontaminación de material
• Autoclave: 121 "C a 15 lbs. de 1 15 m,n

Remisión y conservación de muestras

Definiciones:
S Jstanclas InfeCCiosas: M Viable,: Dacterlas, virus, etc.
Muestras para gen rurlano nlmal cono excretas,

sec:recioroes. etc

Productos Vacunas. cornOnelli:s celu ares. reactivos de

Para la rem,¡slón de sustanc,as :Clfecc:osas ¡ m 'as de ,llag1óstlco, tener en

cuenta:

• ~<eclplentes. 1m con tapó

• Transporte: Uso de re:::lplentes secundarQs
de nuestras Local de recep: ón.

Api~rtura de m,Lestras: E~ cámaras de se,;urldac

Brucelosls: Diagnóstico Serológlco y Vacunas \, INS

Cadena de frío
Representa el modo adecuado de COllservar un producto biológico sin que pierda
sus características y propiedades antlgénicas.

Recomendaciones:
• Mantener durante el almacenamiento y transporte entre 2 u C y 8"C.
• Reconstituir la vacuna liofilizada en forma correcta. Extraer el diluyente e
introducir al Ilófilo. Agitar suavemente hasta lograr su completa reconstitución.
• Se recomienda usar la vacuna el '1lismo día que se reconstituye.

Toma y remisión de muestras

• La prevalencia de la enfermedad se realiza por vigilancia serológica.
• En campañas de vacunación se tomará una muestra al azar en animales sin
antecedentes de vacunación.
• En hatos pequeFios muestrear por :0 menos 10 animales y en hatos mayores un
10% de animales sin vaCIJnar.
• Las muestras deben estar debidamente Identificadas y antes de comenzar
cualquier prueba verificar que el material se encuentre en condiciones
apropiadas para trabajar.

56
 INS Brucelosis Diagnóstico Serológico y Vacunas

Bibliografía
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Bruceloss. Ginebra, OMS; 986. Sext0 IrfoFlne

57
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