CONDICIONES

AMBIENTALES QUE
INFLUYEN EN LA
BIOSÍNTESIS DE TOXINAS
EN CIANOBACTERIAS
 CIANOTOXINAS
FUNDAMENTOS DE ● CILINDROSPERMOPSINA
MICROBIOLOGÍA ● NODULARINA
● MICROCISTINA
INTEGRANTES: ● SAXITOXINA
CYNTHIA GRANJA ● ANATOXINAS
CAMILA TOTOY ● JAMAICAMIDES
NICOL YANEZ
CIANOBACTERIAS
● Organismos microscópicos
Bacterias Gram-negativas fotosintéticas, que comparten algunas
propiedades con las algas

● Conocidas como algas verde-azules.

Pigmentos clorofila (verde) y fotocianina (azul)

● Producen metabolitos secundarios bioactivos

Toxinas: alcaloides, policétidos.
CIANOBACTERIAS
● Herramientas fisiológicas
Sequía, inundaciones, contaminación agrícola

● Genes responsables biosíntesis

Sustancias orgánicas sencillas complejas
Determina factores ambientales regulan toxinas
 EUTROFICACIÓN
Condiciones óptimas:
➢ Temperatura Crecimiento
➢ Luz de Algas y
➢ macronutrientes cianobacterias

Peligros
Blooms o
potenciales Aumento de
floraciones de
para la salud cianotoxinas
cianobacterias

Exceso crecimiento de Blooms: la diversidad baja por la dominancia de

una especie
 Nivel moderado:
➔ 50 µg/L de clorofila-a o 100 000 células/L posiblemente 20
µg/l de microcistina en los 4 m superiores de agua
Acumulación de 100 veces a un nivel alto de nata:
➔ 5000 µg/L clorofila-a o 10 000 000 células/L posiblemente
2000 µg/l de
microcistina en los 4 m superiores de agua
Acumulación de 1000 veces si el viento limpia las natas de100m a
10 m:
➔ 50 000 µg/L de clorofila-ao 100 000 000 células/L
posiblemente 20 000 µg/l de microcistina concentrada en
una bahía

Esquema el potencial de formación de nata que cambia el riesgo

cianotóxico de moderado a alto
Cilindrospermopsina
● Cianotoxina, alcaloide derivado de policétido de sulfato
producida por cianobacterias de agua dulce

● Producida por cianobacterias filamentosas

Con efectos hepatotóxicos, nefrotóxicos y citotóxicos generales

● Potencial cancerígeno
 Reguladores ambientales de la producción de Cilindrospermopsina
2001: NITRÓGENO

● altas concentraciones de cilindrospermopsina en Cylindrospermopsis raciborskii en ausencia de una fuente fija

de nitrógeno
● bajas concentraciones en cultivos suministrados con amonio (NH4) como fuente de nitrógeno.

LIMITACIÓN DE NITRÓGENO:

● variaba respecto a las diferentes intensidades de luz. Siendo máxima a intensidades de luz más bajas.

LIMITACIÓN DE SULFATO Y FOSFATO:

● disminución en la producción de cilindrospermopsina cuando se normaliza el número y masa de células secas

en cultivos de Aphanizomenon ovalisporum
 Respuestas globales en la cianobacteria que produce
cilindrospermopsina
En Aph ovalisporum
● la falta de fosfato aumentó la
producción de
cilindrospermopsina a nivel de
Transcripción y toxinas.
● la exposición al fitoplancton o
gastado del medio indujo la Hipótesis:
secreción de fosfatasa alcalina
★ los niveles elevados de fosfatasa alcalina
en estos organismos liberados por el fitoplancton liberan fosfato
para su absorción por Aph ovalisporum.
Nodularina
Fig.1: N. spumigena. Recuperado
de:https://www.io-warnemuende.de/algal-
blooms-at-heiligendamm-2014.html
➔ Péptido cíclico bacteriano, aislado del género
Nodularia.
➔ Siete isoformas de nodularina identificadas
➔ Nodularina, hepatotoxina potente, además de
ser un promotor de tumor hepático.
➔ Producida por N.spumigena.
Nodularina ● Correlación entre la tasa de producción
y la tasa de división celular.

Regulación ambiental en la ● Las floraciones de nodularia spumigena

producción de nodularina predominan en altas concentraciones

de fósforo, bajos niveles de Nitrógeno y
salinidades moderadas.
Nodularina
Condiciones óptimas:
● intensidad de luz
● tiempo de residencia
● fósforo y nitrógeno
● temperatura
● acidez
Biosíntesis y transcripción de su sintetasa
● Biosíntesis a través de una ruta enzimática mixta (NRPS-PKS)
De manera similar a la Microcistina

● Proteína represora putativa

Flanquea el grupo de genes

● Involucrados en la regulación transcripcional de su ADN

en respuesta al estrés por calor.
 Biosíntesis y transcripción de su sintetasa
● En N.spumigena cepa AV1
la regulación transcripcional del grupo ADN durante la
limitación de fosfato y amoniaco ha sido reportada.
Estudios e ● Jonasson y sus colegas sugieren:
investigaciones que la N.spumigena cultivada en quimiostato mantiene un
nivel constante de nodularina intracelular
● Eliminación de exceso
Degradación o transporte activo, como se propuso para la
microcistina.
S.N. Characters Bacteria Cyanobacteria

1 Size Comparatively smaller. Comparatively larger.

2 Distribution Found every possible places in Only found in presence of

earth. sunlight and moisture.

3 Flagella May bear flagella. Flagella always absent.

4 Cell wall 1-2 layered. 4 layered.

5 Composition of cell Glycolipids and peptidoglycan. Cellulose and pectin.

wall
S.N. Characters Bacteria Cyanobacteria

6 Nutrition May be autotrophic or Usually autotrophic.

heterotrophic.

7 Photosynthetic Photosynthetic pigment is Photosynthetic pigments is

pigments bacteriochlorophyll. chlorophyll a.

8 Locomotory organ Flagella act as locomotory Lack flagella and other

organ. locomotory organ.

9 Sexual reproduction Takes place by conjugation, Totally absent.

transformation and transduction.
Microcistina
● Alrededor de 90 isoformas
Metilación, hidroxilación, secuencia de péptidos y toxicidad
Hepatotóxicas
Poseen una estructura cíclica común

● Transportadas al hígado, proteínas transporte aniones

Inhiben proteínas fosfatasas 1 y 2A
Microcistina
● Dosis de tan solo 50-70 mg P.C
Muerte rápida en animales

● Producción de hepatotoxinas
P. Físicos y Amb Nitrógeno, fósforo, pH, luz etc

● Cultivos Discontinuos
Alta producción Concent. altas nitrógeno/fósforo
Concent. bajas hierro
Microcistina
● Condiciones limitada nitrógeno
Microcystis aeruginosa, células crecimiento rápido vs lento:
pequeñas, menor baja, niv. intracelulares toxinas más altos.

● Relación lineal microcistina vs tasa lineal de crecimiento

● Microcistina aeruginosa
Cepa más virulenta cianobacteria.
Microcistina
● Sintetizada de forma no ribosómica
Enzimas péptido sintetasas

● Cepas tóxicas vs no tóxicas

Genes que codifican síntesis de péptidos potencialmente tóxicos.

● Mcy: Genes de microcistina sintetasa (mcy)

Ausentes en equivalentes no tóxicos.
Detección Cianobacterias potencialmente tóxicas
Microcistina
● Ensayo de protección de RNasa (Ribonuclease)
Identifica moléculas ARN indv. en muestra de ARN heterogéneo

Cultivo células: Altas intens. luz y luz roja elevados niv. trans. mcy
Luz Azul bajos niv. trans. mcy
Microcistina
● Oligoelementos: Transcripción microcistina y producción toxina
Privación Hierro M. aeruginosa Incremento transcripción
de microcistinas/ niveles de toxinas

Exceso de nitrato Estimula crecimiento celular.

No influye direct. transc. mcy/produc. toxinas
Microcistina
● Flotabilidad Regulada

- Controlada por producción de carbohidratos a partir de la fotosíntesis.

- No funciona si concentración de CO2 es muy baja.
- Adaptarse a las condiciones de luz más adecuadas.
- Flotabilidad no puede ser controlada por la noche (lo harán por su reducido
contenido en carbohidratos)
Microcistina
● Floraciones(Multiplicación y acumulación de organismos del fitoplancton (algas y
cianobacterias)
Ocurren en zonas templadas del mundo.
Persisten en aguas que contienen niveles adecuados de nutrientes
inorgánico (N y P)
Temperatura agua entre 15 y 30 ºC
Niveles pH entre 6 y 9.
Microcistina (Experimento)
Corto plazo (Ratones)

- Microcystin-LR (40, 200 y 1000 µg/kg P.C)

- 13 semanas
- 200 µg/kg: cambios en el hígado
- Dosis alta: inflamaciones crónicas, deterioro hepatocitos
Microcistina (Experimento)
Corto plazo (Cerdos)

- Microcystis aeruginosa (280, 800 y 1310 µg/kg P.C)

- 44 días (agua)
- 280 µg/kg : Nada
- 800 y 1310 µg/kg: lesiones en el hígado.
Microcistina (Experimento)
Largo Plazo (Ratones)

- Microcystis aeruginosa (750-12000 µg/kg P.C)

- 1 año (diaria)
- Concentraciones más altas (Resultados obtenidos)
- Incremento mortalidad, lesiones crónicas hígado
evidencia de formaciones tumorales, no se detectó
cáncer.
Microcistina (Experimento)
Éste y otros estudios han establecido que el consumo oral de agua con extractos de
Microcystis actúa como promotor en la formación de tumores.
 Microcistina y Nodularina
Diferencias: Semejanzas:

● Ausencia de dos aminoácidos ● Son hepatotoxinas muy potentes, y dañan el

centrales hígado
● Sustitución del residuo de ● Problemas con la potabilización del agua
microcistina, N-metil dehidroalanina, ● Síntomas: Náusea, vómitos, diarrea, mal
por N-metil dehidrobutirina gusto en la boca, hepatitis aguda, sangre en
● La influencia de nitrógeno y fósforo orina u orina oscura, letargo, dolor de cabeza,
en la transcripción de nodularina y fiebre, disminución del apetito, dolor
microcistina difieren. abdominal
Fig 1. Metabolitos tóxicos que se han identificado hasta la fecha, sintetizados por diversos géneros de cianobacterias, junto con
sus órganos - blanco primarios en seres humanos. Modificado de Chorus and Bartram, 1999. Recuperado de:
http://www.fmed.uba.ar/depto/toxico1/cianobac.pdf
Saxitoxina
➔ La Saxitoxina pertenece a un grupo de
neutro-toxinas potentes.
➔ Presenta 57 tipos análogo producidos tanto
por dinoflagelados eucariotas como por
cianobacterias.
Saxitoxina ● Temperatura
Aumenta en los límites inferiores de la
temperatura de crecimiento óptimo.
Efectos ambientales en la
● Presencia de otras sustancias.
producción de Saxitoxina
Se acumuló esta toxina de forma lineal en
respuesta al aumento de NaCl extracelular.
● Intensidad de la Luz
La toxina parece disminuir en la oscuridad.
 ● La biosíntesis de Saxitoxina es iniciada
Saxitoxina por una enzima PKS multifuncional
inusual.
● El grupo de genes biosintéticos de
Regulación molecular de la Saxitoxina se ha descrito en cinco
biosíntesis de Saxitoxina géneros de cianobacterias.
● La ubicación de los genes es diferente
en cada cepa y su presencia o ausencia
también determina el perfil de toxina
específico expresado.
Anatoxinas
➔ Tres toxinas comunes se han
aislado de cianobacterias;
anatoxina-a, homoanatoxina-a y
anatoxina-a(s)
➔ Interrumpen la actividad de
acetilcolinesterasa, causa la
sobreexcitación de las células
musculares y los síntomas de
cólicos, convulsiones y parálisis
respiratoria
 ● La luz, la temperatura, fuente de
Anatoxinas nitrógeno y la duración del cultivo
influyen en el crecimiento y toxicidad.
● La producción de toxinas no es
Efectos ambientales en la necesariamente una función directa del
producción de Anatoxinas crecimiento celular.
● La expresión preferencial de anatoxina-a
u homoanatoxina-a también parece estar
influenciada por la temperatura y la
composición de los medios.
Anatoxinas ● La biosíntesis de la anatoxina-a y
homoanatoxina-a ocurre después del
enganche NRPS de prolina seguida por
Transcripción de los genes de la extensión y ciclación de la cadena
Anatoxinas PKS.
● Los genes biosintéticos se organizaron
putativamente en cuatro o cinco
operones.
Jamaicamides
➔ Son neurotoxinas lipopeptídicas.
➔ Los Jamaicamides A, B y C también
exhiben actividad bloqueante de los
canales de sodio.
Jamaicamides
Biosíntesis de la transcripción
de la vía de Jamaicamides
● Abarcando 58Kb, el grupo de genes jam
está compuesto de 17 ORF’s, PKS
codificados, NRPS y sintetasas híbridas.
● Tres transposasas son codificadas en
las regiones laterales del grupo de
genes.
● También se ha demostrado la
regulación de los genes jam por la luz,
la exposición a los rayos UV y la
disminución de nitrato en los medios.
Fig 2.Cyanobacteria in water: a guide to their public health consequences, monitoring and management, traducido y adaptado
por Susana García OMS 1999. Recuperado de:
http://www.paho.org/hq/index.php?option=com_content&view=article&id=7398%3A2012-cianobacteria-cianotoxinas-salud&cati
d=4716%3Ageneral&Itemid=39623&lang=es
Aplicaciones e investigaciones en el Ecuador
AISLAMIENTO Y EVALUACIÓN DE LA VIABILIDAD DE CIANOBACTERIAS DE LA
RIZÓSFERA DE PLANTAS LEGUMINOSAS CULTIVADAS EN LA PARROQUIA POALÓ,
LATACUNGA – COTOPAXI.

● Realización: Raquel Estefanía Martínez Pérez Quito, 2014 (tesista de la PUCE)

● el uso de biofertilizantes representan una alternativa para la sustitución de fertilizantes químicos pues estos
proporcionan mayor rentabilidad económica, aumentan la productividad de los cultivos, reducen los efectos
de la fertilización química sobre el medio ambiente y la salud.
● La conformación de consorcios cianobacterias- microalgas en biotecnología agrícola permite ampliar el
espectro de microorganismos utilizados en biofertilización de suelos.
● Se establece un protocolo para la
producción y mantenimiento de
consorcios con cianobacterias fijadoras de
nitrógeno, medio de cultivo y condiciones
de escalado de los cultivos discontinuos.
● Anabaena, Nostoc, Oscillatoria, Spirulina,
Nodularia parecen ser cosmopolitas y
frecuentes en diversos tipos de suelos;
con lo cual se presenta la factibilidad de
aplicar las metodologías para su
aislamiento, cultivo y producción de
biomasa para fines agrícolas.
● Se logró establecer un protocolo para la
producción y mantenimiento de consorcios
con cianobacterias fijadoras de nitrógeno de
acuerdo al tipo de suelo y rizósfera de su
procedencia, medio de cultivo y condiciones
de escalado de los cultivos discontinuos.
● El cultivo de consorcios microbianos a gran
escala permite incrementar la eficiencia de la
producción de biomasa microalgal para
biorremediación, biofertilizantes o producción
de metabolitos de interés
GRACIAS POR SU ATENCIÓN