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1
EDITORIAL UNIVERSITARIA
ISBN 978-950-579-211-5
Impreso en Argentina
©Editorial Universitaria
2
Martos, María Alicia
Ingeniero Químico. Fac. de Cs. Ex. Qcas. y Nat.. UNaM. 1986.
Magister en Tecnología de los Alimentos. Fac. de Cs. Ex. Qcas. y Nat. UNaM. 2003.
Alumna del Doctorado Regional en Ciencia y Tecnología de los Alimentos. Carrera de
Postgrado en Red de Universidades Nacionales, Facultad de Agroindustrias, Universidad
Nacional del Nordeste (tesis en ejecución).
Profesor Adjunto, dedicación exclusiva. Cátedras: Biotecnología de los Alimentos (carrera
Ingeniería en Alimentos), Ingeniería Bioquímica y Biotecnología (carrera Ingeniería Química),
Fac. .de Cs. Ex..Qcas. y Nat. UNaM.
Colaboración en el dictado de temas teóricos correspondientes al curso Química de los
Alimentos. Maestría en Tecnología de los Alimentos. Fac. de Cs. Ex. Qcas. y Nat. UNaM.
Miembro del Consejo Departamental del Departamento de Ciencia y Tecnología de los
Alimentos.
Investigadora Categoría III.
Directora Proyectos relacionados a la producción y aplicación de enzimas pécticas por
microorganismos autóctonos.
Autora de diversos trabajos presentados a Congresos y otros publicados en revistas nacionales o
extranjeras.
Directora y co-directora de diversas tesis de posgrado (maestría) y de grado, finalizadas y en
ejecución.
3
ÍNDICE
3. Bibliografía.................................................................................................................40
4
1. ESTEQUIOMETRIA DEL CRECIMIENTO MICROBIANO Y FORMACION
DE PRODUCTOS
5
Teniendo en cuenta únicamente aquellos compuestos del medio de cultivo que se
encuentran en mayor cantidad y se consumen en forma significativa, el crecimiento
aerobio de las células puede describirse en base al denominado modelo de “caja negra”.
En este modelo se considera que la célula es un compartimiento abierto que recibe un
flujo de FCE, uno de fuente de nitrógeno y uno de O2 y del cual salen flujos de biomasa,
CO2, H2O, algún producto (si lo hubiera) y energía (como calor). En este modelo no se
hace ninguna suposición sobre el metabolismo celular. En la Figura 1.1 se observa un
esquema del modelo utilizado.
Biomasa
FC
CO2
FN Producto
O2
H2O
Figura 1.1: Esquema del crecimiento celular según el modelo de caja negra.
En base a este modelo, el crecimiento aerobio de las células puede describirse mediante
la siguiente ecuación:
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1.2. Formula mínima de un microorganismo promedio: concepto de c-mol
Para formular la ecuación de la reacción de crecimiento y síntesis del producto debemos
conocer la “formula molecular” para describir la biomasa. Se puede considerar que el 90
al 95 % de la biomasa está constituida por cuatro elementos mayoritarios (C, H, O, N) y
se ha encontrado que esa composición elemental se mantiene relativamente constante
para un importante números de microorganismos cultivados bajo condiciones
diferentes. De este modo se puede definir un “microorganismo promedio” como aquel
cuya composición es (p/p): 46,5 % C, 6,94 % H , 31,0 % O y 10,85 % N y el contenido
restante (aproximadamente un 5%) está representado por sales.
Es importante recalcar que si bien la composición elemental promedio de la biomasa se
mantiene prácticamente constante, la concentración intracelular de proteínas,
polisacáridos, lípidos, RNA, DNA y demás constituyentes celulares varían
sensiblemente entre diferentes microorganismos e incluso en un mismo
microorganismo, dependiendo del estadio y condiciones de cultivo.
Teniendo en cuenta esta composición media se puede escribir la “formula molecular” de
la siguiente manera: C3,87H6,94O1,93N0,775. Esta fórmula se puede expresar en base a un
átomo de carbono y obtener así la denominada “fórmula mínima” de un
microorganismo: CH1,79O0,5N0,2, la cuál representa el 95 % p/p de la biomasa (no
incluye el 5 % de sales) y a partir de ella se define un “c-mol de biomasa” como la
cantidad de biomasa que contiene 1 átomo gramo de C. El peso molecular de un c-mol
de biomasa será:
En la Tabla 1.1 se presentan las formulas mínimas de varias especies en base a los
cuatro elementos mayoritarios.
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Tabla 1.1: Composición elemental de algunos microorganismos
Organismo Fórmula elemental
Escherichia coli C H1,77 O0,49 N0,24
Klebsiella aerogenes C H1,75 O0,43 N0,22
Klebsiella aerogenes C H1,73 O0,43 N0,24
Pseudomonas C H1,73 O0,43 N0,24
Aerobacter aerogenes C H1,83 O0,55 N0,25
Paracoccus denitrificans C H1,81 O0,51 N0,20
Paracoccus denitrificans C H1,51 O0,46 N0,19
Saccharomyces cerevisiae C H1,64 O0,52 N0,16
Saccharomyces cerevisiae C H1,81 O0,51 N0,17
Candida utilis C H1,83 O0,54 N0,10
Candida utilis C H1,83 O0,46 N0,19
Media C H1,79 O0,5 N0,2
Ej: Glucosa:
Formula molecular: C6H12O6 PM= 180 g/mol
Formula de 1 c-mol: CH2O PM= 30 g/c-mol
(ec. 1.1)
Siendo:
CHa1Ob1Nc1 : c-mol de cualquier sustancia, empleada como sustrato
CH1,79O0,5N0,2 : c-mol de biomasa.
CHa2Ob2Nc2: c-mol de cualquier producto
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a: representa los moles de la fuente de nitrógeno consumida por cada c-mol de FCE
consumida.
b: moles totales de la O2 consumido por cada c-mol de FCE consumida.
yx/s: representa los c-moles de biomasa formada por cada c-mol de FCE consumida.
yp/s :moles de producto formado por cada c-mol de FCE consumida.
yCO2/s: moles totales de dióxido de carbono formados por cada c-mol de de FCE
consumida.
q: Kcal/c-mol de FCE
tf
moles O 2 total consumidos ro 2 dt (ec.1.2)
t0
tf
moles CO 2 total consumidos rco 2 dt (ec.1.3)
t0
Midiendo la composición de los gases a la salida del reactor se pueden calcular las
velocidades de consumo de O2 y producción de CO2 por medio de las siguientes
ecuaciones que surgen de un balance en fase gaseosa.
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Los subíndices 1 y 2 representan porcentajes a la entrada y salida del reactor
respectivamente.
Siendo:
F: caudal de alimentación de aire (l/min)
0.79: porcentaje de nitrógeno en el aire,
V: volumen del cultivo (l)
T0 y T: 273 °K y la temperatura de trabajo respectivamente
22,4: volumen ocupado por un mol de gas en condiciones normales de temperatura y
presión.
ro2: velocidad de consumo de O2 (moles/l. h).
rCo2: velocidad de producción de CO2 (moles/l. h).
La relación entre los moles de CO2 producidos y los moles de oxígeno consumidos se
denomina “coeficiente respiratorio” (CR) y proporciona información sobre el estado
metabólico de los microorganismos y se lo emplea para controlar el proceso.
y co 2 / s
CR (moles de CO2 producidos/ moles de oxígeno consumidos) =
b
Rendimiento celular:
X
Yx / s (g biomasa formada/g sustrato consumido)
S
x
yx / s (c-mol de biomasa formada/c-mol de sustrato consumido)
s
Rendimiento de producto:
P
Yp / s (g producto formado/g sustrato consumido)
S
10
p
yp/ s (c-mol biomasa formada/c-mol sustrato consumido)
s
S S C S M S P
Los rendimientos en biomasa y producto son parámetros de gran importancia pues dan
una medida de la eficacia de conversión del sustrato en biomasa y productos. Un
proceso destinado a la producción de biomasa tendrá como objetivo maximizar Yx/s y
minimizar Yp/s. Si lo que interesa es el producto se tendrá el caso inverso.
Para calcular el valor de Yx/s debemos conocer cuál es el “sustrato limitante”. El
“sustrato limitante puede ser la FCE, la fuente de nitrógeno. Si el sustrato limitante es la
la fuente de nitrógeno, s será la concentración de la fuente de nitrógeno (ej. amonio).
11
γ = 4.n
Siendo:
n = moles de oxígeno necesarios para oxidar 1 c-mol de un compuesto completamente.
Es decir que grado de reducción se refiere al número de electrones que tiene disponible
un compuesto para transferir al oxígeno durante su combustión completa a CO2, H2O y
compuestos que contengan nitrógeno.
Para determinar el grado de reducción de un compuesto debemos plantear la ecuación
de oxidación y conocer cuanto vale n.
Para simplificar los cálculos se pueden hacer balances elementales y obtener una
ecuación general que nos permita calcular el grado de reducción de cualquier
compuesto.
Haciendo balances de hidrogeno, carbono, oxígeno, nitrógeno en la ecuación de
oxidación se obtiene una ecuación general para un compuesto dado (CHaObNc) que
relacione γ en función de a, b y c:
Balance de H: a = 2 w + 3 k
Balance de C: 1 = g
Balance de O: b + 2 n = 2 g + w
Balance de N: c = k
NH 4 n 4 a 2 b 3 c
3
(ec.1.6)
Esta ecuación es muy útil ya que permite calcular sin necesidad de plantear la
ecuación de oxidación.
La ec. 1.6, describe la ecuación de grado de reducción para cualquier compuesto que se
oxida a CO2, H2O y NH3. Esta ecuación de tiene implícito que ni el CO2, H2O y NH3
tienen electrones disponibles es decir = 0 (no tienen electrones disponibles). Por lo
tanto se debe poner NH3 para tener en cuenta que este fue el nivel de referencia elegido
para el nitrógeno.
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Ejemplo: grado de reducción para biomasa CH1,8 O0,5 N 0,2
a = 1,8
b = 0,5
c = 0,2
Cabe aclarar que si el compuesto contiene nitrógeno, es necesario especificar cuál será
el estado de oxidación final de este, es decir elegir el nivel de referencia para el
nitrógeno. Podemos poner que el compuesto se oxida a N2 o nitrato, etc. pero de esta
manera se deberá utilizar otra ecuación para el grado de reducción.
Se ha encontrado que el contenido energético de los compuestos orgánicos está
relacionado con el grado de reducción. Si se realiza el cociente entre el calor de
combustión de distintos compuestos orgánicos (q) y la cantidad de electrones
transferidos al oxígeno (), se obtiene un valor (q0) que se mantiene aproximadamente
constante.
Es decir que el calor de reacción por mol de electrones transferidos al oxígeno (q0= q/)
es relativamente constante para la oxidación de una amplia variedad de moléculas
orgánicas (Tabla 1.2).
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1.6. Balances de materia y energía
Los balances de materia y energía proporcionan una herramienta muy útil en los
procesos biológicos. Cuestiones como: cuál es la concentración de dióxido de carbono
en la corriente de salida de un fermentador, cuál es la fracción de sustrato consumido,
qué cantidad de reactante se necesita para producir determinada cantidad de producto,
cuánto oxígeno debe alimentarse para que se produzca la fermentación, cuánto calor se
produce durante el proceso, etc., pueden contestarse mediante los balances de materia y
energía.
1 y x / s y p / s y CO2 / s (ec.1.7)
a y x / s 0,2 y p / s c 2 (ec.1.8)
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Aplicando los respectivos balances a esta reacción se obtendría:
s NH 3 4 b x y x / s p y p / x
Siendo:
s = grado de reducción del sustrato
x = grado de reducción de la biomasa
p = grado de reducción del producto
4b
1
p
yx
y (ec. 1.9)
s
s
x/s
s
p/s
ε + η + ξ = 1
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Este balance obedece al principio de conservación de la energía: los electrones
disponibles del sustrato deben ir obligadamente a los distintos productos.
Mediante las ecuaciones de balance de carbono y grado de reducción se puede
comprobar la consistencia de los datos experimentales y verificar si las determinaciones
han sido correctas. En un cultivo microbiano, tanto el balance de carbono como el de
grado de reducción tienen que dar 1 (o 1 + a, para el balance de carbono con urea como
fuente de nitrógeno). Si la ecuación del balance de carbono da 1 pero la del balance de
grado de reducción no, como se tiene en común yx/s, yp/s pero no el oxígeno significa
que hay un problema en la medida de del oxígeno. Además si hay un producto y no se
lo está midiendo se tiene que manifestar en los dos balances, ambos darán valores < 1.
Medidas realizadas en el laboratorio se deben encontrar dentro de los intervalos:
0,93 1,07
1
mt
Se obtiene: yx / s (ec.1.10)
Del balance de grado de reducción se puede considerar que todos los electrones de la
FCE van a para a la biomasa, es decir:
4b
1
p
y x
y
s s
x/s
s
p/s
16
s
mt
yx / s (ec.1.11)
x
Surgen así dos rendimientos máximos teóricos, uno que surge del balance de carbono y
el otro que surge del balance de grado de reducción. De los dos rendimientos se usará
aquel que sea menor, según el valor del grado de reducción de la FCE (s):
Esta es una idealización, para que la reacción ocurra en forma espontánea según los
principios de la termodinámica, se necesita disipar energía entonces habrá una parte de
la FCE que se disipará como calor. En la práctica se tiene entonces un rendimiento que
es el 60 % del máximo teórico.
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El calor de reacción (HR) es la energía desprendida o absorbida durante la reacción y
es igual a la diferencia de entalpía entre productos y reactivos.
Como se mencionó anteriormente, el crecimiento de cultivos aerobios puede
representarse por la siguiente ecuación:
Siendo:
HR = calor producido por cada c-mol de FCE consumida
H s y x / s H x y p / s H p H R
Despejando HR
H R H s y x / s H x y p / s H p (ec.1.12)
H x q x x q 0
H p q p p q 0
H R s q 0 y x / s x q 0 y p / s p q 0 (ec. 1.13)
18
4b
1
p
y x
y
s s
x/s
s
p/s
4 b q0 s q0 y x / s x q0 y p / s p q0 (ec.1.14)
4 b q0 H R (ec.1.15)
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Ws
Hp
Hs Fermentador
Hx
Q M. hv
Se obtiene:
H s Ws M hv H p H x Q E (ec.1.16)
Siendo
Hp = entalpía de producto.
Hr = entalpía de biomasa
Hs = entalpía de sustrato
Q = representa el cambio total o acumulación de energía en el sistema.
Ws = representa el trabajo mecánico.
M. hv = calor latente de evaporación (M= masa del líquido evaporado y hv el
calor latente de evaporación).
H s Ws H p H x Q 0 (ec.1.17)
Siendo H R Ws H p H x
Por lo tanto la cantidad de calor que debe eliminarse de un fermentador (Q) para
mantener las condiciones óptimas de temperatura.será:
Q H R WS (ec.1.18)
20
1.10. Problemas de aplicación
Datos obtenidos:
t= 0 - X0 = 0,53 g/l - S0 = 20,2 g/l
t = 9,5 h - X = 6,07 g/l - S = 10 g/l
Mo2 = 3,93 g/l (oxígeno consumido)
Mco2 = 5,45 g/l (anhídrido carbónico producido)
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7. La levadura Saccharomyces cerevisiae crece anaeróbicamente en un medio con
glucosa y con SO4(NH4)2 con un rendimiento de 0,12 (yx/s).
Calcular:
a) El rendimiento en etanol (yp/s)
b) Los C-moles de etanol producidos por cada c-mol de biomasa formada (yp/x).
c) El porcentaje de etanol producido respecto al máximo teórico.
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a) Calcule el porcentaje de Yp/s obtenido respecto al máximo teórico.
b) Determine la cantidad total de producto obtenido (g/l)
c) Si el método colorimétrico empleado para la valoración del producto en cuestión
tiene límites de detección que van desde 100 ppm (mg/l) a 600 ppm de producto, ¿Qué
dilución del medio de cultivo se deberá realizar para poder medir la concentración de
este producto?.
13. Se sabe que para Micrococcus denitrificans la eficiencia energética del crecimiento:
es de 0,56 para un determinado medio y condiciones de cultivo, y que por cada 1,515
c-moles de sustrato consume 1 mol de oxígeno.
Calcule:
a) El grado de reducción del sustrato limitante si no existe formación de producto.
b) El % del yx/s respecto del máximo teórico.
c) En base al valor del grado de reducción que obtuvo diga cuál es el compuesto que se
utilizó como FCE.
d) Plantee la ecuación de crecimiento y calcule los demás coeficientes estequiométricos.
e) El proceso es aeróbico. ¿Cuánto calor se libera por cada c-mol de biomasa formada?.
Considere que se utilizó amonio como fuente de nitrógeno
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2. CONCEPTOS BÁSICOS DE CINÉTICA MICROBIANA
En el tema anterior se han planteado las relaciones estequiométricas que existen en los
cultivos microbianos y cómo a través de ellas es posible obtener información del destino
que tiene la FCE. Es necesario además, conocer la cinética del crecimiento de las
células o microorganismos (biomasa) y la velocidad de formación de los productos
deseados, lo que permitirá realizar estudios posteriores de diseño de biorreactores.
Hay una cierta cantidad de sustrato, FN y oxígeno que se consumen para producir
biomasa y productos. Se deberá conocer la velocidad con la que se consume sustrato (rs)
para producir biomasa y producto, la velocidad con la que se forma el microorganismo
(rx), la velocidad con la que se consume oxígeno (ro2), etc.
La forma de expresar las distintas velocidades son:
dX
De crecimiento microbiano: rx (gx/l.h)
dt
dS
De consumo de sustrato: rS (gs/l.h)
dt
dP
De formación de producto: rp (gp/l.h)
dt
dO2
De consumo de O2: rO2 (molesO2/l.h)
dt
dCO2
De producción de CO2: rCO2 (molesCO2/l.h)
dt
ri
Velocidades específicas: qi =
X
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Corresponden a las velocidades anteriores pero referidas a la unidad de biomasa:
rx
Velocidad específica de crecimiento:
X
rs
Velocidad específica de consumo de sustrato: qs
X
rp
Velocidad específica de formación de producto: qs
X
rO 2
Velocidad específica de consumo de oxígeno: q o2
X
dX
rx X (ec. 2.1)
dt
Siendo:
μ: velocidad específica de crecimiento microbiano (tiempo -1).
X: biomasa seca (gcélulas secas/l) .
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La velocidad específica de crecimiento microbiano (µ), para un dado microorganismo,
depende de la composición y concentración del medio de cultivo, pH, temperatura,
presencia de inhibidores.
El modelo cinético mas difundido que relaciona la velocidad específica de crecimiento
microbiano (μ) y la concentración de un nutriente que condiciona el crecimiento,
denominado “sustrato limitante (S), es la ecuación de Monod. El sustrato limitante del
crecimiento (S) es aquel componente del medio que primero se agota, puede ser la FCE,
la FN, el oxígeno u otro oxidante como los nitratos.
La ecuación de Monod, sigue una expresión similar a la de Michaelis-Menten porque
supone que un único sistema enzimático controla el consumo de sustrato y que dicho
sistema determina la velocidad de crecimiento de biomasa. La ecuación de Monod
ajusta una amplia gama de resultados experimentales y es la expresión más empleada
para el diseño de fermentadores.
Monod propuso (1942) la siguiente expresión que relaciona μ con S, basándose en la
cinética enzimática.
m S
(ec. 2.2)
Ks S
Siendo:
S: concentración de sustrato limitante (g/l).
Ks: constante de saturación (g/l), representa la concentración de sustrato cuando μ =
μm/2.
: velocidad específica de crecimiento (tiempo-1).
μm.: velocidad específica máxima de crecimiento (tiempo-1).
26
Lactosa E. coli 20
Glucosa Aspergillus 5,0
glucosa Sacchoromyces 25,0
La representación gráfica de la velocidad específica de crecimiento (μ) y la
concentración del sustrato limitante (S) (ec. de Monod), es una hipérbola, similar a la
que describe la cinética enzimática de Michaelis-Menten como se representa en la
Figura 2.1.
µm
m Zona de sustrato
saturante
2
S = Ks s
cultivos restrictos.
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Es decir que para que la velocidad de crecimiento esté controlada por la concentración
de algún nutriente del medio (S), la concentración de ese nutriente debe estar en el
orden de Ks.
La ecuación de Monod (ec. 2.2) se puede linearizar tomando los recíprocos para obtener
la expresión:
1 Ks 1 1
(ec. 2.3)
m S m
Graficando 1/ versus 1/S, produce una linea recta con pendiente Ks/m, abscisa al
origen -1/Ks y ordenada al origen µm (Fig. 2.2).
1
Ks
m
1 1
ks s
Puesto que los valores de Ks en un cultivo celular son generalmente muy bajos, la
determinación precisa de este parámetro a partir de datos de un reactor discontinuo es
bastante difícil. Una mejor estimación de Ks puede realizarse utilizando un cultivo
continuo de células, tal como se verá en temas posteriores.
28
Levaduras 0,45 h-1
Hongos 0,25 h-1
29
Figura 2.3: Representación gráfica de m versus T. 1. psiocrófilos, 2. mesófilos, 3.
termófilos.
La Temperatura también afecta la velocidad de formación de producto pero la Top y la
Ea suelen ser distintas. También influye sobre el YX/S porque para T >Top, la energía
de mantenimiento es mayor por lo tanto baja YX/S.
El pH óptimo suele ser distinto para el crecimiento que para la formación de producto.
Durante las fermentaciones es a menudo necesario controlar el pH, particularmente
cuando se forman productos ácidos como el ácido láctico, acético y cítrico o cuando los
mismos sustratos de crecimiento son ácidos o bases, de modo que al consumirse, el pH
del medio cambiará de manera importante. Un ejemplo es el uso de NH4OH como FN.
30
El crecimiento dará como resultado el consumo de NH3 dejando un protón en el medio,
el cual causa que el pH disminuya. Por tal motivo es frecuente incluir en el medio
sustancias que actúen como tampón (buffer) a fin de evitar que el pH se aleje del óptimo
31
Si la formación del producto está asociada al metabolismo energético, el producto se
formará siempre que exista crecimiento y la velocidad del mismo en un cultivo celular
puede expresarse en función de la concentración de biomasa:
rp q p X (ec. 2.4)
Donde:
rp : velocidad volumétrica de formación de producto (gp/l.h)
qp: velocidad específica de formación de producto (h-1)
x: concentración de biomasa (g/l).
La ec. 2.4 establece que el producto se formará únicamente como consecuencia del ATP
necesario para el crecimiento celular. Sin embargo también se requiere ATP para
funciones de mantenimiento celular (intercambio de componentes celulares,
mantenimiento de gradientes de concentración y pH interno y movilidad celular). Por lo
tanto la velocidad de formación de este tipo de productos debe considerar además del
término que representa la formación como consecuencia del crecimiento, un término
que represente la formación como consecuencia del mantenimiento celular:
rp q P X m p X (ec. 2.5)
Siendo
mp = la velocidad específica de formación de producto debida al mantenimiento celular
(tiempo-1).
De la ecuación de rendimiento de formación de producto:
P rx
Yx / p
S rP
Despejando rp y reemplazando en la ec. 2.4 se obtiene:
rx
qP X (ec. 2.6)
YX / P
rx
rp mp x (ec. 2.7)
Yx/ p
32
El primer término del segundo miembro expresa la formación de producto debida al
crecimiento y el segundo la formación de producto debida a los requerimientos
energéticos para mantenimiento.
2.4.2. Productos intermedios del metabolismo energético
Son metabolitos que están parcialmente asociados al crecimiento microbiano. Son
aquellos productos en los que su síntesis puede comenzar después de un período de
crecimiento debido a la acumulación de algunos metabolitos primarios y posteriormente
relacionarse con el crecimiento.
Pertenecen a este grupo los aminoácidos, nucloeótidos., vitaminas, ácido cítrico, etc.
Se forman durante la fase de desaceleración y estacionaria.
La cinética de formación de este tipo de productos es mas compleja que la de los
metabolitos primarios.
33
Figura 2.5: Relación de la síntesis de un producto con el crecimiento: a) asociado al
crecimiento, b) parcialmente asociado al crecimiento, c) no asociado al crecimiento.
S T S C S M S P (ec. 2.8)
34
Considerando un instante muy pequeño de tiempo y diividiendo la ec. 2.8 por dt se
obtiene:
ds ds ds ds
dt T dt C dt M dt P
X
Yx / s
S
Derivando respecto al tiempo:
dx / dt rx
Y x / s
ds / dt rs
Despejando rs:
35
rX
rS rSC (ec. 2.11)
Yx / s
rx
rs ms X (ec. 2.12)
Yx/ s
Siendo
ms. X = (rs)M : velocidad de consumo de sustrato para mantenimiento.
ms : coeficiente de mantenimiento (gs/gx.h).
rx : velocidad de formación de biomasa.
Y´x/s : rendimiento verdadero.
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Microorganismo Condiciones de cultivo ms (gs/ gx.h)
Aerobacter cloacae Aerobio limitado por 0,094
glucosa
S. cerevisiae Anaerobio limitado por 0,036
glucosa
S. cerecisiae Anaerobio limitado por 0,36
glucosa + NaCl 1M
Kluyveromyces lactis pH = 4,6 (óptimo) 0,020
pH = 2 0,060
Dividiendo la ecuación de Pirt por rx se obtiene:
1 1 m
s (ec. 2.13)
Yx / s Yx/ s
Donde:
Yx/s: representa el rendimiento experimental
X biomasa formada
Yx / s
S T sustrato total consumido
X biomasa formada
Yx/ s
S C sustrato consumido para crecim.
y x / s y x / s
37
0,05 0,645
0,1 0,78
0,3 0,92
Si se grafica 1/Yx/s en función de 1/ se tiene una linea recta de pendiente ms y ordenada
al origen 1/ Y´x/s.
Los rendimientos verdaderos se pueden calcular mediante los balances de electrones o
por el conocimiento de la estequiometría de la reacción y corresponden a los
rendimientos máximos teóricos vistos anteriormente.
rx
rs ms x
Yx/ s
rx rp
rs ms x (ec. 2.14)
Yx/ s Y p / s
38
Siendo Y´p/s el rendimiento verdadero de producto a partir de sustrato y rp la velocidad
volumétrica de formación de producto.
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BIBLIOGRAFÍA
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