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UNIVERSIDAD VERACRUZANA

Facultad de Ciencias Químicas


Campus Coatzacoalcos

MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL

Prácticas de Microbiología Industrial.

Equipo: 4

NOMBRE DEL ALUMNO.

Sanchez Jiménez Thalía Patricia

Grupo: I.B-801

Docente: Oswaldo Guzmán López


FERMENTACION ALCOHOLICA.

MARCO TEÓRICO
OBJETIVO DE LA PRÁCTICA
A partir de sustratos como la glucosa con
la ayuda de levaduras se llevara a cabo la En la elaboración de cerveza, la
fermentación alcohólica para obtener un fermentación alcohólica es la conversión
rendimiento de azúcar en gas de dióxido de carbono
(CO2) y alcohol etílico. Este proceso se
INTRODUCCIÓN lleva a cabo mediante células de levadura
La respiración anaerobia consiste en que utilizando una variedad de enzimas. De
la célula obtiene energía de una hecho, se trata de una compleja serie de
sustancia sin utilizar oxígeno; al hacerlo, conversiones que genera la conversión de
divide esa sustancia en otras; a la azúcar en CO2 y alcohol. La levadura es
respiración anaerobia también se le un miembro de la familia de los hongos
llama fermentación. Probablemente la que me gusta considerar como plantas,
respiración anaerobia más conocida sea pero estrictamente no son vegetales ni
la de las lavaduras de la cerveza animales. Para ser específico, la levadura
(Saccharomyces cerevisiae), que son es un microorganismo eucariota. No todas
hongos unicelulares. las levaduras son adecuadas para la
Para elaborar la cerveza se utilizan elaboración de cerveza. En la elaboración
semillas de cebada, las cuales de cerveza utilizamos la forma de hongos
contienen glucosa, sustancia de la cual de azúcar de la levadura. Estas células de
las levaduras obtienen la energía. Las levadura obtienen energía de la
semillas de cebada son combinan con conversión del azúcar en dióxido de
agua y la flor de una planta llamada carbono y alcohol. El subproducto del
lúpulo, que le da sabor a esta bebida. Los dióxido de carbono burbujea a través del
ingredientes se mezclan y luego se filtran. líquido y se disipa en el aire. En espacios
El líquido resultante, que contiene la confinados, el dióxido de carbono se
glucosa, se deposita en barriles de disuelve en el líquido y lo hace
madera, junto con las levaduras y se deja gaseoso. La acumulación de presión
reposar varios meses o años; durante causada por la producción de CO2 en un
éste tiempo, las levaduras utilizan la espacio confinado puede ser
glucosa para obtener energía y la inmensa. Sin duda lo suficiente como para
transforman en un tipo de alcohol causar la explosión de una botella de
llamado etanol. Supongamos que una vidrio sellada. El alcohol es el otro
levadura toma una molécula de glucosa subproducto de la fermentación.

El alcohol permanece en el líquido, que es


ideal para preparar una bebida alcohólica,
pero no para la
células de levadura, ya que la levadura EQUIPO
muere cuando el alcohol excede su nivel ° Balanza analítica
de tolerancia. ° Parrilla

PROCEDIMIENTO
El proceso general de fermentación es
1. Primero en una botella de plástico
convertir el azúcar de la glucosa
se colocara 500 ml de jugo de
(C 6 H 12 O 6 ) en alcohol (CH 3 CH 2 OH)
naranja, 120 gr de azúcar, 2 gr de
y gas dióxido de carbono (CO 2 ). Las
levadura.
reacciones dentro de la célula de levadura
Se sellara perfectamente con un
tapón de algodón.

que hacen que esto suceda son muy


complejas, pero el proceso general es el
siguiente:

C 6 H 12 O 6 ====> 2 (CH 3 CH 2 OH)


+ 2 (CO 2 ) + Energía (que se almacena
en ATP)
Azúcar ====> Alcohol + Gas de dióxido
de carbono + Energía
(Glucosa) (Alcohol etílico).

MATERIALES 2. Ya pasado una semana, la


° 2 envases de plástico sustancia contenida en el envase
° Probeta y pipetas se destilara. Se monta el equipo
° vidrio de reloj, embudo de destilación, la sustancia se
° Espatula pasara a un matraz balón de fondo
° Algodón, gasas, tijeras plano, conectado al tubo
° Vaso de pp de 250ml refrigerante, que se le introducirá
° Matraz balón y perlas de ebullición perlas de ebullición.
° Equipo de destilación

REACTIVOS
° Agua destilada
° Levadura
OBSERVACIONES CONCLUSIÓN
° Se prepararon dos mostos diferentes
una con levadura, azúcar y la otra no REFERENCIAS
contaba con levadura, por lo que debido a http://www.yobrew.co.uk/fermentation.ph
la falta de tiempo se destilo solo el que p
contenía levadura.
https://bibliotecadeinvestigaciones.wordp
° No se cuidó como es debido la ress.com/biologia/sistemas-y-aparatos-
anaerobiosis, debido a que, al bote, del-cuerpo-humano/sistema-
donde estábamos llevando a cabo la respiratorio/la-respiracion-aerobia-y-
fermentación, tubo presencia de oxígeno anaerobia/
en su interior. Y debido a esto el
fermentado no produjo la cantidad
esperada de alcohol (etanol).

° Hubo una pequeña perdida aproximada


de fermentado a la hora de vaciar en el
matraz balón, la perdida fue de 5 ml
aproximadamente.

PRACTICA 2.
FERMENTACION ACETICA

Marco teórico

° Los equipos de calentamiento se El ácido acético es un ácido orgánico de


encontraban en mal estado, debido a que dos átomos de carbono, se puede
estos, tardaban en calentar y no se encontrar en forma de ion acetato. Su
lograba obtener un buen control de la fórmula es CH3-COOH (C2H4O2), siendo
temperatura del etanol. el grupo carboxilo es el que le confiere las
propiedades ácidas a la molécula. Este es
un ácido que se encuentra en el vinagre,
siendo el principal responsable de su
CÁLCULOS Y RESULTADOS
sabor y olor agrios. De acuerdo con la
° Se obtuvo aproximadamente 5ml de
IUPAC se denomina sistemáticamente
etanol
ácido etanoico. La fermentación acética
° Rendimiento obtenido es la fermentación bacteriana por
Acetobacter, un género de bacterias
250 ml ----------- 100%
aeróbicas, que transforma el alcohol en
5ml ---------------- x
ácido acético. La fermentación acética del
vino proporciona el vinagre debido a un
X= 2 % de rendimiento
exceso de oxígeno y es considerado uno 3. Se llena una botella con 362.5ml
de los fallos del vino. de agua al cual se le incorpora
Acetobacter es un género de bacterias del 36.25gr de azúcar y la fruta, se
ácido acético caracterizado por su mezcla.
habilidad de convertir el alcohol (etanol)
en ácido acético en presencia de aire. Hay
muchas especies en este género y
también otras bacterias son capaces de
formar ácido acético bajo varias
condiciones; pero todas las Acetobacter
son reconocidas por esta habilidad
característica.

Materiales
 145gr de platano
 36.25 gr de azúcar
 362.5 ml de agua
 1 recipiente de plástico, con 4. Se agrega 5% de vinagre
capacidad de 1 lt (18.12ml)
 1 gasa 5. Se tapa el recipiente con una gasa
 Cinta adhesiva y cinta adhesiva.
 1 cuchillo

Procedimiento

1. Escogemos 145g de plátano sin


golpes y que no esté en proceso
de fermentación.

Resultados

La práctica se realizó dos veces


debido a que se contaminó, en la
segunda ocasión se contaminó
nuevamente por lo que no se
lograron los resultados.

2. Se procede a pelarlos y desechar


la cascara, se corta la pulpa en
pequeños trozos.
PRACTICA 3  Se calentó la leche en la parrilla
hasta alcanzar una temperatura
FERMENTACIÓN LÁCTICA.
de 74.5 ° durante 15 segundos.
 Se procedió a llenar la cuba con
hielos
Marco Teórico
 Se colocó el matraz con la leche
Las bacterias acido-lácticas se han dentro la cuba con los hielos para
empleado para fermentar o crear cultivos refrigerar e impedir el crecimiento
alimenticios, durante al menos cuatro microbiano.
milenios. Su uso más corriente se ha  Se tomó la alícuota de 10 ml del
aplicado en todo el mundo en los inoculo proveniente de yakult
productos lácteos fermentados como el  Se inoculo el yakult en el matraz
yogurt, queso, mantequilla, etc. que contiene la leche y se realizó
en condiciones asépticas.
El yogurt es una leche fermentada, la cual
 Se procedió a incubar durante un
se han introducido unas bacterias que
día.
convertirán los azucares de la leche en
acido. Resultados
Este proceso produce una acidificación y Se midió con una cinta para medir pH,
hace que las proteínas de la leche cambiando la tonalidad a un pH de 6
coagulen, dando al yogurt su textura
característica. Se realizó tinción gram para determinar
las bacterias causantes de la
fermentación siendo hallados bacilos.
Materiales

 Leche entera 250 mil


 Yakult
 Matraz earlen meyer 250 ml
 Pipeta volumétrica de 10 ml
 Parrilla eléctrica
 Cuba
 Hielos
 Cronometro
 Mechero Fischer
 Termómetro Conclusiones:

Se pudo concluir que en presencia de


Metodología bacterias en la leche, se produce una
acidificación lo cual es el resultado del
 Se tomaron 100 ml de leche entera metabolismo de las bacterias para
de vaca a temperatura ambiente. degradar glucosa, rompen las cadenas de
 Se vertió la leche en un matraz lactosa. El conocimiento del metabolismo
earlen meyer de 250 ml de las bacterias acido-lacticas permite
controlar los procesos de producción a testigo de concentración celular conocida.
gran escala, con relación a la cantidad de Se basa en la mezcla de concentraciones
sustrato y el inoculo permite tener crecientes de cloruro de bario con
parámetros en el desarrollo de los concentraciones decrecientes de ácido
productos de la ruta láctica. sulfúrico obteniéndose un precipitado de
sulfato de bario en cantidades diferentes.
BIBLIOGRAFIA
MATERIALES
www.wikipedia.com/fermentacionlactica
 Tubos de ensayo y tapón
www.slideshare.com/fermentacionlactica  Pipetas con diferentes volúmenes
 Espectrofotómetro
 Cubetas
 Micropipetas
PRACTICA 4 REACTIVOS
 Cloruro de bario 1%
ESCALA DE MC. FARLAND
 Ácido sulfúrico 1%
OBJETIVO:  Agua destilada
 Calcular a partir de un método  NaCl 0.9% estéril
indirecto el número de bacterias
presentes en un caldo de cultivo. PROCEDIMIENTO
 Usar el espectofotómetro para
conseguir la absorbancia y  Preparación de materiales a
mediante la fórmula de la recta de utilizar.
McFarland, obtener el número de 1. Preparar caldo nutritivo y colocarlo
células por mililitro de los en tubos de ensayo con rosca y
microorganismos que hay en la posteriormente meterlos a incubar
muestra de agua peptonada. a 37 °C.
2. Después de cada cierto tiempo se
FUNDAMENTOS
sacaban de la incubadora y se
Los métodos directos se basan en la
metían al refrigerador.
medida de la evolución de partículas
3. Colocar NaCl al 0.9% en un
(colonias en nuestro caso) a través de
matraz y proceder a esterilizarlo.
contadores.

Los métodos indirectos se basan en la  Medición de absorbancias


medida de algún parámetro de nuestro
cultivo que permite deducir información 1. Inocular el matraz con NaCl al
sobre el crecimiento de los 0.9% con la cepa de interés y
microorganismos. En nuestro caso estandarizar hasta una
mediremos el nivel de turbidez con la absorbancia de 0.05
escala de Mc Farland. 2. Se inocula el microorganismo en
una serie de tubos con caldo
nutritivo. Se deja la otra serie para
La escala de Mc Farland es una curva
control.
estándar construida con una suspensión
3. Se llenaron las cubetas del Se prepararon 8 tubos más otros 8 tubos
espectrofotómetro para proceder a de control (sin inóculo).
leer las absorbancias a 600 nm
Se preparó caldo nutritivo para un total de
tanto de los tubos inoculados y
16 tubos.
con los de control.
8 gr  1000 ml
 Escala de McFarland
X  160 ml
Se llenaron tubos con solución de
BaCl2 1%y H2SO4 1%. En el tubo 1 X= 1.28 gr
vamos a coger 0,1 de BaCl2 y 9,9 de
H2SO4 y así con todos, obteniendo un
volumen final de 10 ml en cada tubo, Una vez preparado el caldo nutritivo se
así como se muestra en la tabla. colocaron 10 mL en cada tubo y se
metieron a la autoclave para esterilizar, de
N° de igual manera en un matraz que contenida
N° BaCl2 H2SO4 VF(ml)
células una cierta cantidad de NaCl al 0.9%, junto
1 0.1 9.9 10 3𝒙𝟏𝟎𝟖 con un vaso de precipitado que contenía
2 0.2 9.8 10 𝟔𝒙𝟏𝟎𝟖 un poco más de 15 mL de NaCl al 0.9%
3 0.3 9.7 10 𝟗𝒙𝟏𝟎𝟖
4 0.4 9.6 10 𝟏𝟐𝒙𝟏𝟎𝟖
5 0.5 9.5 10 𝟏𝟓𝒙𝟏𝟎𝟖
6 0.6 9.4 10 𝟏𝟖𝒙𝟏𝟎𝟖
7 0.7 9.3 10 𝟐𝟏𝒙𝟏𝟎𝟖
8 0.8 9.2 10 𝟐𝟒𝒙𝟏𝟎𝟖
9 0.9 9.1 10 𝟐𝟕𝒙𝟏𝟎𝟖
10 1 9 10 𝟑𝟎𝒙𝟏𝟎𝟖

Y preparados los tubos se procede a


medir su absorbancia.

Para el tubo 0 cogemos sólo agua


estéril para hacer el blanco en el
espectrofotómetro.

Imagen 1. Se agregó NaCl 0.9% en un


OBSERVACIONES matraz Erlenmeyer
Se pidió el material respectivo a utilizar,
 Medición de absorbancias
consecutivamente se lavó todo el
material. Se realizaron los cálculos Se inoculo en el matraz que contenía
necesarios para saber cuánto caldo NaCl al 0.9% Escherichia coli, y se midió
nutritivo se iba a preparar, además del su absorbancia en el cual, nos había dado
volumen que se iba a colocar en cada una absorbancia por debajo de 0.05 por lo
tubo. que le agregamos más NaCl al 0.9%
estéril (el cual este se encontraba en el ayuda de una micropipeta se agregaron
vaso de precipitado como solución extra) 100 microlitros en cada tubo.
hasta que nos dio una absorbancia de
0.47.

Imagen 4. Se colocó el caldo nutritivo en


los tubos de ensaye
Imagen 2. E. coli en matraz con NaCl

Imagen 5. Micropipeta con medida de


Imagen 3. Celdas con E. coli + NaCl 100.0 microlitros

Después se inoculo el m.o en los 8 tubos,


dejando los otros 8 tubos para control, con
Una vez realizado lo anterior, se llenaron  Escala de McFarland
las celdas y se procedió a leer las
En 10 tubos de ensaye de 15x100 ml se
absorbancias en el espectrofotómetro.
agregaron BaCl2 1%y H2SO4 1%.

Imagen 6. Espectrofotómetro con las


Imagen 7. Se coloco BaCl2 1% en 10
celdas de E. coli en NaCl
tubos con H2SO4 1%.

Absorbancias Del cual en el tubo 1 se colocaron 0.1 mL


de BaCl2 y 9.9 mL de H2SO4, el tubo 2 se
colocaron 0.2 mL BaCl2 y 9.8 mL de
Tubos con E. Tubos réplica
H2SO4, el tubo 3 se colocaron 0.3 mL de
coli
BaCl2 y 9.7 mL de H2SO4 obteniendo un
volumen total de 10 mL en cada tubo y así
0 0 respectivamente hasta completar los 10
tubos. Finalmente, se procedió a leer su
0.007 0.02
absorbancia.

0.090 0.086

0.153 0.142

0.140 0.133

0.186 0.189

0.181 0.180

0.194 0.194
10 30 0.683 900 0.466 20.49
Σ 165 4.075 3465 1.924 81.15

 Ecuación de la línea de regresión


𝒏(𝚺 𝐱𝐲)−(𝚺𝐱)(𝚺𝐲)
b= 𝒏(𝚺𝒙𝟐 )−(𝚺𝒙)𝟐
=

𝟏𝟎(𝟖𝟏.𝟏𝟓)−(𝟏𝟔𝟓)(𝟒.𝟎𝟕𝟓)
𝟏𝟎(𝟑𝟒𝟔𝟓)−(𝟏𝟔𝟓)𝟐
= 0.0187

𝚺𝐘 𝚺𝐗
a= 𝒏
− 𝒃 𝒏
=
Ilustración 8. Tubos con BaCl2 1%y
𝟒.𝟎𝟕𝟓 𝟏𝟔𝟓
H2SO4 − (𝟎. 𝟎𝟏𝟖𝟕) = 0.0989
𝟏𝟎 𝟏𝟎

N° de  Ecuación de la recta
N° de tubo Abs.
células
Ῡ = a + bx
1 3𝒙𝟏𝟎𝟖 0.147
𝟖
2 𝟔𝒙𝟏𝟎 0.209 Ῡ = 0.0989 + 0.0187x
𝟖 0.245
3 𝟗𝒙𝟏𝟎
𝟖 0.349
4 𝟏𝟐𝒙𝟏𝟎
𝟖 0.375
5 𝟏𝟓𝒙𝟏𝟎 Gráfica de línea regresión
𝟖 y = 0.09833 + 0.01874 x
6 𝟏𝟖𝒙𝟏𝟎 0.466
0.7 Regresión
𝟖 0.510
7 𝟐𝟏𝒙𝟏𝟎 IC de 95%

𝟖 S 0.0263647
8 𝟐𝟒𝒙𝟏𝟎 0.536 0.6
R-cuad. 97.9%
R-cuad.(ajustado) 97.7%
𝟖 0.555
9 𝟐𝟕𝒙𝟏𝟎 0.5

𝟖 0.683
10 𝟑𝟎𝒙𝟏𝟎 0.4
y

0.3

CÁLCULOS
0.2
Se obtiene la ecuación de la recta con los
datos anteriores. 0.1
0 5 10 15 20 25 30
x

de X Y X2 Y2 XY Escala McFarland
tubo
 Absorbancia muestral
1 3 0.147 9 0.022 0.441
2 6 0.209 36 0.043 1.254 Usando la recta anterior y despejando X,
3 9 0.245 81 0.060 2.205 obtenemos que:
4 12 0.349 144 0.121 4.188 𝒀−𝟎.𝟎𝟗𝟖𝟗
5 15 0.375 225 0.140 5.625 = 𝑿( UFC/mL.)
𝟎.𝟎𝟏𝟖𝟕
6 18 0.466 324 0.217 8.388
Una vez hecho esto, tenemos que
7 21 0.510 441 0.260 10.71 trasladar las absorbancias obtenidas de
8 24 0.536 576 0.287 12.864 nuestra muestra, a la ecuación.
9 27 0.555 729 0.308 14.985
Para medir la absorbancia de nuestro Tiempo 0
microorganismo tenemos primero que 𝟎.𝟎𝟎𝟕
restarle la turbidez del medio de cultivo a 𝟎.𝟎𝟏𝟖𝟕
− 𝟎. 𝟎𝟗𝟖𝟗 = 𝟎. 𝟐𝟕𝟓𝟒 UFC/ml
nuestra muestra con los tubos de control.
Tiempo: 3 horas
𝟎.𝟎𝟗𝟎
𝟎.𝟎𝟏𝟖𝟕
− 𝟎. 𝟎𝟗𝟖𝟗 = 𝟒. 𝟕𝟏𝟑𝟗 UFC/ml

Tiempo: 4 horas
Tiempo Absorbancias
𝟎.𝟏𝟓𝟑
Horas Tubos − 𝟎. 𝟎𝟗𝟖𝟗 = 𝟖. 𝟎𝟖𝟐𝟗 UFC/ml
Tubos 𝟎.𝟎𝟏𝟖𝟕
réplica
con E. coli 5 horas
0 0 0 𝟎.𝟏𝟒𝟎
− 𝟎. 𝟎𝟗𝟖𝟗 = 7.388( UFC/mL.)
0 0.007 0.02 𝟎.𝟎𝟏𝟖𝟕

3 0.090 0.086 6 horas


4 0.153 0.142
𝟎.𝟏𝟖𝟔
5 0.140 0.163 𝟎.𝟎𝟏𝟖𝟕
− 𝟎. 𝟎𝟗𝟖𝟗 = 9.848( UFC/mL.)
6 0.186 0.189
7 horas
7 0.181 0.180
𝟎.𝟏𝟖𝟏
22 0.194 0.194 − 𝟎. 𝟎𝟗𝟖𝟗 = 9.580( UFC/mL.)
𝟎.𝟎𝟏𝟖𝟕

22 horas
0.25 𝟎.𝟏𝟗𝟒
𝟎.𝟎𝟏𝟖𝟕
− 𝟎. 𝟎𝟗𝟖𝟗 = 10.276( UFC/mL.)
0.2
UFC/ML

0.15 REPLICAS
0.1
0 horas
0.05
𝟎.𝟎𝟐
0 𝟎.𝟎𝟏𝟖𝟕
− 𝟎. 𝟎𝟗𝟖𝟗 = 0.971( UFC/mL.)
0 3 4 5 6 7 22
TIEMPO (HORAS) 3 horas
𝟎.𝟎𝟖𝟔
Tubos con E. coli Tubos réplica 𝟎.𝟎𝟏𝟖𝟕
− 𝟎. 𝟎𝟗𝟖𝟗 = 4.5 UFC/mL.

4 horas
Estos datos se sustituyen en la ecuación
de nuestra recta por la variable Y y .𝟏𝟒𝟐
𝟎.𝟎𝟏𝟖𝟕
− 𝟎. 𝟎𝟗𝟖𝟗 = 7.495 ( UFC/mL.)
despejando X obtenemos el número de
UFC/ml de nuestra muestra. 5 horas

Ῡ = 0.0989 + 0.0187x 𝟎.𝟏𝟔𝟑


− 𝟎. 𝟎𝟗𝟖𝟗 = 8.618( UFC/mL.)
𝟎.𝟎𝟏𝟖𝟕
𝒀
𝟎.𝟎𝟏𝟖𝟕
− 𝟎. 𝟎𝟗𝟖𝟗 = 𝑿( UFC/mL.) 6 horas

RESULTADOS 7 horas
𝟎.𝟏𝟖𝟗 Introducción
𝟎.𝟎𝟏𝟖𝟕
− 𝟎. 𝟎𝟗𝟖𝟗 = 10 ( UFC/mL.)
Los hongos son un grupo de organismos
22 horas muy abundantes en la naturaleza que
.𝟏𝟗𝟒
incluye especies con patrones de
𝟎.𝟎𝟏𝟖𝟕
− 𝟎. 𝟎𝟗𝟖𝟗 = 𝟏𝟎. 𝟐𝟖 ( UFC/mL.) distribución amplios, aunque también
pueden existir otras con áreas de
distribución más restringidas. Se les
puede encontrar prácticamente en
cualquier tipo de sustrato orgánico vivo o
CONCLUSIÓN muerto. Actúan como descomponedores
a través de la escala de mc farland de la materia orgánica junto a bacterias y
podemos tener una cuantificación del artrópodos, desarrollándose
número de bacterias ajustadas a un frecuentemente sobre restos vegetales
patrón y por medio de la turbidimetria se como cortezas, troncos, hojas, semillas e
mide la absorbancia y así tener una inflorescencias. A su vez, degradan
relación con la cantidad de moos por alimentos y productos industriales como
mililitro (UFC/ml) papel, plásticos, madera, textiles, etc.
Muchos son patógenos de plantas y
BIBLIOGRAPHY animales, incluido el hombre. También
Muñoz, Y. (7 de junio de 2016). son utilizados en la producción y
Preparación escala Mac Farland y obtención de numerosos metabolitos
recuento de microorganismos por como antibióticos, ácidos orgánicos,
turbidez. Obtenido de Prácticas enzimas, alcohol y otros, siendo muy
laboratorio: empleados en estudios citológicos,
http://iamtheonewhocooks.blogsp genéticos y bioquímicos.
ot.mx/2016/06/preparacion-
Marco teórico
escala-mac-farland-y.html
Para la germinación de las esporas de
hongos, es necesario que la humedad sea
alta y que haya agua. La temperatura
necesaria para los hongos debe de ser
estable no puede ser muy alta ni muy
baja. El Ph también debe de mantenerse
en un nivel estable. El desarrollo de
hongos se lleva a cabo en determinadas
circunstancias en las que influyen ciertos
Práctic 5 factores. Tales como la humedad, el agua
disponible en la zona y la temperatura de
CRECIMIENTO RADIAL esta misma, además de las Zonas de
microflora, en un silo pueden existir
pequeñas zonas del alimento con alto
Objetivo contenido en humedad, un ambiente que
Verificar y llevar acabo el crecimiento permite a las cepas de hongos crecer en
exponencial que puede presentar un abundancia, esto se debe a que cuenta
hongo, mediante el crecimiento radial. con los factores ya mencionados en
cantidades perfectas para su desarrollo.
Para la germinación de las esporas de
hongos, es necesario que la humedad sea
alta y que haya agua. La temperatura
necesaria para los hongos oscila en un
rango aproximado de entre los 4 a los
60ºC.El Ph también debe de mantenerse
en un nivel estable: aproximadamente
entre los 4-6Al juntar estos factores
mayoritariamente el clima húmedo es muy
probable que las cepas de hongos se
generen sin ningún problema, tanto
silvestres como los que se llegan a
generar en el cuerpo humano y en
alimentos. Clima Húmedo Seco Mayor
humedad, mayor presencia de hongos A
continuación se presentan diferentes
especies de hongos de diferentes Material
regiones y con distintas variables.

Los hongos son organismos lisotróficos,  6 cajas petri de vidrio


es decir, que absorben sus nutrimentos  2 espátulas
del medio. se reproducen por esporas.  2 vidrios de reloj
Los hongos requieren de ciertos factores  3 matraz Erlenmeyer de 250 ml
para la regulación de su crecimiento y  Parrilla
desarrollo, uno de los más importantes es
 Barra de agitación magnética
la humedad del medio en general; sin esta
 Probeta
nunca habrá hongos. La temperatura
 Piseta
necesaria para los hongos oscila en un
rango de entre los 4 a los 60ºC.El pH Reactivos
aunque variado en muchas especies, por
lo general debe mantenerse entre los 4-  10 g de residuo orgánico seca.
6.Necesitan tener oxígeno, y en este  PDA (agar papa dextrosa)
punto también debe mencionarse la  AB (agar bacteriano)
relación existente entre el O2 y el CO2; si
Procedimiento
existe una abundancia de CO2; no habrá
crecimiento del cuerpo fructífero. La luz es
medianamente necesaria, para algunos 1.- Preparar medio de cultivo para 6 cajas.
hongos es totalmente innecesaria y para Donde:
otros es un requisito.
1. PDA
2. PDA + materia orgánica
3. AB + materia orgánica
2.- Preparar correctamente las cajas, para
ellos debe cuidarse que el residuo
orgánico este mezclado con el agar.

3.- preparar 1 gota de tween 80 en 100 ml


de agua destilada.

En un tubo eppendorf, agregar 1 ml de


tween 80 en 100 ml de agua destilada,
deberá de estar estéril.

Agregar un pique o inocular una porción


de un hongo aislado.

4.- Esterilizar el medio de cultivo.


Posteriormente verter en la caja y esperar
a su pronta solidificación.

5.- Marcar una cruz bien medida debajo


de las cajas.

7.- Esperar a su pronto secado e incubar


a 28°C boca abajo.

8.- Corroborar el crecimiento cada dia


anotando las dimensiones de crecimiento,
6.- Proceder a inocular 100 microlitros de midiendo el radio de crecimiento.
la solución en el tubo eppendorf, en las
cajas petri, cuidando que la gota caiga
exactamente encima del centro de la caja,
sí que esta se mueva.

Formula:
𝑫𝟏 + 𝑫𝟐
𝒓̅ =
𝟐
Donde:

D1 y D2 = Diámetro de ambos lados.


9.- Realizar una grafica de radio contra Mostrando una línea de tendencia en
tiempo de crecimiento. forma ascendente.

Observaciones

El procedimiento tubo una variedad de


problemas, debido a que, el crecimiento
del hongo presento en la primera prueba,
contaminación, más aparte el radio de
crecimiento se movió del centro.

El crecimiento en la segunda prueba


también generó errores, en la cual, hubo
presencia de contaminación, en menor
cantidad que la anterior.

El crecimiento fue más uniforme en la


segunda prueba, pero está no se
encontraba en el centro.

El residuo utilizado en la primera prueba


era hoja de palma, triturada y seca.
Aunque se llevaron acabo las medidas
El crecimiento de hongo fue casi nulo. necesarias para el crecimiento del hongo
en un medio estéril, esto no evitó la
En la segunda prueba el crecimiento fue
contaminación de nuestras cajas.
más notorio, utilizando como residuo
orgánico, cascara de naranja.

Cálculos y resultados

Resultados inconclusos, debido a los


errores presentados en la práctica, el
crecimiento radial no salió como es
debido.

La grafica debió quedar de la forma, radio


de crecimiento por el tiempo transcurrido.
Crecimiento
3

2.5

radio cm
1.5

0.5

0
0 20 40 60 80 100 120 140
El primer día de crecimiento se vió de Horas
manera normal, no se presentaba alguna
anomalía, sin embargo, el crecimiento Crecimiento
sucede de forma lenta.
la hora del sembrado del inoculo, ya que
no se tomaron las medidas asépticas
necesarias.

Las personas que realizaron el sembrado


fue la primera ocasión que sembraron y la
falta de confianza sobre lo que efectuaba
produjo que titubearan conforme se
desempeñaban en llevar acabo la
práctica, ambas ocasiones se efectuó de
manera tumultuosa ya que no tiene bien
definido el concepto de asepsia, no
contemplan que el aire esta infestado de
partículas contaminantes, así como la
falta de destreza y agilidad en la
manipulación de la instrumentación del
Mostramos en las imágenes la laboratorio, quizás la práctica no tuvo los
contaminación generada en las cajas resultados esperados pero ayudo a
petri, y un crecimiento de hongo fuera de fomentar la habilidad y destreza por parte
lugar. de los integrantes del equipo.

Conclusión Bibliografía

No se logró el objetivo deseado, y por lo Plascencia-Jatomea, M., Sánchez-


tanto no se logró visualizar el crecimiento Mariñez, R. I., Rosas-Burgos, E.
generado por los hongos. C., & Cortez-Rocha, M. O. (Abril
de 2010). Ehu. Obtenido de Ehu:
Ambas veces se nos contamino el cultivo,
http://www.ehu.eus/reviberpol/pdf/
considero que fue principalmente porque NOV10/quintana.pdf
no se tomaron las medidas adecuadas a
Slideshare . (12 de Marzo de 2013).
Obtenido de Slideshare:
https://es.slideshare.net/danielme
ndoozagarcia/desarrollo-de-
hongos

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