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Procedimiento:
Los problemas seleccionados por el profesor corresponden a las TAREAS
que los alumnos resolverán en su casa.
Las tareas constituyen el 20 % de la evaluación del curso de Ingeniería
Bioquímica II.
Los problemas se entregarán a los alumnos con UNA SEMANA de
anticipación.
Los alumnos los resolverán en equipos (los mismos del laboratorio).
Los alumnos recibirán asesoría en el aula de 1.5 horas a la semana,
exclusivamente para la resolución de las tareas.
Los problemas, por temas, son los siguientes:
P1.1. Se dispone un biorreactor con geometría recomendada de 2,650 L que opera al 85% de su capacidad
total; Se trabajará con un medio de cultivo no newtoneano, ( = 1.3 g cm -3) que deber ser agitado a una
velocidad tangencial de 7.5 m s-1 constante.
El fluido en cuestión se caracteriza con un viscosímetro, obteniéndose la siguiente corrida experimental:
(i) Determina qué tipo de fluido es, y calcula el valor de las constantes que lo definen
(ii) Estima la potencia nominal (comercial) del motor que se necesita (trabaja con el supuesto de
que tuviese un 75% de eficiencia). Comenta el resultado que obtengas.
P1.3. Con la aplicación del Teorema Pi de Buckingham, deduce los siguientes adimensionales:
(iv) Número de Potencia
(v) Número de Froude
(vi) Número de Reynolds del impulsor
(vii) Número de aireación
Indica cuál es el significado físico de cada adimensional.
P1.4. Se dispone de un fermentador de 200 L, provisto de un motor con una potencia nominal (comercial)
de 1 HP y 75% de eficiencia acoplado; el fermentador esta provisto de 4 baffles, el fluido en su interior tiene
las siguientes características:
Modificando las rpm y leyendo el consumo de potencia experimentalmente se obtuvieron los siguientes
resultados:
N (rpm) 5 10 15 20 25 30
P (Kgf m s-1) 0.052 0.118 0.210 0.307 0.4 0.47
P1.6. Dispones de dos fluidos newtonianos de diferente viscosidad ( µ1 < µ2). Para un gradiente de
velocidad idéntico en los dos casos, indica cuál de los dos genera un mayor esfuerzo cortante. Explica tu
respuesta.
P1.7. Conociendo que Np = Pgc / N3 Dim5 ; NRe = N Dim2 / ; NFr = Dim N2 / g. Grafica como varía P
con respecto a N, en un biorreactor provisto de mamparas cuando:
(i) El régimen de agitación es laminar.
(ii) El régimen de agitación es turbulento.
P1.8. Se desea producir 207.5 toneladas anuales de una levadura, con un sistema de producción aerobio por
lotes; Para cada lote se emplean 200 horas (incluyendo el t muerto) que se realizan durante 320 días hábiles, que
son de 24 hrs.
El sustrato es glucosa, y la [S 0]=60 g L-1. En ésta cepa en particular se sabe que Y X/S=0.75, y logra su máxima
tasa de crecimiento celular solo cuando la velocidad tangencial ( Dim N) del impulsor es de 5 m s-1, y la
temperatura es 35° C. Al momento de la cosecha, el caldo de cultivo tiene una =1.4 kg L-1.
Los cambios reológicos del medio de cultivo con respecto al tiempo son importantes, de manera que se
caracteriza el fluido resultante, utilizando un viscosímetro rotacional “Brookfield”, a 35° C, con el cilindro
#3, a diferentes velocidades de rotación, obteniendo la siguiente información:
P1.11. La potencia P que consume el motor de un sistema de agitación, varia con respecto al número de
revoluciones por minuto, N, de manera idéntica en régimen laminar y en régimen turbulento.
Si No Por que
P1.12. En un biorreactor aireado y agitado mecánicamente, la relación de consumo de potencia con aire
(Pg) entre el consumo sin aire (P), varia en el intervalo 1.0 Pg/P 0.3. Explica BREVEMENTE las dos
cotas o restricciones.
P1.13. Escribe 3 diferencias entre un flujo laminar y uno turbulento en un biorreactor agitado
P1.14. Especifica el nombre y las unidades en que se expresan las variables que constituyen los
adimensionales siguientes:
Dim 2 N 2 n n Dim * N 2
(i) N Re (ii) N Fr
0.1 * 6n 2 g
P1.15. Dispones de un reactor con geometría recomendada de 50m 3, que opera al 80% de su capacidad total
y cuenta con un motor de 1.5 hp, con una eficiencia del 70%. Se desea utilizarlo para producir inoculantes
(células microbianas) para remediar sitios contaminados con petróleo. Para ello se diseñó un medio mineral,
adicionado con crudo para aclimatar a los microorganismos a altas concentraciones de hidrocarburos. Se
caracterizó el medio de cultivo con un viscosímetro de Brookfield y se obtuvieron los siguientes resultados.
El consorcio microbiano tiene un rendimiento de biomasa del 78% y crece a partir de crudo, en una
concentración inicial de 50 g L-1. Un lote dura 14 días, y el reactor opera 320 días por año.
(i) Caracteriza el medio de cultivo; es decir, ¿Qué tipo de fluido es y cuál es el valor de las constantes
que lo definen?
(ii) ¿Qué cantidad de inoculante se produce por año?
(iii) Sabiendo que la masa celular es de 0.6 mg por 108 células y que se necesitan aproximadamente 2x109
células metabólicamente activas para remediar de manera eficiente 1 kg de suelo, ¿cuántas toneladas
de suelo se podrán remediar con la producción de inoculante acumulado durante un año?
2. Transferencia de oxígeno. Evaluación de coeficientes: estimaciones
teóricas y métodos experimentales.
P2.1. En procesos biotecnológicos en donde la transferencia de oxígeno es limitante, indica cinco formas de
aumentar el kla, para cada uno de los siguientes casos de biorreactores en donde:
(i) La agitación es mecánica mediante impulsores
(ii) La agitación es neumática (columnas de burbujas)
(iii) La agitación es neumática (Airlift)
Justifica cada una de tus respuestas.
P2.2. En un cultivo sumergido aerobio con levaduras, se producen hasta 12.0 g de células por litro. Para esta
levaduras, a 32 ° C, la máxima tasa de consumo de oxígeno es de 25.5 mg de oxígeno por gramo de células
por hora, y la constante de afinidad por el oxigeno es de 0.06 mg de oxigeno por litro. La concentración de
oxigeno disuelto en el medio (C L)) siempre es mayor o igual a cero, pero nunca mayor a 6.0 mg de oxígeno
por litro y el coeficiente volumétrico de transferencia de oxigeno es siempre constante e igual a 100 h-1
Encuentra el valor de CL que satisface el estado estacionario.
NOTA: No es posible considerar a priori que Ks <<< CL pues CL es precisamente lo que vas a determinar.
P2.3. Para la determinación experimental de kla y QO2 en un pequeño fermentador de un litro, se te propone
que uses el método numérico. Explica, paso a paso, ¿Cómo aplicas la última ecuación integrada? y el
significado de cada término de esta ecuación
CL QO2 x
ln (1- ) = - kla t donde B = C*
B kla
P2.4. En un cultivo aerobio se crece al microorganismo M1. Bajo las mismas condiciones de agitación y
aireación se crece ahora a otro microorganismo M 2. Si el QO2 de M1 es el doble del de M2 ¿Cuál debería de
ser la proporción de poblaciones para que CL se mantuviera igual y constante en ambos cultivos?
P2.5. En un fermentador de dimensiones estándar, con un impulsor de turbina de 8 aspas planas, 120 rpm y
0.5VVM, se produce Candida utilis. Cuando la concentración de células es de 18 g l -1, se pretende determinar
el coeficiente volumétrico de transferencia de oxígeno (kla) en segundos -1 y el coeficiente específico de
respiración (QO2) expresado en mg de O 2 consumido por gramos de células por segundo. Para la
determinación se dispone de la siguiente información experimental:
Tiempo (s) 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70
CL (% 75 75 75 70 60 51 46 47 53 60 67 71 74 75 75
Saturación)
NOTAS 1. C*, a las condiciones de operación, es de 7.8 mg de oxígeno por litro de medio
2. El suministro de aire se interrumpió a los 10 s de iniciado el experimento y se
restituyó a los 30 s.
El polinomio que describe la función de la zona 3, después de mover la abscisa, es el siguiente:
CL = 46 + 0.08t + 0.066t2 – 0.00125t3. Donde CL está expresada en % de la saturación
y t en segundos.
(i) Grafica la información experimental.
(ii) Determina el QO2 por el método dinámico.
(iii) Determina kla por el método dinámico.
(iv) Determina kla por el método numérico.
P2.6. En un cultivo con levaduras y metanol como fuente de carbono y energía se logró una concentración
celular de 1.5 g L -1. El flujo de aire es continuo y se mantiene siempre constante en 1.5 VVM. Los
experimentos siguientes se realizaron en intervalos muy cortos:
intervalo.
P2.7. Dispones de un fermentador con geometría recomendada donde se produce Saccharomyces cerevisiae,
cuando la concentración celular alcanza 20g L-1, se pretende determinar los coeficientes que definen el
consumo específico de O2 y la tasa de transporte de O 2 hacia la fase acuosa. Para ello se realizó un
experimento y se obtuvieron los siguientes resultados.
Tiempo (s) 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70
CL
85 85 85 75 65 55 45 44 55 68 77 83 84 85 85
(% Saturación)
Utilizando el método dinámico y numérico, determina el valor de los coeficientes antes mencionados. Discute
tus resultados.
3. Transferencia de calor. Teoría de destrucción térmica, energía de
desactivación. Concepto de Nabla. Esterilización por lotes.
Si la energía de inactivación para las vitaminas es de 32,500 cal/mol, demuestra que las vitaminas deben
esterilizarse por separado.
P3.2. Un cultivo sumergido, durante la fase de crecimiento exponencial, produce un calor metabólico de 1
900 kcal mol-1 de azúcares consumidos. Se espera que la temperatura del biorreactor se eleve por encima de la
temperatura óptima de crecimiento. Si para enfriar el biorreactor dispones de un serpentín por el que circula
agua a 21 °C, detalla la estrategia de cálculo que utilizarías para contrarrestar la elevación de temperatura en el
medio de cultivo.
P3.3. En un análisis del transporte de calor de dos biorreactores diferentes B-1 y B-2, ambos agitados y con
chaqueta, los coeficientes convectivos internos hi 1 y hi2 son de 1 650 y 740 Btu/hr ft 2°C, respectivamente ¿Cuál
de los dos es más eficiente térmicamente? ¿A que se puede atribuir esta diferencia? Justifica tu respuesta.
P3.4. Anota el nombre, el significado físico y las unidades en que se expresa cada uno de los términos de la
siguiente ecuación:
1
U
1 1 k
hi ho
P3.5. Los microorganismos A y B contaminan simultáneamente 500 mL de un medio de cultivo que se
pretende esterilizar por lotes a 120°C. Las concentraciones iniciales y la termo-sensibilidad de los dos
contaminantes son diferentes, la siguiente tabla muestra los resultados experimentales realizados a 120°C.
t (min) 0 1 2 3 4 5
MA (UFC mL-1) 108 2.5x104 6.0x102 15 0 0
MB (UFC mL-1) 104 1.6x103 2.7x102 45 7 0
P3.8. Considera dos microorganismos cuyas “constantes” de destrucción térmica están definidas por los
parámetros de la siguiente Tabla.
Si ambos se encuentran como contaminantes en un fermentador, ¿a cuál tomarías como referencia para
diseñar un método de esterilización por lotes?, ¿por qué?
4. Escalamiento. Factor de escala, principio de similitud y criterios de
ingeniería.
P4.1. Dispones de un biorreactor con un volumen de operación de 1.0 m3 y un segundo de 70,000 litros.
Ambos se deben esterilizar por lotes. La concentración inicial de esporas en ambos equipos es la misma. El
nivel de esterilidad deseado al final del ciclo de esterilización también es el mismo en ambos casos.
Considerando que la de calentamiento y la de enfriamiento son idénticas en los dos equipos y si la
temperatura de mantenimiento fuera de 121ºC (considera que k(121) = 3.9 min-1) en las dos escalas. Responde
a las siguientes preguntas:
(i) ¿Cual es el factor de escala?
(ii) ¿Cual es el criterio de escalamiento?
(iii) ¿Cuál será la diferencia en el tiempo de mantenimiento entre los dos biorreactores para alcanzar el
mismo nivel de esterilidad?
0.95
P 0.67
Kv 0.0635 g Vs en donde Pg se expresa en HP; V en m3 y Vs en m h-1.
V
2/3
También se sabe que: VVM 2 Dim1
VVM 1 Dim2
(i) Calcular el gasto de aire, expresado en m3 s-1, que se requiere para los dos biorreactores.
(ii) Calcular la velocidad de ascenso del aire en los dos biorreactores, expresada en m h-1.
(iii) Calcular la potencia del motor con aire (expresada en HP) en la escala mayor.