Diario de comida nigeriana

Diario Oficial del Instituto nigeriano de Ciencia y Tecnología de Alimentos. www.nifst.org

NIFOJ vol. 31 No. 2, páginas 63 - 72, 2013

Estudios preliminares sobre la degradación microbiana de los plásticos utilizados en el envasado de agua

potable en Nigeria
Odusanya, SA 1, Nkwogu, JV 1, Alu, N. 1, Etuk Udo, GA 1, Ajao, JA 1, Osinkolu, GA 2 y * Uzomah, AC 3

RESUMEN
Se desarrolló una técnica simple que utiliza solventes patentados para solubilizar y pulverizar polietileno lineal de baja densidad (LLDPE) utilizado en el
envasado de agua potable en Nigeria. El aumento de la superficie creada, promovió una mejor exposición del LLDPE a los microbios del suelo. Usando las
técnicas de enriquecimiento de cultivos, se encontraron ocho colonias microbianas capaces de utilizar LLDPE como su única fuente de carbono. El organismo
más prolífico, que produce pigmento rojo, fue aislado e identificado como Serratia marcescens marcescens. Este organismo se caracterizó como varilla gram
negativa, reactividad con β- galón, β- glu, y la ureasa fue positiva mientras que la producción de indol y H 2 S fue negativo. La prueba de fermentación fue positiva
para glucosa, sacarosa, glicerol, fructosa, sorbitol alanina y citrato. Las condiciones para la pigmentación no pudieron ser determinadas. Sin embargo, el
pigmento absorbió la radiación dentro de la región UV y formó un precipitado con cloruro férrico. Las micrografías SEM de las superficies de la película plástica
después de la exposición a S. marcescens reveló algunas hendiduras que se atribuyeron a la capacidad degradante de los organismos. Micrografías de películas
en medio sin S. marcescens ( control) presentaron superficies lisas. La Tg de plásticos degradados y no degradados determinada por calorimetría diferencial de
barrido (DSC) fue de 52.43 o C y 63.33 o C respectivamente, lo que sugiere un mayor grado de motilidad de la longitud de la cadena más corta producida después
de la degradación. La medición de DSC mostró además ∆H como 89.936 J / g antes y

31.945 J / g después de la degradación microbiana. También se observó una disminución en la temperatura de cristalización (118.980 a

112.25 ° C) y la entalpía de cristalización (-83.241 J / g a -34.776 J / g). El resultado del termógrafo DSC fue una indicación de la reducción de la
cristalinidad asociada con los procesos de degradación.

Palabras clave: Polietileno, biodegradación, prodigiosina, serratia marcescens marcescens, pigmentación.

Introducción 2003). La producción global total de plástico aumentó

Las investigaciones sobre la reducción de la contaminación
ambiental derivada del uso de plásticos como materiales de
embalaje han estado en marcha durante muchos años. La dificultad
de la biodegradación del material de polietileno se ha atribuido a su
hidrofobicidad, alta repelencia al agua, alto peso molecular y falta
de grupos funcionales que son propensos a la escisión hidrolítica
por las enzimas microbianas (Chiellini et al.
1 Laboratorio Avanzado de Biotecnología e Ingeniería Genética
(BAL), Complejo de Ciencia y Tecnología Sheda (SHESTCO),
PMB 186, Garki, Abuja.
2 Centro de Investigación y Desarrollo de la Energía (CERD),
dramáticamente de 1.5 millones de toneladas en 1950 a 245 millones
de toneladas en 2008 con una tasa de crecimiento anual del 9%
(Dacko et al. 2008). Muchas ciudades urbanas en Nigeria están
lidiando con un problema de inundación anual ocasionado por
desagües bloqueados y una miríada de otras causas; como el efecto
de obstrucción en el suelo, lo que disminuye la riqueza del suelo para
el cultivo y constituye una carga importante para el ecosistema y la
gestión. Los desagües bloqueados se han atribuido a desechos
plásticos, en particular las películas de plástico utilizadas en los
envases de agua potable.

Universidad de Obafemi Awolowo, Ile-Ife.

3 Departamento de Ciencia y Tecnología de Alimentos, Federal
Se han realizado varios esfuerzos para abordar el problema de
Universidad de Tecnología, PMB 1526, Owerri.
* Autor correspondiente: abimuzomah@yahoo.com
los residuos plásticos. Un tal intento por
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El gobierno del estado de Lagos en Nigeria fue el reciclaje de la Materiales y métodos

bolsita, por lo que las bolsitas de residuos se funden y se Solubilización del polietileno / material plástico.
convierten en bolitas que luego se utilizan para la fabricación de
plásticos en aplicaciones no alimentarias. Esto, en cierto sentido, El polietileno lineal de baja densidad (LLDPE) utilizado para envasar
resolvió un problema, pero creó otro, que es la eliminación de los agua se seleccionó al azar y se lavó a fondo en agua desionizada.
plásticos para las aplicaciones no alimentarias. Las contribuciones Como se muestra en las Figuras 1A - D, los materiales de LLDPE se
de los plásticos al problema de la basura son ampliamente disolvieron utilizando solventes patentados a temperaturas elevadas.
reconocidas en todo el mundo como no más del 20% (Phukon et al. 2012).
Los disolventes se eligieron debido a su ligera reactividad con los
residuos plásticos. El disolvente se calentó gradualmente a 140ºC. o C,
después de lo cual se añadió LLDPE con agitación constante, hasta
que el disolvente se saturó con plásticos de desecho (Figura 1B). La
Varios investigadores han informado sobre los resultados de la
temperatura se incrementó gradualmente para acelerar la velocidad
investigación sobre cómo hacer que los materiales de polietileno sean
de reacción. La temperatura se mantuvo a 140ºC. o C hasta que todos
mucho más fácilmente biodegradables (Eubeler et al.
los plásticos LLDPE se disolvieron. La suspensión se produjo cuando
2010; Nowak et al. 2011b; Siotto et al. 2012). Chiellini et al. ( 2003)
la solución se enfrió rápidamente a temperatura ambiente
evaluaron la biodegradación de polietileno de baja densidad que
sumergiendo el vaso de precipitados en un baño de hielo (Figura 1C).
contenía aditivos plásticos degradables totales pro-oxidantes en
El disolvente se separó luego por filtración de la suspensión
presencia de microorganismos asociados con compost maduro.
empleando un paño de muselina (Figura 1D). Las partículas de
Informaron la asimilación de poliolefina sintética por el
plástico se secaron y los disolventes se reciclaron para uso futuro
microorganismo del suelo a un nivel sustancial, sin embargo, con
(Reichmanis, 1989; Odusanya et al. 2006). Las partículas de plástico
un largo período de incubación. Nowak
obtenidas se lavaron con un 70% de etanol en exceso para eliminar
las trazas del disolvente patentado utilizado en el proceso de
et al. ( 2011a) informó sobre la biodegradación de películas de
solublización. Se dejó que el polvo seco se equilibrara a temperatura
polietileno modificadas y no modificadas expuestas a diferentes
ambiente para permitir que se evaporaran trazas de etanol. El polvo
suelos en condiciones de laboratorio. Pudieron aislar bacterias
de polietileno (PEP) así obtenido se mantuvo para un análisis
pertenecientes al género,
adicional.
Bacilo, y los hongos, Gliocladium viride, Aspergillus awamori y Mortierella
subtilissima, como organismos capaces de degradar polietileno y
polietileno modificado con “Bionolle”. En nuestro estudio anterior, el
análisis de los plásticos utilizados en aplicaciones de envasado de
alimentos y agua en Nigeria resultó ser predominantemente de
polietileno (Odusanya et al. 2006). En el caso de los plásticos de agua, Técnica de enriquecimiento de suelos / aislamiento de
se encontró que los materiales eran polietileno de baja densidad cultivos microbianos.
(LLDPE) completamente lineal (Odusanya). et al. 2006). Se añadió un gramo de PEP a 100 ml de medio mínimo
aumentado con 0,25 g de extracto de levadura y 0,1 g de
licor de maíz. La constitución de los medios es la siguiente:

El objetivo de este estudio fue desarrollar una técnica adecuada

0.5% (NH4) 2HPO 4,
0,1% de extracto de malta, 0,001% de CaCl 2, NaCl al 0,01%,
para la detección de microorganismos capaces de degradar el
0,001% de FeCl 3, La mezcla se autoclavó en un matraz cónico de
LLDPE e investigar sus características de degradación con el
250 ml a 121ºC. o C durante 20 min. Esto fue considerado como el
objetivo final de desarrollar un material plástico biodegradable
medio de polietileno (PEPM). Para aislar e identificar los microbios
adecuado para el envasado de agua y alimentos.
que habitan el suelo, se suspendió 1 g de la muestra de suelo en 5
ml de agua destilada. La suspensión se mezcló bien, se dejó
sedimentar y 1 ml del líquido transparente.
 Estudios preliminares sobre la degradación microbiana de los plásticos utilizados en el envasado de agua potable en Nigeria ... Odusanya et al.
Las figs. 1A - D: Proceso de pulverización de residuos plásticos (LLDPE)
A - residuos plásticos (LLDPE); B-Disolución del plástico en sistema solvente; C - masa disuelta que fluye libremente; D - plástico en polvo
Se utilizó para inocular el PEPM. La mezcla se incubó a
temperatura ambiente 28 ± 2. o C con agitación continua en un
agitador orbital a 120 rpm durante 56 días.
Aislamiento de cultivos puros / inoculación de medios plásticos.
Después de ocho semanas de incubación, 10 o - 10 10 Se prepararon
diluciones en serie de los medios resultantes y se inocularon (1 ml /
placa, mediante técnica de placa de extensión) en placas
duplicadas de agar nutritivo y agar de dextrosa de patata. Las
colonias individuales se purificaron adicionalmente mediante rayas
en placas de agar fresco. Las colonias individuales resultantes se
usaron para inocular PEPM fresco. El pigmento de las colonias
obtenidas se separó suspendiendo las colonias rojas en una mezcla
de cloroformo: metanol (2: 1). Los residuos se filtraron de la
suspensión y el disolvente volátil se evaporó. El pigmento insoluble
en agua se sometió a una prueba de cloruro férrico y absorción UV
a 280 nm, el FTIR y la química ácido-base (Reichmanis, 1989;
Shonaike et al. 2000).
Pruebas bioquimicas
Se realizaron pruebas de fermentación con rojo de fenol en aislados
obtenidos de PEPM anterior, utilizando PEP como única fuente de
carbono. Los organismos capaces de digerir la PEP se determinaron
por el cambio en el pH de los medios, el aumento de la turbidez y la
generación de espuma. Los organismos aislados fueron clasificados
como organismos degradantes del polietileno. Identificación
sesenta y cinco
de estos organismos se realizó a través de DSMZ-Alemania
(Colección alemana de microorganismos y cultivos celulares).
Pruebas en PEP degradada
Después de 56 días de incubación de la mezcla anterior, la PEP se
separó del cultivo por filtración, se enjuagó a fondo con agua del
grifo, después de la inmersión en agua destilada hasta que estuvo
transparente. Este se secó en un horno de vacío fijado a 50ºC. o C
durante 48 h. Las muestras secas se dejaron equilibrar a la
temperatura ambiente y a la humedad durante al menos 24 h antes
de las mediciones posteriores. La biodegradación se monitorizó
midiendo la pérdida de peso de la muestra utilizando un equilibrio
automático Perkin Elmer AD-4. La PEP antes y después de la
exposición a los microorganismos se examinó más a fondo
utilizando la calorimetría diferencial de barrido y el microscopio
electrónico de barrido.
Pruebas puntuales en películas de LLDPE para mostrar la indentación
de plásticos
La película de LLDPE utilizada en el embalaje de agua se cortó en tiras
rectangulares, se lavó en etanol absoluto y, con la ayuda de pinzas
estériles, se colocó con cuidado en la placa de agar de modo que las
tiras encajaran perfectamente en las placas de Petri. Usando el bucle
estéril, cada organismo aislado se colocó sobre la película que actuó
como una barrera entre el organismo y el medio de agar debajo de la
película. Se esperaba que los organismos con la capacidad de
degradar la película de polietileno