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P1
Solo e água, planta, utensílios, trato intestinal do homem e do animal, manipuladores, ração
animal, produtos dos animais, ar e pó.
3. Como são produzidas as aminas biogênicas? Deem exemplos OU O que são aminas
biogênicas?
8.Qual é um dos principais grupos deteriorantes dos alimentos tanto de origem animal
quando vegetal?
As bactérias produtoras de ácido láctico são ruins se passarem perto de produtos cárneos, mas
não são consideradas deteriorantes para os vegetais uma vez que são responsáveis pela
fermentação deles; sendo esta uma característica de interesse ou desejada em determinados
produtos.
Ácido bissoclâmico – Gênero Byssochlamys spp. ; Citrina e Patulina – Gênero Penecilium spp. ;
Ocratoxina A – Gênero do fungo Aspergillus ochraceus; Aflatoxina – Aspergillus spp. ;
Fumonisina e Zearalenona – Furasium spp.
12.Defina bacteriocina.
São substâncias produzidas por algumas bactérias que inibem o crescimento de outras
bactérias.
C) Potencial Oxirredução (Eh) – facilidade com que determinado substrato ganha ou perde
elétrons. Perder elétrons = oxidar = Eh + = com oxigênio aeróbio, O2 como receptor final de
elétrons; Ganhar elétrons = reduzir = Eh - = sem oxigênio anaeróbio = sem O2 como receptor
final de elétrons (essa classificação é baseada na capacidade de utilizarem ou não o O2 como
receptor final de elétrons no metabolismo respiratório); MO microaerofílicos: se multiplicam
em uma quantidade reduzida de O2, são aeróbios (EX: lactobacilos, estreptococos); MO
anaeróbios facultativos: crescem tanto em condições de anaerobiose quanto em aerobiose (EX:
Família Enterobacteriaceae); MO aeróbio: Eh +, presença de O2 (EX: Pseudomonas, Bacillus
cereus); MO anaeróbio: valor reduzido de Eh, ausência de O2 (EX: Clostridium botulinum,
Clostridium perfringes)
B) Umidade relativa do ambiente - alimentos conservados com umidade relativa maior que a
Aa, tendem a absorver umidade do ambiente e assim aumenta a sua Aa; Quando a umidade
relativa é menor que a Aa do alimento, tendem a perder água e assim diminui a Aa;
15. Quais são as técnicas utilizadas em placas? OU Descreva os métodos de Spread Plate,
Pour Plate, Streak Plate:
Streak Plate – riscar: semeia-se ou risca-se com alça bacteriológica com a intenção de separar
uma colônia da outra para ver se irá crescer um único tipo de bactéria; se crescer um tipo de
coloração diferente, significa que houve contaminação, ou seja, é uma técnica para verificar o
grau de pureza.
Os ovos não devem ser lavados; 1º porque os ovos vendidos que apresentam o selo SIF, já
foram higienizados na indústria e 2º como o ovo tem uma casca porosa, caso tenha algum tipo
de contaminação na casca a lavagem contribuirá para internalização dos microrganismos.
17. DTA:
Tudo que pode causar um agravo à saúde individual ou coletiva que pode ser causado por um
perigo físico, químico e/ou biológico, que está presente em alimento ou água (potabilidade da
água – ausência de E.coli/100mL).
18. Gel de agarose: Descreva a corrida eletroforética de DNA em gel de agarose. O gel de
agarose para DNa é para separar fragmentos de DNA.
Para esta corrida preparamos o gel de agarose com o tampão TAE ou TBE. Gel 1% agarose
-1g/mL colocar no micro-ondas, espera esfriar e utiliza no processo. Colocamos corante para
corar o DNA que vai ser colocado no gel que é o brometo de etídeo, além de açúcar para dar
peso e fzer o DNa ficar mais denso e cair no poço, isso será visualizado quando incidirmos a luz
ultravioleta.
Quanto mais agarose colocarmos no gel, mais duro ele fica e mais lentamente o DNA vai
passar, e quanto menos diluído a agorase mais mole fica e mais rápido o DNA vai passar.
Quanto maior o fragmento de DNA mais devagar ele correr e quanto menos mais rápido, por
isso o ideal é um gel menos concentrado para um fragmento maior e mais concentrado para
um fragmento menor.
Depois que se prepara o gel e solidificar, coloca-se na cama, depois faz-se os poços com o
pente no gel e em seguida colocar a cama na cuba com a região dos poços voltada para o lado
negativo para colocar as amostras contendo DNA. O lado positivo tem uma coloração vermelha
e o lado negativo tem uma coloração preta.
Utilizaremos uma cuba onde colocaremos a cama com o gel de agarose e uma doente de onde
obteremos a voltagem. E aplicaremos as amostra de DNA com auxílio da micropipeta no poço
feito com um pente no gel de agarose no lado negativo, pois quando ligarmos a corrente
eletroforética todos os fragmentos de DNA vao atravessar o gel de agarose.
Quanto mais quebrado o DNA terá fragmentos menores e mais distante do poço presente
exclusivamente no lado negativo, e quanto menos quebrado ele fica mais próximo do lado
oposto. Para se ter uma noção do tamanho do fragmento de DNA usa-se o padrão de peso
molecular conhecido que bandas com diferentes tamanhos de DNA (de 100 a 50 pares de
base).
19. Descreva o método de Kirby e Bauer ou de difusão de disco (teste de sensibilidade
antimicrobiana -> antibiograma) OU cite um método de sensibilidade antimicrobiana
Procedimento:
- Retirar as placas e os frascos com os discos da geladeira cerca de 20-30 minutos para que
adquiram a temperatura ambiente antes da execução da prova.
A) Com uma alça bacteriológica em platina devidamente flambada e resfriada, tocar na colônia
recente (18-24 horas). Deve-se pegar de 1 a 3 colônias (é o suficiente)
B) Suspender as colônias em solução salina estéril (NaCl 0,85%) e agitar até se obter uma
turvação compatível com o grau 0,5 da escala Mac Farland (1,5x10 elevado a 8 UFC/mL).
Para este passo deve ser utilizado um tubo aferido na escala 0,5 de Mac Farland como
comparativo ou um turbidímetro, Pode-se comprar ou fazer no laboratório com as substâncias
químicas necessárias. Se a solução salina estiver mais turva que a escala 0,5 Mac Farland é só
diluir acrescentando mais um pouco de solução salina. Já se a solução salina não estiver turva
como a escala 0,5 Mac Farland é só acrescentar mais uma colônia de bactérias.
D) Aguardar (não mais que 15 minutos) a superfície do Agar Muller Hinton secar (tudo tem que
estar homogeneizado)
F) Incubar a placa com os discos em estufa bacteriológica a 35ºC +/- 2ºC por 18-24 horas
Resultado:
Com o auxílio de uma régua, paquímetro ou dispositivo semelhante, medir o diâmetro dos
halos inibitórios de cada disco, e consultar uma tabela apropriada (CLSI) para determinar se a
bactéria em análise é sensível, intermediária ou resistente ao antimicrobiano testado.
O tratamento térmico deve garantir que todas as partes do alimento atinjam a temperatura de,
no mínimo 70ºC;
Os óleos e as gorduras utilizados devem ser aquecidos a temperaturas não superiores a 180ºC;
Unidade amostral: porção ou embalagem individual que analisará ou amostra que será
coletada para análise.
2. Aplique na palma da mão a quantidade de sabonete líquido suficiente para cobrir todas as
superfícies das mãos;
6. Esfregue o dorso dos dedos de uma mão com a palma da mão oposta (e vice versa),
segurando os dedos, com movimento de vai-e-vem;
7. Esfregue o polegar direito com o auxílio da mão esquerda (e vice versa) utilizando
movimento circular;
8. Friccione as polpas digitais e unhas da mão esquerda contra a palma da mão direita, fechada
em concha (e vice versa) fazendo movimento circular;
9. Esfregue o punho esquerdo, com o auxílio da palma da mão direita (e vice versa), utilizando
movimento circular;
10. Enxague as mãos, retirando os resíduos de sabonete. Evite contato direto das mãos
ensaboadas com a torneira;
11. Seque as mãos com o papel toalha descartável, iniciando pelas mãos e seguindo pelos
punhos.
Identificação do perigo – identificar agentes químicos, físicos e biológicos que podem causar
efeitos adversos à saúde e que podem estar presentes em determinado alimento;
Gerenciamento de risco: processos de ponderação das distintas opções normativas à luz dos
resultados da avaliação de risco e, caso necessário, da seleção e aplicação de possíveis medidas
de controle apropriadas, incluídas da medias de regulamentação;
1ºpasso: quebra da parede ou membrana alvo da extração e para isso utiliza-se método físico
(nitrogênio líquido ou de bolas de aço para promover a quebra da parede) e o químico (uso de
detergentes SDS e CTAB).
26. PCR: Mix de PCR: DNA molde+ Taq polimerase+ 1 par de primers+ tampão+ nucleotídeos+
água destilada+ cloreto de magnésio. 1º passo: desnaturar (acima de 90C) desnatura o DNA; 2º
passo: anelamento dos primers (entre 30-70ºC); 3º passo: extensão (72ºC temperatura ótima
para a enzima taq polimerase atuar), adiciona nucleotídeos as 2 fitas de DNA. A DNA
polimerase reconhece o primer para sintetizar.
Diferença de PCR quantitativo para PCR qualitativo: PCR qualitativa só indica presença ou
ausência e utiliza gel de agarose. Já a PCR quantitativa indica presença, ausência e também
quantidade e não usa gel de agarose e sim uma sonda PROBE (fica entre as fitas de DNA e
quando a DNA polimerase passa, emite fluorescência).
Descreva PCR qualitativa: 1º: fazer o PCR no termociclador; 2º: depois é preparado o gel de
agarose e quando solidificado é colocado na cama; 3º: depois retira-se o pente, obtendo-se os
poços onde serão colocadas as amostras; 4º: a amostra é colocada juntamente com azul de
bromofenol e açúcar; 5º: depois se coloca a cama com o gel na cuba e cobre-se com tampão,
tampa a cuba e aplica uma voltagem, que faz com que a amostra corra formando bandas; 6º:
depois de corrida da amostra, retira-se o gel e cora em Brometo de etídeo, então se tira uma
foto (esse corante tem afinidade pelo DNA e fluoresce quando em contato com UV, e isso
possibilita a visualização das bandas, sendo essas bandas comparadas com um padrão
molecular).
Descreva PCR quantitativa: sabe se tem banda ou não e quanto tem, não usa gel de agarose, o
mix é igual, adiciona-se a sonda PROBE em uma das fitas de DNA e no 2º passo se anela aos
primers e a sonda. E na extensão a taq polimease quebra a sonda anelada para colocar
nucleotídeos e após a quebra há fluorescência.