MEMBRANAS BIOLOGICAS

Y TRANSPORTE DE SOLUTOS
LA MEMBRANA
PLASMATICA
Microfotografía electrónica de
transmisión que muestra dos
células adyacentes de páncreas
con una magnificación de
X43.000. El inserto es una
magnificación más alta
(X216.000 que muestra dos
capas densas con una capa
intermedia menos densa
 El cuerpo humano está formado por miles de
millones de células, cada una de ellas rodeada
por una membrana plasmática que separa el
contenido intracelular del entorno extracelular
 COMPOSICIÓN APROXIMADA DE SOLUTOS
EN FLUIDOS DE IMPORTANCIA
Soluto Plasma Plasma libre de Intersticio Células
proteínas
Na+ (mM) 142 153 145 15
K+ (mM) 4,4 4,7 4,5 120
Ca2+ (mM) 1,2 (ionizado) 1,3 (ionizado) 1,25 (ionizado) 1x10-4
2,5 total (ionizado)
Mg2+ (mM) 0,6 (ionizado) 0,6 (ionizado) 0,55 (ionizado) 1 (ionizado)
0,9 total 18 total
Cl- (mM) 102 110 116 20
HCO3- (mM) 22 24 25 15
H2PO4- (mM) 0,7 (ionizado) 0,75 (ionizado) 0,8 (ionizado) 0,7 (libre)
1,4 total
Proteínas 7 g/dl - 1 g/dl 30 g/dl
Glucosa 5,5 5,9 5,9 Muy baja
pH 7,4 7,4 7,4 7,2
Osmolalidad 291 290 290 290
(mosmol/kg de
agua)
 La célula necesita mantener muy controlada la
composición de su medio intracelular para poder realizar
adecuadamente sus funciones.

La membrana plasmática actúa como barrera entre

interior y exterior de la célula

Sin embargo la membrana es mucho más que una

simple barrera, es una barrera semipermeable y
selectiva.

Tiene una gran variedad de proteínas, poros y sistemas

de transporte que determinan las comunicaciones
entre interior y exterior.
 Funciones de la memebrana

Transporte selectivo de moléculas hacia dentro y fuera

de la célula.

Comunicación intercelular por medio de

neurotransmisores y receptores hormonales

Actividad enzimática

Reconocimiento celular por medio de antígenos de la

superficie de la membrana plasmática

Determinación de la forma celular mediante la unión

del citoesqueleto a la membrana plasmática
 Las membranas rodean también organelos de la célula. Las
membranas de los organelos no sólo dividen el espacio intracelular
sino que son el lugar donde se producen muchos procesos
intracelulares importantes
ESTRUCTURA Y COMPOSICION DE
LA MEMBRANA PLASMATICA
 lípidos

Las membranas
biológicas están proteínas
compuestas

carbohidratos

En proporciones
relativamente iones
variables

agua
Membrana de Neurona periférica con mielina
(proteínas/lípido) 0,2/1

Membrana interna de mitocondria

(proteínas/lípido) 3,2/1

La mayoría de las membranas biológicas

presentan variaciones de proteína lípido entre
estos dos extremos
 Los carbohidratos generalmente constituyen el
1-10 % del total del peso seco y se encuentran
unidos covalentemente a lípidos y proteínas

El agua es un importante constituyente de las

membranas, las moléculas de agua unida a la
superficie de la membrana estabilizan la estructura
bilipídica
Lípidos de la membrana
 La característica arquitectónica de las membranas
biológicas es una doble capa de lípidos que actúa
como una barrera al paso de iones y moléculas polares
 Los principales lípidos de
membrana son los fosfolípidos
Los fosfolípidos son
moléculas
anfipáticas que
contienen una
cabeza hidrofílica
cargada
eléctricamente o
polar

Y dos cadenas de
ácidos grasos que
constituye la parte
apolar de la
molécula
 Estructura de los fosfolípidos
molécula de glicerol unido a un grupo fosfato
esterificado (cabeza hidrofílica) y a dos moléculas de
ácidos grasos de cadena larga (colas hidrofóbicas)

POLAR
APOLAR
 Otros componentes lipídicos menores de la membrana son los
glicofosfolípidos. Estos lípidos contienen dos cadenas de ácidos
grasos unidos a cabezas polares de hidratos de carbono, uno de
ellos, el glicosilfosfatidilinositol desempeña un papel importante
en el anclaje de proteínas a la membrana
El colesterol es un componente esencial de las membranas de
células eucariontes animales, se localiza en las dos caras de la
membrana y su función es estabilizar la membrana a la
temperatura corporal normal
¿Cómo y por qué ocurre la formación
de una bicapa lipídica?

La clave es el agua

El 70% o más del peso de la mayoría de

los organismos es agua
Los fosfolípidos son insolubles en agua

Cuando se mezclan con agua

forman espontáneamente
agregados que los separa del
rededor acuoso
La molécula de agua es polar

O
H
 Las moléculas polares se disuelven fácilmente en el agua
porque pueden reemplazar las interacciones agua-agua con
interacciones soluto-agua energéticamente más favorables
 En contraste, las moléculas apolares no son
capaces de formar interacciones agua-soluto y por
eso son insolubles en agua y tienden a formar
agregados
Las fuerzas que mantienen juntas a las regiones apolares
se llaman interacciones hidrofóbicas o efecto
hidrofóbico
Diferencias entre las dos monocapas de fosfolípidos

El tipo de fosfolípido y sus interacciones no covalentes

determinan la flexibilidad de la membrana
La T° a la cual se produce el cambio se llama T° de transición (Tc)
Proteínas de la membrana
Las proteínas confieren a las membranas biológicas su
funcionalidad

Mediadoras de la transferencia de información desde el

espacio extracelular. Por ejemplo receptores

Transporte de iones y moléculas. Por ejemplo canales y

bombas

Actividad metabólica. Por ejemplo, producción de

energía en las membranas de la mitocondria
 Integrales

Las proteínas de
membrana se
pueden dividir
operacionalmente
en dos grupos

Periféricas
Las proteínas integrales de Sólo se pueden remover con
membrana se encuentran agentes que interfieren con
firmemente asociadas a la las interacciones hidrofóbicas
membrana
 Las proteínas periféricas se asocian con la membrana a través de
interacciones electrostáticas y puentes hidrógeno con los dominios
hidrofílicos de las proteínas integrales y con las cabezas polares de los
lípidos de membrana

Pueden liberarse
fácilmente con
tratamientos suaves que
interfieren con las
interacciones
electrostáticas, tales
como agentes quelantes,
cambios en el pH
 FISIOLOGIA DE LA
MEMBRANA CELULAR
En gran medida la constancia de los líquidos extra e
intracelular depende del transporte a través de la
membrana plasmática

DIFERENCIA DE POTENCIAL
ELECTROQUIMICO

TRANSPORTE DE MOLECULAS
A TRAVES DE LA MEMBRANA
Todos hemos visto como fluye el agua de un lado al otro de
un dique, y la única condición que se requiere es que exista
una diferencia en los niveles del agua a ambos lados del
dique, y por supuesto un agujero para que pase el agua

Este flujo es pasivo

Y la fuerza motriz, es la presión que ejerce el agua

sobre la pared izquierda del dique
 Casi de la misma manera, una sustancia puede moverse
pasivamente a través de una membrana que separa dos
compartimientos (imaginemos a la membrana plasmática
que separa el intracelular del extracelular) cuando hay
una fuerza motriz favorable y una ruta abierta para
que esta fuerza motriz produzca su efecto
Cuando existe una ruta para la transferencia
de una sustancia a través de una membrana
decimos que esa membrana es permeable

La fuerza motriz que determina el transporte

de solutos a través de una membrana es el
Gradiente electroquímico o diferencia de
potencial electroquímico que actúa sobre el
soluto entre los dos compartimientos
 La diferencia de potencial
electroquímico incluye

Diferencia de Diferencia de
concentración potencial
de soluto en eléctrico en
ambos lados de ambos lados de
la membrana la membrana
Este concepto lo podemos ilustrar mediante el
transporte pasivo, no acoplado, de un soluto X

Transporte pasivo, no acoplado, a través

de una membrana permeable significa que
el movimiento del soluto X no está
directamente acoplado al movimiento de
ningún otro soluto o reacción química (por
ejemplo la hidrólisis del ATP)
 [X]e

Espacio extracelular Citosol

Si la concentración de X es mayor en el espacio

extracelular que en el citosol y asumiendo que no hay
una diferencia de potencial eléctrico a través de la
membrana, la gradiente de concentración actuará
como fuerza motriz para provocar el movimiento neto
de X desde el exterior al interior
 [X]e [X]i

Ve Vi
Espacio extracelular Citosol

∆V

Si la concentración de X es igual en ambos lados

de la membrana, pero existe una diferencia de
potencial eléctrico a través de la membrana
(asumamos que el soluto X tiene carga eléctrica),
el movimiento neto de X quedará determinado por
las dos fuerzas: el gradiente químico y el
gradiente eléctrico
 Las células tienen una diferencia de potencial
eléctrico a través de su membrana plasmática que
llamamos potencial de membrana en reposo. Por lo
general el citoplasma es negativo respecto del líquido
extracelular
0
-90
mV

+ Externo

-
Interno
Vm=Vi-Ve=-90 mV 0
-90

mV

Externo
+
-
Interno
 Neuronas

Potencial de Células musculares esqueléticas

membrana en reposo
es necesario para la
excitabilidad de
Células musculares lisas

Células cardíacas
 A B

1M O,1 M

X+ X+

Una membrana separa dos compartimientos (A y B) que contienen

soluciones de distintas concentraciones de un catión X+.
 A B

1M O,1 M

X+ X+

Si no existe una diferencia de potencial eléctrico entre

ambos lados, X+ difundirá desde A→B, igual que lo haría
una molécula no cargada, hasta que las concentraciones
en ambos lados se igualen y el sistema se encontrará en
equilibrio.
 A B

- +
1M - + O,1 M
- +
X+ X+
- +
- +

Vm

Sin embargo, si el lado A es eléctricamente negativo

respecto del B, La tendencia de X+ a difundir de A→B
permanece, pero ahora X+ tiende también a difundir de
B→A, por la diferencia de potencial eléctrico a través de
la membrana
 A B

- +
1M - + O,1 M
- +
X+ X+
- +
- +

Vm

El sentido del movimiento

neto de X+ dependerá de
cual componente es mayor
la diferencia de
concentración o el potencial
eléctrico de la membrana
 A B

- +
1M - + O,1 M
- +
X+ X+
- +
- +

Vm

Comparando ambas tendencias

se puede predecir el sentido del
movimiento de X+.
 A B

- +
1M

X+
-
-
-
+
+
+
O,1 M

X+
µ
- +
µA µB
Vm

La cantidad que nos permite comparar la contribución

de la concentración de X+ y el potencial eléctrico en
cada lado de la membrana se llama potencial
electroquímico ( µ )
 A B

- +
1M - + O,1 M
- +
X+ X+
- +
- +
µA µB
Vm

Y la diferencia de potencial
electroquímico ( µA - µB = ∆µ )
a ambos lados de la membrana
indica el movimiento del ion)
 A B

- +
1M
- + O,1 M
- +
X+ X+
- +
- +
µA µB

Vm

La expresión matemática que define la diferencia de potencial electroquímico es

[X+]A
∆µ (X+) = µA (X+) - µB (X+) = RTln + zF (VA–VB)
[X+]B

Tendencia Tendencia
de X+ de de X+ de
moverse moverse
de A→B de B→A
 [X+]A
∆µ (X+) = µA (X+) - µB (X+) = RTln + zF (VA–VB)
[X+]B

∆µ = diferencia de potencial electroquímico entre A y B

R = la constante de los gases ideales

T = temperatura absoluta en grados Kelvin

[X+ ]A logaritmo natural de la relación de concentración de X +a

ln =
ambos lados de la membrana
[X+ ]B

Z = carga del ion

F = constante de Faraday (c/mol)

VA – VB = diferencia de potencial eléctrico a través de la membrana (volt)

 A B
- +

1M - + O,1 M

X+ X+
- +

- +

- +

[X+]A
∆µ (X+) = µA (X+) - µB (X+) = RTln + zF (VA–VB)
[X+]B
Los iones X+ se mueven desde un potencial
electroquímico mayor a uno menor
µA > µB los iones tenderán a moverse de A a B

µA < µB los iones tenderán a moverse de B a A

µA = µB (Δµ = 0) ambas fuerzas son iguales y opuestas

 Diferencia de potencial
electroquímico
Sus dos componentes

Diferencia de potencial Diferencia de potencial

químico (energía eléctrico (energía
acumulada en el asociada al movimiento
gradiente de de iones a través de la
concentración) membrana)
 La ecuación de Nernst

Nos permite calcular el potencial eléctrico de la membrana

Al que un ión con determinadas concentraciones dentro y
fuera de la célula, se encontrará en equilibrio.
 µA (X+) = µB (X+)

∆µ (X+) = 0

[X+]A
∆µ (X+) = µA (X+) - µB (X+) = RTln + zF (VA–VB)
[X+]B
[X+]A [X+]A
RTln + zF (VA–VB) = 0 zF (VA–VB) = - RTln
[X+]B [X+]B
RT [X+]A
VA–VB = - ln
zF [X+]B

RT [X+]B
VA–VB = ln
zF [X+]A ECUACION
DE NERNST
 RT [X]B
VA–VB = ln
zF [X]A

Esta ecuación permite calcular la

diferencia de potencial eléctrico
(VA-VB) necesaria para producir una
fuerza eléctrica que iguale a la
fuerza de concentración.
Ejemplos de aplicaciones de
la ecuación de Nernst
 Gradiente
Ejemplo 1
eléctrico

Gradiente de
concentración

El ion K+ se encuentra 10 veces más concentrado en el lado A que en

B. Calcular la diferencia de potencial eléctrico que debe existir a
ambos lados de la membrana para que el K+ esté en equilibrio
µA (X+) = µB (X+)

T = 30 oC RT [ X]B
R = 8,31 joule / oK mol VA – VB = ln
zF [ X]A

(8,31 joule / oK mol) x (303 oK) 0,1

VA – VB = 2,3 lg = - 0,06 volt
1 x 96.500 c/mol 1
 Gradiente
Ejemplo 2
eléctrico

Gradiente de
concentración

VA-VB = + 100mV

La ecuación de Nernst predice si el HCO3- se encuentra en equilibrio.

Si no lo está, la ecuación permite predecir la dirección del flujo neto
de HCO3-
T = 30 oC RT [ X]B
R = 8,31 joule / oK mol VA – VB = ln
zF [ X]A

8,31 joule / oK mol x 303 oK 0,1

VA – VB = 2,3 lg = 0,06 volt
-1 x 96.500 c/mol 1
La ecuación de Nernst se puede usar
para predecir el sentido en el que
tienden a fluir los iones X

La ecuación de Nernst puede

utilizarse sólo para un tipo de ión
permeante y no para muchos a la vez

+
[X ]
RT B
VA-VB= zF ln +
[X ] A
 A B
- +

- +

X + - + X+
- +

- +

Si la diferencia de potencial medida (con electrodos) a través de una

membrana es igual a la diferencia de potencial calculada por la
ecuación de Nernst, el ion se encuentra en equilibrio electroquímico
no habrá un flujo neto a través de ella
+
[X ]
RT B
VA-VB= zF ln +
[X ] A
 A B
- +

- +

X + - + X+
- +

- +

VAB (medido)>VAB(Nernst)
Si el potencial eléctrico medido (con electrodos) es del mismo signo que el
calculado por Nernst, pero tiene una magnitud mayor, entonces la fuerza eléctrica
es mayor que la gradiente de concentración y el flujo neto del ion tenderá a
producirse en el sentido determinado por la fuerza eléctrica

[X+]
RT B
VA-VB= zF ln +
[X ]A
 A B
- +

- +

X + - + X+
- +

- +

VAB (medido)<VAB(Nernst)
Cuando la diferencia de potencial medida (con electrodos) es del mismo signo
que el calculado por Nernst, pero tiene una magnitud menor, el flujo neto
tenderá a producirse en sentido de la gradiente de concentración

+
[X ]
RT B
VA-VB= zF ln +
[X ] A
 A B
+ -

+ -

X + + - X+
+ -

+ -

Si la diferencia de potencial medida (con electrodos) es de signo opuesto al valor

calculado por Nernst para un ion determinado, entonces las fuerzas eléctrica y
química actúan en el mismo sentido y este ion no puede estar en equilibrio y
tenderá a desplazarse en el sentido de ambas fuerzas

[X+]
RT B
VA-VB= zF ln +
[X ]A
 La diferencia de potencial electroquímico para un soluto X a
través de una membrana es un parámetro útil porque
permite predecir si X se encuentra en equilibrio (Δµ=0) a
ambos lados de la membrana de una célula, o no

Mientras el movimiento de X no esté acoplado al movimiento

de otro soluto o de alguna reacción química, el único factor
que determina la dirección del movimiento es Δµ

La habilidad de predecir el movimiento de X es

independiente de cualquier conocimiento detallado de
cómo está ocurriendo este movimiento. En otras palabras
podemos entender la energética del transporte sin conocer
el mecanismo de transporte
TRANSPORTE DE SOLUTOS A
TRAVES DE LA MEMBRANA
DIFUSION SIMPLE

No hay gasto de energía

• Es el mecanismo más simple de transporte a través de la bicapa lipídica
• Consiste en el paso de una sustancia no cargada eléctricamente
• El flujo de la sustancia no cargada es directamente proporcional a su diferencia
de concentración a ambos lados de la membrana. Indica cuán rápido de moverá
a favor de su gradiente de concentración (moles/cm2.s)
• PX es un parámetro que indica capacidad de X de disolverse y moverse en la
membrana y el ancho de la membrana.

Flujo neto
JX = Px([X]e - [X]i)

JX = Px(o) se detiene el flujo

[X]e > [X]i

I E

[X]e = [X]i
J = P([X]e – [X]i)
TRANSPORTE MEDIADO
 Debido a que la mayoría de los iones y solutos
hidrofílicos de interés biológico tienen un
coeficiente de partición muy bajo dentro de la
bicapa lipídica (capacidad de disolverse en la
membrana), la difusión simple de estos solutos es
despreciable

Por lo tanto su transporte requiere de rutas

especializadas que permitan su paso a través de
membrana. Estas rutas están formadas por
proteínas integrales de la membrana
Se reconocen tres tipos de rutas mediadas
por proteínas integrales de membrana

POROS

CANALES

TRANSPORTADORES
 POROS

La proteína de membrana forma un poro que está siempre abierto.

No es selectivo, moléculas hasta 45kDa.

Ejm: Porinas en la membrana externa de la mitocondria, perforinas
citotoxinas secretadas por los linfocitos, acuaporinas en el tejido
renal.
 Porinas
Perforinas
Acuaporinas

Gradiente de Se encuentran
concentración siempre abiertos

Espacio Espacio
extracelular intracelular
CANALES

La proteína de membrana forma un canal que oscila entre una

forma cerrada y una abierta, esta equipado de una compuerta
movible.

Son selectivos y tiene sensores para abrir o cerrar la

compuerta
Ejm: canales de Na+, K+, Ca2+, Cl-
 Canal abierto

Canal cerrado
TRANSPORTADORES

Transportadores Transportadores
Pasivos Activos

Activos Secundarios Activos Primarios

Transportadores
Pasivos
La proteína de membrana forma un transportador que rodea
un conducto que nunca ofrece un camino continuo. Está
equipado con sitios de unión para el soluto.
Ejm: el transportador de glucosa, el de aminoácidos, fosfato,
oxalato
 Transportadores
Activos

Activos Secundarios
 La diferencia de potencial
electroquímico representa la
energía libre disponible para
realizar el trabajo útil de
transportar una molécula a
través de la membrana
En el transporte activo secundario, la
fuerza motriz proviene del
acoplamiento entre el movimiento de
un soluto “cuesta abajo” (tiene una
diferencia de potencial electroquímico
favorable), con el movimiento de un
soluto “cuesta arriba” (tiene una
diferencia de potencial electroquímico
desfavorable)
 COTRANSPORTE

-
 CONTRATRANSPORTE

-
Transportadores
Activos

Activos Primarios
El soluto es transportado “cuesta arriba”,
a través de una membrana, en contra de
un gradiente electroquímico

En el transporte activo primario, la fuerza

motriz, para la transferencia neta de un soluto,
en contra de su gradiente electroquímico,
proviene de la energía liberada por la hidrólisis
del ATP, por eso se llama transporte activo
primario.
ATP ADP
La bomba de Na-K
 3 Na+
Potencial de membrana
+ + -50 a -70 mV
+ + +
+
+ +
+
- - - - +
+ -- ATP → ADP + P
- -- ++ +
+ - i
+ -
+ - -- ++
+ -
+ - +
-- ++
+ - 2K -- ++
+ -
+
+ -- - ++
+ - - +
+ - -- +
+ -
+ - +
Intracelular [K ] = 140 mM
--- ++
+
+ -
+ - [Na+]= 12 mM - ++
+ - - - - -
+
+ - - - - - - - - - - - - - - - +
+
+ + + + ++ + + ++ + + + + ++ + + + + + + +
Extracelular [K+] = 4 mM
[Na+]= 145 mM
 Resumen

• Estructura y composición de las membranas biológicas

(porqué se forman)

• Potencial electroquímico, potencial en reposo de la

membrana

• Transporte de moléculas a través de la membrana

(difusión simple, poros, canales y transportadores)