Imunofluorescência

É uma técnica amplamente utilizada para detecção ou localização de

antígenos em tecidos ou células a partir de uma marcação com anticorpos
conjugados a uma molécula fluorescente, de modo que a localização do antígeno
se torne visível ao microscópio de fluorescência.
Fluorocromo
Fluorocromos são substâncias que absorvem luz ultravioleta e emite luz
visível, ou seja, fica fluorescente. Existem vários tipos de fluorocromo, porem os
mais utilizados para a conjugação com anticorpos são Fluresceína e Rodamina.
Imunofluorescência Direta

• É colocado apenas um anticorpo e esse é conjugado ao fluorocromo,

ou seja, o antígeno é detectado diretamente pelo anticorpo primário.
Se o Ac é específico para o Ag, ocorre a formação do complexo que
é visualizado pela fluorescência.
• Utilização da técnica: muito usada para a detecção direta de
microrganismos em secreções, na urina, nas fezes, em cortes de
tecidos etc. Também bastante utilizada na fenotipagem de células
tumorais.
Imunofluorescência Indireta
A reação da imunofluorescência indireta, ou técnica de dupla camada, é
realizada por antígenos fixados em uma lâmina, onde se aplica primeiro um
anticorpo específico não fluorescente. E por último coloca-se um anticorpo
fluorescente com especificidade marcada contra determinantes antigênicos do
primeiro anticorpo utilizado para reagir com o antígeno. Esta técnica apresenta
como vantagem à possibilidade de se ter uma fluorescência mais evidente, pelo
fato do anticorpo fluorescente se ligar apenas aos anticorpos primários.
Utilização da técnica: a imunofluorescência indireta é muito usada para o
diagnóstico sorológico de várias doenças infecciosas
Métodos Imunológicos

 São técnicas utilizadas para a detecção ou quantificação de antígenos ou

anticorpos, tem sido amplamente utilizados devido a rapidez, simplicidade
de execução, possibilidade de automação e baixo custo operacional.
 Podem fornecer informações importantes para o diagnóstico e cuidado
clínico de pacientes, sendo de extrema importância no diagnóstico de
doenças relacionadas com o envolvimento direto do sistema imune.
 Os imunoensaios são técnicas para a detecção ou quantificação de
antígenos ou anticorpos.
 Nas últimas décadas os imunoensaios se tornaram a tecnologia padrão em
medicina laboratorial.
 Os métodos imunológicos diretos ou indiretos têm sido amplamente
utilizados devido a rapidez, simplicidade de execução, possibilidade de
automação e baixo custo operacional.
 Podem fornecer informações importantes para o diagnóstico e cuidado
clínico de pacientes, sendo de extrema importância no diagnóstico de
doenças relacionadas com o envolvimento direto do sistema imune.
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