UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA I

CARRERA: Bioquímica FECHA DE ELABORACIÓN DE PRÁCTICA:

NOMBRES Y APELLIDOS
Clínica 14/04/2019
Melissa Acosta GRUPO: 2 FECHA DE ENTREGA DE INFORME: 21/04/2019
Diana Carrera
Juan Carlos Martínez
María José Navarrete DÍA/ HORA: lunes 12:00-14:00
Joyce Pazmiño
Karen Ruiz

TEMA: PRÁCTICA N°1

ANÁLISIS TOXICOLÓGICO
1. OBJETIVOS:
Conocer cómo se desarrolla la toxicología forense y en dónde están ubicados las diferentes
locaciones de un laboratorio clínico en el ecuador según el INSPI.

2. CUESTIONARIO
 Realice un resumen sobre la información que consta Registro Oficial No. 318 - Policía
Judicial Ecuador y como se desarrolla con la toxicología forense. (2,5 puntos)
El Registro oficial Nº 318, de la Policía Judicial, habla sobre los manuales, protocolos, instructivos
y formatos del sistema especializado integral de investigación de Medicina Legal y Ciencias
Forenses, documentos utilizados para cumplir una las funciones de la Fiscalía General del Estado
como es la investigación preprocesal y la procesal penal, para lo cual se han emitido todo tipo de
directrices que permitan el correcto funcionamiento de este organismo. Los manuales se
subdividen en varias áreas, como el área de Ciencias Forenses, el área de Medicina Legal y el
área de la Cadena de Custodia.

Los pertenecientes al área de Ciencias Forenses pasan desde el manual de bioseguridad, hasta
todo tipo de protocolos con procedimientos que permitan establecer metodologías para la
correcta obtención de muestras, métodos de histopatología, descripción macroscópica de piezas
anatómicas, estudio de diatomeas obtenidas de cadáveres, radiología forense, además de
manuales de química y toxicología forense, donde se involucran protocolos de actuación en
experticias en química forense, recepción de muestras en el laboratorio, procedimientos para la
detección de alcohol metílico y etílico en licores y fluidos corporales, identificación y análisis de
productos incautados de los que se presume contienen sustancias sujetas a fiscalización,
además de detección de drogas en orina, identificación de tóxicos orgánicos, como plaguicidas
organofosforados y organoclorados, además de manuales de procedimientos para el laboratorio
de ADN humano, y laboratorio de biología forense, donde se puede encontrar los procedimientos
para la obtención de muestras en un soporte sólido, identificación de espermatozoides, sangre,
saliva, orina y gonadotropina crónica humana (HCG).

Dentro de los documentos del área de medicina Legal están los instructivos para peritajes
forenses, pericia social forense, formatos de informes de extracción de audio, videos y otros
materiales multimedia, al igual que el de pericia social y los de desarrollo y solicitud de diligencias
judiciales en cámaras de Gesell entre otros. Por su parte dentro del área de Cadena de Custodia
se encuentran los instructivos de procedimientos para el manejo de bienes o piezas de patrimonio
cultural, indicios hidrocarburíferos, de vehículos y maquinaria pesada, evidencia digital, joyas y
piedras preciosas, toma de muestras biológicas, muestras y pruebas de sustancias sujetas a
fiscalización, papel moneda, explosivos, sustancias perecibles además del protocolo del centro
de acopio vehicular (Del Pozo, 2014).

Es así, que la toxicología se relaciona muy estrechamente con aspectos legales de índole penal,
puesto que los principios de esta ciencia pueden ayudar a determinar sustancias en organismos
vivos o muertos que han estado presentes en sucesos con consecuencias legales, para
determinar si un acontecimiento puede ser catalogado como delito o no. Por ello, dentro de los
manuales del Sistema Especializado Integral de Investigación, Medicina Legal y Ciencias
Forenses, se encuentra el enfocado en las áreas de Química y Toxicología; el cual contiene
protocolos y procedimientos para la obtención, procesamiento y análisis de las diferentes
muestras forenses, así como, el formato de presentación de informes periciales. (Del Pozo, 2014)

Tomando como base la Constitución de la República del Ecuador, el Código Orgánico Integral
Penal y haciendo énfasis en el ámbito toxicológico, este manual busca estandarizar y optimizar
los procesos en relación a la Toxicología Forense. Manual en el que se detalla la correcta toma
de muestras, conservación y envío (tanto para autopsias como muestras de individuos vivos) para
el correspondiente análisis toxicológico. (Del Pozo, 2014)

El análisis químico toxicológico realizado por el analista está sujeto a los protocolos y
procedimientos técnicos establecidos para cada tipo de identificación toxicológica; por ejemplo,
alcohol etílico y metílico en sangre, humor vítreo y orina, drogas de abuso, medicamentos, gases
tóxicos, plaguicidas y metales pesados. (Del Pozo, 2014)

Para la identificación de tóxicos orgánicos como alcaloides, drogas depresoras y alucinógenas,

marihuana, cocaína, benzodiacepinas, plaguicidas (organofosforados, organoclorados),
carbamatos, piretroides, en muestras biológicas (contenido gástrico, orina y sangre) la técnica de
preferencia es la cromatografía de capa fina. Para cuantificar los metabolitos se utiliza la técnica
de Cromatografía de líquidos/gases con espectrometría de masas. En fin, dentro de este manual
están descritos a detalle todos los protocolos, procedimientos y factores que se deben tener en
cuenta para el análisis toxicológico de cada una de estas sustancias. (Del Pozo, 2014)
 Indague la cartera de servicios del Centro de Referencia Nacional del INSPI describa en detalle, en donde se encuentran
ubicados los laboratorios y que tipo de ensayos realizan, muestras utilizadas y equipamiento (2,5 puntos)
Cartera de servicios del INSPI
Centros de
Ciudad Referencia Pruebas / Ensayos Metodología Tipo de muestra Equipamiento
Nacional
Método de las
Pruebas de sensibilidad a proporciones de
Guayaquil Micobacterias Cepa Incubadora
drogas Canetti, Rist y
Grossett
Identificación de
Pruebas bioquímicas
Guayaquil Micobacterias micobacterias Cepa Incubadora
de tipificación
(tipificación)
Guayaquil /
Control de calidad de Relectura de láminas
Quito / Micobacterias Láminas de baciloscopias Microscopio óptico
láminas TB por microscopía
Cuenca
Recuento linfocitos T Sangre total con
Inmunohematolo CD4+ anticoagulante EDTA (la
Guayaquil gía y Bioquímica Citometría de flujo muestra se debe recibir Citómetro de flujo
Recuento linfocitos CD3,
Clínica hasta 24 horas después de
CD4, CD8; CD4/CD8)
realizada la toma)
Drogas alcalinas (cocaína, Sangre total y muestra
Guayaquil / anfetaminas, barbitúricos, forense Placa y equipo para
Cromatografía en
Quito / Toxicología benzodiacepinas, cromatografía en capa
escopolamina, derivados del capa fina
Cuenca Orina fina
opio: heroína y morfina)
Guayaquil / Placa y equipo para
Drogas ácidas Cromatografía en
Quito / Toxicología Orina cromatografía en capa
(marihuana) capa fina
Cuenca fina
Plaguicidas Sangre total y muestra
Guayaquil / (organofosforado, Cromatografía en forense Placa y equipo para
Quito / Toxicología organoclorado, capa fina / Análisis Orina cromatografía en capa
Cuenca carbamato, cumarínico, químico cualitativo Contenido gástrico fina
piretroide, bipiridilo) Agua
Enviadas: sangre con EDTA
Guayaquil /
Alcoholes (etílico y Microdifusión y Tomadas: sangre total y Cámara de Conway
Quito / Toxicología
metílico) espectrofotometría UV muestra forense Espectrómetro UV/Visible
Cuenca
Bebidas alcohólicas
Guayaquil / Enviadas: Sangre con EDTA
Quito / Toxicología Hidrocarburos Microdifusión Tomadas: sangre total y Cámara de Conway
Cuenca muestra forense
Guayaquil / Sangre total
Marcha analítica y
Quito / Toxicología Metales pesados: plomo Orina Espectrómetro UV/Visible
espectrofotometría UV
Cuenca Agua
Guayaquil /
Gases: Espectrofotometría Sangre total y muestra
Quito / Toxicología Espectrómetro UV/Visible
Carboxihemoglobina UV forense
Cuenca
OMD de la muestra
fresco: KOH, Azul de
Micosis oportunistas:
Guayaquil / lactofenol y Técnicas Sangre, líquidos biológicos
Micología Candidosis (Candida)
Cuenca de tinción estériles, secreción e vías
Criptococosis
especializadas: respiratorias bajas (esputo,
(Cryptococcus)
Wright, Giemsa esputo inducido, lavado
Neumocistosis Incubadora
Cultivo general para bronquial, lavado
(Pneumocystis)
hongos y cultivo bronquioalveolar, aspirado
Hialohifomicosis
específico para traqueal), biopsias, médula
Guayaquil Micología (Aspergillus, Penicillium,
cándida (ChromAgar) ósea, material purulento.
Scopulariopsis)
, Pruebas bioquímicas
y cromogénicas
Kit ELISA
Detección de anticuerpos
Guayaquil / Lectores ELISA
contra Trypanosoma Métodos indirectos:
Quito / Parasitología Suero ó plasma (espectrofotómetro)
cruzi (Enfermedad de ELISA – HAI - IFI
Cuenca Equipo para HAI
Chagas)
Equipo para IFI
Identificación por
métodos directos del Métodos directos:
Guayaquil / Gota fresca, gota
Parasitología parásito Trypanosoma Sangre Microscopio óptico
Cuenca gruesa y extendido,
cruzi (Enfermedad de
MicroStrout
Chagas)
Kit ELISA
Detección de anticuerpos Métodos indirectos
Lectores ELISA
Guayaquil / contra Toxoplasma (Anticuerpos): ELISA
Suero o plasma (espectrofotómetro)
Quito / Parasitología gondii e Identificación – HAI
Ganglios Microscopio óptico
Cuenca directa del parásito en Método directo:
Microscopio de
ganglios (Toxoplasmosis) Fresco
fluorescencia
Guayaquil / Detección de anticuerpos Kit ELISA
Método indirecto:
Quito / Parasitología contra Entamoeba Suero Lectores ELISA
ELISA
Cuenca histolytica (Amebiosis) (espectrofotómetro)
Detección de anticuerpos
Guayaquil Parasitología contra Fasciola hepática Método directo: fresco Heces Microscopio óptico
(Fasciolosis)
Detección de anticuerpos Kit ELISA
Guayaquil / Método indirecto:
Parasitología contra Cysticercus Suero Lectores ELISA
Quito ELISA
cellulosae (Cisticercosis) (espectrofotómetro)
Detección de anticuerpos Kit ELISA
Guayaquil / Método indirecto:
Parasitología contra Echinococcus Suero Lectores ELISA
Cuenca ELISA
granulosus (Hidatidosis) (espectrofotómetro)
Identificación indirecta de
Método directo:
Guayaquil Parasitología Angiostrongylus LCR Microscopio óptico
Fresco
cantonensis
Guayaquil / Identificación de
Tejido de úlcera mediante
Quito / Parasitología Leishmania sp. Método directo: frotis Microscopio óptico
raspado
Cuenca (Leishmaniasis)
Retrovirus,
Herpesvirus (Herpes
hepatitis y otros
Guayaquil / simple 1-2, Varicela Suero sanguíneo, LCR,
virus de PCR Nested multiplex Termociclador
Cuenca Zosterm Citomegalovirus, tejidos (biopsias o necropsia)
transmisión
Herpes 6 y Epstein Barr)
sexual
Retrovirus,
hepatitis y otros
Cuantificación de carga
Guayaquil virus de PCR en tiempo real Plasma sanguíneo Termociclador
viral de VIH-1
transmisión
sexual
Meningitis y Neumonías
Confirmación, pruebas
Bacterianas (cepa de
de susceptibilidad
Streptococcus
Guayaquil / (Concentración Incubadora
Bacteriología pneumoniae, Neisseria Cepas
Cuenca mínima inhibitoria, Antibiograma
meningitidis y
CMI) y serotipificación
Haemophilus
de cepas
influenzae)
Identificación de Difteria Cultivo, Prueba de
Guayaquil / (Corynebacterium toxigenicidad y Cepa / Hisopado Incubadora
Bacteriología
Cuenca diphtheriae, Pruebas de Amigdalítico o faríngeo Antibiograma
Corynebacterium spp.) susceptibilidad (CMI)
 Identificación y Cultivo, Pruebas de
Incubadora
Guayaquil Bacteriología confirmación de susceptibilidad y Cepas
Antibiograma
Salmonellas spp. serotipificación
Identificación y
Cultivos y pruebas de
confirmación de
susceptibilidad
Neisseria gonorrhoeae Incubadora
Guayaquil Bacteriología antimicrobiana (CMI, Cepas
Resistencia a los Antibiograma
Técnica Gold
antimicrobianos
Estándar)
consensuados
Cultivos y pruebas de
Identificación de susceptibilidad
Incubadora
Guayaquil Bacteriología Staphylococcus aureus antimicrobiana (CMI, Cepas
Antibiograma
Vancomicina resistente Técnica Gold
Estándar)
Guayaquil / Influenza y otros Hisopado nasal, aspirado
Subtipificación de AH1N1
Quito / virus qRT-PCR nasofaríngeo/traqueal, Termociclador
PDM
Cuenca respiratorios lavado broncoalveolar
Guayaquil / Influenza y otros Hisopado nasal, aspirado
Quito / virus Subtipificación de AH1N1 qRT-PCR nasofaríngeo/traqueal, Termociclador
Cuenca respiratorios lavado broncoalveolar
Guayaquil / Influenza y otros Hisopado nasal, aspirado
Tipificación de Influenza Microscopio de
Quito / virus Inmunofluorescencia nasofaríngeo/traqueal,
tipo B fluorescencia
Cuenca respiratorios lavado broncoalveolar
Guayaquil / Influenza y otros Hisopado nasal, aspirado
Detección de antígenos Microscopio de
Quito / virus Inmunofluorescencia nasofaríngeo/traqueal,
de adenovirus fluorescencia
Cuenca respiratorios lavado broncoalveolar
Guayaquil / Virus Kit ELISA
Quito / exantemáticos y Rotavirus ELISA Heces Lectores ELISA
Cuenca gastroentéricos (espectrofotómetro)
Suero
Guayaquil / Virus Kit ELISA
ELISA, IgM-IgG Hisopado-Nasofaríngeo
Quito / exantemáticos y Rubeola Lectores ELISA
Pruebas diferenciales Orina o sedimentado de
Cuenca gastroentéricos (espectrofotómetro)
orina
Suero
Guayaquil / Virus Kit ELISA
ELISA IgM-IgG Hisopado-Nasofaríngeo
Quito / exantemáticos y Sarampión Lectores ELISA
Pruebas diferenciales Orina o sedimentado de
Cuenca gastroentéricos (espectrofotómetro)
orina
Guayaquil /
Detección de antígenos Inmunofluorescencia Hallazgos de necropsia Microscopio de
Quito / Zoonosis
de rabia directa (encéfalo) fluorescencia
Cuenca
 Guayaquil / Dengue y otros Kit ELISA
Quito / virus trasmitidos Chikungunya IgM, IgG ELISA Suero sanguíneo Lectores ELISA
Cuenca por vectores (espectrofotómetro)
Guayaquil / Dengue y otros Kit ELISA
Quito / virus trasmitidos Dengue IgM, IgG ELISA Suero sanguíneo Lectores ELISA
Cuenca por vectores (espectrofotómetro)
Dengue y otros Kit ELISA
Guayaquil virus trasmitidos Zika IgM ELISA Suero sanguíneo y LCR Lectores ELISA
por vectores (espectrofotómetro)
Confirmación de
Guayaquil / Pseudomonas
CMI, PCR / Incubadora
Quito / RAM aeruginosa resistente a Cepa en cultivo puro
Secuenciación Termociclador
Cuenca los carbapenémicos /
Colistin
Sangre total con
Inmunohematolo anticoagulante EDTA (la
Quito / Recuento Linfocitos T
gía y Bioquímica Citometría de Flujo muestra se debe recibir Citómetro de flujo
Cuenca CD4+
Clínica hasta 24 horas después de
realizada la toma)
Identificación morfológica
de mosquitos de la
subfamilia Culicidae y
Anophelinae: Vectores Identificación
Quito Vectores de las enfermedades: mediante claves Artrópodos Observación directa
Dengue, Chikungunya, Zika, taxonómicas
Malaria, Fiebre amarilla,
Encefalitis, West Nile Virus,
Mayaro y malaria
Identificación morfológica
de chinches de la Identificación
Quito Vectores subfamilia Triatominae, mediante claves Artrópodos Observación directa
vectores de la taxonómicas
enfermedad de Chagas.
Identificación molecular
triple de arbovirus: Virus
PCR en tiempo real
Quito Vectores del dengue; Virus de Artrópodos Termociclador
(multiplex)
Chikungunya y Virus del
Zika; en insectos vectores
Tinción Ziehl-Neelsen Muestras pulmonares y
Cuenca Micobacterias Baciloscopia Microscopio óptico
Microscopía directa extrapulmonares
(INSPI, 2018)
 Describa que es la microdifusión (2,5 puntos)
Esta palabra hace referencia al método de microdifusión de Conway, pues en dicho proceso se
utiliza una cámara cerrada que permite la identificación de ciertas sustancias a volatilización. El
equipo está formado de dos cámaras en donde la muestra se coloca en el compartimiento externo
junto con un agente liberante, mientras que el compartimiento interno cuenta con un agente
fijador. La muestra se calienta a ebullición dependiendo del analito y una corriente de gas pasa
de la parte externa a la interna generándose una tensión entre ambas cámaras. El componente
absorbido en la parte interna podrá ser examinado por titulación, fotocolorimetría, etc (SERRANO
& VÉLEZ, 2011)(Fernández Ñ., 2017)

 Describa en que consiste la derivatización en toxicología (2,5 puntos)

Es una técnica que consiste en transformar un compuesto químico en un producto que tenga
similar estructura química. Generalmente se utiliza la derivatización en compuestos o mezclas
antes de su análisis para mejorar la eficacia y detectabilidad analítica del compuesto. La
derivatización altera las propiedades físico-químicas de cualquier fármaco con el fin de mejorar
la calidad de la metodología analítica, dando como resultado una mejor estabilidad química,
selectividad analítica y sensibilidad (Sternson, 1987)

3. BIBLIOGRAFÍA
INSPI. (2018). Cartera de Servicios del INSPI Actualizada. Retrieved April 21, 2019, from
http://www.investigacionsalud.gob.ec/wp-content/uploads/2019/02/Cartera-de-Servicios-
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Del Pozo, H. (2014). MANUALES, PROTOCOLOS, INSTRUCTIVOS Y FORMATOS DEL
SISTEMA ESPECIALIZADO INTEGRAL DE INVESTIGACIÓN MEDICINA LEGAL Y
CIENCIAS FORENSES.
Fernández Ñ., J. (2017). El método de microdifusión de Conway. Su aplicación en el dosaje de
amoniaco, urea y nitrógeno no protéico. Anales de La Facultad de Medicina.
https://doi.org/10.15381/anales.v39i4.10747
SERRANO, M., & VÉLEZ, M. (2011). “Comparacion De Valores De Alcohol Etilico En Muestras
De Sangre Y Humor Vitreo En Cadaveres De La Morgue Del Hospital Vicente Corral
Moscoso,” 1–85. Retrieved from
http://dspace.ucuenca.edu.ec/bitstream/123456789/2438/1/tq1078.pdf
Sternson, L. A. (1987). The application of chemical derivatization to clinical drug analysis.
Xenobiotica, 17(3), 385–396. https://doi.org/10.3109/00498258709043946
4. ANEXOS