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Instituto de Bioquímica
UACH
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Pr of
Las miosinas son
una familia de Myosin II
proteínas motrices heavy
que se desplazan a chain
motor
lo largo de hebras α-helical domains
de actina al coiled coil light
chains
hidrolizar ATP.
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Otros tipos de
miosina: Myosin II
heavy
Miosina I solo chain
motor
tiene una cadena α-helical domains
coiled coil light
pesada, con una chains
cola corta & 2 o
single
más cadenas motor
livianas en el Myosin I domain
cuello.
Miosina V tiene 2 cadenas pesadas como miosina II, y
cadenas livianas de calmodulina en el cuello. Pero
miosina V tiene una región coiled-coil corta, seguida por
un dominio globular al final de cada cadena pesada.
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Las colas de las miosinas I & V unen membranas.
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Pr of (+) actin (−)
myosin
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Solo las cabezas de miosina son necesarias para el
movimiento sobre actina. Esto de comprobó por
microscopía fluorescente.
Cabezas de miosina, obtenidas por proteólisis, fueron
purificadas y fijadas en portaobjetos de vidrio.
Filamentos de actina, marcados con rodamina-faloidina,
fueron observados al desplazarse sobre las cadenas de
miosina. Este movimiento requiere la hidrólisis de
ATP.
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Pr of
Las cabezas de miosina II interactúan con filamentos de
actina mediante el siguiente ciclo de reacción:
! La unión del ATP a la miosina causa un cambio
conformacional que permite a la miosina despegarse
de la actina.
! El sitio activo se cierra y la hidrólisis del ATP
resultante permite a la miosina cambiar de
conformación y unir débilmente a la actina.
! La liberación del Pi causa un cambio conformacional
mayor en la miosina, con mayor afinidad por la actina
y el desplazamiento neto del filamento por sobre la
cabeza de miosina.
! La liberación del ADP deja a la actina fuertemente
unida a actina. En la ausencia de ATP esto resulta en
rigidez muscular conocida como rigor.
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El movimiento de la miosina V sobre filamentos
de actina es procesivo, consistente con el rçpapel
de esta miosina en transportar organelos a lo largo
de filamentos de actina.
Las cabezas de miosina V trabajan en forma
sincronizada, y solo se despegan de actina cuando
la otra cabeza se ha unido a otro filamento de
actina
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Pr of
El ATP se une a la cabeza de
PDB1B7T
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El sitio de unión a Myosin
head & neck
nucleótidos está adyacente a PDB 1B7T
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Ca++ regula la interacción actina-miosina de varios
modos, en distintos tejidos y organismos:
! Algunas miosinas están reguladas por unión de Ca++
a las cadenas livianas de calmodulina en la región del
cuello
! Algunas miosinas están reguladas por fosforilación
de las cadenas livianas, catalizada por quinasas
dependientes de Ca++ o una quinasa activada por
GTPasas pequeñas.
! El complejo de tropomiosina-troponina (similar a
calmodulina) regula la interacción actina-miosina en
el músculo esqueletal.
! Caldesmon, una proteína regulada por fosforilación y
e
Ca++, controla la interacción actina-miosina en el
músculo liso.
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Pr of
La estructura del
sarcómero
(+) actin (−)
muscular se basa myosin
en esta organización
de miosina-actina. (−) actin (+)
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Miosinas I & V, que se unen a membranas,
supuestamente participan en:
! movimiento de organelos sobre fibras de actina,
especialmente en la corteza celular.
! movimientos de la membrana plasmática relativos a
filamentos de actina.
Miosinas I & V están asociadas con membranas del
Golgi, que produce vesículas secretorias y vesículas
sinápticas.
! En levadura, mutaciones del gen de miosina V altera
la secreción de proteínas.
! La células cerebrales son ricas en miosina V.
Mutaciones en miosina V en ratones producen
defectos en la transmisión sináptica.
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Pr of
! Las microvellosidades del epitelio intestinal
contienen paquetes de filamentos de actina, que
proveen rigidez.
Miosina I, asociada a la membrana plasmática
puede estar involucrada en arrastrar la membrana
sobre los filamentos de actina, ya que estos crecen
por adición de monómeros de actina por la punta.
! Una proteína similar a miosina está involucrada en
la circulación del citoplasma alrededor de la
vacuola central en en alga Nitella. Filamentos de
actina se encuentran en esta zona.
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Movimiento ameboide: Leading edge of an ameboid cell
El extremo delantero de una
célula en movimiento es el − myosin I +
lamelipodio.
La extensión del lamelipodio Arp2/3
es generada por
polimerización de la actina. actin-ADP
Los lamelipodios contienen
una red de filamentos de actin-ATP
actina bifurcados.
Sus extremos positivos están orientados hacia la membrana
plasmática. Múltiples proteínas participan junto con actina
en el avance de los lamelipodios.
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Su presencia ha sido demostrada por marcación fluorescente
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en el extremo de los lamelipodios.
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Pr of Leading edge of an ameboid cell
Profilina, que facilita el
intercambio ADP/ATP por − myosin I +
actina-G, para producir la
forma ATP polimerizable,
Arp2/3
se localiza en el extremo
de ataque en un célula que actin-ADP
avanza.
actin-ATP
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Various proteínas Leading edge of an ameboid cell
involucradas en cross-
linking de actina − myosin I +
estabilizan estos filamentos
en lamelipodios. Arp2/3
Marcación por pulso y caza
actin-ADP
ha demostrado que estos
filamentos de actina son actin-ATP
estables mientras que el
lamelipodio que avanza pasa mas allá de estos, para luego
desmantelarse después del avance del borde de la célula.
Miosina I, que se une a la membrana plasmática, tira de la
membrana mientras que avanza hacia el extremo positivo de
los filamentos de actina crecientes.
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Pr of
Cofilina participa en la depolimerización de los filamentos
de actina detrás del borde de avance del lamelipodio.
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Señalización en el movimiento ameboide:
Proteínas de la familia de Rho que unen GTP, en particular
Rac1 & Cdc42, activan WASP, que a su vez activa Arp2/3
para nuclear polimerización de actina en el borde de avance.
La hidrólisis de PIP2 por fosfolipasa C (activada por una
cascada de señalización), resulta en el aumento local de
profilina, cofilina, gelsolina y Ca++ (debido a la producción de
IP3).
Indicadores fluorescentes de Ca++ libre han indicado que:
! [Ca++] citosólico es máxima detrás de una célula que
avanza, donde puede activar la interacciones entre actina y
miosina II.
! [Ca++] citosólico es relativamente baja en el extremo que
avanza, donde el movimiento ocurre principalmente por
ensamblaje de filamentos de actina.
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Pr of
Resumen del movimiento ameboide.
Ameboid movement
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