UNIVERSIDAD NACIONAL HERMILIO VALDIZÁN-HUÁNUCO

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS

ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE AGRONOMÍA

SECCIÓN – HUACRACHUCO

BIOLOGIA

TEMA : el microscopio

DOCENTE : Ing. , yofre.

ALUMNOS : ROCA LOPEZ, Kelly

SEMESTRE : I

Huacrachuco, junio del 2012

 I._ Dedicatoria

Este trabajo lo realice con mucho entusiasmo y esmerándome para poder aprender
Buenos conocimientos sobre este tema sabiendo que es muy importante
En beneficio para mi aprendizaje así mismo dicho trabajo le dedico
Con mucho aprecio a mis queridos padres
 II._ Presentación
El microscopio es muy importante para el uso y el estudio en el campo de la ciencia y investigación de los seres
vivos que no se pueden ver a simple vista.
El ser humano posee el sentido de la vista desarrollado. Sin embargo, no se pueden ver a simple vista cosas que
midan menos de una décima de milímetro. Y muchos de los avances en química, biología y medicina no se
hubieran logrado si antes no se hubiera inventado el microscopio.
El primer microscopio fue inventado, por una casualidad en experimentos con lentes, lo que sucedió de similar
manera pocos años después con el telescopio de Hans Lippershey (1608). Entre 1590 y 1600, el óptico holandés
Zacharías Janssen (1580-1638) inventó un microscopio con una especie de tubo con lentes en sus extremos, de
8 cm. de largo soportado por tres delfines de bronce; pero se obtenían imágenes borrosas a causa de las
lentes de mala calidad. Estos primeros microscopios aumentaban la imagen 200 veces. Estos microscopios
ópticos no permiten agrandar la imagen más de 2000 veces. En la actualidad los de efecto túnel los amplían 100
millones de veces.

A partir del descubrimiento del microscopio por Van Leeuwenhoek, se inició el estudio de las funciones celulares
que podían ser observadas con este instrumento, la división de las células por ejemplo. El descubrimiento del
microscopio abrió la posibilidad de observar objetos muy pequeños y tuvo a la vez el mérito enorme de haber
estimulado la curiosidad de los humanos por conocer más sobre las propiedades y características de tejidos y
células.
 III._ Objetivos
3.1.) Objetivos generales
 Conocer el uso y cuidado del microscopio.
 Obtener una imagen aumentada de objetos minúsculos o detalles muy pequeños de los mismos.
 Identificar los distintos tipos de patógenos (virus bacterias).
 Facilitar la visualización de las células.
 Facilita el estudio, sobre todo el campo de la ciencia.

3.2.) Objetivos específicos

 Identificar las diversas partes que componen un microscopio compuesto y señalar el funcionamiento
de cada una de ellas.
 permite determinadas aplicaciones diagnósticas.
 se utilizan para estudiar especímenes delgados.
 se utilizan para examinar cultivos.
 IV._ Materiales
bibliografía
internet

V._ Contenidos
5.1.) Microscopio
El microscopio (de micro- pequeño, y scopio-observar) es un instrumento que permite observar objetos que
son demasiado pequeños para ser vistos a simple vista. El tipo más común y el primero que se inventó es el
microscopio óptico. Se trata de un instrumento óptico que contiene dos o más lentes que permiten obtener una
imagen aumentada del objeto y que funciona por refracción. La ciencia que investiga los objetos pequeños
utilizando este instrumento se llama microscopio.

5.2.) Tipos de microscopios

Existen diversas clases de microscopios, según la naturaleza de los sistemas de luz, y otros accesorios
utilizados para obtener las imágenes.

Utiliza lentes para ampliar las imágenes de los objetos observados. El aumento obtenido con estos microscopios
es reducido, debido a la longitud de onda de la luz visible que impone limitaciones. El microscopio óptico puede
ser monocular, y consta de un solo tubo. La observación en estos casos se hace con un solo ojo. Es binocular
cuando posee dos tubos. La observación se hace con los dos ojos. Esto presenta ventajas tales como mejor
percepción de la imagen, más cómoda la observación y se perciben con mayor nitidez los detalles.

5.2.1.) MICROSCOPIO COMPUESTO U ÓPTICO

Un microscopio óptico es un microscopio basado en lentes ópticos. También se le conoce como microscopio
de luz, (que utiliza luz o "fotones") o microscopio de campo claro. El desarrollo de este aparato suele
asociarse con los trabajos de Anton van Leeuwenhoek. Los microscopios de Leeuwenhoek constaban de una
única lente pequeña y convexa, montada sobre una plancha, con un mecanismo para sujetar el material que se
iba a examinar (la muestra o espécimen). Este uso de una única lente convexa se conoce como [da], en el que
se incluye la lupa, entre otros aparatos ópticos.
Historia

 1608 Zacharias Jansen construye un microscopio con dos lentes convergentes.

 1611 Kepler sugiere la manera de fabricar un microscopio compuesto.
 1665 Robert Hooke utiliza un microscopio compuesto para estudiar cortes de corcho y describe los
pequeños poros en forma de caja a los que él llamó "células". Publica su libro Micrographia.
 1674 Leeuwenhoek informa su descubrimiento de protozoarios. Observará bacterias por primera vez 9
años después.
 1828 W. Nicol desarrolla la microscopía con luz polarizada.
 1838 Schleiden y Schwann proponen la teoría de la célula y declaran que la célula nucleada es la
unidad estructural y funcional en plantas y animales.
 1876 Abbé analiza los efectos de la difracción en la formación de la imagen en el microscopio y
muestra cómo perfeccionar el diseño del microscopio.
 1881 Retzius describe gran número de tejidos animales con un detalle que no ha sido superado por
ningún otro microscopista de luz. En las siguientes dos décadas él, Cajal y otros histólogos desarrollan
nuevos métodos de tinción y ponen los fundamentos de la anatomía microscópica.
 1886 Carl Zeiss fabrica una serie de lentes, diseño de Abbé que permiten al microscopista resolver
estructuras en los límites teóricos de la luz visible.
 1908 Köhler y Siedentopf desarrollan el microscopio de fluorescencia.
 1930 Lebedeff diseña y construye el primer microscopio de interferencia.
 1932 Zernike inventa el microscopio de contraste de fases.
 1937 Ernst Ruska y Max Knoll, físicos alemanes, construyen el primer microscopio electrónico.
 1952 Nomarski inventa y patenta el sistema de contraste de interferencia diferencial para el
microscopio de luz.

5.2.1.1.) Partes del microscopio óptico y sus funciones

1 * Ocular: lente situada cerca del ojo del observador. Capta y amplía la imagen formada en los objetivos.

2 * Objetivo: lente situada cerca del revolver. Amplía la imagen, es un elemento vital que permite ver a través
de los oculares
 o Los objetivos secos se utilizan sin necesidad de colocar sustancia alguna entre ellos y la
preparación. En la cara externa llevan una serie de índices que indican el aumento que
producen, la abertura numérica y otros datos. Así, por ejemplo, si un objetivo tiene estos
datos: plan 40/0,65 y 160/0,17, significa que el objetivo es planacromático, su aumento 40 y
su apertura numérica 0,65, calculada para una longitud de tubo de 160 mm. El número de
objetivos varía con el tipo de microscopio y el uso a que se destina. Los aumentos de los
objetivos secos más frecuentemente utilizados son: 4X, 10X, 20X, 40X y 60X.
o El objetivo de inmersión está compuesto por un complicado sistema de lentes. Para
observar a través de este objetivo es necesario colocar una gota de aceite de cedro entre el
objetivo y la preparación, de manera que la lente frontal entre en contacto con el aceite de
cedro. Generalmente, estos objetivos son de 100X y se distingue por uno o dos círculos o
anillos de color negro que rodea su extremo inferior.

 Tipos de objetivos y sus características.

Aunque todos los componentes que constituyen un microscopio son importantes, los objetivos son de suma
importancia, puesto que la imagen, en definitiva, depende en gran medida de su calidad. Los mejores objetivos
son aquellos que están corregidos para las aberraciones.

Las aberraciones

Son alteraciones ópticas en la formación de la imagen debidas a las propias lentes del objetivo.

 aberraciones geométricas (efecto Keystone)

 aberraciones cromáticas

Corrección de las aberraciones

Para evitar las aberraciones geométricas se construyen los llamados objetivos planos o planáticos, lo cual
suele estar indicado en el propio objetivo con la inscripción PLAN. Los objetivos que están corregidos para las
aberraciones cromáticas se denominan acromáticos (corregidos para el rojo y el azul), semiapocromáticos
(corregidos para el rojo y el azul y tienen una mayor apertura numérica) y finalmente los apocromáticos (que
son de mayor calidad y están corregidos para el rojo, el azul y el verde).

3 * Condensador: lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparación.

4 * Diafragma: regula la cantidad de luz que llega al condensador.

5 * Foco: dirige los rayos luminosos hacia el condensador.

6 * Tubo: es una cámara oscura unida al brazo mediante una cremallera. tiene forma cilíndrica. El tubo se
encuentra en una carretera superior de la columna mediante un sistema de cremalleras, las cuales permiten
que el tubo se mueva mediante los tornillos.

7 * Revólver: Es un sistema que agarra los objetivos, y que rota para utilizar un objetivo u otro

8 * Tornillos macro y micrométrico: Son tornillos de enfoque, mueven la platina hacia arriba y hacia abajo.
El macrométrico lo hace de forma rápida y el micrométrico de forma lenta. Llevan incorporado un mando de
bloqueo que fija la platina a una determinada altura.

9 * Platina: Es una plataforma horizontal con un orificio central, sobre el que se coloca la preparación, que
permite el paso de los rayos procedentes de la fuente de iluminación situada por debajo. Dos pinzas sirven para
retener el portaobjetos sobre la platina y un sistema de cremallera guiado por dos tornillos de desplazamiento
permite mover la preparación de delante hacia atrás o de izquierda a derecha y viceversa.
10 * Base: Es la parte inferior del microscopio que permite el sostén del mismo.

Microscopio compuesto

Fabricado hacia 1751 por Magny. Proviene del laboratorio del duque de Chaulnes y pertenece al Museo de Artes
y +Oficios, París

El microscopio fue inventado hacia los años 1610, por Galileo según los italianos, o por Zacharias Janssen en
1590, en opinión de los holandeses. En 1665 aparece en la obra de William Harvey sobre la circulación sanguínea
al observar al microscopio los capilares sanguíneos y Robert Hooke publica su obra Micrographia.

En 1665 Robert Hooke observó con un microscopio un delgado corte de corcho y notó que el material era
poroso, en su conjunto, formaban cavidades poco profundas a modo de celditas a las que llamó células. Se
trataba de la primera observación de células muertas. Unos años más tarde, Marcello Malpighi, anatomista y
biólogo italiano, observó células vivas. Fue el primero en estudiar tejidos vivos al microscopio.

A mediados del siglo XVII un holandés, Anton van Leeuwenhoek, utilizando microscopios simples de fabricación
propia, describió por primera vez protozoos, bacterias, espermatozoides y glóbulos rojos. El microscopista
Leeuwenhoek, sin ninguna preparación científica, puede considerarse el fundador de la bacteriología. Tallaba él
mismo sus lupas, sobre pequeñas esferas de cristal, cuyos diámetros no alcanzaban el milímetro (su campo de
visión era muy limitado, de décimas de milímetro). Con estas pequeñas distancias focales alcanzaba los 275
aumentos. Observó los glóbulos de la sangre, las bacterias y los protozoos; examinó por primera vez los
glóbulos rojos y descubrió que el semen contiene espermatozoides. Durante su vida no reveló sus métodos
secretos y a su muerte, en 1723, 26 de sus aparatos fueron cedidos a la Royal Society de Londres.

Durante el siglo XVIII continuó el progreso y se lograron objetivos acromáticos por asociación de Chris Neros y
Flint Crown obtenidos en 1740 por H. M. Hall y mejorados por John Dollond. De esta época son los estudios
efectuados por Isaac Newton y Leonhard Euler. En el siglo XIX, al descubrirse que la dispersión y la refracción
se podían modificar con combinaciones adecuadas de dos o más medios ópticos, se lanzan al mercado objetivos
acromáticos excelentes.

Durante el siglo XVIII el microscopio tuvo diversos adelantos mecánicos que aumentaron su estabilidad y su
facilidad de uso, aunque no se desarrollaron por el momento mejoras ópticas. Las mejoras más importantes de
la óptica surgieron en 1877, cuando Ernst Abbe publicó su teoría del microscopio y, por encargo de Carl Zeiss,
mejoró la microscopía de inmersión sustituyendo el agua por aceite de cedro, lo que permite obtener aumentos
de 2000. A principios de los años 1930 se había alcanzado el límite teórico para los microscopios ópticos, no
consiguiendo estos aumentos superiores a 500X o 1,000X. Sin embargo, existía un deseo científico de observar
los detalles de estructuras celulares (núcleo, mitocondria, etc.).

El microscopio electrónico de transmisión (TEM) fue el primer tipo de microscopio electrónico desarrollado.
Utiliza un haz de electrones en lugar de luz para enfocar la muestra consiguiendo aumentos de 100.000X. Fue
desarrollado por Max Knoll y Ernst Ruska en Alemania en 1931. Posteriormente, en 1942 se desarrolla el
microscopio electrónico de barrido (SEM).
 VENTAJAS Y DESVENTAJAS DEL MICROSCOPIO ÓPTICO Y DEL MICROSCOPIO ELECTRÓNICO.
 Microscopio óptico:
- En el microscopio óptico el haz de luz choca en ángulo recto con la superficie de la probeta y luego esta se
refleja hacia el ocular
- El poder de resolución de un microscopio óptico varía desde unos 50 a 2000X, en cambio un microscopio de
barrido tiene un poder de resolución que alcanza una amplificación de 20000X.
- En el microscopio óptico la imagen es enfocada al cambiar la separación de los lentes.
- En un microscopio óptico es imposible realizar una observación sin una preparación previa de la probeta de
manera tal de obtener una superficie uniforme que pueda ser atacada para ver los detalles micro
estructurales que posee.
- La resolución de un microscopio óptico está limitada por los efectos de difracción. Utilizando longitudes de
onda de 500 mm un microscopio óptico no puede “resolver” objetos más pequeños que de unos cientos de
nanómetros, independientemente de lo cuidadosamente que se construyan las lentes. La resolución de un
microscopio electrónico también está limitada por las longitudes de onda de los electrones pero estas
longitudes de onda pueden ser muchos miles de veces más pequeñas que las longitudes de onda de la luz
visible. El aumento habitual de un microscopio electrónico puede ser miles de veces mayor que un microscopio
óptico.
-En el caso de un microscopio electrónico las lentes de aumento consistan en bobinas de cable que
transportan corrientes eléctricas. Las lentes condensadores forman un haz paralelo de electrones que inciden
sobre el objeto. La lente objetivo forma una imagen intermedia que sirve de objeto para la imagen final
formada por la lente de proyección. La imagen final se proyecta sobre una película fotográfica, una pantalla
fluorescente o la pantalla de un vídeo-cámara.

o Microscopio electrónico.
- Ventajas

o Produce una imagen brillante contra un fondo oscuro sin halos de difracción de una célula viva.
o Determinación del índice de refracción
o Determinación de sólidos, masa seca y espesor de las estructuras celulares.
- Desventajas

o Alto costo del equipo por los diferentes aditamentos utilizados en el microscopio
o Costo alto y mantenimiento cuidadoso de la muestra de células vivas
o La microcinematografía requerida para mirar los procesos que realiza la célula in vivo requiere de equipos
especiales y personal entrenado.
 5.2.2.) MICROSCOPIO ESTEREOSCÓPICO:

El microscopio estereoscópico hace posible la visión tridimensional de los objetos. Consta de dos tubos
oculares y dos objetivos pares para cada aumento. Este microscopio ofrece ventajas para observaciones que
requieren pequeños aumentos. El óptimo de visión estereoscópica se encuentra entre 2 y 40X o aumento total
del microscopio.

Microscopio estereoscópico. En la platina se aprecia una concha de 4 cm de diámetro.

El diseño de este instrumento, también llamado «lupa binocular», es distinto al del diagrama de más arriba y su
utilidad es diferente, pues se utiliza para ofrecer una imagen estereoscópica (3D) de la muestra. Para ello, y
como ocurre en la visión binocular convencional, es necesario que los dos ojos observen la imagen con ángulos
ligeramente distintos. Obviamente todos los microscopios estereoscópicos, por definición, deben ser
binoculares (con un ocular para cada ojo), por lo que a veces se confunden ambos términos. Existen dos tipos
de diseño, denominados respectivamente convergente (o Greenough) y de objetivo común (o Galileo).

El diseño convergente consiste en usar dos microscopios idénticos inclinados un cierto ángulo uno con respecto
a otro y acoplados mecánicamente de tal forma que enfocan la imagen en el mismo punto y con el mismo
aumento. Aunque es un diseño económico, potente y en el que las aberraciones resultan muy fáciles de
corregir, presenta algunas limitaciones en cuanto a modularidad (capacidad de modificar el sistema para poner
accesorios) y la observación durante tiempos largos resulta fatigosa.

El diseño de objetivo común utiliza dos rutas ópticas paralelas (una para cada ojo) que se hacen converger en el
mismo punto y con un cierto ángulo con un objetivo común a ambos microscopios. El diseño es más sofisticado
que el convergente, con mejor modularidad y no genera fatiga en tiempos de observación largos.

Sin embargo es más costoso de fabricar y las aberraciones, al generarse la imagen a través de la periferia del
objetivo común y en un ángulo que no coincide con el eje óptico del mismo, son más difíciles de corregir.

Los microscopios estereoscópicos suelen estar dotados, en cualquiera de sus variantes, de un sistema
pancrático (zoom) o un sistema de cambiador de aumentos que permite observar la muestra en un rango de
aumentos variable, siempre menor que el de un microscopio compuesto.

El microscopio estereoscópico es apropiado para observar objetos de tamaños relativamente grandes, por lo
que no es necesario modificar los objetos a ver, (laminar) ni tampoco lo es que la luz pase a través de la
muestra. Este tipo de microscopios permite unas distancias que van desde un par de centímetros a las decenas
de ellos desde la muestra al objetivo, lo que lo hace muy útil en botánica, mineralogía y en la industria
(microelectrónica, por ejemplo) como en medicina (microscopios quirúrgicos) e investigación,
fundamentalmente en aplicaciones que requieren manipular el objeto visualizado (donde la visión
estereoscópica es esencial).

Podríamos decir que un microscopio estereoscópico sirve para las disecciones de animales.
 5.2.3.) MICROSCOPIO DE SONDA DE BARRIDO
En los microscopios de sonda de barrido se utiliza una sonda que recorre la superficie de una muestra,
proporcionando una imagen tridimensional de la red de átomos o moléculas que la componen. La sonda es una
afilada punta de metal que puede tener un grosor de un solo átomo en su extremo. Un tipo importante de
microscopio de sonda de barrido es el microscopio de túnel de barrido (siglas en inglés de Scanning Tunelling
Microscopio, STM) desarrollado en 1981. Este microscopio utiliza un fenómeno de la física cuántica, denominado
efecto túnel, para proporcionar imágenes detalladas de sustancias conductoras de electricidad. La sonda se
coloca a una distancia de pocos ángstroms de la superficie del material y se aplica un voltaje pequeño entre la
superficie y la sonda. A causa de la poca distancia entre el material y la sonda algunos electrones se escapan a
través del hueco, generando una corriente. La magnitud de la corriente del efecto túnel depende de la distancia
entre la superficie y la sonda. El flujo de corriente es mayor cuando la sonda se acerca al material y disminuye
cuando se aleja. A medida que el mecanismo de barrido mueve la sonda por encima de la superficie, se ajusta de
modo automático la altura de la sonda para mantener constante la corriente del efecto túnel. Estos ajustes
minúsculos permiten dibujar las ondulaciones de la superficie. Después de muchas pasadas hacia adelante y
hacia atrás se utiliza una computadora para crear una representación tridimensional del material.
Otro tipo de microscopio de sonda de barrido es el microscopio de fuerza atómica (Atomic Force Microscope,
AFM), que no emplea la corriente de efecto túnel y que por lo tanto puede utilizarse también en materiales no
conductores. A medida que la sonda se mueve a lo largo de la superficie de la muestra los electrones de la
sonda de metal son repelidos por las nubes electrónicas de los átomos de la misma. La altura de la sonda se
ajusta de modo automático para mantener constante la fuerza recibida. Un sensor registra el movimiento
ascendente y descendente de la sonda y entrega la información a una computadora, que a su vez la utiliza para
dibujar una imagen tridimensional de la superficie del espécimen.

5.2.3.1.) PARTES DEL MICROSCOPIO DE SONDA DE BARRIDO

A.- OCULAR:
Qué el utilizador mira a través para examinar el espécimen. La potencia del ocular multiplicada por la potencia
objetiva iguala la ampliación total (es decir 10X objetivo 10X del ocular X = 100X. El espécimen se ha agrandado
100 veces).
B.- CUERPO:
El microscopio puede venir como un monocular, (un ocular y tubo), o binocular, (dos oculares y tubos). Si es un
binocular generalmente solamente un tubo del ocular será ajustable mientras que el otro es fijo.
C.- OBJETIVOS:
El objetivo es la lente más importante del microscopio para producir una imagen clara de la alta resolución. El
objetivo tiene varias funciones importantes. Debe recolectar la luz que viene de cada uno de las varias partes o
puntas del espécimen. Debe tener la capacidad de reconstituir la luz que viene de las varias puntas del
espécimen en las varias puntas correspondientes de la imagen. El objetivo se debe construir de modo que sea
enfocado cerca bastante al espécimen para proyectar una imagen magnificada, verdadera para arriba en el
tubo del cuerpo.
D.- ETAPA MECÁNICA:
Un dispositivo para llevar a cabo diapositivas con seguridad con las perillas con estrías separadas para mover
la diapositiva desde frente a la parte posterior (norte y al sur) o de lado a lado (este y al oeste). Estas perillas
pueden estar en los ejes separados o en un eje coaxial. Pueden enderezar o zurdo.
E.- CONDENSADOR DEL SUB-STAGE:
Se cabe debajo entre de la etapa del microscopio, la lámpara que ilumina y el espécimen. La abertura del
condensador y el enfocarse apropiado del condensador son de importancia crítica en realizar la capacidad
máxima de la lente objetiva en uso. Asimismo, el uso apropiado del diafragma ajustable del diafragma de la
abertura (incorporado en el condensador) es también importante para asegurar la iluminación apropiada y
contraste. La apertura y el cierre del diafragma del diafragma controla el ángulo de los rayos de la iluminación
que pasan a través del condensador, a través del espécimen y entonces en la lente objetiva.

F.- CONTROLES DEL FOCO DE FINE/COARSE:

En ambas caras del soporte del microscopio hay dos conjuntos de perillas del ajuste. La perilla del ajuste
aproximado para movimientos que se enfocan incrementales más grandes y la perilla del ajuste fino para
movimientos que se enfocan incrementales más pequeños. Las perillas del ajuste sirven para traer el objetivo y
el espécimen más cercano juntas o para engendrar aparte. En la mayoría de los microscopios las perillas del
ajuste levantan o bajan la etapa; en algunos microscopios las perillas levantan o bajan el tubo el microscopio o
el pedazo de la nariz.
Iluminador (Estándar):
Esta parte proporciona a la iluminación requerida para realizar cualquier función con el microscopio. Es
básicamente una fuente de alimentación electrónica que proporciona a electricidad a la fuente de la lámpara.
Esta fuente de la lámpara podía ser una lámpara estándar del tungsteno o lámpara del halógeno. **time-out**
ventaja halógeno tipo lámpara ser más luz para publicar salida vatiaje y en bajo nivel iluminación luz no tender
para dar vuelta amarillo a medida que estándar tungsteno lámpara hacer.
Cubierta Del Iluminador (Estándar):
Aquí es adonde el elemento electrónico asociado al iluminador se pone. Algunos microscopios más viejos tienen
transformadores separados del control y el único interior de la cubierta es la lámpara, ensamblaje del socket,
condensador del campo y el diafragma del diafragma del campo.
G.- DIAFRAGMA DEL CAMPO CONDENSER/IRIS:
Esta pieza del microscopio contiene la lente de condensador de la lámpara y el diafragma del diafragma del
campo. Este diafragma controla el área del círculo de la luz que ilumina el espécimen.

5.2.4.) MICROSCOPIO DE CAMPO OSCURO.

Este microscopio está provisto de un condensador paraboloide, que hace que los rayos luminosos no penetren
directamente en el objetivo, sino que iluminan oblicuamente la preparación. Los objetos aparecen como puntos luminosos sobre un
fondo oscuro.

5.2.5.) MICROSCOPIO DE FLUORESCENCIA.

La fluorescencia es la propiedad que tienen algunas sustancias de emitir luz propia cuando inciden sobre ellas
radiaciones energéticas. El tratamiento del material biológico con flurocromos facilita la observación al
microscopio.
 5.2.6.) MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE FASES

. Se basa en las modificaciones de la trayectoria de los rayos de luz, los cuales producen contrastes notables en
la preparación.

Principales elementos de un microscopio básico

Diagrama simple de la óptica de un microscopio.

Los microscopios de este tipo suelen ser más complejos, con varias lentes en el objetivo como en el ocular. El
objetivo de éstas lentes es el de reducir la aberración cromática y la aberración esférica. En los microscopios
modernos el espejo se sustituye por una lámpara que ofrece una iluminación estable y controlable.

Los microscopios compuestos se utilizan para estudiar especímenes delgados, puesto que su profundidad de
campo es muy limitada. Por lo general, se utilizan para examinar cultivos, preparaciones trituradas o una
lámina muy fina del material que sea. Normalmente depende de la luz que atraviese la muestra desde abajo y
usualmente son necesarias técnicas especiales para aumentar el contraste de la imagen.

Sistema de iluminación

La fuente de luz, con la ayuda de una lente (o sistema) , llamada colector, se representa en el plano del
diafragma iris de abertura del condensador. Este diagrama se instala en el plano focal anterior del condensador
y puede variar su abertura numérica. El diagrama iris dispuesto junto al colector es el diafragma de campo. La
variación del diámetro del diafragma de campo permite obtener su imagen igual al campo visual lineal del
microscopio. La abertura numérica del condensador supera, generalmente la de la abertura del objetivo
microscópico. es la iluminación que permite ver mejor lo que queremos observar como las células o las
membranas celulares entre otros.

 Fuente de iluminación: se trata clásicamente de una lámpara incandescente de tungsteno

sobrevoltada; en versiones más modernas con leds. Por delante de ella se sitúa un condensador (una
lente convergente) e, idealmente, un diafragma de campo, que permite controlar el diámetro de la
parte de la preparación que queda iluminada, para evitar que exceda el campo de observación
produciendo luces parásitas.
 El espejo: necesario si la fuente de iluminación no está construida dentro del microscopio y ya
alineada con el sistema óptico, como suele ocurrir en los microscopios modernos. Suele tener dos
caras: una cóncava y otra plana. Goza de movimientos en todas las direcciones. La cara cóncava se
emplea de preferencia con iluminación artificial, y la plana, para natural (luz solar). Los modelos más
modernos no poseen espejos sino una lámpara que cumple la misma función que el espejo.
  Condensador: está formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar los rayos
luminosos sobre el plano de la preparación, formando un cono de luz con el mismo ángulo que el del
campo del objetivo. El condensador se sitúa debajo de la platina y su lente superior es generalmente
planoconvexa, quedando la cara superior plana en contacto con la preparación cuando se usan
objetivos de gran abertura (los de mayor ampliación); existen condensadores de inmersión, que piden
que se llene con aceite el espacio entre esa lente superior y la preparación.
 Diafragma: el condensador está provisto de un diafragma-iris, que regula su abertura para ajustarla
a la del objetivo. Puede emplearse, de manera irregular, para aumentar el contraste, lo que se hace
cerrándolo más de lo que conviene si se quiere aprovechar la resolución del sistema óptico.

Propiedades del microscopio

 Poder separador. También llamado a veces poder de resolución, es una cualidad del microscopio, y se
define como la distancia mínima entre dos puntos próximos que pueden verse separados. El ojo
normal no puede ver separados dos puntos cuando su distancia es menor a una décima de milímetro.
En el microscopio viene limitado por la longitud de onda de la radiación empleada; en el microscopio
óptico, el poder separador máximo conseguido es de 0,2 décimas de micrómetro (la mitad de la
longitud de onda de la luz azul), y en el microscopio electrónico, el poder separador llega hasta 10 Å.
 Poder de definición. Se refiere a la nitidez de las imágenes obtenidas, sobre todo respecto a sus
contornos. Esta propiedad depende de la calidad y de la corrección de las aberraciones de las lentes
utilizadas.
 Ampliación del microscopio. En términos generales se define como la relación entre el diámetro
aparente de la imagen y el diámetro o longitud del objeto. Esto quiere decir que si el microscopio
aumenta 100 diámetros un objeto, la imagen que estamos viendo es 100 veces mayor linealmente que
el tamaño real del objeto (la superficie de la imagen será 1002, es decir 10.000 veces mayor). Para
calcular el aumento que está proporcionando un microscopio, basta multiplicar los aumentos
respectivos debidos al objetivo y el ocular empleados. Por ejemplo, si estamos utilizando un objetivo
de 45X y un ocular de 10X, la ampliación con que estamos viendo la muestra será: 45X x 10X = 450X, lo
cual quiere decir que la imagen del objeto está ampliada 450 veces, también expresado como 450
diámetros.

Campo del microscopio

Paramecium aurelia. Microscopio óptico. El mejor conocido de los ciliados. Las burbujas que se ven son
vacuolas. Todo el cuerpo está cubierto de cilios, que se ven borrosos debido a sus rápidos movimientos.

Se denomina campo del microscopio al círculo visible que se observa a través del microscopio. También
podemos definirlo como la porción del plano visible observado a través del microscopio. Si el aumento es
mayor, el campo disminuye, lo cual quiere decir que el campo es inversamente proporcional al aumento del
microscopio. Para medir el diámetro del campo del microscopio con cualquiera de los objetivos se utiliza el
micrómetro,
 VI._ Recomendaciones

 Es necesario el uso del microscopio

 Debemos conocer los distintos trabajos que podemos realizar con el microscopio.
 Que todas las instituciones educativas deben de contar con el microscopio.
 Realizar diversas prácticas de estudio de seres vivos microscópicos.
 VII._ Conclusiones
Este instrumento ha sido de gran utilidad, sobre todo en los campos de la ciencia en donde la estructura y la
organización microscópica es importante, incorporándose con éxito a investigaciones dentro del área de la
química (en el estudio de cristales), la física (en la investigación de las propiedades físicas de los materiales), la
geología (en el análisis de la composición mineralógica de algunas rocas) y, por supuesto, en el campo de la
biología (en el estudio de estructuras microscópicas de la materia viva), por citar algunas disciplinas de la
ciencia.

Hasta ahora se da uso en el laboratorio de histología y anatomía patológica, donde la microscopio permite
determinadas aplicaciones diagnósticas, entre ellas el diagnóstico de certeza del cáncer, numerosas
estructuras cristalinas, pigmentos, lípidos, proteínas, depósitos óseos, depósitos de amiloide, etcétera.