CINÉTICA DE CONSUMO DE SUSTRATO

LISTA DE SÍMBOLOS

Concentraciones

P Producto
S Substrato
X Biomasa

Coeficientes

m Mantenimiento
Yx/s Coeficiente de rendimiento celular (biomasa)
Yp/s Coeficiente de rendimiento de producto

Velocidades específicas

μ
α
qP Velocidad especifica de crecimiento
qS Velocidad especifica de muerte celular
q02 Velocidad especifica de formación de producto
Velocidad especifica de consumo de substrato
Velocidades Velocidad especifica de consumo de oxigeno

rX
rS
rP
ro2

Velocidad de crecimiento celular

Velocidad de consumo de substrato
Velocidad de formación de producto
Velocidad de consumo de oxigeno

Cinética del consumo de substrato Villanueva

Aguilar Carlos E,

1. VELOCIDAD DE CONSUMO DE SUSTRATO (rsx) PARA EL CRECIMIENTO

1.1. VELOCIDAD DE CONSUMO DE SUSTRATO ( rsx )

1.1.1. Aplicando Yx/s (Rendimiento Celular):

Si reordenamos la Ec. (1) y derivamos respecto al tiempo se obtiene Ec. (25):

(1) Yx/s = - dx / ds

Yx/s = dx / dt / - ds / dt

Despejando: - ds / dt

(24) - ds / dt = 1 / Yx/s . dx / dt
 Aplicando sus equivalentes:

rs = 1 / Yx/s . rx donde: rs = velocidad de consumo sustrato

rx = velocidad de crecimiento celular
Reordenando

(25) VELOCIDAD DE CONSUMO DE SUSTRATO ( rsx )

rsx = rx / Yx/s

1.1.2. Aplicando rx ( velocidad de crecimiento celular ):

Introduciendo la Ec. (18) en la Ec. (25) se obtiene Ec. (26):

(18) rX = μx donde: μ = velocidad especifica de crecimiento

(25) rS = rX / Yx/s

(26) VELOCIDAD DE CONSUMO DE SUSTRATO ( rSx )

rsx = μ x / Yx/s

1.1.3. Aplicando qSX ( velocidad especifica de consumo de sustrato ):

(27) VELOCIDAD DE CONSUMO DE SUSTRATO (rsx )

rS también puede expresarse como:

rsx = qsx . x

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1.2. VELOCIDAD ESPECIFICA DE CONSUMO SUSTRATO ( qsx )

1.2.1. Comparando rS ( velocidad de consumo de sustrato):

Comparando las Ec. (26) y (27), se obtiene Ec. (28)

(26) y (27) μ x / Yx/s = qSx . x

Despejando qS

qSx = μ x / Yx/s . x

(28) VELOCIDAD ESPECIFICA DE CONSUMO SUSTRATO (qSX )

qsx = μ / Yx/s

Si: μ = μm ; se tendrá: qxx = qsm;

 es decir ambos parámetros están directamente relacionados

(28b) qsxm = μm / Yx/s

Es evidente hasta aquí que el crecimiento puede ser caracterizado

mediante 3 parámetros:

Ks

μm

Yx/s.

Estos dependen tanto del microorganismo como del medio de cultivo

empleado, por lo que su evaluación debe realizarse para cada caso
particular.

Referencia: FAO Pág. 38

Cinética del consumo de substrato Villanueva

Aguilar Carlos E,

Cinética del consumo de substrato Villanueva

Aguilar Carlos E,

3. MANTENIMIENTO CELULAR

3.1. Concepto.
3.2. Velocidad de consumo de la fuente de carbono y energía
3.3. Relación entre los rendimientos Yx/s y Y’ x/s

3.1. Concepto.

 La ( Ec. 25 ) Velocidad de consumo de sustrato ( rs)

(Ec.25) rs = rx / Yx/s

 Establece que el consumo de substrato solo es posible cuando hay crecimiento.

 Sin embargo, cuando el substrato considerado es la fuente de C y Energía , puede darse el

caso en que el crecimiento es nulo ( rx = 0 ) pero ocurre consumo de substrato ( rs = 0 ).

 A éste consumo de substrato que no redunda en Biomasa se le asocia con el mantenimiento

de funciones vitales ( recambio de material celular, mantenimiento de gradientes de
concentración y movilidad )

3.2. Velocidad de consumo de la fuente de carbono y energía ( Ec. 29 )

 Piert ha propuesto la sgte. ecuación para la velocidad de consumo de la fuente de
carbono y energía

( Ec. 29 ) rs = rx / Y’x/s + ms X

Donde:

ms Coeficiente de mantenimiento

Y’x/s Rendimiento que se obtendría si el mantenimiento fuese nulo.

En la práctica existe mantenimiento de funciones vitales; en consecuencia
Yx/s es el rendimiento observable.
El valor de Yx/s es obviamente inferior al de Y’x/s

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3.3. Relación entre los rendimientos Yx/s y Y’ x/s

La Relación entre ambos se obtiene dividiendo la ( Ec. 29 ) por rx , obteniendo la ( Ec. 29 b )

(Ec.29 ) rs = rx / Y’x/s + ms X

(Ec.29b) rs / r x = 1 / Y’x/s + ms X / rx

Introduciendo las ecuaciones (25) y (18) en (29b) y suprimiendo X se tiene (30)

(Ec.25) rs = rx / Yx/s
Ec.18) rX = μ X

rx / Yx/s / rx = 1 / Y’x/s + ms X / μ X

(Ec.30) 1 / Yx/s = 1 / Y’x/s + ms / μ

 De la Ec. 30 surge claramente que cuando ms 0; Yx/s Y’x/s

 Debe destacarse que Yx/s es el rendimiento observable, mientras que Y’x/s solo puede
ser evaluado indirectamente mediante la (Ec. 30 ).

 Valores de ms de 0.01 a 0.04 g g–1 h–1 son frecuentes de hallar pero se incrementan con
la temperatura y con la presión osmótica del medio de cultivo.

 Son ejemplos para Saccharomyces cerevisiae, creciendo en anaerobiosis se encuentra

un valor de ms = 0.036 g g –1 h–1 mientras que es diez veces superior si el medio
contiene una concentración de NaCl 1M , lo cual da cuenta del trabajo osmótico que
deben realizar las células.

 De este modo el mantenimiento celular posee una implicancia tecnológica directa, ya

que un proceso destinado a la producción de Biomasa debe conducirse de modo tal que
el valor de ms sea pequeño.
Cinética del consumo de substrato Villanueva
Aguilar Carlos E,

4. REQUERIMIENTO DE OXIGENO

4.1. La Velocidad de Consumo de Oxígeno ( rO2 )

4.2. Velocidad Específica de Consumo de Oxígeno (q02)

 En las fermentaciones aerobias, la obtención de energía está ligada a la presencia de 0 2.

 Es el aceptor final de los electrones en la cadena de citrocomos donde se genera abundante

ATP ( Adenosin trifosfato ).

 Las moléculas de ATP aportarán la energía necesaria para las reacciones de síntesis con las
que el microorganismo se “fabricará” a si mismo, y la requerida para el mantenimiento
celular.

4.1. La Velocidad de Consumo de Oxígeno ( rO2 )

 Por analogía con la ( Ec. 29 ) se puede expresar Ec.( 31a)

(Ec.29 ) rs = rx / Y’x/s + ms X

( Ec. 31a) r02 = rx / Y’x/o + m0 X

Donde

m0 Es el coeficiente de mantenimiento en base al oxigeno

Y’x/o Es el rendimiento en base al 02 consumido que se obtendrá cuando
m0 = 0
Cinética del consumo de substrato
Villanueva A.C.

4.2. Velocidad Específica de Consumo de Oxígeno (q02)

 Dividiendo varios miembros de la Ec. (31a) por X , se obtiene:

( Ec. 31b) r02 / X = rx / Y’x/o . X + m0 X / X

Introduciendo en (31 b): r02 = q02 . X r02 velocidad de consumo de 02

rx = μ X rx velocidad de crecimiento celular

 Se obtiene la (Ec. 32a):

( Ec. 32a) q02 . X / X = μ X / Y’x/o . X + m0 X / X

Cinética del consumo de substrato

Villanueva A.C.

 Suprimiendo X se tiene Ec. 32b

( Ec. 32b) q02 = μ / Y’x/o + m0

Donde:
q02
μ Velocidad especifica de consumo de 02
m0 Velocidad especifica de crecimiento
Y’x/o Coeficiente de mantenimiento en base al oxigeno
Rendimiento en base al 02 consumido que se obtendrá cuando m0 = 0

En un cultivo en medio líquido los microorganismos utilizan substancialmente el 0 2 que está

disuelto, y el valor de q02 depende de cual sea ésta concentración.

Por analogía con la ecuación de Monod y cuando el 0 2 es el substrato limitante se suele

representar ésta dependencia como :

q02 = q02max C / ko + C

Donde:
C Concentración de O2 disuelto
KO Constante de saturación
q02max Velocidad especifica máxima de consumo; se obtiene cuando C > KO

Cinética del consumo de substrato Villanueva

Aguilar Carlos E,

Velocidad específica máximade consumo de oxígeno

para diferentes microorganismos
4.3. Concepto de concentración critica de oxigeno disuelto (Cc)

 En la práctica se utiliza principalmente el concepto de Cc .

 La Cc es el valor por encima del cual q02 es independiente de la concentración de oxígeno

disuelto y por lo tanto el crecimiento no está limitado por 02.

 En éstas condiciones el valor q02 depende del cual sea el valor de μ, el cual será función del
substrato que limita el crecimiento.

 Si la concentración de éste es saturante será μ = μm y q02 = q02m.

 Los valores de Cc para la mayoría de los organismos están en el orden de 0.1 a 1mg L -1
(3.1 - 31 uM) valores relativamente bajos si se compara con la solubilidad del 02 , que a
30°C y 0.21 atmósferas en medios acuosos diluidos es de 7.8 mg L-1.

 Esto podría conducir al error de suponer que no constituye un problema satisfacer los
requerimientos de 02 en los cultivos, pero el siguiente ejercicio demostrará todo lo contrario.
Concentración crítica de oxígeno

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Concentración crítica de oxígeno para el cultivo de diferentes organismos

 Solubilidad de oxígeno en agua y en soluciones acuosas

XL: fracción molar de oxígeno en agua

mg/L = mM x 32

UNIVERSIDAD NACIONAL PEDRO RUIZ GALLO BIOINGENIERÍA Y

BIOTECNOLOGIA
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS
Diseño de Bioprocesos y Biotecnología Microbiana

PRACTICA

CONCENTRACIÓN CRITICA DE OXIGENO DISUELTO (Cc)

Dr. Blgo. Carlos E. Villanueva Aguilar

 Maestría Microbiología Industrial y Biotecnología

INTRODUCCIÓN

En la práctica se utiliza principalmente el concepto de Cc . La Cc es el valor por

encima del cual q02 es independiente de la concentración de oxígeno disuelto y por lo
tanto el crecimiento no está limitado por 02.

En éstas condiciones el valor q02 depende del cual sea el valor de μ, el cual será
función del substrato que limita el crecimiento. Si la concentración de éste es
saturante será μ = μm y q02 = q02m.

Los valores de Cc para la mayoría de los organismos están en el orden de 0.1 a 1mg
L-1 , valores relativamente bajos si se compara con la solubilidad del 02, que a 30°C y
0.21 atmósferas en medios acuosos diluidos es de 7.8 mg L -1.

Esto podría conducir al error de suponer que no constituye un problema satisfacer

los requerimientos de 02 en los cultivos, pero el sgte. ejercicio demostrará todo lo
contrario.

OBJETIVOS:

1. Calcular la velocidad de crecimiento (r x) de un cultivo microbiano, la velocidad del

consumo de oxigeno (rO2) y concentración crítica del oxigeno disuelto (Cc ).

2. Calcular el tiempo transcurrido hasta que la concentración de 0 2 se hace crítica e

igual a 0.5 mg L-1

MATERIALES:

- Datos experimentales
- Calculadora

PROCEDIMIENTOS:

1. DATOS EXPERIMENTALES:

Se tiene una población microbiana creciendo activamente en un medio de cultivo,

obteniéndose los siguientes datos experimentales:

 Concentración celular X = 10 g L-1

 Velocidad especifica de crecimiento μ = 0.15 h-1.
 Coeficiente de mantenimiento mo = 2.6 mg g -1 h -1

Y´x/o = 1gg -1
 Rendimiento cuando manteniendo es nulo
Co = 7.8 mg L-1
 Concentración de oxigeno disuelto inicial

¿ Calcular el tiempo transcurrido hasta que la concentración de 0 2 se hace

crítica e igual a 0.5 mg L-1 ?.

2. CÁLCULO DE LA VELOCIDAD DE CRECIMIENTO (rx)

Ec. (18) rx = ux

=
 rx =

3. CÁLCULO DE VELOCIDAD DE CONSUMO DE OXIGENO (r02)

( Ec. 31a) r02 = rx / Y’x/o + m0 X

r02 =

r02 =

4. CONCENTRACIÓN CRITICA DE OXIGENO DISUELTO

Si se tiene: rx = dx /dt = u . x

Por analogía: r o2 = - dc / dt = qo2 . x

ro2 = - dc / dt

Integrando ésta ecuación con la condición to t ; Co C

Donde Co : Concentración de 02 disuelto a to = O

C : Concentración crítica de oxígeno disuelto a t

Resulta: - dc / dt = r o2

C t
- dc = ro2 . dt
Co to

Co - C = ro2 ( t - to)

- C = - Co + r o2 ( t - to)

Concentración Crítica de Oxigeno C = Co - r o2 t

Disuelto:

5. CALCULO DEL TIEMPO NECESARIO PARA QUE Cc = 0.5

Despejando t: Co - rO2 t = C
- rO2 t = - Co + C
rO2 t = Co - C

Tiempo requerido para Co - C

Concentración Critica de Oxígeno t = ------------------
rO2

De donde el tiempo necesario para que: Cc = C = 0.5 será:

7.8 mgL-1 - 0.5 mg L-1

t = --------------------------------
1526 mg L-1 h-1
 t = 4.8 . 10 -3
h

t = 17.3 segundos

Por tanto, en escasos segundos el crecimiento comenzará a estar limitado por el

oxígeno, y eventualmente llegará a detenerse cuando la concentración sea nula, a
menos que sea repuesto continuamente y a una velocidad comparable a la del
consumo.

Este aspecto es fundamental en el diseño de biorreactores destinados a cultivos

aerobios, ya que deberán ser capaces de suministrar oxígeno a altas velocidades a
fin de satisfacer la demanda.