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LABORATORIO DE CIENCIAS BÁSICAS

BIOLOGÍA CELULAR

PERMEABILIDAD DE MEMBRANA

María Alejandra Molina López, Junior Montesino, Andrés Felipe Rodríguez Torres
1
Departamento de Medicina, Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombia

Recibido 10/Julio/ 2019

Resumen

La membrana citoplasmática es la encargada de regular la entrada y salida de diferentes sustancias,


esto gracias a su permeabilidad selectiva, la cual varía dependiendo de las características de la
sustancia como su solubilidad en lípidos, su tamaño y su carga. En esta práctica observamos como el
gel de agar nutritivo actuó como una membrana a la cual se le aplicó diferentes sustancias con
diferentes características físicas y químicas y al final se observó si lograron pasar la permeabilidad
selectiva del gel hacia la muestra ubicada al otro lado.

Palabras claves: Membrana, permeabilidad selectiva, solubilidad, agar nutritivo.

Abstract
The cytoplasmic membrane is responsible for regulating the entry and exit of different substances,
this is due to its selective permeability, which refers to the characteristics of the substance such as its
lipid solubility, its size and its charge. In this practice we observed how the nutritive agar gel acted
as a membrane to which different substances with different physical and chemical characteristics
were applied and in the end the selective permeability of the gel was passed to the appropriate
sample on the other side.

Keywords: Membrane, selective permeability, solubility, nutritive agar.

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Objetivos ● Entender el fenómeno en función de la


Comprobar la selectividad de la membrana celular estructura química de la membrana.
por medio de reacciones químicas en un modelo ● Observar el comportamiento de la
artificial. membrana ante las diferentes sustancias.
Específicos ● Conocer sobre los componentes de la
● Verificar que los factores de la solubilidad membrana
de la membrana sean ciertos.
Introducción o Marco Teórico
Laboratorio de Ciencias Básicas I
Por la presencia de dos zonas (una hidrofílica y otra
La membrana citoplasmática regula la entrada y hidrofóbica) los fosfolípidos en presencia de agua
salida de materiales, permitiendo la entrada de unos y forman una bicapa. El movimiento continuo que
restringiendo el paso de otros. Esta propiedad se presentan las colas de las moléculas da una enorme
llama permeabilidad selectiva. La permeabilidad de flexibilidad a esta zona, por lo que se considera que
la membrana depende de varios factores relacionados en la membrana hay un flujo bidimensional continuo,
con las propiedades físico-químicas de la sustancia: ya que las moléculas tienen gran movimiento lateral
a lo largo y ancho de cada monocapa. Por el contrario,
● Solubilidad en los lípidos: Las sustancias el movimiento de moléculas entre dos monocapas
que se disuelven en los lípidos (moléculas opuestas es extremadamente lento (3)
hidrófobas, no polares) penetran con Que una membrana permita o no el paso de una
facilidad en la membrana dado que esta está sustancia a través de ella depende del tamaño y la
compuesta en la mayor parte por carga de la sustancia y de la composición de la
fosfolípidos. membrana. Se dice que la membrana es permeable a
una sustancia dada si permite que esta la cruce, e
● Tamaño: La mayor parte de las moléculas de impermeable en caso contrario. Una membrana con
gran tamaño no pasan a través de la una permeabilidad selectiva (semipermeable) permite
membrana. Solo un pequeño número de el paso solo de algunas sustancias. En general, las
moléculas no polares de tamaño pequeño membranas biológicas son más permeables a las
pueden atravesar la capa de fosfolípidos. moléculas pequeñas y a sustancias liposolubles
capaces de cruzar el interior hidrófobo de la bicapa
● Carga: Las moléculas cargadas y los iones (Ver Fig. 1). (4)
no pueden pasar, en condiciones normales, a
través de la membrana. Sin embargo,
algunas sustancias cargadas pueden pasar
por los canales proteicos o con la ayuda de
una proteína transportadora.

Gracias a esta selección es posible mantener dentro


de la célula moléculas de alto peso molecular como
proteínas y ácidos nucleicos, y de bajo peso molecular
como gases, sales y algunos iones. (1) Fig. 1. Estructura de la membrana plasmática
El transporte de materia puede realizarse Aunque son polares (no liposolubles), las moléculas
gracias a la presencia de ciertas sustancias que de agua pueden cruzar con rapidez las bicapas
conforman a las membranas: unas se encargan de lipídicas fluidas que constituyen las membranas
formar una compleja estructura, otras de facilitar el porque son lo suficientemente pequeñas para pasar
paso de sustancias de una manera selectiva y por los huecos que se crean cuando una cadena de
controlada, y algunas más tienen como función ácido graso se desplaza en forma momentánea.
relacionar a la célula con el medio circundante. También pueden atravesar con libertad algunos gases
como el oxígeno, dióxido de carbono y nitrógeno;
Entre los compuestos básicos que conforman a las moléculas polares pequeñas como el glicerol, y
membranas podemos reconocer los lípidos, las sustancias no polares de mayor tamaño (hidrófobas),
proteínas y los carbohidratos. Los lípidos conforman entre éstas los hidrocarburos. Algunas moléculas
la estructura o matriz de la membrana y están polares un poco más grandes, como la glucosa, así
representados básicamente por los fosfolípidos, es como los iones con carga de cualquier tamaño, cruzan
decir, compuestos que presentan una “cabeza” con mayor lentitud la bicapa (3)
hidrofílica constituida por grupos fosfato, y una Si bien la bicapa es relativamente
“cola” hidrofóbica formada por cadenas de carbonos impermeable a los iones, las células necesitan
de naturaleza lipídica. Tanto la cabeza como la cola desplazar iones y moléculas polares grandes y
pueden tener diferente composición y complejidad, pequeñas, como aminoácidos y azucares, a través de
de acuerdo con el tipo de membrana de que se trate. las membranas. La permeabilidad de estas últimas a
(2) sustancias de esos tipos se debe sobre todo a
2
Laboratorio de Ciencias Básicas I
actividades de proteínas de membrana especializadas. 2. Una vez que se tenga la película de gel,
Las membranas biológicas que rodean a células, colocarla en el embudo y agregarle 5 ml de las
núcleos, vacuolas, mitocondrias, cloroplastos y otros soluciones de almidón, glucosa, NaCl y
organelos subcelulares son semipermeables a albúmina.
diferentes tipos de moléculas.
3. Colocar el embudo con la película de gel en
En respuesta a las condiciones ambientales o a las un vaso con agua destilada hasta tener contacto
necesidades celulares cambiantes, una membrana con la película, al agua se le habrán practicado
plasmática puede constituirse en barrera para una previamente las pruebas para almidón, glucosa,
sustancia dada en un momento y promover de modo proteínas y cloruros, para asegurarse que el agua
activo su paso en otro instante. Al regular el tránsito no contenga ninguna de estas sustancias.
químico de esta manera, la célula ejerce algún control
sobre su propia composición iónica y molecular 4. Se deja reposar el embudo con el vaso, en
interna, que puede ser diferente de la que corresponde posición vertical durante 24 hrs.
al medio extracelular. (5)
Materiales
● Mechero
● Probeta
● Vaso de precipitado de 500ml
● Embudo
● Película de gel

REACTIVOS:
● Lugol.
● Reactivo de Benedict
● Solución de albúmina.
● Ácido nítrico concentrado.
● Agua destilada.
● Reactivo de Biuret y lugol.
● Solución de almidón al 1%. Fig. 3. Montaje de la película de gel, preparado
● Solución de glucosa al 30%. 24h antes del laboratorio
● Solución de nitrato de plata al 1%.
● Solución de cloruro de sodio al 5%. 5. Los procedimientos para realizar las pruebas
de identificación de almidón, glucosa y proteínas
como se describe a continuación:

PRUEBA DEL LUGOL PARA IDENTIFICAR


ALMIDÓN:
Fig. 2. Materiales con los que se hicieron las pruebas a) Colocamos una pequeña cantidad de la
muestra en un tubo de ensayo.
Procedimientos
1. Preparar la película de gel utilizando b) Agregamos 2 a 3 gotas de lugol.
gelatina libre de azúcares, bacteriológica bioxon
2g en 50ml de agua destilada o gelatina sin sabor. c) Observamos la reacción.
Colocarla en un molde circular para obtener la
forma de éste, procurando que la capa sea
delgada (máx. 5 mm) puede ser una tapa,
cristalizador o caja Petri colocando entre este y
el gel un pedazo de bolsa de plástico para que no
pegue el gel en el recipiente.

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Es una prueba general para proteínas y
polipéptidos de cadena no menor de tres
unidades de aminoácidos.

a) Colocar una pequeña porción de la muestra


en un tubo de ensayo y agregar 3 a 5 gotas
de reactivo de Biuret.

b) Observar la reacción. Si en la muestra


existen proteínas se observará que el
reactivo agregado adquirirá una coloración
violeta (reacción positiva).

Fig. 4. Prueba de la muestra de almidón

PRUEBA DE BENEDICT PARA


IDENTIFICACIÓN DE AZÚCARES
REDUCTORES:
a) Colocar una pequeña cantidad de la muestra
en un tubo de ensayo.

b) Agregar 1 ml de solución de Benedict.

c) Calentar a ebullición por 2 minutos (en baño


maría). Observar la reacción.
Fig. 6. Prueba de la muestra de albúmina.
d) Si en la reacción existen azúcares reductores
con el reactivo de Benedict se formará un PRUEBA PARA IDENTIFICAR
precipitado café-rojizo (reacción positiva) o CLORUROS:
por lo menos la solución debe tomar esta a) Colocar 1 ml de muestra en un tubo de
coloración. ensayo.

b) Agregar 5 gotas de solución de nitrato de


plata.

c) Agitar y observar.

d) La presencia de un precipitado blanco indica


la presencia de cloruros.

Fig. 5. Prueba de la muestra de glucosa

PRUEBA DE BIURET PARA


IDENTIFICACIÓN DE PROTEÍNAS:

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Análisis de Resultados

PRUEBA ANTES DESPUÉS


(POSITIVA (POSITIVA
Y/O Y/O
NEGATIVA) NEGATIVA)
Benedict -
Lugol -
Biuret -
Nitrato de plata +
Xantoprotéica -

Cuestionario
Fig. 7. Prueba de la muestra de cloruro de sodio
1) De las sustancias utilizadas incluyendo el
NOTA: Si el resultado de las pruebas anteriores es agua, decir cuáles son de alto peso
positivo indica que la sustancia se encuentra en la molecular y de bajo peso molecular.
muestra que se está analizando, o de que no hay si es
negativo. En el cuadro de reacciones de identificación Alto peso molecular Almidón
se indican las características de los resultados de las Glucosa
pruebas para cuando son positivas y/o negativas. Bajo peso molecular Agua
Cloruro de
6. Tomar cuatro muestras del agua destilada donde Sodio
estuvo sumergida la película de gel en tubos de Albumina
ensayo numerados y efectuar las reacciones para las
sustancias de la mezcla, anotando en cada caso, si la 2) Indicar qué sustancias se encontraban en
reacción fue positiva y/o negativa de acuerdo con la ambos lados de la membrana de gel en el
información del cuadro que se presenta a siguiente esquema:
continuación:
Interior Exterior
REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN Glucosa y NaCl Almidón y
SUSTA REACTIV REACCION REACCIONES Albumina
NCIA OS ES NEGATIVAS 3) ¿Qué sustancias atraviesan la membrana
POSITIVAS de gel de afuera hacia adentro, así como de
Glucosa Benedict Coloración o Solución del dentro hacia fuera?
precipitado color del En el transcurso de la práctica no se logró
café-rojizo reactivo. identificar con claridad que sustancias
Almidón Lugol Solución color Solución del atravesaron la membrana de adentro hacia
azul oscuro color del afuera, pero si se observaron las de afuera
reactivo. hacia adentro que fue el cloruro de sodio.
Albúmin Xantoprot Precipitado Solución del debido a las características específicas de
a eica amarillo color de la que permiten el paso selectivo de
huevo albúmina sustancias determinadas. (6)
Cloruro Nitrato de Precipitado Solución 4) ¿Por Qué dichas sustancias atraviesan la
de sodio plata blanco transparente membrana?
incolora. La sal (NaCl) atraviesa la membrana
debido a su bajo peso y su pequeño tamaño
cumpliendo con las características debidas
para su transporte. (7)

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5) ¿Qué tipo de transporte se efectuó a través 4. Nason, A. 1990. El mundo biológico.
de la membrana durante el experimento? México D.F. Primera edición. Editorial
En el desarrollo de la práctica se presentó Limusa. Págs. 53-55
El transporte pasivo ya que es un 5. Young, A. 2001. Biología II. México D.F.
movimiento de sustancias bioquímicas, Primera edición. Editorial Nueva Imagen.
atómicas o moleculares a través de Págs. 40-43
membranas de la célula sin necesidad de 6. Diffusion and passive transport [Internet].
sobrecarga de energía debido a que fue una Khan Academy. 2019 [cited 10 July 2019].
membrana fabricada artificialmente. (8) Available from:
Discusión https://www.khanacademy.org/science/biol
En este laboratorio pudimos observar como las ogy/membranes-and-transport/passive-
características físicas y químicas de una sustancia transport/a/diffusion-and-passive-transport
afecta en su paso a través de la célula, gracias a que 7. TRANSPORTE PASIVO [Internet].
contamos con 4 sustancias (Glucosa, almidón, Motordenuestravida.blogspot.com. 2019
albúmina y cloruro de sodio) con propiedades muy [cited 10 July 2019]. Available from:
variadas. https://motordenuestravida.blogspot.com/2
Respecto a la glucosa y al almidón no pasaron el gel 012/10/transporte-pasivo.html
ya que posiblemente el tiempo que estuvieron no fue 8. Mi sitio [Internet]. Mi sitio. 2019 [cited 10
suficiente, al ser moléculas grandes demoran más en July 2019]. Available from:
pasar la membrana, la albúmina si paso en pequeña https://membranaplasmatica.weebly.com
medida y con el cloruro de sodio si se observó que
pasó una cantidad más reconocible a pesar de ser una
molécula relativamente grande, todos estos resultados
nos permitieron observar como las sustancias que
tenemos o que ingerimos a nuestro organismo pueden
ser recibidas por nuestras células.
Conclusiones
● La membrana celular tiene una particular
función de dejar pasar por medio de ella las
moléculas que son necesarias para la célula
y las que no son necesarias no podrán pasar
por ella.
● El cloruro de sodio tiene una propiedad
química que le permite precipitar moléculas
insolubles en la membrana plasmática,
gracias a su solubilidad, carga y tamaño.
● Solutos de grandes tamaños no son muy
permeables en la membrana, es por esto que
las proteínas, azúcares y almidón no fueron
procesados por la membrana.

Referencias
1. Tortora, G. 2002. Principios de anatomía y
fisiología. México. Novena edición.
Editorial Oxford. Págs. 61-74
2. Johnson, G. 2006. “Biología Celular”.
México D.F. Segunda edición. Editorial
Panamericana. Págs. 73-77
3. Villee, C. 2003. Biología. México D.F.
Octava edición. Editorial Mc Graw Hill.
Págs. 37-39

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