Enzimas

Mblgo. Rubén Asalde Ramos

Facultad de Medicina
 Enzimas
Son catalizadores biológicos de naturaleza proteica o
nucleica.
Un catalizador es un agente capaz de acelerar una
reacción química, sin formar parte de los productos
finales.
 Propiedades de las Enzimas
• Son muy específicas.
• No sufren modificación química en la reacción.
• No cambian la constante de equilibrio de una
reacción química.
• Actúan en condiciones moderadas de presión y
temperatura.
• Disminuyen la energía de activación.
Energía de Activación (EA)
Es la energía
requerida para
la activación de
los reactantes.
Esta se reduce
cuando los
reactantes se
combinan con
la enzima.
Acción catalítica
 Razón de la acción catalítica
• Las enzimas cumplen su papel catalítico gracias a:
– Fijación estereoquímicamente complementaria del
substrato.
– Transformación catalítica del mismo.

• En ambas funciones participan:

– Cadenas laterales de los aminoácidos
– Grupos o moléculas no proteicas:
• Cofactores inorgánicos: metal
• Cofactores orgánicos: coenzimas (NAD, NADP, FAD)
Lisozima y su
substrato
 Nomenclatura de las enzimas
• Nombre trivial. Sufijo “asa” al sustrato en el
cual actúan. Ej. Ureasa, hexoquinasa.

• Nombre sistemático. El número de

clasificación es una serie de 4 dígitos que
designan la clase, subclase, sub-subclase y
número de orden de la enzima dentro de la
clasificación internacional. Va precedido por
las siglas EC (Enzyme Commission).
 Nomenclature Committee of the
International Union of Biochemistry and
Molecular Biology (NC-IUBMB)
• EC 1 OXIDOREDUCTASE
• EC 1.4 Acting on the CH-NH2 group of donors
• EC 1.4.1 With NAD+ or NADP+ as acceptor
Ejemplos:
• EC 1.4.1.1 alanine dehydrogenase
EC 1.4.1.2 glutamate dehydrogenase
EC 1.4.1.3 glutamate dehydrogenase [NAD(P)+]
EC 1.4.1.4 glutamate dehydrogenase (NADP+)
EC 1.4.1.5 L-amino-acid dehydrogenase
EC 1.4.1.6 deleted, included in EC 1.4.4.1
EC 1.4.1.7 serine 2-dehydrogenase
EC 1.4.1.8 valine dehydrogenase (NADP+)
EC 1.4.1.9 leucine dehydrogenase
 Clasificación de las enzimas
1. Oxidorreductasas. Catalizan oxidaciones y
reducciones.
2. Transferasas. Transferencia de grupos (no agua).
3. Hidrolasas. Reacciones de hidrólisis.
4. Liasas. Adición de grupos a dobles enlaces o
formación de dobles enlaces por eliminación de
grupos.
5. Isomerasas. Reacciones de isomerización.
6. Ligasas. Formación de enlaces C-C, C-S, C-N, C-O
por condensación acopladas a hidrólisis de ATP.
Clasificación de las enzimas
 Teorías de la acción
enzimática
Modelo de Llave y Cerradura (Fischer, 1890)
Substrato y enzima se acoplan de forma
estereospecífica, de la misma manera que una
llave se justa a su cerradura.
 Teorías de la acción
enzimática
Modelo de Ajuste Inducido (Koshland y Neet, 1968)

Tanto la enzima como el substrato sufren una alteración

en su estructura por el hecho físico de la unión.
 Influencia en la acción
enzimática
• Activador: Agente que aumenta la actividad
enzimática. Ej. Biotina (AGS)
• Inhibidor: Agente que disminuye la actividad
enzimática. Ej.
• Inhibidor reversible: establece un equilibrio
con la enzima: E+I EI
• Inhibidor irreversible: modifica químicamente
a la enzima:
E+I E’
 Inhibición enzimática
• Competitiva: El inhibidor compite con el
sustrato para unirse al sitio activo.
• No competitiva: El inhibidor se une en un sitio
diferente al activo y modifica a la enzima.
• Acompetitiva: El inhibidor se une al complejo
enzima-sustrato.
Inhibición competitiva
Inhibición No competitiva
Inhibición acompetitiva
 Enzima activa

Holoenzima = Apoenzima + Cofactor

Centro activo

Apoenzima
Holoenzima
Cofactor
 Cofactor
Ion o molécula que participa en el proceso catalítico sin
ser enzima ni sustrato. Participa de dos maneras en la
actividad catalítica:

• A través de una fijación muy fuerte a la proteína y

salen sin ser modificados del ciclo catalítico.
• Como un segundo substrato; salen modificados del
ciclo catalítico y por lo general requieren otra enzima
para volver al estado original.
 Piruvato L-Lactato

COO- COO-
LDH
C O HO C H
CH3 CH3
NADH + H+ NAD+

LDH: Lactato deshidrogenasa

Utiliza como cofactor NADH, el cual sale de la

reacción oxidado a NAD+. La regeneración a NADH
requeriría otra enzima (reductasa).
NAD+
Nicotinamida
adenina
dinucleotídio (B3)
Cofactores inorgánicos
Cofactores orgánicos
(Coenzimas)
 Cinética Enzimática

• Actividad enzimática: mide catálisis de un µmol de

sustrato/min. (UI)
• Actividad específica: mide unidades de actividad
enzimática por mL o mg, en disolución.
• Katal: cantidad de enzima que cataliza un mol de
sustrato/seg.
1 Kat = 60 000 000 UI
 Ecuación de Michaelis-Menten
Si la velocidad de la reacción es directamente
proporcional a la concentración de enzima,
entonces la velocidad es una medida de la
concentración de enzima en una preparación.

Cuando la concentración de sustrato

no es saturante, la velocidad de la
reacción enzimática depende de la
concentración de sustrato.
 Ecuación de Michaelis-Menten

[S ]
v = Vmax .
K M + [S ]
• Vmax= máxima velocidad de desarrollo de la enzima
• KM = constante de Michaelis; específico para cada E-S
Cuando la [S] = KM , la enzima trabaja a la mitad de su
velocidad máxima.
Ecuación de Michaelis-Menten
Km de algunas enzimas y
sustratos
Conclusiones sobre la cinética de
Michaelis-Menten
a) K. pequeña: Refleja una afinidad
elevada de la enzima por el sustrato,
porque se necesita una baja
concentración de sustrato para saturar
la mitad de la enzima, es decir, para
alcanzar una velocidad que sea ½ Vmax.
b) K. grande: Refleja una afinidad baja de
la enzima por el sustrato, porque se
necesita una concentración elevada de
sustrato para saturar la mitad de la
enzima.
 Factores que afectan la catálisis
• Concentración de la enzima.
• Concentración del sustrato.
• Concentración del producto.
• Temperatura.
• Concentración de iones hidrógeno (pH).
• Presencia de activadores.
• Presencia de Inhibidores.
 Factores que afectan la catálisis
• Concentración de la enzima. La velocidad de
reacción aumenta con la concentración de la
enzima, siempre que la concentración de
sustrato sea ilimitada.
 Factores que afectan la catálisis
• Concentración del sustrato. En la medida que
aumenta la concentración de sustrato, aumenta
la velocidad de reacción, pero después la curva
se aplana.
 Factores que afectan la catálisis
• Concentración de productos. Cuando
aumenta la concentración de sustratos la
velocidad de reacción disminuye, se detiene o
se revierte.
E1 E2 E3

A B C D
Ej. Si E3 está ausente C, se acumulará e
inhibirá a E2, bloqueando la reacción
 Factores que afectan la catálisis
• Temperatura. La velocidad de reacción
aumenta con la temperatura pero disminuye
después de alcanzar lo óptimo.
 Factores que afectan la catálisis
• Concentración de iones hidrógeno. Cada
enzima tiene pH óptimo que puede variar por
diversos motivos.
 Factores que afectan la catálisis
• Presencia de activadores. Algunas enzimas
tienen mayor actividad en presencia de iones.
Ej. Cloro para amilasa salival y Calcio para
lipasas.
Otra forma de activación es por ruptura de
enlaces peptídicos que convierten zimógenos
en enzimas activas.
 Factores que afectan la catálisis
• Presencia de inhibidores. Competitivos o no.
Droga Enzima inhibida Uso clínico
Alopurinol Xantina oxidasa Gota
Penicilina Transpeptidasa Infecciones bacterianas
Metotrexato FH2-Reductasa Cáncer
Neostigmina Acetil colinesterasa Miastenia gravis
Lovastatina HMG CoA-Reductasa Hipercolesterolemia
Trimetoprim FH2-Reductasa Infecciones bacterianas
Azaserina Fosforribosil Cáncer
amidotransferasa
 Regulación de la
Actividad Enzimática
• Las enzimas aumentan o disminuyen su actividad de
acuerdo a señales.
• La enzima que cataliza la primera etapa de una vía
metabólica es reguladora.
• Existen dos tipos de enzimas reguladoras:
– Alostéricas.
– Reguladas por modificación covalente.
• Otras enzimas son controladas por expresión génica.
 Regulación alostérica
• Gr. Allo=otro; stereo=sitio o lugar.
• La enzima se inhibe o activa por un producto
intermediario o por el producto final de una vía
metabólica (feedback).

• Estas enzimas tienen otros sitios reguladores donde

se unen moduladores o efectores alostéricos.
Efectores alostéricos
 Regulación covalente
Puede ser reversible o irreversible:
• Modificación reversible.
Reacciones de señalización.
Ej. Quinasas.
• Modificación irreversible.
Proteólisis. Ej. Zimógenos
pancreáticos, factores de
coagulación, caspasas
apoptóticas.
 Regulación de la expresión
Según las necesidades de la célula:
• Inducción / expresión. Operones en procariotas.
• Ubiquitinización. En degradación de proteínas.
• Expresión diferencial de isoenzimas.
 Isoenzimas (Isozimas)
• Formas moleculares
distintas de una enzima
dentro del mismo
organismo.
• Representan formas que
tienen que ver con la
diferenciación celular,
presentando distintas
características
funcionales.
 Mecanismos de Regulación
Tiempo
Acción reguladora Efecto habitual Resultado
necesario
Inhibición por el Sustrato Cambio en la Inmediato
sustrato velocidad (Vo)
Inhibición por el Producto Cambio en la Vmáx o Inmediato
producto Km
Control alostérico Producto final Cambio en la Vmáx o Inmediato
K0,5
Modificación Otra enzima Cambio en la Vmáx o De inmediato a
covalente Km minutos
Síntesis o Hormona o Cambio en la De horas a días
degradación de la metabolito cantidad de enzima
enzima
 Enzimas de importancia médica

• Lactato deshidrogenasa LDH Anemia

• Glutamato deshidrogenasa GLDH Tum. hepatic.
• γ- Glutamiltransferasa γGT Cirrosis hept.
• Aspartato aminotransferasa GOT (AST) Enf. hepatic.
• Alanina aminotransferasa GPT (ALT) Enf. hepatic.
• Creatina quinasa CPK Musc.esquel.
• Colinesterasa CHE Intox. alch.
• Fosfatasa ácida ACP Próstata
• Fosfatasa alcalina AP Tumores
• Lipasa --- Pancreatitis
• α- Amilasa --- Pancreatitis
• Fructosa 1,6 diP aldolasa ALD Transt. Musc.
Gracias